贝那普利、氯沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞表达及排泄的影响

目的:探讨尿液中足细胞检测在糖尿病肾病(DN)大鼠中的意义,贝那普利、氯沙坦对DN大鼠足细胞的表达及排泄的影响。方法:32只DN大鼠随机分为4组:A组:糖尿病肾病模型组;B组:贝那普利组;C组:氯沙坦组;D组:贝那普利 氯沙坦组。腹腔注射链佐脲菌素诱导DN大鼠模型。实验12周时检测24h尿蛋白定量(TP),总胆固醇(TC)。间接免疫荧光法检测尿沉渣足细胞特异性标志蛋白podocalyxin以检测尿液足细胞(UPC)水平;免疫荧光染色观察肾小球上皮细胞蛋白-1( GLEPP1)的表达。结果:A组UPC、TP较B、C组明显升高(P<0.01),TC亦较B、C组升高(P<0.05)。B、C组UPC、TP、TC无显著性差异(P>0.05)。与B、C组相比,D组显著降低TP(P<0.01),UPC及TC(P<0.05)。病理组织肾小球荧光染色示GLEEPP1在A组呈节段性明显缺失,B、C组缺失较轻,D组无明显缺失。UPC与TP正相关(r_s=0.54,P<0.05),而与TC无显著相关性(r_s=0.35,P>0.05)。结论:尿液中脱落足细胞检测可作为判断DN病情活动性的标志之一。贝那普利、氯沙坦均可减少DN大鼠蛋白尿,降低胆固醇,减少足细胞脱落及尿液足细胞的排泄,且两者效果相似,而两者联用较单用一种可显著减少足细胞排泄,降低蛋白尿及胆固醇,肾保护作用更为明显。     

白蛋白过负荷对足细胞骨架蛋白α-actinin-4的影响

目的:观察足细胞损伤及药物干预后细胞骨架蛋白mRNA的变化,以进一步研究足细胞病的发病机制。方法:体外培养条件永生化小鼠足细胞,设立分组:对照组、足细胞损伤组(BSA 20mg/ml)、地塞米松组(地塞米松0.1umol/L+白蛋白20mg/ml),分别于12h、24h、48h检测足细胞内α-actinin4 mRNA表达变化。结果:足细胞损伤组足细胞内α-actinin4 mRNA水平随时间变化逐渐降低,地塞米松组先降低后升高。结论:地塞米松可以改善足细胞损伤后骨架蛋白α-actinin-4的mRNA表达的变化。     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠肾脏氧化应激及细胞凋亡的影响

目的 探讨氧化应激在糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡中的作用以及α-硫辛酸的肾保护作用.方法 腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型,并将糖尿病大鼠分为糖尿病非干预组(DM组)、α-硫辛酸干预组(LA组),非糖尿病正常大鼠作对照(NC组),每组10只.12周时检测肾皮质中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;原位末端标记(TUNEL)法检测肾脏细胞凋亡,免疫组化法检测半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达.结果 与NC组相比,DM组肾皮质MDA含量显著升高(P<0.01),SOD活性显著下降(P<0.01);肾脏凋亡细胞数及Caspase-3表达均显著增加(P<0.01).α-硫辛酸干预后可改善上述指标(P<0.01).结论 糖尿病可引起肾脏高水平的氧化应激和过度的细胞凋亡.α-硫辛酸通过抑制氧化应激和下调Caspase-3的表达来干预细胞凋亡发挥肾保护作用.     

α-硫辛酸联合氯沙坦治疗早期糖尿病肾病的临床观察

目的:观察α-硫辛酸联合氯沙坦治疗早期糖尿病肾病(DN)的疗效并探讨其协同作用机制。方法:116例早期DN患者随机分为3组,在一般治疗基础上,A组39例予氯沙坦钾片治疗(50 mg,qd);B组39例予α-硫辛酸胶囊治疗(300 mg,bid);C组38例予氯沙坦钾片(50 mg,qd)+α-硫辛酸胶囊(300 mg,bid)治疗,时间均为3个月。比较3组治疗前后的24 h尿白蛋白排泄率(UAER)、血糖、糖化血红蛋白、血压、血脂、肾功能、尿转化生长因子-β1(TGF-β1)、血清超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果:3组治疗后UAER、尿TGF-β1均较前明显下降,其中C组显著低于A组和B组(P<0.05或<0.01);治疗后B组、C组血清SOD、GSH-Px活性明显高于A组(P<0.01)。结论:α-硫辛酸联合氯沙坦可更有效治疗早期DN,其协同作用机制可能是通过更有效改善氧化应激进而下调肾脏TGF-β1的高表达。     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏AT2受体及细胞因子mRNA表达的影响

目的研究氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏AT2受体及细胞因子mRNA表达影响.方法SD大鼠随机分成3组对照组、糖尿病组、氯沙坦治疗组(30 mg·kg-1·d-1,ig).实验第8周,应用RT-PCR技术检测大鼠肾皮质血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍化生长因子-B(PDGF-B)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及Ⅳ型胶原的mRNA表达.同时用放免法检测大鼠肾皮质血管紧张素II(Ang II)含量.结果糖尿病大鼠尿蛋白排泄率(P＜0.01)、肾皮质Ang II水平(P＜0.05)较对照组明显升高;糖尿病组大鼠肾皮质TGF-β1、PDGF-B、TNF-α及Ⅳ型胶原的mRNA表达较对照组大鼠显著增加(P＜0.01);然而,糖尿病组大鼠肾皮质AT2mRNA表达却较对照组显著下降(P＜0.05),氯沙坦治疗能明显降低糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1、PDGF-B、TNF-α及Ⅳ型胶原的mRNA表达(均P＜0.05).治疗组AT2的mRNA表达则明显高于对照组(P<0.05)与糖尿病组(P＜0.01).结论糖尿病大鼠肾皮质AT2受体mRNA表达的下调可能与肾组织TGF-β1、PDGF-B、TNF-α及血管紧张素Ⅱ表达的增加有关.氯沙坦激活AT2受体的表达的机制可能与下调肾脏系列细胞生长因子的表达有关.     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中α-SMA表达的影响

目的探讨罗格列酮(rosiglitazone,RSG)对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中表达的影响,揭示RSG对糖尿病肾病的保护作用。方法应用免疫组化技术及流式细胞学技术检测对照组、2型糖尿病组及RSG干预组肾小管上皮细胞中α-SMA的表达。结果免疫组化及流式定量结果显示:RSG干预组较2型糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞胞浆中α-SMA表达减弱。结论RSG可以减弱2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中α-SMA的表达,从而起到保护肾脏的作用。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中α-SMA表达的影响

目的探讨罗格列酮(rosiglitazone,RSG)对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中表达的影响,揭示RSG对糖尿病肾病的保护作用。方法应用免疫组化技术及流式细胞学技术检测对照组、2型糖尿病组及RSG干预组肾小管上皮细胞中α-SMA的表达。结果免疫组化及流式定量结果显示:RSG干预组较2型糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞胞浆中α-SMA表达减弱。结论RSG可以减弱2型糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中α-SMA的表达,从而起到保护肾脏的作用。     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠肾脏聚ADP-核糖多聚酶表达的影响

目的 探讨旷硫辛酸(α-LA)对糖尿病大鼠肾脏聚ADP-核糖多聚酶(PARP)表达的影响.方法 30只SD大鼠随机均分为链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病组(A组)、α-LA干预的糖尿病组(B组)及正常对照组(C组).8周后测各组大鼠肾脏超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,TUNEL法检测.肾脏细胞凋亡,免疫组化法观察PARP在肾脏中的表达,Western blot法检测肾脏半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达.结果 与C组比,A组大鼠肾脏SOD活性下降,MDA含量、肾脏细胞凋亡数、PARP和Caspase-3的表达均显著增多(P<0.05),而B组上述指标均较A组明显改善(P<0.05).结论 α-LA对糖尿病大鼠肾脏保护作用可能与抑制氧化应激、下调PARP表达而对抗细胞凋亡有关.     

氯沙坦对实验性糖尿病大鼠肾脏功能的保护作用

目的 :探讨氯沙坦对糖尿病肾病肾脏功能的保护作用。方法 :制作糖尿病大鼠模型 ,分成 3组 ,每组 15只 ,糖尿病治疗组给予氯沙坦灌胃 ,糖尿病组和正常对照组均给予等量生理盐水灌胃。分别于实验的wk 1,2 ,4取材 ,测定血糖、血肌酐、尿清蛋白、尿肌酐、尿α1 微球蛋白排泄率和血浆内皮素(ET)水平。结果 :糖尿病组大鼠出现血糖升高、肌酐清除率下降、尿清蛋白和尿α1 微球蛋白排泄率升高 ,与正常对照组相比差异有非常显著和显著意义(P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,血浆ET水平升高 ,wk 2时与正常对照组间差异有非常显著意义 ;肌酐清除率、尿清蛋白和尿α1 微球蛋白排泄率等指标 ,治疗组与糖尿病组比较差异均有显著或非常显著意义。结论 :动物实验证实氯沙坦可减轻糖尿病肾病的肾功能损害 ,改善肾功能 ,具有肾脏保护作用     

替米沙坦对糖尿病肾病大鼠肾脏α-SMA表达影响的实验研究

目的探讨糖尿病肾病肾脏α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)的表达及血管紧张素-Ⅱ受体1拮抗剂替米沙坦对其表达的影响。方法将28只SD大鼠单次腹腔注射STZ(60 mg.kg-1)诱发实验性糖尿病肾病,随机分为糖尿病肾病组(D)和替米沙坦组(T),14只.组-1,另将14只鼠龄及体重相等的SD大鼠作为正常对照组。药物干预12周后,称量体重,收集24 h尿液及血标本,取大鼠肾脏组织行免疫组织化学检查-αSMA。结果与正常组相比,糖尿病肾病大鼠肾小球内-αSMA蛋白表达、24 h尿蛋白排泄量以及肾功能各项指标大幅度增高(P<0.01)且成相关关系,替米沙坦能显著性抑制-αSMA蛋白表达,减少尿蛋白排泄量以及降低肾功能各项指标(P<0.01),并能降低DN大鼠血糖浓度。结论糖尿病肾病大鼠肾脏损伤可能与-αSMA表达增高有关,替米沙坦下调-αSMA表达,减少尿蛋白排泄以及降低肾功能指标,可能是其肾脏保护作用机制之一。     

来氟米特联合氯沙坦钾对糖尿病肾病患者肾小球足细胞的影响

目的 探讨来氟米特联合氯沙坦钾对糖尿病肾病（DN）患者肾小球足细胞的影响。方法 将60例DN患者随机分为对照组与治疗组各30例，对照组予氯沙坦钾治疗，50 mg/次口服，1次/d；治疗组在对照组基础上给予来氟米特治疗，前3 d剂量为50 mg/次，1次/d，之后减量至20 mg/次，1次/d。两组疗程均为6周。分别在治疗前后检测血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、24 h蛋白尿定量、尿足细胞数及其标志蛋白（PCX）。结果 治疗前，两组Scr、BUN、24 h蛋白尿定量均无统计学差异；治疗后，两组Scr、BUN、24 h蛋白尿定量均较治疗前明显下降，同组治疗前后比较差异有统计学意义（P<0.05）；且治疗组以上指标明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗前，两组尿足细胞数和PCX水平比较，差异无统计学意义；治疗后，两组尿足细胞数和PCX水平较治疗前明显降低，同组治疗前后比较差异有统计学意义（P<0.05）；且治疗组明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗组总有效率为93.3%，明显优于对照组的73.3%，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 来氟米特联合氯沙坦钾治疗DN的疗效较好，可有效减少肾小球足细胞的损伤。     

罗格列酮对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮整合素连接激酶和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的探讨罗格列酮对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮整合素连接激酶和α-平滑肌肌动蛋白(α-SM A)表达的影响。方法 30只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、阳性对照组和罗格列酮处理组,每组10只,正常对照组给予普通营养饲料喂养,阳性对照组和罗格列酮处理组给予高脂饲料喂养,连续喂养12周后,阳性对照组和罗格列酮处理组大鼠腹腔注射30 mg/kg链脲佐菌素,正常对照组给予等量枸橼酸缓冲液。成功制备DKD模型后,罗格列酮处理组大鼠给予罗格列酮3 mg/kg灌胃,正常对照组和阳性对照组给予等量生理盐水灌胃。连续给药28周后,对各组大鼠进行称重,检测FBG、Hb A1c和24 h尿蛋白水平,实时荧光定量PCR检测右肾上极皮质组织中ILK和α-SMA表达。结果罗格列酮处理组和阳性对照组大鼠体重均低于正常处理组,而相对肾重均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),罗格列酮处理组大鼠体重均高于阳性对照组,而相对肾重低于阳性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);罗格列酮处理组大鼠FBG、Hb A1c和24 h尿蛋白水平均高于正常对照组,但均低于阳性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);罗格列酮处理组大鼠右肾上极皮质组织中ILK mRNA和α-SMA mRNA相对表达量均高于正常对照组,但均低于阳性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DKD大鼠肾组织中ILK和α-SMA呈高表达,罗格列酮可下调DKD大鼠肾组织中ILK和α-SMA表达,可能通过抑制肾小管上皮细胞转分化发生而延缓肾小管间质纤维化。     

来氟米特对糖尿病肾病大鼠肾脏VEGF表达的影响

目的：研究氟米特对糖尿病肾病大鼠肾脏血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法：将48只清洁级雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组（A组）、模型对照组（B组）、来氟米特组（C组）和氯沙坦组（D组）。分别于糖尿病成模后8、12周处死,观察24h尿蛋白排泄量、尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）、肾脏病理组织学改变、免疫荧光检测肾组织VEGF蛋白的表达,RT—PCR方法检测肾组织VEGF mRNA表达。结果：8、12周末糖尿病模型大鼠（B、C、D组）的Scr、BUN及24h尿蛋白较正常对照组（A组）均有显著增高（P〈0．01）;12周末时B、C、D组大鼠的Scr、BUN及24h尿蛋白均较8周时有所增加;来氟米特（LEF）干预组及氯沙坦干预组上述指标均低于B组,差异有统计学意义（P〈0．01）．但LEF干预组及氯沙坦干预组之间差异无统计学意义。结论：来氟米特和氯沙坦均对糖尿病大鼠肾脏损害有保护作用,其机制可能是通过增加VEGF表达而实现。     

雷帕霉素对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的探讨雷帕霉素对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用。方法将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、糖尿病肾病模型组(DN组)和雷帕霉素治疗组(R组)各8只。R组大鼠给予雷帕霉素灌胃。观察各组大鼠血糖、24h尿蛋白及肾脏病理改变,并通过透射电镜观察足细胞的超微结构的改变。结果与C组相比,DN组大鼠尿蛋白排泄量明显增加(P<0.01),肾脏病理可见肾小球肥大,电镜下可见肾小球足细胞足突增宽、融合,基底膜节段性增厚;R组大鼠尿蛋白较DN组降低(P<0.01),肾组织病理改变减轻。结论雷帕霉素对糖尿病肾病具有一定肾脏保护作用,可能通过改善足细胞超微结构,延缓糖尿病肾病的进展。     

氯沙坦对大鼠糖尿病肾损害的保护作用*

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂氯沙坦对糖尿病肾损害的保护作用与机制.方法36只大鼠分成正常对照组、糖尿病模型组和氯沙坦治疗组,每组12只.模型组和氯沙坦组腹腔注射链脲佐菌素65 mg·kg-1建立糖尿病模型,在模型建立1周后氯沙坦组灌胃给予氯沙坦5 mg·kg-1·d-1,共12周.检测各组第1,4,12周血糖、24 h尿视黄醇结合蛋白(RBP)、尿白蛋白(Alb)排泄率;分别于第4和12周每组各处死5只大鼠,取肾,称重,计算肾脏肥大指数;分离肾皮髓质,荧光定量RT-PCR法检测皮质转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA水平;透视电子显微镜检查肾小球基底膜、系膜区的病理改变.结果第4和12周时模型组尿Alb,RBP排泄、肾脏肥大指数和TGFβ1mRNA表达量均显著高于正常对照组(P＜0.01),氯沙坦组的这些指标则较模型组明显减少(P＜0.01).电镜显示模型组肾小球毛细血管基底膜增厚,系膜和系膜细胞增生;氯沙坦组肾小球毛细血管基底膜也有不规则增厚,较同时期模型组减轻.结论氯沙坦对糖尿病肾损害有确切的保护作用,其机制可能部分与氯沙坦抑制肾脏TGFβ1过度表达有关.     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾组织降钙素基因相关肽和内皮素-1表达的影响

目的 探讨氯沙坦对糖尿病大鼠肾组织降钙素基因相关肽（CGRP）及内皮素-1（ET-1）表达的影响。方法 42只大鼠随机分成正常对照组、糖尿病组和氯沙坦治疗组（每日灌胃给予氯沙坦30mg/kg,共8周）,腹腔注射STZ诱发糖尿病大鼠模型。实验8周取尿、血化验,肾组织采用免疫组化检测CGRP与ET-1蛋白表达,半定量RT-PCR检测CGRP与ET-1mRNA的表达。结果 3组大鼠24h尿蛋白定量、血肌酐、血尿素氮均有统计学意义（P〈0.05）。糖尿病组肾组织CGRP的蛋白及mRNA的表达较正常对照组降低,ET-1的蛋白及mRNA的表达较正常对照组升高;氯沙坦组CGRP的表达较糖尿病组升高,ET-1的表达较糖尿病组降低;3组间均有统计学意义（P〈0.05）。结论 氯沙坦的肾脏保护作用可通过促进CGRP合成,减少ET-1分泌而起作用。     

百令胶囊对肾小管间质纤维化大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白表达的影响及意义

目的观察百令胶囊对肾小管间质纤维化大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscleactin,α-SMA）表达的影响,探讨百令胶囊肾脏保护作用的可能机制。方法雄性3个月龄SD大鼠90只,随机分为：对照组（30只）,模型组（30只）,预防组（30只）,以腺嘌呤灌胃法建立大鼠肾小管间质纤维化模型,预防组加以1.5 g/（kg.d）百令胶囊溶于生理盐水灌胃以预防肾小管间质纤维化;对照组以等体积的2%淀粉溶液和生理盐水灌胃。分别于实验第7、12、17周时随机处死10只大鼠,进行血肌酐（creatinine,Cr）、尿素氮（blood urea nitrogen BUN）,24 h尿蛋白定量和尿N乙-酰-β-D氨-基葡萄糖苷（N-a-cetylβ--D-glucosam inidase,NAG）酶检测,光镜下观察肾组织的病理变化及免疫组织化学法检测肾脏转化生长因子-β1（transform ing growth factor-beta1,TGFβ-1）、α-SMA的表达情况。结果①功能学变化：与对照组比较,各时相点模型组、预防组大鼠尿蛋白、尿NAG酶、血Cr及血BUN均升高（P〈0.01）,但预防组低于模型组（P〈0.01）;模型组、预防组自身对照各指标均较前一时相点升高（P〈0.01）。②病理学变化：7周时模型组、预防组即有肾小管间质损害;模型组、预防组自身对照肾小管间质损害均较前一时相点加重（P〈0.01）,但7、12周时预防组肾小管间质损害均较模型组为轻（P〈0.01）,17周时两组间差异无统计学意义（P=0.670）。③免疫组化：各时相点模型组、预防组大鼠肾脏TGFβ-1、α-SMA的表达均高于对照组（P〈0.01）,但预防组均低于模型组（P〈0.01）,模型组、预防组自身对照均较前一时相点升高（P〈0.01）,17周时表达量最高。结论百令胶囊可能通过抑制α-SMA,在肾小管间质纤维化早期应用时起到保护作用。     

氯沙坦对糖尿病肾病患者血清VEGF、MMP-9表达的影响

目的研究氯沙坦对糖尿病肾病患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法选取2014年5月至2015年4月本院收治的72例糖尿病肾病患者,根据抽签法分为观察组和对照组,每组36例。对照组为常规药物治疗,观察组在此基础上加以氯沙坦进行治疗,100 mg/次,1次/d,疗程均为3个月。比较两组患者治疗前后血清VEGF、MMP-9、肾功能、血生化指标变化。结果治疗后,观察组、对照组的血清VEGF表达为(72.21±8.21)、(102.34±11.32)ng/L,MMP-9分别为(58.45±8.01)、(80.54±9.75)ng/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);两组血肌酐分别为(154.43±8.32)、(184.32±9.54)μmol/L,尿素氮为(10.32±1.23)、(12.46±1.87)mmol/L,24 h尿蛋白为(0.78±0.08)、(1.12±0.12)g/24 h,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);两组空腹血糖分别为(4.35±0.57)、(5.75±0.92)mmol/L,三酰甘油为(1.76±0.13)、(2.12±0.22)mmol/L,总胆固醇为(4.21±0.32)、(4.86±0.43)mmol/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论氯沙坦能明显降低糖尿病肾病患者血清VEGF、MMP-9表达,有利于患者临床症状的改善,安全性高。     

氯沙坦对临床糖尿病肾病的短期作用

目的：短期１个月观察血管紧张素Ⅱ受体（ＡＴ１型）拮抗剂氯沙坦对临床糖尿病肾病（ＤＮ）的作用。方法：１５例临床ＤＮ患者给了氯沙坦５０～１００ｍｇ／ｄ，观察指标包括血压，尿蛋白（总蛋白，ＩｇＧ，白蛋白，转铁蛋白和视黄醇结合蛋白）排泄，肾功能和止钾。结果：与基础值相比，血压和２４ｈ尿蛋白（包括总蛋白，大分子，中分子和小分子蛋白）明显降低（Ｐ〈０．０５），肾功能保持稳定，血钾轻度升高，但无统计学差异，结论