神经病理性痛大鼠背根神经节神经元钠电流的变化

目的 钠通道在神经病理性疼痛中的作用尚不十分明确,仍有许多疑题待研究.文中研究神经病理性痛模型大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元钠电流的变化. 方法 SD雄性大鼠,周龄4～6周,采用结扎L5脊神经的方法建立神经病理性痛模型.于术后14d时采用酶消化法急性分离模型组损伤侧组(SNL组)以及假手术组(Sham组)L5 DRG神经元,采用全细胞膜片钳技术记录神经元钠电流. 结果 SNL-L5组 DRG神经元河豚毒素敏感型钠电流(TTX-S INa)密度峰值较Sham组增高(P＜0.05),河豚毒素非敏感型钠电流(TTX-R INa)密度峰值较Sham组降低(P＜0.05).与Sham组比较,SNL组TTX-S INa的激活曲线向超极化移动了8.5mY(P＜0.05),稳态失活曲线变化没有统计学意义(P＞0.05);TTX-R INa激活向超极化移动7.4mV(P ＜0.05),稳态失活曲线向去极化方向移动9.6mV(P ＜0.05). 结论 神经病理性疼痛模型大鼠损伤DRG神经元2种钠电流发生了不同的变化,提示损伤神经元不同类型的钠通道在神经病理性痛过程中发挥着不同的作用.     

离体新生大鼠运动神经元的电学特性

在新生大鼠脊髓切片,对经逆行激活鉴定的运动神经元进行常规细胞内记录,测得静息电位-67±3mV,膜电阻91±50MΩ,时间常数4.7±1.6ms,I-V曲线显示轻度正常整流性质。直接动作电位幅值74±4mV,阈电位-52±6mV,I-F曲线表明紧张型放电频率随去极化电流增大而升高。在4个细胞记录到自发的锋电位发放,其频率随膜超极化而降低,是否节律性活动有待进一步研究。     

miR-340对背根神经节神经元兴奋性和钠通道电流的作用

目的：观察miR-340对小鼠背根神经节神经元兴奋性和电压依赖性钠通道电流的作用。方法：采用全细胞膜片钳技术记录神经元放电和钠通道电流。结果：在给予miR-340-3p前DRG神经元的膜静息电位为-49.50±4.76 mV,灌流miR-340-3p后膜的静息电位为-52.13±5.32 mV,差异无统计学意义（P＞0.05）,提示miR-340未影响神经元静息膜电位。在给予miR-340-3p前诱发动作电位数为1.8±0.75个,灌流miR-340-3p后诱发动作电位数为5.6±0.51个,差异具有统计学意义（P＜0.05）,提示miR-340可增高神经元诱发放电频率。电流-电压曲线表明在激活电压从-30 mV至0 mV时,miR-340-3p明显增加钠通道电流密度,差异具有统计学意义（P＜0.05）。激活曲线也表明,miR-340-3p使钠通道激活曲线左移,半激活电压从-22.6 mV增加至-27.4 mV。结论：miR-340对背根神经节神经元的兴奋作用可能是介导坐骨神经损伤神经病理性疼痛的机制之一。     

闪光视诱发电位正常值测定

目的:测定不同年龄组F-VEP闪光视诱发电位的正常值。方法:对40例80只正常眼按年龄不同分为:<20岁组,20～40岁组,>40岁组。按国际标准法进行闪光-VEP测试,结果:<20岁组振幅A5b为13.41±1.93mV;20～40岁组为11.53±0.18mV;>40岁组为15.81±1.49mV;L5b潜伏期:<20岁组为106.10±3.54ms;20～40岁组为97.9±5.65ms;>40岁组为102.5±4.63ms;振幅各组间统计学分析P>0.05;潜伏期各组间统计学分析P>0.05。结论:3组间A5b峰值无明显差异;L5b潜伏期无明显差异。     

性别和性周期对3-硝基丙酸预处理神经保护作用的影响

为探讨3-硝基丙酸(3-NPA)预处理神经保护作用的性别差异和性周期对预处理效果的影响,采用细胞内记录和细胞外记录技术,观察不同性别和性周期小鼠海马神经元缺氧时群峰电位波幅(PSA)和膜特性在3-NPA预处理前后的变化,并采用荧光光谱记录技术检测还原型辅酶1(NADH)荧光强度.结果发现,3-NPA预处理后雄性小鼠PSA缺氧后恢复,由(26±12)%增至(92±17)%(P＜0.01),雌性小鼠情前期组由(17±12)%增至(42±22)%(P＜0.05),动情期和间情期无增加.情前期小鼠海马神经元缺氧时膜电位由3-NPA预处理前的去极化改变翻转为预处理后的超极化,膜电位的超极化改变可为ATP敏感钾通道抑制剂格列本脲所抑制.NADH相对荧光强度的缺氧性增加在雄性和情前期小鼠分别由3-NPA预处理前的(142±10)%和(205±74)%降至预处理后的(119±12)%(P＜0.05)和(122±6)%(P＜0.01).结果表明,3-NPA预处理可提高神经元缺氧耐受性,其神经保护作用存在性别和性周期差异.生理性雌性激素对氧化能量代谢储备和ATP敏感钾通道的影响可能与该差异的形成有关.     

大鼠脊髓背角胶质层神经元的"超极化反跳"现象

目的:研究脊髓背角胶质层神经元在超极化脉冲刺激下的细胞膜反应性,揭示神经元在超极化状态下膜的基本性质. 方法:在大鼠脊髓新鲜薄组织片上,利用脊髓薄片膜片钳全细胞记录技术,记录脊髓背角胶质层神经元接受超极化刺激后膜电位的变化情况. 结果:在电流钳模式下,膜电位在超极化刺激结束后,从超极化电位水平恢复到静息水平的过程中出现一个长时程的对抗回到静息水平的现象超极化反跳,该超极化反跳幅值的最大值为(16.5±3.8) mV;在电压钳模式下,同时可以记录到一个对应的长时程超极化激活的外向流,该外向流的最大幅值为:(45.0±2.1) pA,时程为:(475.0±0.8) ms. 该超极化反跳和超极化激活的外向流具有电压依赖性,没有时间依赖性. 结论:超极化刺激能引起大鼠脊髓胶质层神经元出现"超极化反跳",该现象是神经元在超极化状态下的基本膜特性之一.     

银杏叶总黄酮介导的豚鼠腹腔神经节细胞的去极化

目的观察并分析银杏叶总黄酮(TFG)对豚鼠离体腹腔神经节(CG)细胞膜电位的影响。方法应用细胞内生物电记录技术和离体神经节灌流给药方法。结果TFG可使45·8%的CG细胞去极化,幅度和时程分别为(7·9±0·7)mV和(245·9±29·2)s,且表现剂量依赖性;10%超极化;另有10%出现先超极化后去极化的双相反应;还有34%几乎不发生反应。多数细胞的去极化可被低钙/高镁Krebs液部分阻断,但不受胆碱和肾上腺素受体阻断剂的影响。在TFG诱发的CG细胞去极化的同时伴膜电阻减小(47·2%)、增大(21·8%)或不变(30·9%);无钠或无钙的Krebs液可部分阻断CG细胞去极化,而四乙基铵则使细胞去极化增强。结论TFG可诱发豚鼠CG大多数细胞的去极化,其机制可能与Na+、Ca2+内流增强和K+外流减弱有关。     

腹根刺激在离体新生大鼠运动神经元诱发兴奋性突触后电位

<正> 在10～20天龄大鼠腰段脊髓切外对运动神经元(MN)进行细胞内记录,发现刺激腹根在38%的 MN 诱发去极化(潜伏期1～4.2 ms),6%诱发超极化(潜伏期1.5～3.5 ms),8%诱发前两者混合的反应,且与逆行峰电位的存否无关.超极化反     

人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞Ca2+通道的电生理特性

目的研究人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞L型Ca2+通道的特性及其激动剂BayK 8644对通道的影响.方法培养SK-N-SH细胞,用膜片钳细胞贴附式技术记录和研究L型Ca2+通道的特性.结果SK-N-SH细胞L型Ca2+通道电导为(27.8±2.56)pS,平均开放时间为(0.65±0.08)ms,平均关闭时间的短关闭时间常数(0.53±0.05)ms,长关闭时间常数(6.02±3.46)ms.Bay K 8644使Ca2+通道平均开放时间延长(P＜0.05),但不影响其电导(P＞0.05).结论人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞上存在L型Ca2+通道,与其他神经元上L型Ca2+通道特性相近.     

小鼠初级听皮层SOM中间神经元突触输入的时空特性研究

目的 研究小鼠初级听皮层SOM+神经元接受刺激后突触输入的时空特性.方法 通过局部场电位记录方法对初级听皮层进行定位后,采用电压钳全细胞记录方法在离体脑片上分别记录SOM+神经元和锥体神经元在接受刺激后诱发的兴奋后突触后电流和抑制性突触后电流.通过对两类神经元的兴奋性突触后电流和抑制性突触后电流时间特性以及幅度上的比较,从而分析SOM+神经元突触输入的时空特性.结果 SOM+神经元与锥体神经元的突触输入在时间特性上表现出相似的起始潜伏期.SOM+神经元的兴奋性突触后电流和抑制性突触后电流的峰值潜伏期[(14.35 ±2.74) ms,(18.26 ±3.24) ms]明显要短于锥体神经元的兴奋性突触后电流和抑制性突触后电流的峰值潜伏期[(18.81 ±3.76) ms,(21.08 ±3.93)ms],差异具有统计学意义(EPSC P＜0.05,IPSC P＜0.01).在突触后电流的幅度上两类神经元差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 SOM+中间神经元接受的突触输入与锥体神经元接受的突触输入在基本电生理特性上类似,但时间特性上的差异提示两者接受的突触输入在皮层内环路来源上可能存在一定差异.     

下丘脑冠状切片视上核神经元的电生理特性

目的了解下丘脑冠状切片视上核神经元的电生理特性。方法在下丘脑冠状切片（厚５００μｍ）对视上核神经元进行细胞内生物电记录。结果测得静息电位（－５８±７） ｍＶ（ｘ± ｓ, ｎ＝４４）,膜斜率电阻（１９５±８３）ＭΩ,时间常数（１０．８± ５．０）ｍｓ,膜电容（６０±２０）ｐＦ,动作电位幅度（６７± ９）ｍＶ,阈电位（－４２ ±８）ｍＶ,半幅时程（２．１±１．１）ｍｓ,超射（１１±５）ｍＶ。在记录的１１３个细胞中,３１．９％的细胞有自发锋电位发放,其中５．５％为持续型（紧张型）放电,７０．６％为时相型放电,其余为不规则放电。在时相型放电的细胞可观察到自发的慢去极化电位。长时程去极化时锋电位发放呈明显的适应现象。顺行电刺激可诱发兴奋性突触后电位,并具有刺激强度依赖性。结论提示视上核神经元作为神经内分泌细胞具有与其他神经元不同的电生理特性。     

Verapamil modulating arsenic trioxide-induced QT interval prolongation in guinea pig

Objective To investigate therapeutic action of verapamil on QT prolongation induced by arsenic trioxide （As2O3） in guinea pig and to further explore its possible mechanism. Methods Different doses of As2O3 was infused intravenously to observe the changes of QT interval on the electrocardiogram （ECG） at different times in guinea pig. Patchclamp technique and laser scanning confocal microscopy were utilized to study the action of As2O3 on action potential duration （APD）,     

Single voltage-dependent potassium channels in isolated habenula neurons(Preliminary report)

目的：观察和探讨缰核细胞膜上延迟整流钾电流（Ｉｋ）的性质。方法：应用细胞吸附式膜片钳记录技术。结果：去极化阶跃电压激活该通道电导为３０～３５ｐＳ的外向单通道电流；呈电压依赖性；平均开放时间随去极化电位的增长（０ｍＶ～６０ｍＶ）由３．７２±１．５ｍｓ提高到３２．２±５．６ｍｓ。可以认为，通道的开放不依赖于电极内Ｃａ２＋的存在，四乙基胺明显抑制通道的开放。结论：由以上结果判断，此电流为外向延迟整流钾电流（Ｉｋ）。     

Electrophysiological properties of neurons of guinea pig celiac ganglia

Summary The present study was carried out to investigate electrophysiological properties of neurons of guinea pig celiac ganglia in vitro. The mean value of resting membrane potential was-59.3 ±5.6 mV (n = 29). The mean values of membrane resistance, time constant and membrane capacity were 53.7±19.8mΩ, 18.4±8.5 ms, and 375.9±175.0 pF (n = 24) respectively. When depolarizing electrotonic potentials induced by application of depolarizing current pulses reached the threshold level, all of the neurons could be made to discharge action potentials. The mean values of amplitude, overshoot, duration of the spikes were 68.0±15.3 mV, 11.7 ±4.6mV, and 2.7±0.6ms (n = 29) respectively. 75% of the neurons tested (n = 29) produced tonic (slow adapting) firing in response to depolarizing current lasting 5 s. The remaining neurons (25%) produced phasic (fast adapting) firing. In addition, fast excitatory postsynaptic potentials or orihodromic action potentials were recorded from 80% of the neurons, antidromic action potentials were recorded from ihe remaining neurons during stimulation of the splanchnic nerves.     

细胞外高K^＋浓度对HCN（1，2）通道电生理特性的影响

目的：研究细胞外高K^＋浓度对异源转染的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞上的超极化激活的环核苷酸门控阳离子通道（HCN）1,2电生理特性的影响．方法：将HCN1,HCN2质粒DNA转染至CHO细胞,在两种不同细胞外K^＋浓度条件下用全细胞膜片钳记录细胞膜上HCN1,HCN2通道电流．结果：细胞外高K^＋浓度时,HCN1（pA／pF,112．30±21．50 vs42．33±15．89;-140mV,n=6,P〈0．05）,HCN2（pA／pF,130．57±17．70 vs 26．98±4．62;-140mV,n=8,P〈0．05）通道的电流密度增加,加快了HCN1（激活时间常数：ms,176．59±8．23 vs 306．12±45．66;-80rnV,P〈0．05）,HCN2（激活时间常数：ms,385．24±31．58 vs 763．55±106．17;-80mV,P〈0．05）通道的激活,减小了HCN2通道的半时最大激活电压[mv,-（110．05±1．73）vs -（126．09±2．85）,P〈0．05]和倾斜因子（11．70±0．46 vs 15．87±1．17,P〈0．05）,但对HCN1无影响．结论：细胞外高K^＋浓度对细胞膜上的HCN1和HCN2通道的电生理特性具有明显影响．     

Effects of Phorbol-12,13-dibuterate on Sodium Currents and Potassium Currents in Rat Trigeminal Ganglion Neurons

The effects of phorbol-12,13-dibuterate (PDBu) on total sodium current (INa-total), tet-rodotoxin-resistant sodium current (INa-TTXr), 4-AP-sensitive potassium current (IA) and TEA-sensitive potassium current (IK) in trigeminal ganglion (TG) neurons were investigated. Whole-cell patch clamp techniques were used to record ion currents in cultured TG neurons of rats. Results revealed that 0.5 μmol/L PDBu reduced the amplitude of INa-total by (38.3±4.5)% (n=6, P<0.05), but neither the G-V curve (control: V0.5 =-17.1±4.3 mV, k=7.4±1.3; PDBu: V0.5=-15.9±5.9 mV, k=5.9±1.4; n=6, P>0.05) nor the inactivation rate constant (control: 3.6±0.9 ms; PDBu: 3.6±0.8 ms; n=6, P>0.05) was altered. 0.5 μmol/L PDBu could significantly increase the amplitude of INa-TTXr by (37.2± 3.2)% (n=9, P<0.05) without affecting the G-V curve (control: V0.5=-14.7±6.0 mV, k=6.9± 1.4; PDBu: V0.5=-11.1±5.3 mV, k=8.1±1.5; n=5, P>0.05) or the inactivation rate constant (control: 4.6±0.6 ms; PDBu: 4.2±0.5 ms; n=5, P>0.05). 0.5 μmol/L PDBu inhibited IK by (15.6±5.0) % (n=16, P<0.05), and V0.5 was significantly altered from - 4.7±1.4 mV to -7.9 ±1.8 mV (n=16, P<0.05). IA was not significantly affected by PDBu, 0.5 μmol/L PDBu decreased IA by only (0.3±3.2)% (n=5, P>0.05). It was concluded that PDBu inhibited INa-total but enhanced INa-TTXr, and inhibited IK without affecting IA. These data suggested that the activation of PKC pathway could exert the actions.     

佐替平对家兔齿状回兴奋性突触反应和长时程增强的影响

目的 观察佐替平对家兔齿状回神经元兴奋性突触反应和长时程增强(LTP)的影响作用.方法 20只成年雄性家兔(体质量2.5～3.5 kg),按随机数字表法分为对照组和佐替平1.0组、佐替平2.0组、佐替平5.0组,每组各5只.每只家兔在120分钟里,共有60次记录结果.以群峰电位(PS)幅度和兴奋性突触后电位(EPSP)斜率作为齿状回神经元突触反应的观察指标.各组开始时记录基础反应,30min时分别腹腔注射二甲基亚砜0.5ml和佐替平-二甲基亚砜溶液0.5ml(佐替平的剂量依次为1.0mg/kg、2.0mg/kg、5.0mg/kg),90min时给予强直刺激,并记录相应的反应.结果 4组在单刺激前后的PS幅度和EPSP斜率均无显著性改变;对照组的PS幅度和EPSP斜率在强直刺激后[分别为(0.678±0.052)mV和(0.633±0.024)mV/ms]与注射前[分别为(0.266±0.008)mV和(0.246±0.010)mV/ms]相比有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01),产生LTP;强直刺激后,佐替平1.0组、2.0组、5.0组均不产生LTP;佐替平5.0组强直刺激后的PS幅度和EPSP斜率[分别为(0.277±0.008)mV和(0.296±0.007)mV/ms]与对照组的同阶段结果相比有显著性差异(P＜0.05).结论 佐替平对单刺激家兔海马穿通纤维引起的兴奋性突触反应强度无影响作用,却能抑制家兔海马穿通纤维齿状回通路LTP的产生.     

硫化氢对哇巴因诱发的豚鼠乳头肌迟后去极化及触发活动的影响

目的 探讨硫化氢(H2S)对哇巴因诱发的豚鼠乳头肌迟后去极化(DAD)及触发活动的影响及其可能的机制.方法 应用细胞内玻璃微电极技术记录含哇巴因的高钙K-H液诱发的DAD和触发活动.随机数字表法将豚鼠分为哇巴因组、哇巴因+NaHS组、哇巴因+NaHS+格列苯脲组、哇巴因+ NaHS+ Bay K8644组和哇巴因+NaHS+左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)组5组,各6只.观察硫氢化钠( NaHS)预处理对DAD和触发活动的影响,格列苯脲(20 μmol/L),Bay K8644(0.25 μmol/L),L-NAME(1 mmol/L)预处理对H2S作用的影响.结果 NaHS( 100、200 μmol/L)预处理DAD的潜伏期分别为(19.9±1.6) min、(23.7±1.3) min,均长于哇巴因组[(12.0±1.0) min,P＜0.05或＜0.01];幅值分别为(6.47±0.33) mV、(5.65±0.26) mV,均低于哇巴因组[(11.47±0.74) mV,均P＜0.01];时程分别为(173±10) ms、( 134±7) ms,均短于哇巴因组[(205±11) ms,P＜0.05];在每组6个标本中,有触发活动的发生的标本数分别为4、2、1个,而哇巴因组6个标本中,5个出现触发活动(P ＜0.05或P＜0.01);预先应用格列苯脲(20 μmol/L)部分阻断NaHS(100 μmol/L)的作用;Bay K8644(0.25μmol/L)可完全阻断NaHS的作用;L-NAME(1mmol/L)对NaHS的作用无影响.结论 H2S具有抑制乳头肌DAD及触发活动的作用,其机制可能与兴奋三磷酸腺苷(ATP)敏感的钾通道促进K+外流,抑制Ca2+内流有关.