环介导等温扩增技术检测肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌

目的建立环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测肺结核患者痰标本和分枝杆菌阳性培养物中的结核分枝杆菌(MTB)。方法选择临床可疑肺结核患者痰标本121份、MTB阳性分离物14份,非结核分枝杆菌(NTM)阳性分离物14种共31株,用涂片抗酸染色镜检、罗氏固体培养基培养、LAMP技术分别进行检测,用LAMP技术对人MTB标准菌株H37Rv及卡介苗(BCG)进行检测,判断LAMP检出限并评价敏感性和特异性。结果涂片法抗酸杆菌检出率为38.02%(46/121),培养法MTB检出率为42.15%(51/121),LAMP法MTB检出率为49.28%(56/121),差异无统计学意义(χ2分别为3.146和1.247,P均>0.05)。对121例可疑肺结核患者痰标本进行MTB检测,以罗氏固体培养基培养结果为金标准,LAMP检测结果的敏感性为92.16%(47/51),特异性为87.14%(61/70),二者无显著性差异(χ2=1.247,P>0.05),且一致性强(kappa=0.78,P<0.01)。LAMP能准确分辨MTB和NTM阳性分离物,对H37Rv、BCG检测结果均为阳性;对H37Rv菌株的检出限为120 CFU/mL。结论 LAMP检测MTB敏感性和特异性高,操作简便易行、快速准确,不需要昂贵的检验设备,适于基层医院结核病诊断的推广和应用。     

LAMP法在肺结核患者痰标本中的应用评价

目的评价环介导等温扩增技术(LAMP)在肺结核患者痰标本中的应用。方法收集该院2016年12月至2017年4月门诊及住院诊断为肺结核且抗结核治疗涂片阳性的患者痰标本75份、涂片阴性患者痰标本72份,每份痰标本同时进行LAMP法结核分枝杆菌复合群核酸快速检测、罗氏固体(L-J)培养,分别计算LAMP法及L-J培养的阳性率。结果 75份痰涂片抗酸染色阳性标本中,LAMP法检测阳性75份,L-J培养阳性64份,LAMP法阳性检出率[(100%)75/75]显著高于L-J培养阳性检出率[(85.3%)64/75],且差异具有统计学意义(χ2=9.09,P0.05)。72份痰涂片抗酸染色阴性标本中,LAMP法检测阳性23例,L-J培养阳性12例;与痰涂片阴性标本比较,LAMP阳性检出率[31.9%(23/72)]显著高于L-J培养阳性检出率[16.7%(12/72)],且差异具有统计学意义(χ2=6.67,P0.05)。结论 LAMP法具有较高的灵敏度及特异度,对结核分枝杆菌的阳性检出率高于痰涂片和L-J培养,且LAMP法具有快速、简便、准确的特点,可用于临床上早期发现结核病患者。     

LAMP技术检测结核分枝杆菌的临床时效性分析

目的探讨环介导等温扩增法(LAMP)检测结核分枝杆菌在基层诊疗机构中的临床应用价值。方法采用LAMP法及抗酸染色涂片法对140例临床诊断为肺结核的患者的痰标本进行检测。统计分析采用McNemar检验和Kappa检验。结果 140例痰标本中,抗酸染色涂片法及LAMP法的阳性检出率分别为29.3%(41/140)和45.0%(63/140)。与抗酸染色涂片法比较,LAMP法的灵敏度为97.6%(40/41)、特异度为76.8%(76/99),总体一致率82.9%(116/140)。两种方法一致性相比,差异有统计学意义(Kappa=0.642,P0.05),两者一致性良好。在检测时间上,与涂片法相比,大批量标本检测中LAMP法所用时间较短。结论痰标本检测中,LAMP法阳性检出率优于抗酸染色涂片法,批量检测性好,具有较好的临床应用前景。     

LAMP法在临床诊断的肺结核患者BALF标本中的应用评价

目的评价环介导等温扩增法(LAMP)在临床诊断的肺结核与非肺结核两组患者中支气管肺泡灌洗液(BALF)结核分枝杆菌的检测效果。方法收集2017年6月至2018年2月于遵义医学院附属医院住院的患者130例,其中临床诊断肺结核51例,非肺结核79例,分别行支气管肺泡灌洗(BAL)进一步寻找病原体。所有标本均送支气管刷检物行涂片抗酸染色,支气管肺泡灌洗液分别行结核分枝杆菌罗氏培养及LAMP检测,并进行统计学分析。分别计算LAMP法及培养法的阳性率及阳性检出率。结果 51例临床诊断肺结核患者中,抗酸染色阳性3例,阳性率为5.9%(3/51),18例BALF培养阳性,阳性率为35.3%(18/51),28例LAMP阳性,阳性率为54.9%(28/51)。非肺结核组79例标本中,支气管刷检物行涂片抗酸染色及肺泡灌洗液培养均阴性,LAMP法阳性2例(1例临床诊断为肺癌,1例临床诊断为肺炎)。结论在BALF标本中,TBLAMP法具有较高的灵敏度及特异度,对结核分枝杆菌的阳性率及阳性检出率高于罗氏固体培养,并明显高于抗酸染色法,且LAMP法具有快速、简便、准确的特点,可替代抗酸染色法用于临床上早期发现结核病患者。     

环介导等温扩增技术快速检测痰标本中结核分枝杆菌的初步评价

目的评价环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技术在结核分枝杆菌诊断中的应用价值。方法收集246份疑似肺结核患者的痰标本,分别进行涂片镜检,罗氏培养以及实时定量PCR和LAMP法检测。结果涂片镜检,罗氏培养实时定量PCR和LAMP法对结核分枝杆菌的检出率分别为30.89%,45.53%,54.47%,57.32%。以罗氏培养结果作为金标准,LAMP法诊断的敏感性为96.19%（101/105）,特异性为76.87%（103/134）,两种方法检测结果的一致性是Κ=0.71,两法具有很好的吻合性。以实时定量法为标准,LAMP法的敏感性为90.07%（127/141）,特异性为93.33%（98/105）,两法检测结果的一致性是κ=0.83,P〈0.001。结论 LAMP法检测结核分枝杆菌具有较高的敏感性和特异性,与罗氏培养和RT-PCR有着较高的吻合性,很适合作为临床检测项目开展。     

显色固液双相培养基快速检测结核分枝杆菌的临床应用评价

目的探讨固液双相培养基快速检测结核分枝杆菌的临床价值。方法对350例患者的痰标本分别进行涂片抗酸染色、改良罗氏培养法、固液双相培养法、Bactec 960培养法检测。结果 350例痰标本涂片抗酸染色法阳性率为14.8%,改良罗氏培养法为24.0%,固液双相法为35.7%,Bactec 960培养法为40.3%,改良罗氏培养法与涂片抗酸染色法比较,差异有统计学意义(P0.01),固液双相培养法与改良罗氏培养法比较,差异有统计学意义(P0.01),固液双相培养法与Bactec 960培养法比较,差异无统计学意义(P0.05)。改良罗氏培养法平均报告阳性时间为21.5d,固液双相培养法液相平均为13.2d,固相为16.4d,Bactec 960培养法平均为11.8d。结论固液双相培养法操作简便,阳性率高,时间短,适合基层医院快速检测结核分枝杆菌。     

聚合酶链反应检测结核分枝杆菌的临床应用价值

目的探讨用聚合酶链反应(PCR)荧光定量法检测结核分枝杆菌的临床应用价值。方法对189例临床确诊的结核病患者(结核病组)和45例非结核呼吸系统疾病患者(对照组)的痰或支气管灌洗液标本,分别应用PCR实时荧光定量法、涂片抗酸染色法和结核杆菌培养法检测,然后对3种方法的阳性检出率进行统计学分析。结果 PCR法检测结核病组标本的阳性检出率为74.1%(140/189),明显高于涂片抗酸染色法的24.9%(47/189)及结核杆菌培养法的43.9%(83/189)。3种方法检测45例对照组患者的结果均为阴性,特异度为100.0%(45/45)。结论 PCR荧光定量法的敏感度和特异度明显高于涂片抗酸染色法和结核杆菌培养法,用于结核分枝杆菌的鉴定简便、快速、特异,适于在卫生检疫系统和临床实验室应用。对于结核病的及早诊断、预防和疗效监测具有良好的临床应用前景。     

3种检测方法在HIV合并结核分枝杆菌感染诊断中的对比研究

目的对比3种检测方法在HIV合并结核分枝杆菌感染中的诊断价值,以期找到最优的检测方法或检测方法组合。方法收集2013年1月至2015年12月确诊为HIV合并结核分枝杆菌感染患者的各类标本115份。每例患者均用相同类型的标本进行直接涂片抗酸染色镜检、罗氏培养和实时荧光定性PCR法检测。结果以任意1种标本检出阳性计算阳性率,115例HIV合并结核分枝杆菌感染患者的标本直接涂片抗酸染色法与罗氏培养法检测的阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=19.865,P=0.001);直接涂片抗酸染色法与实时荧光定性PCR法检测的阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=0.028,P=0.001);罗氏培养法与实时荧光定性PCR法检测的阳性率比较,差异无统计学意义(χ~2=21.261,P=0.868)。应用罗氏培养法来检测脓液、粪便和尿液,其检出率都达到了100.0%。实时荧光定性PCR法检测脑脊液、胸腔积液及腹水等含菌量较少的标本,检出率达到100.0%。罗氏培养法与实时荧光定性PCR法在检测痰液标本时检出率也较高(80.0%)。而从标本类型上来看,脓液标本3种方法均全部检出结核分枝杆菌,粪便和尿液标本用培养的方法检测结核分枝杆菌阳性率均为100.0%。支气管肺泡灌洗液的检出率也较高,均大于70.0%。结论实时荧光定性PCR在检测低排菌量标本如脑脊液、胸腔积液及腹水时具有明显优势;脓液标本3种方法均全部检出结核分枝杆菌,粪便和尿液标本用培养的方法均能100.0%检测出结核分枝杆菌。     

3种方法检测结核分枝杆菌的评价

目的评价荧光定量基因扩增法(FQ-PCR法)、胶体金法、痰涂片萋-纳氏抗酸染色法检测结核分枝杆菌情况,寻求结核分枝杆菌的快速、准确和特异性检测手段。方法选择经临床确诊96例肺结核患者痰液,采用3种方法进行检测。以临床确诊结核组为"真阳性",以对照组为"真阴性",分别计算3种方法的灵敏度、特异度、符合率、正确诊断指数、阴性及阳性预测值。结果 3种方法检测结核分枝杆菌的阳性率分别为:FQ-PCR法42.7%,胶体金法48.9%,痰涂片萋-纳氏抗酸染色法12.5%,FQ-PCR法联合胶体金法66.7%。经χ2检验,FQ-PCR法、胶体金法对结核分枝杆菌的检出率优于痰涂片萋-纳氏抗酸染色法;FQ-PCR法联合胶体金法对结核分枝杆菌的检出率优于单独采用FQ-PCR法、胶体金法的检出率;FQ-PCR法具有高度灵敏性和特异性,结果的可信度优于其他两种方法,联合胶体金法诊断可在保持高灵敏性、高特异性的同时,进一步提高结核分枝杆菌检出率。结论对早期诊断可获得较好治疗效果的肺结核患者应该选择灵敏度高的诊断方法,FQ-PCR法联合胶体金法检测有一定优势。     

噬菌体生物扩增法检测结核性胸膜炎患者胸水临床应用研究

目的 评价噬菌体生物扩增法检测胸水中结核分枝杆菌对诊断结核性胸膜炎的临床应用价值.方法 采用噬菌体生物扩增法技术对73例结核性胸膜炎患者,20例非结核性胸膜炎患者胸水中的结核分枝杆菌进行检测.同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养.结果 73例结核性胸膜炎胸水.噬菌体生物扩增法阳性率为49.3%(36/73)、涂片抗酸染色阳性率为2.7%(2/731、罗氏培养阳性率为4.1%(3/73).20例非结核性胸膜炎,噬菌体生物扩增法、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性.结论 噬菌体生物扩增法检测胸水中结核分枝杆菌只需2天时间,操作简便、灵敏度高、特异性强,不需要特殊仪器设备,可作为诊断结核性胸膜炎的一种好方法 .     

Xpert MTB/RIF检测技术在肺结核实验室诊断中应用价值探析

目的：探讨结核分枝杆菌及利福平耐药检测(Xpert MTB/RIF)在肺结核实验室诊断中的临床价值。方法：选取2020年1月至2022年1月收治的118例疑似肺结核患者作为研究对象,所有疑似患者均采集痰液标本,开展痰培养、痰涂片抗酸染色、Xpert MTB/RIF检测,并以痰培养为金标准,分析痰涂片抗酸染色法、Xpert MTB/RIF检测诊断肺结核的临床价值;采用kappa检验验证痰涂片抗酸染色法、Xpert MTB/RIF检测诊断肺结核与痰培养的一致性。结果：118例疑似患者痰培养检出92例,其中痰涂片抗酸染色法检出80例,检出率为86.96%(80/92);Xpert MTB/RIF检测检出90例,检出率为97.83%(90/92);Xpert MTB/RIF检测检出率高于痰涂片抗酸染色法,差异有统计学意义(χ²=7.731,P=0.005);Xpert MTB/RIF检测诊断肺结核的灵敏度[96.74%(89/92)]、准确度[96.61%(114/118)]及阴性预测值[89.29%(25/28)]高于痰涂片抗酸染色法[84.78%(78/92)、86....     

噬菌体生物扩增法对结核病临床诊断的意义

目的 探讨噬蒲体生物扩增法技术检测临床标本对结核病临床诊断的应用价值.方法 采用噬菌体生物扩增法技术对86例活动性肺结核患者痰标本、73例结核性胸膜炎患者胸水、30例肺结核患者肺泡灌洗液,共计189份临床标本进行检测;对非结核病患者痰标本10例、胸水5例、灌洗液5例共计20份标本进行检测.同份标本同时进行涂片抗酸染色、罗氏培养.结果 86例活动性结核患者痰标本、73例结核性胸膜炎患者胸水、30例肺结核患者肺泡灌洗液噬菌体生物扩增法检测阳性率分别为53.49%(46/86)、49.32%(36/73)、60.00%(18/30);涂片抗酸染色阳性率分别为24.42%(21/86)、2.74%(2/73)、20.00%(6/30);罗氏培养阳性率分别为44.19%(38/86)、4.11%(3/73)、36.67%(11/30).20份非结核患者标本,噬菌体生物扩增法、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性.结论 噬菌体生物扩增法检测结核病标本的阳性率高于涂片法和罗氏培养,该方法 敏感性高、特异性强、操作简便,对结核病临床诊断有较高的应用价值.     

结核抗体蛋白芯片法对老年肺结核的诊断价值研究

目的探讨结核抗体蛋白芯片法对老年肺结核的诊断价值。方法选择93例肺结核及77例肺部非特异性感染老年患者,均行痰涂片抗酸染色试验,均采用结核分枝杆菌IgG抗体检测试剂盒(蛋白芯片)检测抗结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露醇(LAM)、基因工程重组的16 kD和38 kD的IgG抗体,计算两种方法诊断结核分枝杆菌感染的敏感性及特异性;并分别构建受试者工作特征曲线,通过比较曲线下面积(area under the curve,AUC)评价其诊断效能。结果蛋白芯片法和痰涂片抗酸染色试验诊断结核分枝杆菌感染的敏感性分别为68.82%和33.33%,特异性分别为100.00%和97.40%;AUC分别为0.84和0.65,提示蛋白芯片法的诊断效能显著高于痰涂片抗酸染色法,差异有统计学意义(P0.01)。结论蛋白芯片法检测抗结核分枝杆菌LAM、16 kD和38 kD抗体快捷简便,对诊断老年肺结核有较高的实用价值。     

DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用

目的 探讨DNA微阵列芯片法在海南地区结核病诊断及耐药性检测中的应用.方法 采用抗酸杆菌涂片法、罗氏培养法、比例法药敏试验及DNA微阵列芯片法对海南地区的2069例疑似结核病患者痰标本进行检测,并对结核分枝杆菌检出率、耐药性及耐药基因突变特征进行分析.结果 DNA微阵列芯片法检测结核分枝杆菌检出率为明显高于罗氏培养法和...     

环介导等温扩增技术在肺结核诊断中的应用价值

目的评价环介导等温扩增技术(LAMP)在肺结核诊断中的应用价值。方法选取2016年1月至2019年1月于长治市人民医院就诊的295例可疑肺结核患者为研究对象,所有病例均送痰标本进行LAMP检测和涂片抗酸染色,分别计算LAMP及涂片抗酸染色法的阳性检出率、阳性预测值、阴性预测值等,并进行统计学分析。结果 295例患者中,临床诊断肺结核180例,非肺结核115例,LAMP和涂片抗酸染色法的灵敏度分别为83%、28%。与涂片抗酸染色法比较,LAMP的灵敏度明显高于涂片抗酸染色法。结论 LAMP具有较高的特异度和灵敏度,对肺结核尤其是痰涂片阴性的肺结核有很好的临床诊断价值和应用前景。     

BACTEC MGIT 960仪在肺结核病诊断中的应用

[目的]探讨BACTEC MGIT 960仪在肺结核病诊断中的应用。[方法]应用BACTEC MGIT 960仪对肺结核病人的痰标本进行培养，并与BACTEC TB 460仪、改良罗氏培养法及涂片抗酸染色法进行对照。[结果]BACTEC MGIT 960仪阳性率为31．96％，与BACTEC TB 460仪的阳性率接近，比改良罗氏培养法及涂片抗酸染色法高。[结论]BACTEC MGIT 960仪能显著缩短（初代阳性平均分离时间为11．6d，比BACTEC TB 460仪快1．9d，比改良罗氏培养法快9．1d。）报告时间，且阳性检出率高。     

Xpert MTB/RIF技术在结核分枝杆菌利福平耐药性快速检测中的价值

目的探讨Xpert MTB/RIF技术在结核分枝杆菌(MTB)快速检测及利福平耐药检测中的价值。方法收集1 562例初诊疑似肺结核患者痰液样本,同时采用Xpert MTB/RIF法、液体培养法和涂片抗酸染色法进行检测,评价Xpert MTB/RIF法的检测敏感性和特异性。以液体培养法为标准,分析Xpert MTB/RIF法检测涂片抗酸染色法阳性、阴性标本的敏感性和特异性。将188例液体培养阳性样本进行分枝杆菌菌群鉴定和药物敏感性试验,评价Xpert MTB/RIF法检测MTB及其对利福平耐药的敏感性和特异性。结果 Xpert MTB/RIF法与液体培养法检测结果的符合率为93.92%(χ~2=3.55,P0.05),与涂片抗酸染色法的符合率为89.44%(χ~2=48.51,P0.001)。以液体培养法为标准,XpertMTB/RIF法的检测敏感性为82.41%(328/398)、特异性为97.85%(1 139/1 164),2种方法差异无统计学意义(χ~2=3.55,P0.05);XpertMTB/RIF法鉴定188例液体培养阳性样本菌群种类的敏感性为91.23%(156/171)、特异性为88.24%(15/17)、准确性为90.96%(171/188),与液体培养法比较差异无统计学意义(χ~2=4.109,P0.05);Xpert MTB/RIF法检测利福平耐药的敏感性为82.35%(14/17)、特异性为99.35%(1/154),与传统比例法药物敏感性试验结果比较,差异无统计学意义(χ~2=0.138,P0.05)。结论 Xpert MTB/RIF技术可快速检测MTB及其对利福平的耐药性,敏感性和特异性较好,具有较高的临床应用价值。     

模板涂片法检测抗酸杆菌的临床应用价值

目的评价模板涂片法检测抗酸杆菌的临床应用价值。方法对送检的726例痰标本,应用模板涂片法检测抗酸杆菌,并与目测涂片法、罗氏培养法室间质控结果进行比较。结果模板涂片法的阳性检出率为33.8%,高于目测涂片法的26.6%(χ2=8.48,P0.01),接近于罗氏培养法的40.5%(χ2=7.08,P0.01),原始结果与省级盲法复检结果阳性符合率100%,阴性符合率100%,痰涂片质量符合国家标准(χ2=0.21,P0.5),比目测涂片法痰细胞、痰膜大小、厚薄、染色、痰膜脱落5项质量指标合格率均明显提高(P0.001),以罗氏培养结果为金标准,模板涂片法的敏感性为83.3%,特异性为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为89.8%,准确性为93.3%。结论模板涂片法既继承了目测涂片法检测抗酸杆菌的简便快速,又较目测涂片法制片质量和阳性检出率明显提高,具有较高的敏感性和特异性,适合基层实验室推广应用。     

酶联免疫斑点技术和分枝杆菌改良罗氏固体培养法在肺结核辅助诊断中的价值

目的评价酶联免疫斑点技术(ELISPOT)和分枝杆菌改良罗氏固体培养法在肺结核辅助诊断中的应用价值。方法收集临床疑似肺结核的214例患者的血液和痰液,用ELISPOT技术(T-SPOT.TB试剂)分析血液标本中结核分枝杆菌特异性致敏T细胞的γ-干扰素释放情况;用酸性改良罗氏培养基进行痰液的分枝杆菌分离培养;用PNB固体培养法进行菌种初步鉴定,确定为结核复合群。比较两种方法在肺结核辅助诊断中的符合率和诊断效能。结果两种方法的阳性检出率差异无统计学意义(χ2=1.58,P=0.21),两法符合率为85.5%(183/214)。以临床确诊肺结核为金标准,固体培养法的敏感性为98.2%,特异性为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为98.1%,约登指数为0.98;T-SPOT.TB法敏感性为89.2%,特异性为83.5%,阳性预测值为85.3%,阴性预测值为87.8%,约登指数为0.73。结论 ELISPOT检测(T-SPOT.TB)对肺结核的诊断效能较好,检测周期较分枝杆菌固体培养方法短,在肺结核感染快速诊断和早期筛查中具有广泛应用前景。     

实验室诊断结核性脑膜炎6种方法的比较研究

目的　比较 6种实验诊断结核性脑膜炎 (结脑 )方法的特异性和敏感性 ,寻求实用的实验诊断结脑的方法。方法　采集结脑组 115份及对照组 4 2份脑脊液标本 ,平行进行改良罗氏法培养结核分枝杆菌、PCR法检测TB DNA、离心涂片一步法检测抗酸分枝杆菌 (AFB)、常规沉渣涂片法检测AFB、斑点免疫金渗滤试验法检测LAM IgG、连续监测法检测ADA。应用卡方检验比较各种方法特异性和敏感性的差别。结果　结脑组 6种试验的阳性率 :培养法 4 .3%、TB DNA 81.7%、常规涂片法 13.9%、离心涂片法 6 4 .3%、LAM IgG5 0 .4 %、ADA5 9.1%。对照组有 16例ADA阳性 ,余均阴性。结论　PCR法和离心涂片法具有较高的特异性 (均 10 0 % )和敏感性 (81.7%和 6 4 .3% ) ,应用价值高于其他方法。