血府逐瘀汤通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响低氧性肺动脉高压大鼠肺血管重构的研究

目的 探讨血府逐瘀汤对低氧性肺动脉高压（hypoxic pulmonary hypertension,HPH）大鼠肺血管重构的影响及其相关机制。方法 40只♂ SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、血府逐瘀汤组、NVP-BEZ235组、药物联合组,每组8只。采用低压低氧法建立大鼠HPH模型。HE染色观察大鼠肺小动脉病理改变,Masson染色观察肺小动脉胶原纤维含量,免疫组化检测肺小动脉增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）的表达,Western blotting测定肺组织p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR和PCNA的表达。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠肺小动脉血管壁增厚、管腔变窄,胶原纤维含量显著增加（P<0.01）,PCNA、p-AKT、p-mTOR表达增加（P<0.05或P<0.01）;与模型组比较,各药物治疗组大鼠肺小动脉病理改变不同程度减轻,胶原纤维含量显著减少（P<0.01）,PCNA、p-AKT、p-mTOR表达降低（P<0.05或P<0.01）;药物联合组与血府逐瘀汤组相比,胶原纤维含量减少（P<0.05）,PCNA、p-AKT、p-mTOR表达降低（P<0.01）。结论 血府逐瘀汤能有效减轻HPH大鼠肺血管重构,减少血管壁胶原纤维含量以及PCNA的表达,其机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路活化相关。     

金丝桃苷调节RhoA/ROCK信号通路对创伤性脑损伤大鼠的影响

目的：探讨金丝桃苷调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关的卷曲螺旋激酶（ROCK）信号通路对创伤性脑损伤（TBI）大鼠的影响。方法：采用改良Feeney自由落体打击法构建TBI大鼠模型,随机分为模型组、金丝桃苷低剂量（60 mg/kg）组、金丝桃苷高剂量（120 mg/kg）组、金丝桃苷高剂量（120 mg/kg）+空载组、金丝桃苷高剂量（12 0mg/kg）+RhoA过表达组,每组均10只,另取10只健康大鼠设定为假手术组,采用金丝桃苷和质粒分组处理后,以改良神经功能缺损评分（m NSS）和避暗实验检测大鼠神经损伤;以伊文思蓝（EB）定量法检测大鼠血脑屏障通透性;以透射电镜观察大鼠血脑屏障超微结构损伤;以试剂盒检测大鼠血清及脑组织炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)与氧化应激因子超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平;以蛋白免疫印迹检测大鼠脑组织RhoA/ROCK通路相关蛋白表达。结果：与假手术组比较,模型组大鼠血脑屏障结构发生损伤,步入潜伏期、SOD水平显著降低（P<0.05）,mNSS评分、犯错次数、脑组织EB含量、血清及脑...     

埃他卡林对低氧性肺动脉高压肺组织增殖细胞核抗原表达的抑制作用

目的研究低氧性肺动脉高压(HPH)肺组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及新型三磷腺苷（ATP）敏感的钾通道开放药(KATPCOs)埃他卡林(IPT)对HPH肺组织中PCNA表达的影响。方法将36只SD大鼠随机分成正常对照组、HPH模型组、IPT实验组各12只。HPH组及IPT实验组在(100±0.5)%氧浓度饲养，每天8 h，每周6 d，共4周，IPT实验组给予IPT 1.5 mg·kg^-1·d^-1，ig ， 正常对照组及HPH模型组给予0.9%氯化钠注射液5 mL·kg^-1·d^-1，ig。用逆转录聚合酶链反应技术和S P免疫组织化学法分别检测肺组织PCNA mRNA及肺血管平滑肌细胞PCNA蛋白的表达。结果HPH模型组大鼠肺组织PCNA mRNA表达及肺血管中PCNA蛋白阳性细胞数较正常对照组显著增加(P＜0.01)；而IPT实验组与HPH模型组比较，PCNA mRNA和蛋白质表达分别平均下降64.5%，59.9%(均P＜0.01)；IPT实验组与正常对照组比较，PCNA mRNA表达差异无显著性(P＞0.05)。结论HPH模型组大鼠的肺组织PCNA mRNA表达增加，而IPT逆转这种增加。IPT是抑制HPH血管增殖的有效药物。     

葛根素对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的　观察葛根素对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉压力和肺血管重构的调节作用。方法　SD大鼠 3 0只随机分为 :正常对照组 (NC)、低氧组 (HH)、低氧加葛根素组(HP)。分别测定平均肺动脉压 (mPAP) ;肺组织匀浆超氧化物歧化酶 (SOD)活性、丙二醛 (MDA )含量 ;血浆内皮素 1(ET 1)、一氧化氮代谢产物 (NO-x )含量 ;弹力纤维染色法测定肌型动脉百分比 ,肺中、小动脉相对中膜面积 (RMP)、厚度 (RMT) ;采用免疫组织化学法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达 ;核酸原位杂交法检测肺动脉Ⅰ型前胶原mRNA表达。结果　HP组与HH组相比 :①mPAP降低 (P <0 0 1) ;平均颈动脉压 (mCAP)差异无显著性 (P >0 0 5) ;②肺组织匀浆SOD活性升高 (P <0 0 1) ,MDA含量降低 (P <0 0 1) ;③血浆ET 1浓度降低 (P <0 0 1) ,NO-x 含量升高 (P <0 0 1) ,ET 1/NO-x 比值降低 (P <0 0 1) ;④肌型动脉百分比和肺中、小动脉RMP及RMT降低 (P <0 0 1) ;⑤肺细小动脉Ⅰ型胶原蛋白及Ⅰ型前胶原mRNA表达降低 (P <0 0 1) ,而Ⅲ胶原蛋白平均吸光度值差异无显著性 (P >0 0 5)。结论　葛根素注射液可预防慢性低氧性肺动脉高压大鼠的形成 ,减轻肺血管重构。其机制可能与抗氧化作用 ,调节肺动脉胶原蛋白合成以及恢复ET 1/NO的失衡等有关     

基于RhoA/ROCK通路探讨软肝冲剂对CCl4所致大鼠肝纤维化的作用机制

目的 从RhoA/ROCK通路角度探究软肝冲剂对CCl4所致大鼠肝纤维化的分子机制。方法 灌胃给与2 mL·kg-1 40% CCl4(CCl4:橄榄油=2:3,v:v)每周2次,共计8周,建立大鼠肝纤维化模型。造模第6周给与软肝冲剂干预8周,采用Masson染色、脏器指数、生化指标评价软肝冲剂对CCl4所致大鼠肝纤维化的作用;采用RT-PCR、Western blot及免疫荧光组织化学法检测大鼠肝脏组织中Coll Ⅰ、α-SMA、RhoA、ROCK 1 mRNA和蛋白质的表达。结果 脏器指数和生化指标结果显示,与模型组比较,软肝冲剂可以不同程度降低大鼠的肝指数、脾指数,升高胸腺指数(P<0.05,P<0.01);软肝冲剂可以不同程度降低大鼠的血清中AFP、ALT、AST水平(P<0.05,P<0.01);Masson染色结果显示,软肝冲剂可以显著降低大鼠肝脏胶原纤维增生;RT-PCR、免疫荧光组织化学和Western blot结果显示,软肝冲剂可以显著降低大鼠肝脏组织中Coll Ⅰ、α-SMA、RhoA、ROCK 1 mRNA和蛋白质的表达。结论 软肝冲剂对CCl4所致大鼠肝纤维化的治疗作用可能与抑制RhoA/ROCK通路有关。     

秦艽醇提物下调RhoA/ROCK通路发挥对神经根型颈椎病模型大鼠镇痛作用

目的:探讨秦艽醇提物调控Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路对神经根型颈椎病(cervical spondylotic radiculopathy,CSR)模型大鼠镇痛的影响机制。方法:建立CSR模型大鼠,随机分为模型组、秦艽醇提物(2 g·kg^-1)组、Rhosin(RhoA抑制剂,40 mg·kg^-1)组、秦艽醇提物(2 g·kg^-1)+Rhosin(40 mg·kg^-1)组4组(各12只),再选取12只大鼠作为假手术组,分组给药干预后,检测大鼠疼痛度、运动功能、血清炎性介质水平、脊髓及神经根组织病理形态及RhoA/ROCK通路相关蛋白表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠脊髓及神经根组织出现明显病理损伤,步态障碍评分、左前肢离地时间、脊髓及神经根组织RhoA、ROCK蛋白表达水平显著升高(P＜0.05),机械痛阈值、游泳时间显著降低(P＜0.05);模型大鼠经给药干预后其脊髓及神经根组织病理损伤均减轻,各指标水平变化减弱,相比秦艽醇提物、Rhosin单独干预,秦艽醇提物+Rhosin联合干预对模型大鼠作用更强。结论:秦艽醇提物可能通过下调RhoA/ROCK通路,抑制炎性介质合成释放,改善脊髓及神经根组织炎症损伤,减轻CSR大鼠疼痛,修复其神经运动功能。     

水蛭素抑制 RhoA/Rho激酶信号通路对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症反应和纤维化的影响

目的探讨水蛭素抑制 RhoA/Rho激酶(ROCK)信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症反应和纤维化的影响。方法 2020年 1—6月,将 52只清洁级 SD大鼠随机数字表法分为造模组( 42只)和对照组( 10只)。造模组大鼠通过气管内滴注脂多糖( LPS)溶液建立 COPD模型,建模后的大鼠随机数字表法分为模型组、水蛭素组( 50 U/kg)、 ROCK激活剂组［溶血磷脂酸( LPA,40 μg/kg)组、水蛭素 +LPA组( 50 U/kg水蛭素 +40 μg/kg LPA)］,10只/组。药物组和激活剂组分别按照相应剂量进行干预;其余各组给予生理盐水干预。干预结束后,检测各组大鼠肺功能指标 -呼气峰值流速( PEF)及 0.3秒用力呼气容积(FEV0.3)、用力肺活量比值( FVC);颈总动脉取血,检测血清中炎性因子指标［白细胞介素 -1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)］水平;分离肺组织,观察肺组织形态学变化、肺纤维化程度以及 RhoA/ROCK信号通路蛋白表达情况。结果对照组大鼠无肺组织损伤;与对照组 PEF(11.21±1.12)V/mL,FEV0.3(31.68±3.24)mL/s,FVC(8.56±0.85)V/mL,IL-1β(65.78±6.66)ng/L,TNF-α(100.32±10.02)ng/L相比,模型组大鼠肺组织损伤及纤维化较为严重, PEF(7.41±0.71)V/mL、FEV0.3(22.42±2.21)mL/s、FVC(4.61±0.46)V/mL较显著降低( P<0.05),而 IL-1β(158.63±15.89)ng/L、TNF-α(545.37±54.56)ng/L显著增加, RhoA、Rho激酶 1(ROCK1)蛋白表达也增加( P<0.05);与模型组相比,经水蛭素组大鼠肺组织损伤及纤维化程度得到改善, PEF(5.34±0.53)V/mL、FEV0.3(16.15±1.62)mL/s、FVC(8.21±0.82)V/mL较模型组显著增加( P<0.05)而 IL-1β(68.72±6.88)ng/L、TNF-α(115.35±11.55)ng/L显著降低, RhoA、ROCK1蛋白表达均显著降低(P<0.05); LPA可减弱水对 COPD大鼠炎症反应和肺纤维化的改善作用(P<0.05)。结论水蛭素可以降低炎症细胞浸润,改善肺组织损伤和肺纤维化,可能与抑制 RhoA/ROCK信号通路有关。     

罗哌卡因对脑胶质瘤U251细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移及RhoA/ROCK1信号通路的影响

目的：探讨罗哌卡因对脑胶质瘤U251细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的作用及对Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)信号通路的影响。方法：将脑胶质瘤U251细胞分为阴性对照组、阳性对照组,罗哌卡因低、中及高剂量组。阴性对照组正常培养不进行处理,阳性对照组给予顺铂10μg/L,罗哌卡因低、中及高剂量组分别给予罗哌卡因25、50及100 mg/L。继续培养48 h后,采用四甲基噻唑蓝法、流式细胞仪、Transwell小室和划痕法检测细胞增殖率、凋亡率、细胞侵袭数和迁移距离,采用蛋白质印迹法检测细胞中RhoA、ROCK1和基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达。结果：与阴性对照组比较,阳性对照组和罗哌卡因各剂量组脑胶质瘤U251细胞增殖率降低,细胞侵袭数减少,迁移距离缩短,RhoA、ROCK1和MMP-2蛋白表达降低,细胞凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05),且罗哌卡因呈剂量依赖性。与阳性对照组比较,罗哌卡因各剂量组脑胶质瘤U251细胞增殖率升高,细胞侵袭数增加,迁移距离延长,RhoA、ROCK1和MMP-2蛋白表达升高,细胞凋亡率降低,差...     

苏拉明对慢性低氧高二氧化碳大鼠血管内皮生长因子的影响

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)在低氧性肺动脉高压形成中的意义及苏拉明对其的影响。方法　将 30只SD大鼠分成正常对照组 (N组 )、低O2 高CO2 4wk组 (F组 )、低O2 高CO2 4wk +苏拉明组 (S组 ) ,采用ELISA法、透射电镜、免疫组化和原位杂交技术等方法 ,观察各组大鼠肺动脉平均压 (mPAP)、右心室重量比 (RV/LV +S)、血清和肺组织VEGF含量、肺细小动脉超微结构、肺组织VEGF及其基因表达的变化。结果　①F组大鼠mPAP、RV/LV +S、血清和肺组织VEGF的含量高于N组 (P <0 0 1) ,S组大鼠mPAP、RV/LV +S、血清VEGF低于F组 ,(P <0 0 1) ,而肺组织VEGF的含量也低于F组 ,(P <0 0 5 )。②F组中膜平滑肌细胞明显增生、胶原纤维较N组增多 ,S组较F组则减轻。③免疫组化、原位杂交显示F组大鼠肺细小动脉VEGF及其mRNA与N组比较增加 (P <0 0 1) ,而S组与F组比较 ,则降低 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论　VEGF参与了慢性低氧性肺动脉高压的形成 ,苏拉明通过抑制VEGF的作用而有效地降低低氧所致的肺动脉高压。     

葛根素对慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠肺血管低氧诱导因子1α的影响

目的：探讨葛根素降低大鼠慢性低氧(O_2)高二氧化碳(CO_2)性肺动脉高压的作用是否与抑制肺小动脉低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达有关。方法：清洁级SD雄性大鼠30只随机分为正常对照组(NC)、低O_2高CO_24 wk组(HH)、低O_2高CO_2加葛根素组(HP)。免疫组织化学法检测肺细小动脉HIF-1α蛋白的表达,核酸原位杂交法检测肺细小动脉HIF-1αmRNA表达。结果：HH组平均肺动脉压,右室/(左室+室间隔)重量比高于NC组(P＜0.01),HP组低于HH组(P＜0.01)。HH组血浆一氧化氮含量低于NC组(P＜0.01),HP组高于HH组(P＜0.01)。HH组肺细小动脉HIF-1α蛋白表达及HIF-1αmRNA表达高于NC组(P＜0.01),HP组肺细小动脉HIF-1α蛋白表达及HIF-1αmRNA表达低于HH组(P＜0.05)。结论：葛根素减轻大鼠慢性低O_2高CO_2性肺动脉高压的作用可能与其抑制肺血管HIF-1α表达有关。     

Statins suppress MMP2 secretion via inactivation of RhoA/ROCK pathway in pulmonary vascular smooth muscles cells

Recent studies have shown that statins ameliorate hypoxia-induced pulmonary hypertension in animal models. Yet, the underlying molecular mechanisms have not been completely understood. Here, we investigated the hypothesis that statins regulate vascular remodeling by modulation of matrix metalloproteinases (MMP) secretion in primary cultured pulmonary artery smooth muscle cells (PASMCs). Angiotensin II induced a concentration-dependent MMP2 secretion. A 2.75 fold increase was achieved by 100 nM angiotensin II stimulation for 24 h in primary cultured PASMCs (P<0.01 versus control), which was reversed by silencing Ras homolog gene family member A (RhoA) or inhibition of its downstream Rho-associated kinase (ROCK). There was no effect of angiotensin II on the expression of tissue inhibitors of matrix metalloproteinases (TIMPs). Pre-exposure of cells to simvastatin concentration-dependently blocked angiotensin II-stimulated MMP2 release. MMP2 release was reduced to1.34 fold increase in the presence of 10 microM simvastatin (P<0.01 versus angiotensin II-stimulated cells). We further revealed that simvastatin suppression of RhoA activation mediated its inhibitory effect on angiotensin II-triggered MMP2 release. Similarly, simvastatin suppressed endothelin-1-induced MMP2 release through RhoA/ROCK pathway. These results indicated a novel statins-regulation of RhoA/ROCK signaling against pulmonary vascular remodeling, and suggest that statins could prove useful in targeting this pathway in pulmonary hypertension and other disease conditions.     

染料木黄酮对慢性缺氧性肺血管结构改建的干预作用

目的　探讨染料木黄酮对大鼠缺氧性肺血管结构改建的干预作用及其作用机制。方法　将♂Wistar大鼠随机分为 3组 ,常氧对照组 (C)、慢性缺氧组 (H)和慢性缺氧 +染料木黄酮组 (H +G) ,对肺血管进行显微形态学观察。通过免疫组织化学方法检测肺动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果　与常氧对照组相比 ,慢性缺氧组大鼠肺血管管壁增厚 ,管腔狭窄 ,肌型动脉百分比显著增加 (P<0 .0 1) ;肺动脉平滑肌增殖细胞核抗原表达增加。与H组比较 ,H +G组大鼠肺动脉管壁增厚程度及血管腔狭窄程度显著减轻 ,肌型动脉百分比显著降低 (P <0 0 1) ;肺动脉平滑肌PCNA表达明显减少。结论　实验结果提示 ,染料木黄酮可以显著抑制缺氧性肺血管结构改建 ,其作用机制可能与其抑制缺氧诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖有关。     

Targeting RhoA/ROCK pathway in pulmonary arterial hypertension

Introduction: Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a rare disease with a complex pathogenesis. It is often associated with an increased vascular resistance, whilst in the more advanced stages there is a remodelling of the vascular walls. PAH has an intricate involvement of various signaling pathways, including the ras homolog family member A (RhoA)–Rho kinase (ROCK) axis. Currently, available therapies are not always able to significantly slow PAH progression. Therefore, newer approaches are needed.

Areas covered: In this review, areas covered include the role of the RhoA/ROCK in PAH pathogenesis and the plausibility of its therapeutic targeting. Furthermore, various inhibitory compounds are discussed, including Fasudil and SB-772077-B.

Expert opinion: Currently, specific RhoA/ROCK inhibition is the most promising therapeutic approach for PAH. Research has shown that it suppresses both the components of this axis and the upstream upregulating mediators. An inhaled RhoA/ROCK inhibitor may be a successful future therapy; however, further clinical trials are needed to support this approach.     

间歇低氧合并肺气肿大鼠模型肝脏氧化应激及凝血功能的研究

目的建立肺气肿合并间歇低氧(IH)的重叠综合征(OS)大鼠模型,探讨OS大鼠肝脏炎性损伤及其凝血功能的变化。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分成正常组(A组)、IH组(B组)、肺气肿组(C组)和IH合并肺气肿组(D组)。通过对大鼠进行16周的熏烟暴露造成大鼠肺气肿;从13周开始,同时施加程控预制的间歇低氧/再氧合(IH/ROX)处理对大鼠进行IH暴露4周。暴露结束后取各组大鼠肺和肝脏组织于光镜下观察并计算肝脏炎性损伤病理评分。取肝组织匀浆采用ELISA方法测定其超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)浓度。检测血浆纤维蛋白原(FIB),血浆因子FⅧ促凝活性(FⅧ:C)、血管性血友病因子抗原(v WF:Ag)和抗凝血酶活性(AT:A)水平。结果 D组肝脏炎性损伤病理评分和凝血因子FIB、FⅧ:C、v WF:Ag水平均高于A、B、C组,而SOD和CAT活性以及AT:A水平低于其他3组(均P<0.05)。FIB、v WF:Ag、FⅧ:C、AT:A与SOD呈明显相关(r分别为-0.905、-0.941、-0.946和0.817,均P<0.01)。结论 OS动物模型下IH和肺气肿在导致氧化应激和高凝状态上具有一定叠加效应,可引起更强的肝脏炎症反应和血栓前状态。     

氯离子通道阻断剂对大鼠低氧性肺动脉高压的影响

目的:探讨氯离子通道阻断剂三苯氧胺(tamoxifen,TAM)对大鼠低氧性肺动脉高压的治疗效果。方法:雄性Wistar大鼠96只,随机分为:(1)治疗组(缺氧+三苯氧胺,H/Q):大鼠在常压缺氧(10%,每日8 h)箱内饲养,缺氧前3 d开始灌胃三苯氧胺0.4 mg.kg-1.d-1,每日1次;(2)缺氧组(H组):每日给予相等量的生理盐水,余同治疗组;(3)正常对照组(C组)。测定各组大鼠d 4、7、14、21右心室/(左心室+室间隔)厚度,多导生理记录仪记录肺动脉平均压(mPAP),图像分析仪测定血管管壁面积占管总面积的百分比(WA/TA)和血管管腔面积占管总面积的百分比(VA/TA)。结果:缺氧组d 7mPAP开始升高,d 21达高峰,治疗组同时间点明显低于缺氧组;缺氧组RV/(LV+S)d 14开始上升,d 21达高峰,治疗组同时间点明显低于缺氧组;缺氧组d 21的血管管壁面积占管总面积的百分比(WA/TA)显著高于d 21治疗组(P<0.05)。而缺氧组d 21的血管管腔面积占管总面积的百分比(VA/TA)显著低于d 21治疗组(P<0.05)。结论:氯离子通道阻断剂三苯氧胺可降低缺氧所致大鼠肺动脉压升高、改善右心室肥厚及肺小动脉增厚,对低氧性肺动脉高压有一定的治疗作用。     

Alterations in pulmonary vascular function in rats exposed to intermittent hypoxia

Vasoactive agents were examined in arteries from control rats and rats exposed to intermittent hypoxia (10% oxygen; 8 h/day) for 3, 5 or 20 days. Hypoxic rats developed right ventricular hypertrophy after 5 days, but became pulmonary hypertensive (elevated right ventricular systolic pressure; RVSP) only after 20 days. In pulmonary arteries (main and intralobar), responses to acetylcholine and ionomycin (endothelium-dependent vasodilators) were reduced after 20 and 5 days of intermittent hypoxia, whereas contractions to 5-hydroxytryptamine (5-HT) were enhanced (potency increase >10-fold) after 20, 5 and 3 days. Contractions to endothelin-1 and a thromboxane-mimetic, but not Ca(2+), were also increased. No changes in vascular function occurred in aorta. Since changes in pulmonary vascular function preceded the increase in RVSP they do not result from, but may contribute to, the development of hypoxia-induced pulmonary hypertension. If similar changes occur in humans, they may be important in conditions characterised by intermittent, as opposed to continuous, hypoxia.     

Withania somnifera shows a protective effect in monocrotaline-induced pulmonary hypertension

Abstract

Context: Withania somnifera (Linn.) Dunal (Solanaceae), a clinically used herbal drug in Ayurveda, shows potent antioxidant, anti-inflammatory, pro-apoptotic, and cardioprotective effects. However, the efficacy of W. somnifera in pulmonary hypertension (PH), a cardiopulmonary disorder, remains unexplored.

Objective: The present study investigates the effect of W. somnifera root powder on monocrotaline (MCT)-induced PH in rats.

Materials and methods: In preventive studies, W. somnifera root powder (50 and 100?mg/kg/d, p.o.) was administered from day 1 following single administration of MCT (60?mg/kg, s.c.) in Sprague–Dawley (SD) rats. After 35?d, right ventricular pressure (RVP) was measured in anesthetized rats. Various physical markers of right ventricular hypertrophy (RVH) were measured in isolated hearts. Markers of endothelial function, inflammation, and oxidative stress were estimated in lung homogenate. Vasoreactivity of pulmonary arteries was also studied. In therapeutic treatment, W. somnifera (50 and 100?mg/kg/d, p.o.) was administered from day 21 to 35 post-MCT administration.

Results: Preventive treatment with 50 and 100?mg/kg W. somnifera significantly reduced the RVP (32.18?±?1.273?mm?Hg and 29.98?±?1.119?mm?Hg, respectively, versus 42.96?±?1.789?mm?Hg of MCT) and all markers of RVH in MCT-challenged rats. There was an improvement in inflammation, oxidative stress and endothelial dysfunction, and attenuation of proliferative marker and apoptotic resistance in lungs. Therapeutic treatment with W. somnifera (100?mg/kg) also reduced RVP and RVH.

Discussion: This study demonstrated that W. somnifera significantly protected against MCT-induced PH due to its antioxidant, anti-inflammatory, pro-apoptotic, and cardioprotective properties.     

慢性间断性低氧对大鼠肝脏细胞色素P450的影响

目的观察慢性间断性低氧对大鼠肝脏P450同工酶的影响。方法♂SD大鼠随机分为对照组和实验组,实验组分别低氧3、7、14、28d。采用酶法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,分光光度法测定大鼠肝微粒体红霉素N-脱甲基酶(ERD)、苯胺羟化酶(ANH)活性,半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测大鼠肝脏细胞色素P4503A2、2E1的mRNA表达水平。结果慢性间断性低氧对血清ALT和AST活性无明显影响;低氧7d后,大鼠肝脏ERD和ANH活性明显升高,28d时诱导率分别为155·5%和42·2%;同时CYP3A2和CYP2E1mR-NA的表达水平,也分别增加了220·5%和102·8%。结论慢性间断性低氧能明显增加大鼠肝脏ERD(CYP3A2)和ANH(CYP2E1)活性,其机制可能与其在转录水平上提高肝脏CYP3A2和CYP2E1的基因表达水平有关。     

缬沙坦及红花对单侧输尿管结扎大鼠肾脏细胞增殖的影响

目的观察肾间质纤维化实验大鼠肾脏细胞增殖的特点及缬沙坦、红花对其的抑制作用。方法结扎大鼠单侧输尿管(UUO)复制肾间质纤维化实验动物模型,分别给以缬沙坦10mg·kg-1·d-1、红花4.0g·kg-1·d-1经口灌服,14d后摘取肾脏,采用免疫组化、RT-PCR检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达、流式细胞学检测细胞增殖/凋亡及细胞周期。结果免疫组化结果显示UUO大鼠肾脏PCNA阳性细胞表达明显增多,RT-PCR显示其基因表达增强,流式细胞学显示UUO大鼠肾脏细胞增殖/凋亡比例下降,S期细胞比例增多;缬沙坦及红花治疗组均可在蛋白及基因水平下调其表达。结论单侧输尿管结扎可诱导肾脏细胞增殖,血管紧张素受体拮抗剂缬沙坦及中药红花可下调其表达。