金黄色葡萄球菌耐药基因与耐消毒剂基因的检测与分析

摘要 目的 <\b> 分析金黄色葡萄球菌临床分离株的耐药谱及耐药基因与耐消毒剂基因的检出情况。方法 <\b>　采用纸片扩散法测定42株金黄色葡萄球菌对16种抗菌药物的敏感性;采用聚合酶链反应技术对β-内酰胺酶类耐药基因（blaZ）、甲氧西林耐药基因（mecA）、氟喹诺酮类耐药基因(norA）及耐消毒剂基因（〖WTBX〗smr、qacA/B、qacG、qacH〖WTBZ〗）进行检测和分析。结果 <\b> 共检出28株（66.7%）耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和14株（33.3%）甲氧西林敏感葡萄球菌（MSSA）,所有菌株对青霉素类、氟喹诺酮类和大环内酯类抗菌药物的耐药率较高,仅对呋喃妥因、奎奴普汀和万古霉素敏感100%。菌株耐药基因及耐消毒剂基因的总检出率分别为mecA 73.8%、blaZ 69.0%、norA 59.5%、smr 2.4%、〖WTBX〗qacA/B〖WTBZ〗 4.8%,〖WTBX〗qacG〖WTBZ〗和〖WTBX〗qacH〖WTBZ〗均未检出。MRSA的耐药基因携带率均高于MSSA,差异有统计学意义（P<0.05）,耐消毒剂基因携带率无统计学差异。结论 <\b> 金黄色葡萄球菌耐药现状严重,耐药基因携带率较高,且部分菌株同时携带耐药基因和耐消毒剂基因,应引起临床重视。     

医护人员携带金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因检测及消毒剂抗性研究

摘要 目的 了解医务人员携带金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因及其对消毒剂抗性情况,为科学有效地消毒提供参考依据。方法 采用鼻拭子采样和基因分析方法,对某医院部分医务人员和健康体检人员携带金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因及消毒剂抗性进行评价。结果 共采集110名医护人员和336名健康体检人员鼻腔拭子,共分离出金黄色葡萄球菌125株和凝固酶阴性葡萄球菌333株。医务人员和健康体检人员携带的金黄色葡萄球菌qacA/B、smr基因检出率分别为39.0%、17.1%和13.1%、3.6%；携带凝固酶阴性葡萄球菌qacA/B、smr基因检出率分别为22.0%、15.1%和8.3%、6.3%。苯扎溴铵对携带qacA/B基因的葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌MIC值均>4 mg/L。结论 医护人员携带金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因检出率均明显高于健康体检人群,提示医务人员应加强手卫生消毒措施。     

肠球菌耐万古霉素基因及耐消毒剂基因检测的研究

目的 利用PCR技术检测南昌地区肠球菌所携带的耐万古霉素基因(vanA、vanB、vanC)和耐消毒剂基因(qacE△1-sul 1)的存在状况.方法 收集81株南昌市各三甲医院临床分离的肠球菌株,用纸片琼脂扩散法筛选出耐万古霉素肠球菌(VRE),从敏感、中介和耐受各组菌中,采取等比例分层抽取方式共抽取16株细菌,E-test法测定耐万古霉素肠球菌的MIC,PCR检测各菌株耐万古霉素基因(vanA、vanB、vanC)和耐消毒剂基因(qacE△1-sul 1).结果 16株细菌中药敏实验检出万古霉素耐受菌1株,而PCR检测出vanB阳性2株,vanA、vanC、qacE△1-sul 1均阴性.结论 南昌地区首次发现2株vanB阳性VRE,尚未发现耐消毒剂基因(qacE△1-sul 1)肠球菌,应引起医院感染监控部门高度重视.     

携带耐药基因的大肠杆菌对消毒剂抗力研究

目的研究临床分离的大肠杆菌耐消毒剂基因携带情况及其对消毒剂抗力水平。方法采用PCR检测法与肉汤稀释法对临床分离大肠杆菌耐药基因和对消毒剂的最小抑菌浓度进行检测,同时与消毒试验标准菌株作平行比较。结果临床分离的7株大肠杆菌中,有4株耐药基因qacE△1-sulIPCR扩增阳性;该7株大肠杆菌基因qacA/B均为阴性。醋酸氯己定对7株大肠杆菌的最小抑菌浓度为1~2mg/L,对大肠杆菌标准株为2mg/L。对氯间二甲苯酚对7株临床分离大肠杆菌与标准株的最小抑菌浓度均为156mg/L。苯扎溴铵对7株大肠杆菌的最小抑菌浓度为19.5mg/L,与标准菌株相同。聚维酮碘和聚醇醚碘对7株临床分离大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为1000mg/L与500mg/L,与标准株相同。结论临床分离大肠杆菌多数存在耐药基因,其对常用消毒剂的抗力与标准菌株相当。     

社区和医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及耐消毒剂基因的检测

摘要 目的 〖JP3〗了解伤口分泌物分离的社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)与医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)的耐药特点,探讨其耐药基因及耐消毒剂基因的携带情况。方法 收集某院2016年1月-2017年12月伤口分泌物分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)76株,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测其耐药基因和耐消毒剂基因。结果 共分离到MRSA 76株,其中CA-MRSA 52株,HA-MRSA 24株。52株CA-MRSA对四环素、庆大霉素、红霉素的耐药率分别为36.54%、1.92%、86.54%,24株HA-MRSA对四环素、庆大霉素、红霉素的耐药率分别为50.00%、12.50%、75.00%,HA-MRSA和CA-MRSA中，耐药基因tetM、ermA及耐消毒剂基因(qacA/B)的携带率均较高。结论 伤口分泌物分离的CA-MRSA与HA-MRSA菌株耐药严重,均可携带多个耐药基因和耐消毒剂基因,应引起重视。     

医院感染铜绿假单胞菌耐消毒剂基因研究

目的:了解医院感染多重耐药铜绿假单胞菌的消毒剂与磺胺类抗生素耐药相关基因存在状况,探讨铜绿假单胞菌对医院常用消毒剂的耐药机制.方法;琼脂稀释法测定50株多重耐药铜绿假单胞菌及标准菌株对医院常用消毒剂的最低抑菌浓度,并用PCR法检测消毒剂耐药基因qacE△1-sul1.结果:50株多重耐药铜绿假单胞菌对医院常用消毒剂苯扎溴铵的最低抑菌浓度为8～32 pg/mL,高于标准菌株最低抑菌浓度(P<0.01);消毒剂耐药基因qacE△1-sul1阳性率100%.结论:铜绿假单胞菌对医院常用消毒剂苯扎溴铵耐药;消毒剂与磺胺类等抗生素耐药相关基因qacE△1-sul1携带率较高,细菌携带qacE△1-sul1基因是消毒剂耐药主要因素.     

含氯消毒剂对耐药结核分枝杆菌的杀灭效果及耐消毒剂基因检测北大核心

目的观察含氯消毒剂对耐药结核分枝杆菌的杀灭效果,检测其耐消毒剂基因。方法采用悬液定量杀菌试验和基因扩增法,对该含氯消毒剂杀灭结核分枝杆菌的效果进行了观察和基因检测。结果用含有效氯1 000mg/L的含氯消毒剂作用10 min,对悬液内结核分枝杆菌标准株H37Rv杀灭对数值>4.00;杀灭标准株H37Ra需有效氯2 000 mg/L的消毒液。用有效氯1 000 mg/L的该消毒液作用2.5 min,对结核分枝杆菌多重耐药株a和c杀灭对数值均>4.00;杀灭多重耐药株d需要作用5 min,杀灭多重耐药株b需要作用10 min。从结核分枝杆菌标准菌株H37Rv和多重耐药菌株a与b中检出qacE△1-sulI基因,其他株未检出。所有试验菌株均未检出qacA/B基因。结论含氯消毒剂对结核杆菌标准株和多重耐药株均有良好杀菌作用。6株菌中qacE△1-sulI基因结果 3株阳性、3株阴性,而qacA/B基因均未检测到。     

临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药表型及耐消毒剂基因检测

摘要 目的 研究医院临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的耐药表型和消毒剂抗性基因携带情况,为加强MRSA感染防控提供理论依据。方法采用细菌分离培养方法和PCR技术,对徐州地区医院住院患者送检病原学标本分离的MRSA耐药表型和抗消毒剂基因携带情况进行检测。结果从临床标本分离的280株金黄色葡萄球菌中共鉴定出MRSA 157株,占检出金黄色葡萄球菌的56.1%。临床分离MRSA仅对万古霉素、奎奴普丁/达福普汀和利奈唑胺敏感,对其他所试验的抗菌药物普遍耐药。MRSA菌株中有28.0%携带抗消毒剂基因qacA/B,MSSA菌株中携带qacA/B基因仅占7.3%。结论该地区医院患者感染的金黄色葡萄球菌中MRSA检出率较高,其MRSA菌株携带抗消毒剂基因比例明显高于敏感株,且普遍耐药,应加强MRSA监测和控制。     

血流感染人葡萄球菌及其耐消毒剂基因检测

摘要 目的 了解医院住院患者血流感染人葡萄球菌临床特点及其耐消毒剂基因携带情况。方法 采用回顾性分析方法和基因检测技术,对河北医科大学第二医院住院患者血标本中分离人葡萄球菌及其抗消毒剂基因进行调查与检测。结果 连续3年,该医院从患者送检的血标本中共检出病原菌2 897株,其中检出人葡萄球菌596株,占检出病原菌总数的20.57%,标本主要来自各科室重症监护室和呼吸科。所检出的耐甲氧西林人葡萄球菌对抗菌药物耐药率显著高于甲氧西林敏感菌株。从93株血流感染人葡萄球菌中检出32株携带耐消毒剂基因qacA/B,检出率为34.4%。结论 该医院住院患者送检血标本中人葡萄球菌检出率最高,严重耐药和抗消毒剂基因检出率均较高。     

qacE△1耐消毒剂基因与细菌多重耐药性的关系

qacE△1存在于Ⅰ类整合子的3’保守端，编码针对季铵化合物、双胍类等消毒剂的外排蛋白，使细菌对消毒剂产生抗性。qacE△1分布较广，多存在于革兰阴性细菌中，也存在于小部分革兰阳性细菌。由于Ⅰ类整合子是编码抗菌素耐药性基因盒的良好载体。因此，在一般情况下，qacE△1阳性菌株比qacE△1阴性菌株发生多重耐药现象的频率高。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗消毒剂基因的检测

目的了解某医院临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌消毒剂抗性基因携带情况,以便掌握其对消毒剂抗药的可能性。方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测25株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中qacA基因。结果临床分离的25株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中有16株检出qacA基因为阳性,qacA基因携带率为64%。结论该医院临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中qacA基因的携带率较高,存在抗消毒剂的可能性,应引起临床医院感染控制部门的重视。     

凝固酶阴性葡萄球菌抗药基因检测及其对消毒剂抗性研究

目的研究医院分离的凝固酶阴性葡萄球菌抗药基因携带情况及其对消毒剂的抗性关系。方法采用PCR方法和肉汤稀释法,分别对凝固酶阴性葡萄球菌qacA基因及其对消毒剂抗性进行了检测。结果从医院环境和医务人员手上分离的63株凝固酶阴性葡萄球菌中,检出12株携带qacA基因,检出率为19.05%。聚维酮碘对12株携带抗药基因的菌株MIC值在250~500 mg/L之间,对其中3株菌的MBC为1 000 mg/L,超过标准菌株的500 mg/L。12株携带抗药基因的凝固酶阴性葡萄球菌中,二氯异氰尿酸对其中3株菌的MIC值为500 mg/L、对其中5株菌的MBC值为500 mg/L;三氯异氰尿酸对其中7株菌的MIC值介于500~1000 mg/L之间、有3株MBC值为1 000 mg/L,均超过标准菌株的250 mg/L。结论凝固酶阴性葡萄球菌抗药基因携带率为19.05%,携带qacA基因的凝固酶阴性葡萄球菌部分菌株分别对含碘消毒剂和含氯消毒剂的抗性有所增加。     

三种革兰阴性杆菌耐消毒剂基因检测及对苯扎溴铵抗性研究

目的研究临床分离致病菌抗药基因情况及其对消毒剂的抗性水平。方法采用基因扩增法和肉汤稀释法分别检测了三种21株革兰阴性杆菌的耐消毒剂基因和苯扎溴铵最低抑菌浓度及最低杀菌浓度。结果临床分离的铜绿假单胞菌、大肠杆菌和鲍曼不动杆菌等21株三种革兰阴性杆菌,其中有13株携带耐消毒剂基因,携带率为61.9%。7株铜绿假单胞菌对苯扎溴铵M IC均低于标准菌株,共有7株菌的MBC高于标准菌株。结论临床分离的三种21株革兰阴性杆菌多数携带耐消毒剂基因,有33.3%的菌株对苯扎溴铵的MBC高于标准株,提示其抗力有所增强。     

临床分离的金黄色葡萄球菌对消毒剂抗力及其抗药基因研究

目的研究临床分离的金黄色葡萄球菌对临床常用消毒剂的抗力及其耐消毒剂基因携带情况。方法用基因扩增技术和纸片扩散法,检测了临床分离的金黄色葡萄球菌抗药基因携带率和对抗生素与消毒剂耐受力。结果在临床分离的金黄色葡萄球菌中,qac(A)基因检出阳性率为18%。在MRSA菌株中,携带qac(A)基因阳性率为21.05%;在MSSA菌株中,携带qac(A)基因阳性率为8.33%。50株临床分离的金黄色葡萄球菌对15种常用抗生素均有不同程度耐药,但对万古霉素敏感。在有效碘200 mg/L和苯扎氯铵300 mg/L作用7.5 min,有效氯500mg/L作用10 min,均有金黄色葡萄球菌存活。结论临床分离的金黄色葡萄球菌qac(A)基因阳性率为18%,对临床常用抗菌药物耐药,部分细菌对含氯消毒剂耐受力较强。     

老年病区大肠埃希菌消毒剂-磺胺耐药基因携带情况的检测

目的了解老年病区大肠埃希菌临床分离株消毒剂-磺胺耐药基因携带情况及耐药性。方法应用聚合酶链反应技术和稀释法对大肠埃希菌临床分离株消毒剂-磺胺耐药基因和药敏进行了检测。结果本医院老年病区中分离的40株大肠埃希菌检出携带消毒剂-磺胺耐药基因28株,携带率为70.0%。40株临床分离的大肠埃希菌对头孢类、替卡西林和环丙沙星类抗菌药物的耐药率为77.5%以上。结论该医院老年病区临床分离的大肠埃希菌消毒剂-磺胺耐药基因检出率较高,多数对临床常用抗生素耐药。     

大肠埃希菌连续分离株对消毒剂-磺胺耐药基因的研究

目的了解大肠埃希菌连续分离株对消毒剂-磺胺耐药基因存在情况和耐药性。方法应用聚合酶链反应法对大肠埃希菌耐药株对消毒剂和磺胺耐药基因进行检测与分析。结果经对连续分离的68株大肠埃希菌中,检测出消毒剂-磺胺耐药基因(qacE△1与sulⅠ)阳性41株,检出率为60.3%。结论临床连续分离大肠埃希菌耐药株消毒剂-磺胺耐药基因检出率较高,提示临床抗药菌株可能同时对消毒剂存在抗药性。     

两株大肠杆菌对低热及六种消毒剂抗力的比较

为比较大肠杆菌(8099)与大肠杆菌(ATCC11229)两个菌株的抗力,用热力与消毒剂进行了载体定量杀菌试验。结果,经56℃、70℃作用5s,大肠杆菌(8099) 的存活率分别为32.38％与0.002％,大肠杆菌(ATCC 11229)者分别为2.160％与0.001％(g/ml)过氧化氢、0.025％(g/ml)戊二醛、含有效氯20mg/L的次氯酸钠复方消毒剂。含有效碘25 mg/L的碘伏、稀释度为25％的酒精(?)哩或氯已定复方消毒剂溶液分别作用5min,大肠杆菌(8099)的存活率分别为0.15％、4.75％、0.29％、0.24％、0.03％与0.01％,大肠杆菌(ATCC 11229) 者分别为0.03％、0.77％、0.19％、0.01％、0.02％与0.00％。结果表明,在相同试验条件下,大肠杆菌(ATCC11229) 对所试热力与消毒剂的抗力比大肠杆菌(8099)弱。     

酸性氧化电位水对大肠杆菌杀灭效果及其主导因素研究

目的研究酸性氧化电位水杀灭大肠杆菌的效果及其主要影响因素。方法采用悬液定量杀菌试验和理化分析方法以及光学显微镜观察,进行了实验室研究。结果在清洁条件下,用含有效氯33.1 mg/L的EOW作用0.5 min,对悬液内大肠杆菌达到完全杀灭。菌悬液与含30 g/L小牛血清白蛋白溶液对倍稀释,明显影响EOW的杀菌效果。单因子低pH值或单独提高有效氯,其杀菌效果均明显低于相同浓度的EOW。经碘化丙锭染色和显微镜观察显示,EOW作用后的大肠杆菌细胞膜受到严重破坏。结论 EOW的杀菌作用是以有效氯为主导,低pH值及高ORP值为促进作用的三者协同作用的结果。     

二株大肠杆菌对冷热抗力的比较

将大肠杆菌分别存放于4℃冰箱与37℃温箱中,经不同时间检测其存活数量。结果,在2种温度下,大肠杆菌8099株的存活率均高于大肠杆菌 ATCC 25922株者。