豚鼠中性粒细胞性哮喘模型的建立

目的建立豚鼠中性粒细胞性哮喘模型。方法 40只成年雄性豚鼠按随机数字表法分为对照组（A组）、嗜酸粒细胞性哮喘组（B组）、中性粒细胞性哮喘组（C组）、嗜酸粒细胞性哮喘治疗组（D组）和中性粒细胞性哮喘治疗组（E组）。用卵白蛋白（ovalbumin,OVA）和弗氏完全佐剂（Freund’s complete adjuvant,FCA）联合致敏或OVA单独致敏豚鼠后用OVA雾化吸入激发建立中性粒细胞性哮喘或嗜酸粒细胞性哮喘模型,治疗组在激发前腹腔注射地塞米松。观察各组豚鼠雾化激发后体征变化及支气管肺组织病理改变,并比较各组豚鼠气道阻力、血中白细胞分类计数、支气管肺泡灌洗液（brochial alveolar lavage fiuid,BALF）细胞总数及分类计数。结果 B、C组豚鼠激发后均出现典型哮喘症状,不同浓度乙酰甲胆碱激发后的气道阻力与A组相比均显著增高（P〈0.05）;B组豚鼠BALF总数、BALF及血中嗜酸粒细胞所占比例与A组比较显著增加（P〈0.05）;C组豚鼠BALF总数、BALF及血中中性粒细胞所占比例与A组比较均显著增加（P〈0.05）;C组豚鼠BALF中性粒细胞所占比例与B组相比显著增加（P〈0.05）;除B、D组血中性粒细胞外,D和E两组的上述其他各项指标分别与B组和C组相比明显降低（P〈0.05）,以上差异均有统计学意义。B、C两组豚鼠支气管肺组织病理均提示支气管管腔狭窄、黏膜上皮脱落、炎症细胞浸润等典型的哮喘病理学改变,其中B组以嗜酸粒细胞浸润为主,C组以中性粒细胞浸润为主,D、E组较之明显好转。结论本实验建立的豚鼠中性粒细胞性哮喘模型是成功的。     

罗格列酮对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的探讨罗格列酮对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法50只小鼠随机分为口服罗格列酮组,既口服罗格列酮又雾化吸入布地奈德组,单用布地奈德吸入组,模型组和正常对照组。卵白蛋白雾化吸入建立小鼠哮喘模型,计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸粒细胞数,观察支气管肺组织病理的改变,ELISA测定血清中IL-4及IFN-γ的水平。结果模型组小鼠BALF中嗜酸粒细胞数明显高于其他各组,但罗格列酮组仍高于布地奈德组。肺内炎症细胞评分显示模型组评分最高,正常对照组评分最低,布地奈德组评分低于罗格列酮组。模型组IL-4含量显著高于其余各组,模型组IFN-γ含量显著低于其余各组,罗格列酮＋布地奈德组高于布地奈德组（P〈0.05）。结论罗格列酮能减轻哮喘气道炎症。     

支气管哮喘急性发作期激活转录因子-3的表达及作用

目的探讨支气管哮喘（简称哮喘）急性发作期激活转录因子-3（ATF3）的表达及作用。方法 30只健康雄性豚鼠,按随机数字表法分为对照组（A组）、哮喘组（B组）及地塞米松治疗组（C组）,每组10只。卵清蛋白致敏法复制哮喘模型。收集支气管肺泡灌洗液（BALF）并进行细胞总数及分类计数;观察豚鼠肺组织病理学改变;检测豚鼠肺组织及BALF中ROS含量;采用免疫组织化学和Westernblot法测定豚鼠肺组织中ATF3蛋白的表达和量的变化;原位杂交、RT-PCR法检测ATF3 mRNA的表达变化;免疫细胞化学检测豚鼠BALF细胞中ATF3蛋白的表达。结果①哮喘组豚鼠BALF中炎细胞总数、嗜酸粒细胞百分比（EOS%）显著高于对照组（P〈0.01）,哮喘组豚鼠肺组织可见大量炎症细胞浸润及明显气道重塑改变,且哮喘组ROS含量显著升高,而地塞米松治疗组上述变化明显减低（P值均〈0.01）;②ATF3蛋白及mRNA表达哮喘组明显高于对照组（P值均〈0.01）;③ATF3蛋白及mRNA的表达变化与ROS含量及BALF炎细胞总数、EOS%变化均呈正相关。结论哮喘急性发作期豚鼠肺组织及BALF细胞中ATF3的表达升高,可能与气道炎症反应和氧化应激有关;给予地塞米松治疗后ATF3表达下降,可能在哮喘的防治中起重要作用。     

母牛分枝杆菌菌苗对哮喘豚鼠肺组织Eotaxin mRNA表达的影响

目的研究母牛分枝杆菌菌苗对哮喘豚鼠肺组织Eotaxin mRNA表达的影响。方法30只豚鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及母牛分枝杆菌菌苗组，每组lO只。应用卵白蛋白（OVA）建立哮喘模型，母牛分枝杆菌菌苗组每只豚鼠在OVA致敏前10d肌注22．5峭母牛分枝杆菌菌苗。最后一次激发后，计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞，观察肺组织病理学改变，应用原位杂交方法检测肺组织Eotaxin mRNA的表达。结果母牛分枝杆菌菌苗组豚鼠BALF中嗜酸粒细胞数量显著低于哮喘组（P〈0．01），肺组织哮喘炎症反应明显轻于哮喘组，肺组织Eotaxin mRNA表达（OD值）显著低于哮喘组（P〈0．01）。结论母牛分技杆菌菌苗能减少哮喘豚鼠BALF及肺组织嗜酸粒细胞数量，与其抑制Eotaxin mRNA在哮喘豚鼠肺组织的表达有关。     

异丁斯特对支气管哮喘豚鼠Th2型细胞因子白介素4、白介素13及嗜酸粒细胞趋化因子的影响

目的探讨异丁斯特对支气管哮喘（简称哮喘）豚鼠Th2型细胞因子白介素4（interleukin-4,IL-4）、IL-13及嗜酸粒细胞趋化因子（eotaxin）的影响。方法Hartley豚鼠,随机分为正常对照组、哮喘模型组、异丁斯特10、20、30mg／kg组及地塞米松（DXM）给药组。用卵白蛋白致敏制备豚鼠哮喘模型,给药后观察各组肺组织的病理变化;收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,并对其中的嗜酸粒细胞（eosinophil,EOS）进行计数;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定BALF中IL-4、IL-13的含量;双抗体夹心ABC—ELISA法检测eotaxin水平。结果HE染色显示,模型组豚鼠支气管壁及管腔内、血管周围可见大量炎症细胞浸润,平滑肌肥厚,黏膜、肺组织充血水肿,异丁斯特各剂量组及DXM给药组较模型组炎症表现明显减轻;与模型组比较,异丁斯特各剂量组及DXM给药组均能显著降低哮喘豚鼠BALF中EOS的数量;与模型组比较,异丁斯特各剂量组及DXM给药组均能显著降低哮喘豚鼠BALF中IL-4、IL-13含量及eotaxin水平。结论异丁斯特对哮喘豚鼠有治疗作用,其机制可能与降低IL-4、IL-13含量及eotaxin水平,减少气道EOS浸润,从而减轻哮喘气道炎症有关。     

异丁斯特对支气管哮喘豚鼠Th2型细胞因子白介素4、白介素1 3及嗜酸粒细胞趋化因子的影响

目的 探讨异丁斯特对支气管哮喘(简称哮喘)豚鼠Th2型细胞因子白介素4(interleukin-4,IL-4)、IL-13及嗜酸粒细胞趋化凶子(eotaxin)的影响.方法 Hartley豚鼠,随机分为正常对照组、哮喘模型组、异丁斯特10、20、30 mg/kg组及地塞米松(DXM)给药组.用卵白蛋白致敏制备豚鼠哮喘模型,给药后观察各组肺组织的病理变化;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),并对其中的嗜酸粒细胞(eosinophil,EOS)进行计数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定BALF中IL4、IL-13的含量;双抗体夹心ABC_ELISA法检测eotaxin水平.结果 HE染色显示,模型组豚鼠支气管壁及管腔内、血管周围可见大量炎症细胞浸润,平滑肌肥厚,黏膜、肺组织充血水肿,异丁斯特各剂量组及DXM给药组较模型组炎症表现明显减轻;与模型组比较,异丁斯特各剂量组及DXM给药组均能显著降低哮喘豚鼠BALF中EOS的数量;与模型组比较,异丁斯特各剂量组及DXM给药组均能显著降低哮喘豚鼠BALF中IL-4、IL-13含量及eotaxin水平.结论 异丁斯特对哮喘豚鼠有治疗作用,其机制可能与降低IL-4、II-13含量及eotaxin水平,减少气道EOS浸润,从而减轻哮喘气道炎症有关.     

异丁斯特对支气管哮喘豚鼠Th2型细胞因子白介素4、白介素13及嗜酸粒细胞趋化因子的影响

目的探讨异丁斯特对支气管哮喘（简称哮喘）豚鼠Th2型细胞因子白介素4（interleukin-4,IL-4）、IL-13及嗜酸粒细胞趋化因子（eotaxin）的影响。方法Hartley豚鼠,随机分为正常对照组、哮喘模型组、异丁斯特10、20、30mg／kg组及地塞米松（DXM）给药组。用卵白蛋白致敏制备豚鼠哮喘模型,给药后观察各组肺组织的病理变化;收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,并对其中的嗜酸粒细胞（eosinophil,EOS）进行计数;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定BALF中IL-4、IL-13的含量;双抗体夹心ABC-ELISA法检测eotaxin水平。结果HE染色显示,模型组豚鼠支气管壁及管腔内、血管周围可见大量炎症细胞浸润,平滑肌肥厚,黏膜、肺组织充血水肿,异丁斯特各剂量组及DXM给药组较模型组炎症表现明显减轻;与模型组比较,异丁斯特各剂量组及DXM给药组均能显著降低哮喘豚鼠BALF中EOS的数量;与模型组比较,异丁斯特各剂量组及DXM给药组均能显著降低哮喘豚鼠BALF中IL-4、IL-13含量及eotaxin水平。结论异丁斯特对哮喘豚鼠有治疗作用,其机制可能与降低IL-4、IL-13含量及eotaxin水平,减少气道EOS浸润,从而减轻哮喘气道炎症有关。     

灵芝孢子对支气管哮喘豚鼠引喘潜伏期及类胰蛋白酶释放的影响

目的 研究灵芝孢子对支气管哮喘(简称哮喘)豚鼠引喘潜伏期及肥大细胞类胰蛋白释放的影响.方法 10%卵蛋白腹腔注射致敏,雾化吸入1%卵蛋白方式诱导复制哮喘动物模型.30只健康豚鼠随机分为对照组(A)、哮喘组(B)、灵芝组(C)3组,每组10只,分别用生理盐水,灵芝孢子灌胃15 d.测定哮喘豚鼠的引喘潜伏期及呼气相气道阻力(Re),计数支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数及分类,肺组织HE染色和免疫组织化学观察肺组织病理变化及肥大细胞类胰蛋白酶分布情况.结果 ①灵芝组的引喘潜伏期明显较哮喘模型组延长,Re显著降低(P＜0.05).②哮喘BALF白细胞总数及嗜酸粒细胞比例较生理盐水组增高(P＜0.05),肺组织炎性病变明显;灵芝组BALF细胞总数、嗜酸粒细胞比例及肺组织炎性病变明显较哮喘组降低或减轻(P＜0.05).③哮喘组类胰蛋白酶染色阳性的肥大细胞计数明显较生理盐水组增多(P＜0.05),主要分布在气道黏膜下,肺泡间隔及血管周围;灵芝组类胰蛋白酶染色阳性的肥大细胞计数较哮喘组显著减少.结论 灵芝孢子有延长哮喘豚鼠引喘潜伏期,降低气道阻力,减轻肺组织炎性病变,抑制肥大细胞释放类胰蛋白酶的作用.     

灵芝孢子对支气管哮喘豚鼠引喘潜伏期及类胰蛋白酶释放的影响

目的研究灵芝孢子对支气管哮喘（简称哮喘）豚鼠引喘潜伏期及肥大细胞类胰蛋白释放的影响。方法10％卵蛋白腹腔注射致敏,雾化吸入1％卵蛋白方式诱导复制哮喘动物模型。30只健康豚鼠随机分为对照组（A）、哮喘组（B）、灵芝组（C）3组,每组10只,分别用生理盐水,灵芝孢子灌胃15d。测定哮喘豚鼠的引喘潜伏期及呼气相气道阻力（Re）,计数支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞总数及分类,肺组织HE染色和免疫组织化学观察肺组织病理变化及肥大细胞类胰蛋白酶分布情况。结果①灵芝组的引喘潜伏期明显较哮喘模型组延长,Re显著降低（P〈0．05）。②哮喘BALF白细胞总数及嗜酸粒细胞比例较生理盐水组增高（P〈0．05）,肺组织炎性病变明显;灵芝组BALF细胞总数、嗜酸粒细胞比例及肺组织炎性病变明显较哮喘组降低或减轻（P〈0．05）。③哮喘组类胰蛋白酶染色阳性的肥大细胞计数明显较生理盐水组增多（P〈0．05）,主要分布在气道黏膜下,肺泡间隔及血管周围;灵芝组类胰蛋白酶染色阳性的肥大细胞计数较哮喘组显著减少。结论灵芝孢子有延长哮喘豚鼠引喘潜伏期,降低气道阻力,减轻肺组织炎性病变,抑制肥大细胞释放类胰蛋白酶的作用。     

哮喘豚鼠嗜酸粒细胞凋亡与白细胞介素—1β转换酶,Fas表达的关联 …

支气管哮喘是由嗜酸粒细胞等多种炎性细胞参与的慢性气道炎症性疾病。哮喘患者肺内嗜酸粒细胞浸润是其显著的病理特征。这种嗜酸粒细胞增多,除了与哮喘体内嗜酸粒细胞生成增多外,还与嗜酸粒细胞在肺内生存时间延长,即正常的细胞凋亡受到抑制有关。本实验通过观察哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(ＢＡＬＦ)中嗜酸粒细胞的凋亡和白细胞介素1β转换酶(ＩＣＥ)及Ｆａｓ的表达,探讨哮喘豚鼠嗜酸粒细胞凋亡与ＩＣＥ和Ｆａｓ表达的关系。一、材料与方法1.健康雄性豚鼠30只,体重400～500ｇ,随机分为2组,每组15只。哮喘组:采用卵白蛋白致敏和激发建立哮喘模…     

白细胞介素17在大鼠慢性阻塞性肺疾病和支气管哮喘模型中的变化及意义

目的了解白细胞介素17(IL17)在大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)和支气管哮喘(简称哮喘)模型中的变化。方法SD雄性大鼠随机分为COPD组(13只)、哮喘组(11只)、吸烟组(11只)和正常对照组(12只);观察各组大鼠气道病理改变,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织匀浆IL17水平;免疫组化及图像分析法检测肺组织IL17及胞间黏附分子1(ICAM1),CD3、CD4、CD8的表达。结果COPD组和哮喘组肺组织匀浆IL17和BALF中IL17均显著增高,与正常对照组和吸烟组比较差异有显著性(P均<001);COPD组IL17主要在支气管上皮细胞内表达,哮喘组则在气道周围单核淋巴细胞内表达;COPD组和哮喘组IL17表达量均显著高于正常对照组及吸烟组(P<001或<005)。COPD组肺组织匀浆IL17与BALF中中性粒细胞(r=0676,P=0002)以及BALF中IL17与小气道平滑肌增生均呈正相关(r=0641,P=0046);肺组织匀浆IL17与ICAM1呈正相关(r=0550,P=0051);哮喘组肺组织匀浆IL17分别与BALF中嗜酸粒细胞(r=0884,P=0001)和肺组织CD3T细胞呈正相关(r=0812,P=0002)。结论COPD中IL17可能通过增强ICAM1的表达等途径促进中性粒细胞在气道内聚集,参与对COPD气道炎症的调节。IL17在哮喘中的作用可能与其促进嗜酸粒细胞在气道内聚集有关。     

Comparison between bronchial and alveolar samples of bronchoalveolar lavage fluid in asthma.

BACKGROUND: Cell content of BALF may vary according to the segment of the lung washed. It was proposed to separate BALF into several aliquots, the first sample being more related to bronchi. The present study compared bronchial and alveolar samples by fractionating aliquots of BALF in normal and asthmatic subjects. METHODS: One hundred asthmatic subjects (mean +/- SEM: 37 +/- 1.5 yr in age) were compared with 31 normal subjects (mean +/- SEM: 32 +/- 2.2 yr in age). None of the subjects was a smoker and none was taking drugs that might interfere with the results. The severity of asthma was defined by the clinical score of Aas examining the chronic severity of asthma and ranging from 1 to 5 (range: 1 to 4; mean +/- SEM: 2.2 +/- 0.1) and FEV1 (range: 45 to 130 percent; mean +/- SEM: 82 +/- 1.8 percent of predicted values). Bronchoscopy was done in a standardized manner. A first aliquot of 50 ml of saline each were instilled and the BALF recovered was pooled (alveolar sample). After centrifugation, total and differential cell counts (May Grünwald-Giemsa) were carried out on bronchial and alveolar samples. RESULTS: The alveolar sample contained significantly more cells per milliliter of BALF than the bronchial sample in normal (p less than 0.0077, Wilcoxon test) and in asthmatic subjects (p = 0.0001, Wilcoxon test). Both in normal and asthmatic subjects, bronchial samples contained significantly more neutrophils and epithelial cells and fewer macrophages and lymphocytes than alveolar samples. In asthmatic subjects, the bronchial sample contained a significantly greater percentage of eosinophils than the alveolar sample. Eosinophils were significantly increased in asthmatic subjects for both the bronchial and alveolar samples. Bronchial and alveolar eosinophilia both were correlated with the Aas score (r = 0.25, p = 0.024 and r = 0.38, p = 0.0006, respectively, by Spearman Rank test). CONCLUSIONS: This study shows in a large number of subjects that the cell content of bronchial and more distal segments of the lung is not comparable, indicating that studies should not give pooled data in asthmatic subjects. Moreover, it confirms the presence of BALF eosinophilia in asthmatic subjects.     

外源性间充质干细胞减轻支气管哮喘小鼠气道炎症的研究

目的 观察鸡卵清蛋白诱导小鼠支气管哮喘(简称哮喘)模型中外源性间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)在哮喘小鼠肺组织气道炎症中的作用.方法 45只雌性SPF级C57BL/6小鼠,体质量18～22 g.随机分为对照组(P:P:P)、哮喘组(O:P:O)和MSC治疗组(O:M:O).哮喘组与MSC治疗组第1天和第8天致敏,第15天、第16天和第17天使用OVA气道内滴入激发哮喘.MSC治疗组于哮喘造模第14天移植外源性MSC.对照组小鼠予PBS处理.三组小鼠于末次激发结束后24 h(第18天)处死,取支气管肺泡灌洗液上清,ELISA检测IL-5、IL-9及β-氨基己糖苷酶;支气管肺泡灌洗液细胞计数总细胞数、嗜酸粒细胞数;取肺组织行病理切片苏木精-伊红染色观察肺部气道炎症情况.结果 ①MSC下调了哮喘小鼠气道局部炎症;②MSC减轻了哮喘小鼠肺组织中的炎细胞浸润;③MSC减轻了哮喘小鼠气道中的肥大细胞脱颗粒现象;④MSC抑制了哮喘小鼠过度的Th2变态反应.结论 外源性MSC通过抑制Th2变态反应,减轻哮喘肺组织的气道炎症.     

地塞米松对哮喘豚鼠气道炎症细胞凋亡的影响

目的 炎症细胞的清除是哮喘治疗效果的关键。探讨地塞米松治疗是否以凋亡形式清除哮喘粘膜组织中的炎症细胞。方法 采用卵蛋白诱导的豚鼠哮喘模型以地塞米松作治疗，用末端脱氧核苷酸转移酶（ＴｄＴ）倡导的脱氧三磷酸尿嘧啶（ｄＵＴＰ）末端标记（ＴＵＮＥＬ）法进行凋亡细胞的标记。以免疫组化标记活化的嗜酸性粒细胞蛋白（ＥＧ２）以及Ｔ淋巴细胞的ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋。对皮质激素组和对照组气道粘膜组织中的淋     

大鼠哮喘模型Clara细胞及其分泌蛋白的表达

目的　观察大鼠哮喘模型Clara细胞及其分泌蛋白 (CCSP)的表达。方法　SD大鼠 2 4只 ,分为哮喘模型组和健康对照组。哮喘模型组大鼠用卵白蛋白 (OVA)致敏激发建立大鼠哮喘模型。用逆转录 聚合酶链反应、斑点免疫印迹、免疫组化及图像分析方法检测 2组大鼠肺组织CCSPmRNA表达、支气管肺泡灌洗液(BALF)中CCSP蛋白水平、细小支气管Clara细胞比率及气道形态学参数。结果　哮喘模型组大鼠OVA激发2周的支气管总管壁面积、内壁面积及平滑肌面积均较健康对照组和哮喘模型组OVA激发 1周时的增加 (P <0 0 1) ,并与CCSP及其mRNA呈负相关 (r分别为 - 0 5 9、- 0 72、- 0 6 5、- 0 6 3、- 0 78及 - 0 73,P <0 0 1)。哮喘模型组大鼠细支气管、终末细支气管及呼吸性细支气管Clara细胞数量减少 (P <0 0 1或 0 0 5 )。哮喘模型组大鼠肺组织CCSPmRNA表达较健康对照组降低 ,BALF中CCSP蛋白含量降低。结论　CCSPmRNA表达降低 ,Clara细胞数量减少。     

烟曲霉提取物诱导小鼠哮喘模型的建立

目的:探讨小鼠哮喘模型建立的方法,为开展哮喘发生机制或药物治疗研究奠定基础。方法:40只,SPF级C57BL/6小鼠,雌雄各20只,随机分成对照组和模型组两组。模型组小鼠采用气管滴注烟曲霉提取物,隔天给药,对照组小鼠采用无菌0.9%氯化钠溶液气管滴注。给药21天后,最后一次给药24小时后收取肺泡灌洗液,离心后灌洗液上清检测炎症因子水平,灌洗细胞做Giemsa染色分类计数;取左肺做AB-PAS染色,右肺提取mRNA;腹主动脉取血ELISA检测Ig E水平。结果:与对照组相比,模型组小鼠可见典型的哮喘症状,肺泡灌洗液中炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞较对照组显著增多,肺泡灌洗液IL-3、IL-4、IL-5、IL-6及IL-17表达上调,与对照组相比分别为P<0.05和P<0.01。血清Ig E较对照组明显增加[(23.84±3.65)vs.(6.22±1.06)mg/L,P<0.01];AB-PAS染色黏液分泌较对照组明显加重。结论:烟曲霉提取物气管滴注可成功诱导小鼠哮喘模型。     

日本血吸虫感染对OVA诱导的小鼠过敏反应的影响

目的研究蠕虫感染对过敏性哮喘的影响。方法将15只BALB/c小鼠随机分成3组,每组5只。Ⅰ组为血吸虫感染后OVA致敏组,Ⅱ组为单纯OVA致敏组,Ⅲ组为正常对照组。Ⅰ组小鼠首先建立日本血吸虫感染模型,于感染后第57~84d,与Ⅱ组小鼠一起以OVA(卵清白蛋白)诱导建立过敏性哮喘模型,第85d剖杀全部小鼠,收集脾脏、肺脏和支气管肺泡灌洗液。制备支气管肺泡灌洗液涂片以计数其中各类细胞;制备肺组织切片以检查肺部病理变化;培养脾细胞以检测培养上清中相关细胞因子水平。另外,还要检测支气管肺泡灌洗液中相关细胞因子水平。结果与Ⅱ组相比,Ⅰ组小鼠肺部嗜酸粒细胞数量显著减少(P<0.05),肺部炎症明显减轻(P<0.05),支气管肺泡灌洗液和脾细胞培养上清中IL-4和IL-5水平均降低(P<0.05),而IFN-γ水平无明显改变(P>0.05)。结论日本血吸虫感染对OVA诱导的过敏性哮喘有抑制作用。     

构建以中性粒细胞浸润为主的小鼠重症支气管哮喘模型的初步探讨

目的：探讨构建以中性粒细胞浸润为主的重症支气管哮喘(简称哮喘)小鼠模型的方法。方法 C57BL/6小鼠15只,随机分成 NS 组(生理盐水组)、第1 组(50μg HDM+50μg OVA +15μg LPS)、第2 组(50μg HDM+100μg OVA+15μg LPS)、第 3组(100μg HDM+50μg OVA+15μg LPS)、第4组(100μg HDM+100μg OVA+15μg LPS),每组3只。于实验第0、1、2天腹腔注射致敏,第14、15、18、19天进行激发,第21天处理小鼠,检测相关指标。结果①小鼠行为学变化：致敏后第1~4组小鼠出现不同程度挠耳抓鼻、躁动不安、呼吸加快、大小便失禁等改变,第4组甚至出现嗜睡、匍匐不起等症状,而 NS 组未见上述表现。②小鼠肺功能：与 NS 组、第1 ~3组比较,第4组 小 鼠 在 乙 酰 甲 胆 碱 (Mch)刺激下气道阻力明显升高,呈现明显气道高反应性(P <0.05);NS、第1、第2、第 3组小鼠气道阻力变化不明显。③小鼠肺泡灌洗液细胞总数及分类计数：与 NS 组、第1 ~3组比较,第4组小鼠 BALF 中细胞总数最多,相较 NS 组有3倍以上升高(F =66.971,P <0.001);且第4组小鼠 BALF 中性粒细胞数量最高,约3×105/ml;与 NS 组、第1 组比较,第4组小鼠 BALF 嗜酸粒细胞数量偏高(F =23.888,P <0.01),而第2-4组比较,3组 BALF嗜酸粒细胞数量差异无统计学意义(P >0.05)。④小鼠肺组织病理：HE 染色,NS 组小鼠可见各级支气管及肺泡结构正常,支气管黏膜上皮完整连续,纤毛排列整齐,未见明显炎性细胞浸润;第1 ~4组小鼠可见不同程度支气管黏膜充血水肿明显、管腔变狭窄,杯状细胞增生及上皮细胞的坏死脱落,而气道、肺间质和小血管周围散布着大量的炎性细胞,而 第4组 小 鼠 肺 部 炎 症 浸 润 最 明 显(χ2=23.888,P <0.05);粒细胞分化抗原-1免疫组织化学染色,NS 组小鼠未见明显中性粒细胞浸润,第1~4组小鼠可见不同程度中性粒细胞浸润,而第4组小鼠肺部中性粒细胞浸润最明显(F =28.411, P <0.05);嗜酸粒细胞阳离子蛋白免疫组织化学染色,NS 组小鼠未见明显嗜酸粒细胞浸润,第1 ~4组小鼠可见不同程度嗜酸粒细胞浸润,但差异无统计学意义(F =0.206,P >0.05);中性粒细胞/嗜酸粒细胞比值比较,第4组 小 鼠 肺 组 织 比 值 最 高。结 论 在 15μg LPS 环境下,100μg HDM 联合100μg OVA 可成功建立以中性粒细胞浸润为主的小鼠重症哮喘模型。     

香烟烟雾暴露对支气管哮喘大鼠OX-62、白介素12表达的影响

目的 研究香烟烟雾暴露对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠肺组织树突状细胞(dendritic cell,DC)的特异性标记蛋白OX-62、血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)白介素12(IL-12)表达的影响,探讨吸烟加重哮喘的免疫学机制.方法 30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、暴露组;建立哮喘大鼠模型和哮喘大...