氨甲酰-妥布霉素产生菌的高产菌株筛选

以黑暗链霉菌Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｔｅｎｅｂｒａｒｉｕｓ１６３为出发菌株,应用磁场、磁场复合吖啶橙、耐受氨甲酰 妥布霉素、磁场复合耐受氨甲酰 妥布霉素筛选得到５株高产菌株,经摇瓶发酵复筛后表明,其总效价与氨甲酰 妥布霉素均比出发菌株提高了２５％以上     

单组分妥布霉素产生菌的选育

目的 提高妥布霉素产生菌的发酵单位。方法 以黑暗链霉菌UVS－51为出发菌株，采用UV和NTG为诱变剂，结合耐受妥布霉素，运用固体循环诱变筛选高产菌株。结果 获得两株高产稳定变株NS－81和NT－26，这两株菌的授瓶发酵效价分别比出发菌株提高53％和77％。经薄层层析检验，该两变株的产物仍为单一的氨甲酰妥布霉素。结论 出发菌株经UV和NTG诱变处理后结合耐自身代谢物的驯育，正变率显著提高。通过引入循环诱变筛选的思路，大大缩短的实验周期有交待 提高了诱变育种的工作效率，能在较短时间内选育到理想变株，因此，循环诱变筛选法是一种较好的选育方法。     

尼拉霉素单组份—安普霉素高产菌株的研究

以黑暗链霉菌Ａｓ４．１０９８为出发菌株的进行诱变处理和筛选，得到了稳定的单组份安普霉素高产变株９００８，００３，０２１，并研究其发酵培养基和产物的结构。变株产物经薄层层年鉴定增为单组份。发酵培养基经过考察和均匀设计方法优化，使摇瓶发酵效价为６８００μｇ／ｍｌ。     

通过获得链霉素抗性基因(str)突变株筛选梅岭霉素高产菌株

本文通过链霉素对梅岭霉素（meilingmycin）产生菌南昌链霉菌NS－41－80菌株孢子致死浓度的测定，采用诱变剂EMS四种不同诱变剂量对菌株的孢子进行诱变处理，诱变处理的孢子涂布在含链霉素致死浓度的高氏平板上，获得了大量的链霉素抗性基因（str）突变株。然后从链霉素抗性基因突变株进一步筛选到梅岭霉素高产菌株80－5．11－221，在摇瓶条件下，只产梅岭霉素不产南昌霉素，梅岭霉素活性效价达1500μg/ml，比出发菌株NS－41－80的摇瓶发酵效价855μg/ml提高了77．9％，该菌株连续传代六代进行摇瓶发酵，其F2代和F3代梅岭霉素发酵效价稳定，F4代至F6代随着传代数增加，其梅岭霉素发酵效价急速下降。通过EMS诱变剂量分别与抗药性突变率和链霉素抗性基因突变株产梅岭霉素产量的产势统计分析表明，菌株抗药性突变与产抗生素突变密切相关，产抗生素突变的EMS诱变剂量高于链霉素抗性基因突变诱变剂量。在0．03mol/L的EMS剂量作用下，菌株致死率为99．43％，而抗药性突变率为0．0440％，建立了梅岭霉素产生菌链霉素抗性基因突变筛选方法，为南昌链霉菌高产菌种选育研究作了有益的尝试，并有助于其它链霉菌属的抗生素产生菌育种研究。     

中生菌素耐自生产物突变株的选育

以中生菌素产生菌淡紫灰链霉菌海南变种UV-69自然分离获得的A3为出发菌株,经过5h培养制备和紫外诱变60s处理后,利用其自生代谢产物,筛选耐自生产物突变株,获得突变株NV-36,其摇瓶发酵效价比出发菌株提高20%。传代试验表明,该突变株的高产性能遗传特性较稳定。在20吨发酵罐上连续5批验证,平均发酵效价比原生产水平提高35%。     

氨甲酰妥布霉素高产菌株的诱变选育

目的筛选氨甲酰妥布霉素高产菌株。方法通过诱变剂和诱变条件的考察,确定最佳选育手段,从而筛选到效价高、组分好的优良生产菌株。结果UV、NTG等诱变方法处理后得一稳定高产菌株,效价为2 182 U.mL-1,为出发菌株的1.3倍。结论UV、NTG诱变可明显提高菌株产量。     

氮离子注入法选育春雷霉素高产菌株和生产发酵

目的以氮离子束注入法对春雷霉素产生菌进行诱变育种,获得高产菌株。方法以小金色链霉菌(Streptomyces microaureus)US17为出发菌株,采用不同剂量的氮离子注入法处理该菌株,经过摇瓶初筛、复筛和上罐发酵,确定生产性状优良的菌种。结果经过诱变处理和筛选后,获得4株高产菌株。其中K1999.2010S247菌株摇瓶效价达到27 546mg·L-1。经25吨罐生产验证,平均发酵效价比原工业生产菌株提高了5.44%,组分含量质量分数提高了4.5%。结论采用离子束注入法对春雷霉素产生菌诱变育种效果显著,所获得高产菌株发酵效价高、组分含量高,产生巨大的经济效益,适合工业生产发酵使用。     

达托霉素产生菌前体物耐受选育及其流加补料发酵

目的 通过对达托霉素产生菌进行诱变选育,以及前体物补料发酵方式提高达托霉素的产量。方法 采用常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma, ARTP)技术对玫瑰孢链霉菌进行诱变,以癸酸铵和甘氨酸耐受作为选择压力进行菌株筛选,在摇瓶和100L发酵罐上进行癸酸铵流加补料试验确定最佳的发酵工艺。结果 经诱变选育获得1株突变株FIM-D1568摇瓶效价达到380mg/L,发酵单位较出发菌株提高了35.7%;通过优化100L发酵罐流加补料癸酸铵溶液工艺,使达托霉素发酵效价达到2276mg/L。结论 以ARTP为诱变源,甘氨酸及癸酸铵耐受性为选择性压力,可以快速筛选获得达托霉素高产菌;高产突变菌株在流加补料发酵工艺上优良性状得以发挥,发酵效价大幅提高。     

60Coγ射线对南昌霉素产生菌的诱变选育

采用不同剂量的^60Coγ射线，对南昌霉素产生菌南昌链霉菌80-5.3-116菌株的孢子进行处理。结果表明，7.74c/kg的诱变剂量在对孢子致死率为90％左右时，具有较好的诱变效应；初筛摇瓶产量正变率达到21.08％；复筛摇瓶发酵效价比出发菌株提高50％以上的有10株，占初筛菌株的5％；连续四批摇瓶发酵试验平均产量比出发菌株的产量提高50％以上；有6个菌株摇瓶产量分别比出发菌株提高60％，其中3株平均摇瓶产量比出发菌提高70%以上。     

多因子处理黑暗链霉菌微型化理性筛选

研究黑暗链霉菌的筛选,揭示其退化的主要表征是出现淡黄色菌落,退化与时间和菌落表征的关系。比较代表四类不同诱变因子NTG、NaNO2、5－Bu和紫外线的处理效果。认为复壮以紫外线温和诱变最有效。建立了优质孢子富集法。采用原生质体融合－优质孢子富集法－琼脂块法－固体微型发酵法的复合理性筛选。经摇瓶验证,获得了比出发菌株高出2．5倍的高产菌株。主要成分妥布霉素从52％上升到71％,效果显著,为进一步筛选更加优质高产的菌种提供较为简便的新途径。