Tiam1基因慢病毒表达载体构建及其在HT29细胞中的表达

目的:构建Tiam1与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒表达载体,观察其在人结直肠癌HT29细胞中的表达.方法:通过酶切Tiam1/C1199HA质粒获得Tiam1 cDNA片段,并将其克隆到慢病毒载体表达质粒pCDF1-copGFP中,经酶切、测序鉴定.慢病毒表达质粒和包装质粒共转染293FT细胞,获得携带Tiam1和GFP融合基因的重组慢病毒.取病毒上清感染人结直肠HT29细胞株,荧光显微镜检测绿色荧光蛋白及免疫细胞化学检测Tiam1在靶细胞中的表达.结果:重组慢病毒质粒pCDF1-Tiam1-copGFP酶切鉴定结果与目的基因条带吻合,克隆测序结果与NCBI收录的Tiam1基因序列(NM_003253)完全一致.重组慢病毒质粒可高效转染293FT细胞,病毒包装效率为88.34%.收获慢病毒上清可高效感染HT29细胞,荧光显微镜下可观察到大量绿色荧光,感染效率为55.89%,感染后靶细胞中Tiam1稳定高表达.结论:成功构建了携带Tiam1与GFP融合基因的慢病毒表达栽体pCDF1-Tiam1-copGFP,并使目的基因在靶细胞中得到稳定表达,为进一步研究Tiam1基因的相关功能提供了优质的稳定转染载体.     

转化生长因子β1在喉癌中的表达及其病理学意义

转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１,ＴＧＦβ１）是一具有广泛生物学作用的同源二聚体多肽。它可在细胞增殖、细胞外基质沉积,血管生成及免疫反应等生理病理过程中起作用〔１〕。其在肿瘤发生和恶性转化过程中的作用尤其受到有关学者的重视。国内外文献已报道,多种肿瘤ＴＧＦβ１表达均强于其起源组织,而喉癌中ＴＧＦβ１的表达特点在国内还未见相关报道。本研究对３６例喉癌进行ＴＧＦβ１免疫组织化学染色,以探讨ＴＧＦβ１在喉癌组织中的表达特点及其意义。１　材料与方法１．１　材料　３６…     

喉癌淋巴结跳跃性转移1例

淋巴结转移是喉癌的主要转移方式,在近处淋巴结尚未出现转移时,远处淋巴结已发生转移,即跳跃性转移.淋巴结的跳跃性转移在胃癌和肺癌已有报道,但喉癌的淋巴结跳跃性转移尚未见报道.     

MDR1基因在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨多药耐药基因MDR1在胃癌组织中的表达及临床意义.方法 收集2009年12月～2010年8月胃癌新鲜癌组织标本53例(实验组)、15例正常胃黏膜组织(对照组),采用逆转录-聚合酶链反应技术检测胃癌组织和正常胃组织中MDR1基因的表达,并分析与临床病理特征之间的关系及对化疗的指导意义.结果 MDR1基因在正常胃组织及胃癌组织中的表达分别为0.57±0.27和0.20±0.10(t=8.13,P＜0.001).MDR1基因的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移之间差异具有统计学意义(t=2.83,3.47;P=0.007,0.002),而与患者性别、肿瘤部位、大小之间差异无统计学显著性意义(t=1.41,0.54,1.16;P=0.16,0.60,0.25).结论 MDR1基因的高表达可能是胃癌多药耐药产生的基础,MDR1基因的检测对制定化疗方案和选择化疗药物有一定的指导意义.     

SSTR2和SSTR5在喉癌中的表达及意义

目的 研究生长抑素受体（somatostatin receptor，SSTR）亚型SSTR2和SSTR5在喉癌组织及癌旁组织中的表达情况，以及与临床病理特征的关系。方法 应用免疫组化方法检测46例喉癌组织与30例癌旁组织中SSTR2和SSTR5的表达，分析其与临床病理因素的关系。结果 在46例喉癌中SSTR2和SSTR5的表达率分别为58．70％和82．61％，癌旁组织中分别为83．33％和90．00％。喉癌中SSTR2的表达低于癌旁组织（P〈0．05），SSTR5的表达与癌旁组织无差异（P〉0．05），SSTR2和SSTR5的表达与喉癌的临床分期（P〈0．05）、病理分化程度（P〈0．05）有明显相关。结论大多数喉癌肿瘤组织中有一种以上生长抑素受体亚型基因的表达，其表达随喉癌恶性程度呈下降趋势。     

抑癌基因p16在喉癌中的表达及临床意义

目的 探讨抑癌基因ｐ１６与喉癌的生物学行为的关系。方法 采用免疫组织化学法检测３９例喉癌中ｐ１６基因表达情况。结果 喉癌组织ｐ１６阳必表达率６６．７％,ｐ１６蛋白的阳性率在鳞癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级中分别为１００％、６４．７％、５０％,显示ｐ１６蛋白表达阳性率随喉癌的病理分级的上升而降低,ｐ１６阳性与阴性组之间的１～５年的生存率则无明显差异．结论 抑癌基因ｐ１６的表达与肿瘤的类型有关,百喉癌预后好于其它肿瘤     

Bmi-1在结直肠癌中的表达及其意义

目的：对 Bmi-1在结直肠癌中的表达情况与意义进行探讨。方法选取结直肠癌与癌旁正常结直肠黏膜标本各50例,分别作为甲组与乙组,采取免疫组化法对两组标本中 Bmi-1表达情况进行检测,并对 Bmi-1表达与结直肠癌分化程度、Dukes 分期及淋巴结转移与否的相关性进行分析。结果甲组 Bmi-1蛋白阳性率显著高于乙组,甲组中低分化患者 Bmi-1蛋白阳性率显著高于中分化与高分化,有淋巴结转移者 Bmi-1蛋白阳性率显著高于无淋巴结转移者,Dukes分期 C 期 Bmi-1蛋白阳性表达率显著高于 A 期与 B 期。结论 Bmi-1的异常表达可对结直肠癌的发病、进展予以反映,且在结直肠癌的临床诊断与病情评估中具有重要应用价值。     

基因nm23-H1和TGVβ1在人体食管癌中的表达及其临床病理关系的意义

目的探讨转移抑制基因nm23-H1及转化生长因子β1（TGFβ1）基因在人食管癌（EC）中的表达水平及其临床病理关系。方法应用免疫组化方法对56例人食管癌组织中转移抑制基因nm23～H1及TGFβ1基因表达蛋白水平进行研究。结果nm23-H1和TGFβ1表达水平与食管的TNM分期、细胞分化程度及食管癌的转移有密切关系（P〈0．05）。结论nm23-H1、TGFβ1基因表达水平同时降低，预示食管癌的转移和预后不良。     

基因nm23-H1和TGFβ1在人体食管癌中的表达及其临床病理关系的意义

目的 探讨转移抑制基因nm23-H1及转化生长因子13.(TGFβ1)基因在人食管癌(EC)中的表达水平及其临床病理关系.方法 应用免疫组化方法对56例人食管癌组织中转移抑制基因nm23-H1及TGFβ1基因表达蛋白水平进行研究.结果 nm23-H1和TGFβ1表达水平与食管的TNM分期、细胞分化程度及食管癌的转移有密切关系(P<0.05).结论 nm23-H1、TGFβ1基因表达水平同时降低,预示食管癌的转移和预后不良.     

喉癌放射治疗的疗效观察

目的观察喉癌术后放疗单纯放疗效果，手术后与放疗间隔时间，颈淋巴结转移及癌发部位对预后的影响。方法全组61例，术后放疗37例，单纯放疗24例，放疗采用钴—60r线或6MVX线。结果手术与放疗间隔≤4周，1、3、5年生存率为100％、93．8％、83．4％；≤6周为96．0％、85．5％、76．9％；〉6周为83．8％、67．0％、47．5％。单纯放疗1、3、5年生存率分别为100％、68．2％、46．0％。手术与放疗不同间隔时间与单纯放疗相比≤4周者X。=9．211，P〈0．01；≤6周者X^2=3．220，P=0．07；〉6周者X^2=0．142。全组癌发于声门者1、3、5年生存率为94．4％、88．0％、80．7％；癌发于声门上者为95．8％、60．7％、37．9％，相比X^2=8．637，P〈0．01。颈淋巴结转移1、3、5年生存率，N0为97．4％、82．7％、74．8％；N1-3为77．8％、52．4％、21．0％，相比X^2=12．097，P=0．000。结论手术后与放疗间隔时间≤4周最好，≤6周次之，〉6周效果最差。声门癌好于声门上癌，颈淋巴结转移是喉癌预后的不良因素。     

人胃癌组织中Runx3表达水平与淋巴结转移的相关性研究

目的探讨胃癌组织中Runx3表达水平与淋巴结转移的关系。方法选取2018年1月至2019年1月在九江市第三人民医院经胃镜、病理活检确诊为胃癌并行手术治疗的患者30例为研究对象,根据患者淋巴结活检是否存在第2站及以上淋巴结转移分为未转移组(13例)、转移A组(7例,发生第2站淋巴结转移)和转移B组(10例,发生第2站以上淋巴结转移);采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测30例胃癌患者胃癌组织中Runx3的表达水平,分析Runx3表达水平与淋巴结转移的相关性。结果未转移组、转移A组、转移B组患者胃癌组织中Runx3表达水平分别为0.787±0.227、0.583±0.135、0.362±0.040,3组比较,差异有统计学意义(F=7.425,P<0.05)。相关性分析结果显示,Runx3表达水平与胃癌淋巴结转移距离呈明显负相关(r=-0.993,P<0.05)。结论Runx3可作为判断胃癌患者是否存在淋巴结转移的检测指标,且其表达水平随着转移距离的增加而下降。     

口腔鳞状细胞癌中PD-L1的表达与P16、HPV感染以及淋巴结转移关系分析

目的观察口腔鳞状细胞癌中程序性死亡分子-L1配体(PD-L1)的表达与乳头瘤病毒-16 (P16)、人乳头瘤病毒(HPV)感染以及淋巴结转移关系,初步探讨PD-L1在口腔鳞状细胞癌病情发展中的作用。方法以本院2017年6月至2018年6月期间收集到的口腔鳞状细胞癌组织蜡块为研究标本,行采用免疫组化染色法检测组织标本PD-L1、P16及HPV表达情况。观察PD-L1、P16、HPV的表达情况,并采用Spearman等级相关性分析法分析PD-L1与P16、HPV感染以及淋巴结转移关系的相关性。结果 51例口腔鳞状细胞癌组织中,PD-L1呈阳性表达44例(86.27%),PD-L1呈阴性表达7例(13.72%),P16呈阳性表达22例(43.14%),P16呈阴性表达29例(56.86%)。口腔鳞状细胞癌组织中的PD-L1表达与P16表达呈负相关(rs=-0.819,P=0.000),与淋巴结转移分期之间呈负相关(rs=-0.736,P=0.000),与HPV感染呈正相关(rs=0.653,P=0.000)。结论 PD-L1在口腔鳞状细胞癌组织中呈高度表达,且与口腔鳞状细胞癌病情发展标志物P16、HPV密切相关,同时在淋巴结转移中也具有促进作用,因此,深入研究PD-L1在口腔鳞状细胞癌病情发展的作用,有助于口腔鳞状细胞癌免疫疗法的完善。     

Ubiquitin C-terminal hydrolase L1 promotes lymph node metastasis in small cell neuroendocrine carcinomas of the cervix

ObjectiveTo screen for specific differentially expressed genes in small cell neuroendocrine carcinoma of the cervix (SCNEC) and to further explore their roles and mechanisms in tumor progression.MethodsDifferentially expressed genes in SCNEC compared with squamous cell carcinoma (SCC) and adenocarcinoma (AC) were screened by microarray and immunohistochemical analyses. The biological functions of the identified genes were examined in a SCNEC cell line using RNA interference and over-expression plasmid-transfection technologies. Co-expression network analysis and immunoprecipitation technology were used to explore the potential mechanisms.ResultsCompared with SCC and AC, UCHL1 (encoding ubiquitin C-terminal hydrolase L1) was identified as a specific differentially expressed gene in SCNEC, which was positively related to lymph node metastasis (LNM). Migration and invasion of SCNEC tumor cells were induced by UCHL1 over-expression and suppressed by UCHL1 down-regulation, as shown by scratch and transwell invasion assays. Co-expression network analysis suggested that Prospero homeobox protein 1 (PROX1) might interact with UCHL1, and in vivo immunoprecipitation and western blots verified that levels of ubiquitinated PROX1 were significantly decreased following UCHL1 overexpression.ConclusionUCHL1 is a potential biomarker of LNM in SCNEC. UCHL1 might promote SCNEC cell migration and invasion by reducing PROX1 ubiquitination.     

血管内皮生长因子及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白与鼻咽癌患者临床分期及预后的相关性

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)与鼻咽癌患者临床分期及预后的相关性。方法选择鼻咽癌患者50例及体检健康者50例。采集鼻咽癌患者的鼻咽癌组织、癌旁正常组织以及血清标本,检测血清中VEGFA、VEGFC、VEGFD的含量以及鼻咽癌组织、癌旁正常组织中m TOR、核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(P70S6)、真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)的mRNA含量。结果鼻咽癌患者血清中VEGFA、VEGFC、VEGFD含量显著高于健康志愿者(P0.05);TNMⅢ/Ⅳ期、低/未分化、淋巴结转移的鼻咽癌患者血清中VEGFA、VEGFC、VEGFD含量显著高于TNMⅠ/Ⅱ期、中/高分化、淋巴结未转移鼻咽癌患者(P0.05)。鼻咽癌组织中m TOR、P70S6、4EBP1的表达量显著高于癌旁正常组织(P0.05);TNMⅢ/Ⅳ期、低/未分化、淋巴结转移的鼻咽癌组织中m TOR、P70S6、4EBP1的表达量显著高于TNMⅠ/Ⅱ期、中/高分化、淋巴结未转移的鼻咽癌组织(P0.05)。结论鼻咽癌患者血清中VEGF含量异常升高,肿瘤组织中m TOR表达量异常增加,VEGF及m TOR异常与TNM分期、病理分级以及淋巴结转移相关。     

人喉鳞状细胞癌组织中VEGF-C的表达与淋巴结转移的关系

目的探讨血管内皮生长因子C（VEGF-C）在人喉癌组织中的表达及与淋巴结转移之间的关系。方法选择65例喉癌标本,应用免疫组织化学染色方法,检测VEGF-C在人喉癌组织中的表达,同时对其与临床病理参数的关系进行统计学分析。结果①VEGF-C蛋白在喉癌组织中呈强阳性表达,且VEGF-C蛋白表达水平显著高于对照组（P〈0．05）;②VEGF-C蛋白表达水平在淋巴结转移组较无淋巴结转移组均明显升高（P〈0．05）。结论VEGF-C与喉癌的淋巴结转移密切相关,检测其在喉癌组织中的表达有助于预测淋巴结转移的发生。     

甲状腺乳头状癌的超声征象与颈侧区淋巴结转移的相关性研究

目的 分析甲状腺乳状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)患者颈侧区淋巴结转移(lateral lymph node metastasis,LLNM)的相关危险因子。方法 收集本院2014年1月～2017年1月接受手术治疗的208例PTC患者的病历资料及其肿瘤的声像图资料,就PTC患者中央区淋巴结转移 (central lymph node metastasis ,CLNM)、肿瘤与甲状腺被膜关系、双侧、最大径、多发性、钙化、位置、肿瘤边缘及内部具有丰富血流信号、患者年龄及性别与LLNM之间的关系进行回顾性分析。结果 二项分类Logistic逐步回归分析方法筛选出LLNM的危险因子：CLNM、肿瘤与甲状腺被膜的关系、多发、位于上极、肿瘤边缘及内部具有丰富血流信号,建立回归方程,当预测概率≥0.33时,诊断LLNM的敏感度、特异度分别为92.3%及79.9%,其曲线下面积(area under curve, AUC)值为0.923。当CLNM数目≥3枚时,诊断敏感度、特异度分别为79.7%及91.6%,其AUC值为0.915;当CLNM率≥0.37时,诊断敏感度、特异度分别为87.1%及79.0%,其AUC值为0.882。结论 术前超声检查预评估PTC患者LLNM的发生风险,对指导临床决定是否行治疗性颈侧区淋巴结清扫术具有重要意义。     

伴BRAF V600E突变PTC患者超声特征及与淋巴结转移的关系研究

【摘要】目的:探讨伴鼠类肉瘤病毒癌基因同源物B1（v-raf murine sarcoma viral oncogene homologue B1,BRAF）突变甲状腺乳头状癌（Papillary carcinoma of thyroid,PTC）患者超声特征及与淋巴结转移的关系。方法：本次研究纳入绵阳市第三人民医院2015年1月-2022年1月收治PTC患者共417例,均经穿刺或手术病理组织学检查确诊,分析不同亚型患者BRAF V600E突变阳性率和淋巴结转移情况关系,采用Logistic回归模型评价BRAF V600E突变对不同亚型患者超声图像特征的影响。结果：①高细胞亚型BRAF V600E突变阳性率显著高于经典亚型、滤泡亚型（P<0.05）;②BRAF V600E突变阳性人群不同亚型颈部淋巴结转移率比较差异有统计学意义（P<0.05）;不同亚型BRAF V600E突变阳性患者颈部淋巴结转移率显著高于BRAF阴性者（P<0.05）;③合并BRAF V600E突变不同亚型患者钙化类型和是否贴近被膜比例比较差异有统计学意义（P<0.05）;④多因素分析结果显示,BRAF V600E突变与经典亚型/高细胞亚型患者钙化特征独立相关（P<0.05）。结论：合并BRAF V600E突变PTC患者出现颈部淋巴结转移几率更高;BRAF V600E突变存在可影响经典亚型/高细胞亚型PTC患者超声图像钙化类型。