电刺激延髓外侧网状核对大鼠心脏-躯体运动反射的下行性抑制作用及其机制

目的：观察电刺激延髓外侧网状核 (LRN) 对大鼠心包内辣椒素 (IC) 诱发心脏-躯体运动反射 (CMR) 的下行性抑制作用并探讨其作用机制。方法：22只雄性SD大鼠随机分为电刺激组、电刺激+鞘内注射3 g.L^-1育亨宾组、电刺激+鞘内注射5 g.L^-1育亨宾组和电刺激+鞘内注射溶媒组,观察各组处理因素干预后大鼠IC诱发CMR的脊斜方肌肌电（EMG）的变化。结果：与对照组比较,电刺激（10、20和30 μA）LRN能够抑制EMG,随着刺激强度的增加,抑制效果也加强,EMG分别下降到对照组的51.41%、21.11%和1.43%,（P<0.001）,同时伴有或不伴有血压的改变;与电刺激组比较（10 μA）,鞘内注射肾上腺素能α2受体拮抗剂育亨宾（3和5 g.L^-1）部分逆转了电刺激LRN对CMR的抑制作用,EMG从41.34%分别升高到72.40%和78.73%（P<0.01）。结论：电刺激LRN对CMR具有下行性抑制作用,脊髓水平的α2受体参与了其抑制作用。     

中缝大核对大鼠心脏伤害性感受的下行抑制性调控作用及其调控通路

目的：观察大鼠心脏-躯体运动反射（CMR）,阐明中缝大核(NRM)对大鼠心脏伤害性感受的下行抑制性调控作用及其调控通路。方法：34只雄性健康SD大鼠随机分为NRM电刺激组（n=8）、NRM电刺激联合脊髓背外侧束（DLF）横断组（n=8）和NRM电刺激联合5-羟色胺（5-HT）受体拮抗剂鞘内微注射组（n=18）。所有大鼠均采用心包插管术制作为CMR模型,以心包内注入致痛剂辣椒素（CAP）所诱发的背斜方肌肌电（EMG）为检测指标,通过NRM区域放置刺激电极和(或)脊髓鞘内置管的方法,观察NRM高强度电刺激对CMR的下行调控作用及双侧DLF横断和鞘内5-HT受体拮抗剂注射对NRM下行调控作用的影响。 结果：给予NRM 75 μA 高强度电刺激后,CAP注射诱发的EMG反应与其未实施NRM电刺激前的基础对照比较明显减小（P<0.05）;实施双侧DLF横断后,NRM高强度电刺激后的EMG反应明显大于DLF横断前（P<0.05）,且与其基础对照比较差异无统计学意义（P>0.05）;5-HT受体拮抗剂鞘内微注射后,NRM高强度电刺激后的EMG反应较鞘内注射前明显增加（P<0.05）,但仍小于其基础对照（P<0.05）。 结论: NRM高强度电刺激对心脏伤害性感受具有下行抑制性调控作用,其下行抑制性调控通路主要由DLF所介导,且脊髓内5-HT能神经系统可能参与了源自NRM的抑制性调控过程。     

家兔大鼠延髓呼吸中枢压力感受区的细胞构筑

24只家兔和10只大鼠的延髓呼吸中枢压力感受区(BSA),经HE、Cajal等染色及免疫组化技术作细胞构筑学研究。BSA在软脑膜2～82μm之下,范围为390μm×490μm×1000μm,由中、小型多极和梭形神经元构成,属B1/35-羟色胺能神经元。其表层的胶质纤维及神经纤维与脑表面平行呈板层状排列。BSA富于毛细血管。     

5-羟色胺2C受体对新生大鼠离体延髓脑片基本节律性呼吸放电的调节作用

目的探讨5-羟色胺2C(5-HT2C)受体对新生大鼠离体延髓脑片基本节律性呼吸放电(RRDA)的调节作用。方法取2日龄Sprague-Dawley大鼠18只制备离体延髓脑片标本,使用人工脑脊液(ACSF)灌流脑片,吸附电极记录脑片舌下神经根RRDA。观察使用空白ACSF灌流脑片15、30、45、60 min时RRDA的吸气时程(TI)、呼吸周期(RC)和放电积分幅度(IA)变化情况;使用含1、5、10、20μmol·L~(-1)5-HT2C受体激动剂MK212的ACSF灌流脑片后RRDA的TI、RC和IA变化情况;使用含1、5、10、20μmol·L~(-1)5-HT2C受体阻断剂RS102221的ACSF灌流脑片后RRDA的TI、RC和IA变化情况。结果空白ACSF灌流脑片15、30、45、60 min时RRDA的TI、RC和IA比较差异均无统计学意义(P>0.05)。1μmol·L~(-1)MK212的ACSF灌流脑片后RRDA的TI、IA和RC与给药前比较差异均无统计学意义(P>0.05);5μmol·L~(-1)MK212的ACSF灌流脑片后RRDA表现为TI延长、IA增加、RC缩短(P<0.05);10μmol·L~(-1)MK212的ACSF灌流脑片后RRDA表现较5μmol·L~(-1)MK212的ACSF灌流脑片后TI进一步延长、IA进一步增加、RC进一步缩短(P<0.05);但20μmol·L~(-1)MK212的ACSF灌流脑片后与10μmol·L~(-1)MK212的ACSF灌流脑片后比较,RRDA的TI、IA、RC差异均无统计学意义(P>0.05)。1μmol·L~(-1)RS102221的ACSF灌流脑片后RRDA的TI、IA和RC与给药前比较差异均无统计学意义(P>0.05);5μmol·L~(-1)RS102221的ACSF灌流脑片后RRDA表现为TI缩短、RC延长(P<0.05),IA差异无统计学意义(P>0.05);10μmol·L~(-1)RS102221的ACSF灌流脑片后RRDA表现较5μmol·L~(-1)RS102221的ACSF灌流脑片后TI缩短、IA减少、RC延长(P<0.05);但20μmol·L~(-1)RS102221的ACSF灌流脑片后与10μmol·L~(-1)RS102221的ACSF灌流脑片后比较,RRDA的TI、IA、RC差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 5-HT2C受体对延髓呼吸中枢起着正性调节作用。     

5-羟色胺受体及其在疼痛调控中的研究进展

5-羟色胺(5 hydroxytryptamine,5-HT)受体广泛分布于中枢和外周神经系统,参与机体多种生理功能的调控.5-HT及其类似物通过与不同亚型、不同部位的5-HT受体结合,对疼痛信号产生抑制或易化作用.在中枢神经系统,下行的5-HT能神经元能够激活抑制性中间神经元而发挥镇痛作用,且镇痛作用的强弱与5-HT能神经元的受体类型和分布密度有关.在外周,5-HT受体能够参与疼痛信号的传导,与痛觉过敏密切相关.本文主要综述了中枢和外周不同亚型5-HT受体在不同部位对疼痛信号的调控作用,为急慢性疼痛治疗与康复的基础理论研究和作用靶点选择提供参考.     

损毁大鼠延髓外侧网状核前后高频高强度电针对脊髓背角WDR神经元的作用

采用微电极细胞外记录技术，以清醒大鼠脊髓背角广动力范围（ＷＤＲ）神经元的晚串放电频率为指标，观察损毁延髓外侧网状核（ＬＲＮ）前后高频高强度电针对ＷＤＲ神经元的作用。结果表明：高频高强度电针可明显抑制ＷＤＲ神经元对外周伤害性刺激的反应，电针的这种抑制作用似乎并不受ＬＲＮ的调控。     

电刺激孤束核对大鼠心脏伤害性感受的作用及其脊髓机制的探讨

目的 观察电刺激孤束核(nucleus tractus solitarius,NTS)对心包内注射辣椒素诱发的心脏-躯体运动反射(cardiac-somatic motor reflex,CMR)的影响,以及脊髓鞘内注射受体拮抗剂对NTS这一电刺激效应的影响,探讨参与NTS对心脏伤害性信息调控的脊髓机制.方法 SD大鼠随机分为电刺激组、对照组、育亨宾组、纳洛酮组.分别单独电刺激NTS或电刺激NTS结合脊髓鞘内注射溶媒、生理盐水、去甲肾上腺素α2受体阻断剂(育亨宾)或阿片受体阻断剂(纳洛酮),观察以背斜方肌肌电(electromyogram,EMG)活动为指标的CMR变化.结果 与对照比较,电刺激(10、20、50μA)NTS,CMR呈强度依赖性的减少(P＜0.05);鞘内注射育亨宾的溶媒或生理盐水10 μL,对20 μA电刺激的抑制效应没有明显影响(P＞0.05);鞘内注射育亨宾(20、50μg)或纳洛酮(50、100 μg),电刺激对CMR的抑制效应被翻转(P＜0.05);鞘内注射小剂量的纳洛酮(10μg),使电刺激对CMR的抑制效应增强(P＜0.05).结论 电刺激NTS对心脏伤害性感受信息有下行抑制作用,脊髓的α2去甲肾上腺素受体和阿片受体介导NTS的下行抑制作用,小剂量的纳洛酮对该下行抑制有协同作用.     

大鼠腮腺内5-羟色胺受体的免疫组织化学探讨

目的：观察大鼠腮腺内5-羟色胺(5-HT)受体的分布。方法：免疫组织化学ABC法。抗5-HT的抗体是兔源性的抗5-HT独特型抗体，购于第四军医大学。结果：大鼠腮腺的各级导管的上皮细胞、毛细血管及小血管的内皮细胞均呈5-HT受体免疫反应阳性，免疫反应物分布于胞质，胞核为阴性反应。结论：大鼠腮腺各级导管上皮细胞内有5-HT受体，说明大鼠腮腺可能有自分泌5-HT的功能。     

辛基酚对5-羟色胺转运及受体通路的影响

目的 通过观察人肝7702细胞暴露于辛基酚(OP)后5-羟色胺(5-HT)转运体SERT、5-HT3b受体表达以及5-HT水平的变化,探讨OP对5-HT转运通路和受体结合通路的影响.方法 实验分5个组,分别为OP高(5.0μg/L)、中(1.0μg/L)、低(0.2μg/L)剂量组、盐酸氟西汀组和空白对照组,体外细胞培养48 h,采用ELISA试剂盒检测细胞上清液中5-HT含量的变化,运用实时荧光定量PCR法检测转运体SERT及5-HT3b受体的表达.结果 中、高剂量组细胞上清液中5-HT含量高于空白对照组(P＜0.05),细胞中5-HT3B受体的表达降低(P＜0.05);低、中、高剂量组细胞中SERT的表达均低于空白对照组(P＜0.05);与盐酸氟西汀组检测结果一致.结论 OP可引起5-HT再摄取障碍,同时减少5 HT.受体的表达,对机体5-HT代谢网络的转运通路及受体结合通路产生毒效应作用.     

慢性不可预见性应激易感性差异的5-羟色胺转运体和5-羟色胺受体机制研究

目的 探讨大鼠慢性不可预见性应激(Chronic Unpredictable Stress,CUS)易感性差异的中脑边缘系统5-羟色胺转运体(5-HTT)和5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)机制.方法 150只雄性Sprague-Dawley大鼠以随机数字表法分为试验组(n=120)和对照组(n=30).实验组建立CUS模型,根据旷场试验(Open Field Test,OFT)和强迫游泳试验(Forced Swimming Test,FST)测评指标将大鼠分为高、中、低易感组.在应激模型建立后分别处死高、低偏爱组和对照组大鼠各8只,原位杂交检测大鼠内侧前额叶皮质(mPFC)、中脑腹侧被盖区(VTA)和伏隔核(NAc)区5-HTT和5-HT1AR的表达.结果 高易感组三个脑区5-HTT的灰度值高于低易感组,3组脑区灰度值分别为:mPFC区169.20±8.23,143.53±5.31、Nac区177.41±5.68,158.65±5.24、VTA区174.16±5.61,158.65±4.85,且差异均有统计学意义(P＜0.01);高易感组三个脑区5-HT1AR的灰度值低于低易感组,3组脑区灰度值分别为:mPFC区113.98±7.46,125.90 ±3.30、Nac区112.11 ±5.50,125.06±3.97、VTA区103.11±6.05,115.57 ±3.19,且差异有统计学意义(P＜0.01).结论 中脑边缘系统VTA-NAc-mPFC环路中5-HT1AR高表达状态和5-HTT低表达状态与大鼠CUS高易感性有关.     

大白鼠外侧网状核的传出纤维投射——放射自显影法研究

用放射自显影法(ARG)研究了大白鼠外侧网状核的传出投射。发现外侧网状核除传统上所说的是到小脑投射的“中继站”外,还与脑干运动核及脊髓前角细胞有联系,特别值得提出的外侧网状核还与巨细胞网状核、中缝大核以及前脑的中央中核及束旁核等有联系。     

大鼠丘脑出血后丘脑网状核中GAD67和MOR受体含量的变化*

目的: 探讨大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)模型中,丘脑网状核(thalamic reticular nucleus,TRN)中谷氨酸脱氢酶67(glutamate decarboxylase 67,GAD67)和m型阿片受体(m-opioid receptor,MOR)含量的变化。方法: 在立体定位仪下进行右侧丘脑腹后外侧核(ventral posteriorlateral thalamic nucleus,VPL)注射Ⅳ型胶原酶,建立大鼠丘脑出血模型,同一位置注射同等体积的生理盐水为对照组,尼氏染色观察VPL周围神经元形态,免疫荧光染色观察TRN中GAD67和MOR含量的变化。结果: 丘脑腹后外侧核出血大鼠模型的运动功能未见明显异常表现;模型组VPL内神经元尼氏体坏死,萎缩,空泡变性;对照组TRN内MOR数量为77.77±9.45,ICH后7天减少到30.00±4.90(P＜0.05),ICH后14天为23.30±2.05(P＜0.05),ICH后28天10.50±2.87(P＜0.05);GAD67阳性细胞数量对照组为78.67±7.77,而ICH后7天为27.00±5.35(P＜0.05),ICH后14天为41.67±5.44(P＜0.05),ICH后28天为26.00±6.13(P＜0.05)。结论: 大鼠VPL注射Ⅳ型胶原酶能成功制备丘脑出血模型,模型组大鼠的运动功能无明显变化,模型组大鼠TRN中GAD67蛋白减少,MOR数量减少。     

大鼠孤束核内谷氨酸受体亚型对心脏伤害性感受信息的调控作用

目的：探讨大鼠孤束核(NTS)内谷氨酸受体亚型对心包内注射辣椒素诱发的心脏-躯体运动反射(CMR)的影响,阐明NTS对心脏伤害性信息调控的作用机制。方法：SD大鼠60只随机分为鹅膏蕈氨酸(IBO)组、谷氨酸组、5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸（MK-801）组、α-甲基,4-羧基苯丙氨酸（MCPG）组、MCPG联合MK-801组和6,7-二硝基喹喔啉-2,3-二酮（DNQX）组;各组大鼠孤束核内分别微量注射13 mmol•L^-1 IBO　100 nL,100、200、500 mmol•L^-1谷氨酸100 nL,NMDA受体拮抗剂 40和60 mmol•100•^-1 MK-801 100　nL,代谢型谷氨酸受体拮抗剂 25 和50 mmol•L^-1 MCPG 100 nL,25 mmol•L^-1MCPG 50 nL联合40 mmol•L^-1MK-801 50 nL,非NMDA受体拮抗剂20和50 mmol•L^-1 DNQX 100 nL;观察各组大鼠CMR的变化。结果：与对照组比较, IBO组大鼠CMR减少(P<0.05);谷氨酸组随着谷氨酸浓度的增加,大鼠CMR不断增加(P<0.05); MK-801和MCPG组CMR均减少(P<0.05); MCPG联合MK-801组CMR减少(P<0.05); DNQX组CMR无明显变化(P>0.05)。结论：NTS对心脏伤害性感受信息有易化调控作用,这种易化调节作用主要由NMDA和mGluRs受体介导。     

眼镜蛇毒对大鼠丘脑网状核c-jun表达的影响

目的:观察眼镜蛇毒对大鼠丘脑网状核(thalamicreticular nucleus,TRN)c-jun表达的影响。方法:大鼠随机分为正常组、生理盐水组和眼镜蛇毒组,每组各6只。灌注固定、取脑包埋、石蜡切片。运用免疫组织化学染色法,观察并比较c-jun在各组大鼠TRN的分布情况。结果:眼睛蛇毒组大鼠TRN c-jun阳性细胞数及表达强度较正常组、生理盐水组均显著增高(P<0.01)。结论:眼镜蛇毒对大鼠TRN c-jun的表达有上调作用。     

Melanocortin-4 receptor expression in the rostral ventromedial medulla involved in modulation of nociception in transgenic mice

The rostral ventromedial medulla (RVM) is a prominent component of the descending modulatory system involved in the control of spinal nociceptive transmission. In the current study, we investigated melanocortin-4 receptor (MC4R) expression in the RVM, where the neurons involved in modulation of nociception reside. Using a line of mice expressing green fluorescent protein (GFP) under the control of the MC4R promoter, we found a large number of GFP-positive neurons in the RVM [nucleus raphe magnus (NRM) and nucleus gigantocellularis pars α (NGCα)]. Fluorescence immunohistochemistry revealed that approximately 10% of MC4R-GFP-positive neurons coexpressed tyrosine hydroxylase, indicating that they were catecholaminergic, whereas 50%-75% of those coexpressed tryptophan hydroxylase, indicating that they were serotonergic. Our findings support the hypothesis that MC4R signaling in RVM may modulate the activity of serotonergic sympathetic outflow sensitive to nociceptive signals, and that MC4R signaling in RVM may contribute to the descending modulation of nociceptive transmission.     

大鼠延髓巨细胞网状核与脑干内脏运动核间的纤维投射研究

目的研究成年大鼠延髓巨细胞网状核与脑干内脏运动核的神经联系。方法将顺、逆行神经示踪剂WGA-HRP注入一侧巨细胞网状核,光学显微镜下观察该核团与一般内脏运动核(迷走神经背核、上泌涎核、下泌涎核)和特殊内脏运动核(面神经核、疑核、三叉神经运动核)的纤维联系。结果在一般内脏运动核、双侧迷走神经背核、下泌涎核均可看到少量逆行标记细胞及神经纤维末梢,但上泌涎核未发现任何标记,在特殊内脏运动核的面神经核、疑核、三叉神经运动核团双侧均见逆行标记细胞及神经纤维终支。结论巨细胞网状核与大多数脑干内脏运动核有双向纤维联系。     

大鼠巨细胞网状核与脑干眼球外肌运动神经核的纤维联系

目的:观察大鼠脑干网状结构抑制区巨细胞网状核与脑干眼球外肌运动神经核的纤维联系.方法:将2种神经元示踪剂麦芽凝集素-辣根过氧化物酶(WGA-HRP)、1,1'-双十八烷-3,3,3',3'-四甲基吲哚羰花青-高氯酸盐(DiI) 分别注入大鼠左侧巨细胞网状核后,镜下观察示踪剂在脑干眼球外肌运动神经核的分布.结果:WGA-HRP逆行标记神经元胞体及顺行标记神经纤维终末出现于双侧动眼神经核、滑车神经核,标记胞体同侧多于对侧;动眼神经核小细胞部也发现逆行标记细胞;展神经核未见标记.2种示踪剂显示结果基本一致.结论:大鼠巨细胞网状核与脑干眼球外肌运动神经核有直接纤维联系.     

细纤维活动引起的大鼠脊髓背表面电位

以浅麻醉和麻痹大鼠为对象,利用计算机叠加技术观察了对脖肠神经施加不同强度的电刺激所诱发的脊髓背表面电位(CDP)的波形;延髓网状巨细胞核(NGC)对CDP的影响。实验发现,大鼠腓肠神经诱发的CDP由N_1、N_2、P_1、N_3、P_2、N_4波组成。在同侧NGC微量注射谷氨酸钠后,A_β纤维引起的N_1波无显著性改变,A_β和A_δ纤维引起的P_1波以及A_δ和C纤维引起的N_3波轻微减小,C类纤难引起的P_2和N_4波明显减小。结果提示:NGC对由细纤维诱发的CDP成分有抑制作用。