HPLC-MS法同时测定大鼠血浆中那格列奈及其主要代谢物M1

目的 建立同时测定那格列奈及其主要代谢物M1的HPLC-MS方法。方法 血浆样品经过乙酸乙酯萃取,以非那西丁为内标。色谱采用岛津C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm)分离,流动相为0.1%甲酸溶液与乙腈,梯度洗脱,流速0.2 mL/min。质谱采用选择性离子监测(SIM)阳离子模式,检测对象[M+H]⁺为：那格列奈318.2,代谢物M1 334.1,非那西丁180.1。结果 标准曲线线性范围为0.0625～8μg/mL那格列奈,M1为0.0313～4μg/mL。日内及日间准确度和精密度变异均<10%,血浆样品稳定性良好,提取回收率均>96%,基质效应<5%。结论 本方法稳定性好、灵敏度高、重现性好,可应用于各类生物样本中那格列奈及其代谢物M1的生物等效性与药物代谢动力学研究。     

高效液相色谱-串联质谱法测定移植患者血浆泊沙康唑水平

目的建立测定血浆泊沙康唑水平的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法,并应用于临床治疗药物监测。方法 HPLC色谱柱为Ultimate XB-C18。柱温50℃,流速0.8mL/min,流动相为含0.1%甲酸,以及2mmol/L乙酸铵的水溶液和含0.1%甲酸的甲醇溶液,梯度洗脱。质谱检测方式为ESI正离子模式,MRM扫描,监测泊沙康唑m/z 701.5~683.4作为定量离子,内标泊沙康唑-d4m/z 705.4~687.5作为定量离子。结果泊沙康唑水平在0.1~10.0μg/L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.993 0),日内及日间精密度5%,平均回收率为90%~103%。结论该方法简便、准确、快速,适用于泊沙康唑的血药浓度测定。     

高效液相色谱-串联质谱法在检测绝经后妇女血清中雌激素及其代谢物中的应用

目的 建立一种高灵敏度的高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),分析绝经后妇女血清中包含雌酮(E1)、雌二醇(E2)及其羟基化、甲基化、葡萄糖醛酸结合/硫酸结合(-G/S)等代谢产物的水平。方法 采用叔丁基甲醚液-液萃取法,结合β-葡萄糖醛酸苷酶/芳基硫酸酯酶水解及丹磺酰氯对萃取后的血清样品进行衍生化处理。以同位素标记的雌酮-d4作为内标,采用Waters UPLCⅠ-Class/Xevo TQS液质联用系统测定。以ACQUITY UPLC BEH C18 (2.1 mm×100 mm, 1.7μm)为色谱柱,水/甲醇(含0.05%甲酸和2 mmol/L甲酸铵)为流动相,0.3 mL/min流速梯度洗脱。柱温为50℃,进样量10μL。电喷雾离子源(ESI)正离子模式下扫描,多重反应监测(MRM)下测定,分析时间7 min。结果 各类雌激素定量下限低至1～2 pg/mL,平均加标回收率在90.3%～111.3%之间。绝经后妇女血清各类雌激素总量远高于临床常规雌激素指标E2的水平,并以E1-G/S和16α-羟基雌酮结合型(16OHE1-G/S)水平相对较高。各类雌激素-G/S结合型水...     

液相色谱-质谱法测定人血浆氢氯噻嗪浓度的研究

目的建立液相色谱-质谱(LC-MS)测定人血浆中氢氯噻嗪浓度的方法。方法以对乙酰氨基酚为内标,血浆样品经乙酸乙酯提取后进样测定。分析柱为XTerraMS C18柱(5μm,2.1 mm×150 mm);保护柱为Diamonsil C18(2)Gart-ridges(3μm,2.1 mm×10 mm),柱温30℃;流动相为水:乙腈-60:40,流速为0.2 ml/min。用于定量的检测离子为氢氯噻嗪296,内标150。结果血浆氢氯噻嗪浓度在0.5～150μg/L范围内线性关系良好,方法回收率为95.6%～109.1%,日内、日间RSD均小于15%。结论所建立的LC-MS方法灵敏、准确、快速,可用于人血浆中氢氯噻嗪浓度的测定。     

液相色谱-串联质谱法检测人血浆中碘帕醇

目的建立一种稳定的检测人血浆碘帕醇的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),并对该方法进行性能评价。方法以氘代同位素作为内标,人血浆样品经直接沉淀法前处理后进样,用XSelect^TM HSS PFP色谱柱进行分离,用含0.1%甲酸-5mmol/L九氟戊酸-10%乙腈的水溶液等度洗脱;正离子电喷雾离子化扫描检测,多反应监测(MRM)扫描分析,建立检测血浆碘帕醇的LC-MS/MS方法。根据CLSI EP10-A和CLSI C62-A,评价该方法的线性范围、正确度、精密度、选择性、基质效应、稳定性。结果 LC-MS/MS检测血浆碘帕醇的线性范围为1～1 000μgI/mL(以含碘量计算);低、中、高浓度(3、50、800μgI/mL)血浆质控品检测结果与理论靶值的偏移为-6.1%～7.5%,重复性以不精密度表示,CV<6.6%(4.6%～6.6%),期间精密度CV<8.5%(6.6%～8.5%),方法回收率为92.5%～95.9%,基质效应为88.8%～95.2%;方法选择性良好,溶血和脂血因素均不影响检测结果。血浆样品在室温下放置最好不要超过48 h,在-80℃下反复冻融不超过2次,经前处理后的血浆样品4℃自动进样器中放置不超过72 h,碘帕醇可稳定检测。结论建立并评价了一种可靠的检测人血浆碘帕醇的LC-MS/MS方法。     

HPLC-MS/MS法在白血病患者血浆维生素C水平测定中的临床应用

目的建立测定白血病患者血浆维生素C水平的高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法,并应用于临床。方法采用HPLC-MS/MS法,L-Ascorbic Acid-1-13 C为内标,XBridge?C18(4.6 mm×50.0mm,5μm)色谱柱,流动相为(0.1%甲酸)甲醇-(2mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸)水,梯度洗脱,流速为0.8mL/min,柱温60℃,进样量10μL。采用电喷雾电离源,以多反应监测(MRM)方式进行负离子检测。并对123份白血病患者标本及407份健康志愿者标本进行了检测,测定结果用t检验进行比较分析。结果维生素C的水平在0.5～50.0μg/mL范围内线性关系良好(r0.990 0),日内及日间精密度(RSD)均小于5%,回收率在90%～110%;与健康人相比,患者体内维生素C水平明显偏低[(8.8±3.0)vs.(2.4±3.9)μg/mL,P0.01]。结论该方法快速、准确、灵敏度高、操作简单,适用于临床中患者血浆中维生素C水平的检测。建议白血病患者应适当补充维生素C。     

Ag/H柱脱氯-超高效液相色谱-质谱法测定出厂水消毒副产物

目的 建立Ag/H柱脱氯-超高效液相色谱—质谱法检测出厂水中消毒副产物。方法 样品经Ag/H固相萃取柱除去余氯,再经0.22μm的膜过滤后,在HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)上进行分离,采用甲醇-0.000 5%甲酸水溶液梯度洗脱方式,电喷雾负离子(ESI-)模式,多反应监测模式(MRM)进行质谱分析。为校正基质效应,采用基质匹配标准曲线法对一氯乙酸、二氯乙酸、一溴乙酸、一氯一溴乙酸、二溴乙酸、三氯乙酸、一溴二氯乙酸、二溴一氯乙酸和三溴乙酸9种卤乙酸进行定量分析。结果 9种卤乙酸在0.5～100μg/L内均具有良好的线性关系(r≥0.9995),检测限(S/N=3)为0.012～0.50μg/L,定量限(S/N=10)为0.036～1.50μg/L。以自来水为基底根据卤乙酸含量的不同分别进行5.0、20、80μg/L浓度的加标试验(n=6),平均回收率在75.3%～106.3%,相对标准偏差范围在0.58%～12.8%。结论 该分析方法可用于出厂水中微量卤乙酸的检测。     

高效液相色谱法同时测定人血浆中氟西汀和喹硫平浓度

目的建立同时测定人血浆中氟西汀和喹硫平浓度的高效液相色谱(HPLC)方法。方法采用HPLC同时测定血浆氟西汀和喹硫平浓度。色谱柱为Inertsil ODS-C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为0.05 mol/L醋酸铵-甲醇(体积比22∶78),流速为0.8 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为40℃,萃取剂为乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比77∶23),内标物为卡马西平。结果卡马西平和喹硫平、氟西汀色谱峰完全分离,峰形良好,保留时间分别为4.91、6.53和7.48 min,血浆中杂质对测定不产生干扰。氟西汀在10～480μg/L、喹硫平在20～1 600μg/L范围内线性关系良好(r值分别为0.990 5、0.992 9);当信噪比(S/N)=3时,检测限分别为5、8μg/L。氟西汀和喹硫平低、中、高3种浓度绝对回收率均>75%,相对回收率>95%,日内、日间相对标准偏差(RSD)均<10%。结论该方法灵敏、准确、成本低廉,可用于临床氟西汀与喹硫平的血药浓度监测和药物动力学研究。     

固相萃取-反相高效液相色谱法同时测定血清中3种抗癫痫药物

目的　应用固相萃取-反相高效液相色谱法测定血清中抗癫痫药物。方法　用 ElutBond C18小柱预处理样品,甲醇为洗脱剂;采用 Waters Nova RC18 柱,流动相为甲醇∶水=45∶55;检测波长230nm,流速1ml/min,内标(苯乙酮)法定量。结果　苯巴比妥、苯妥英、卡马西平的浓度线性范围分别为4.1~62.6μg/ml(r=0.9968)、3.9~60.1μg/ml(r=0.9971)和 1.6~21.2μg/ml(r=0.9945),最低检测限分别为 0. 05μg/ml、0. 05μg/ml 和 0. 01μg/ml;相对回收率分别为 90. 6% ~103.6%、93.4%~118.3%和91.2%~101.1%;批内变异系数均小于 6.0%,批间变异系数均小于8.0%。结论　固相萃取-反相高效液相色谱法简便、灵敏、准确、稳定,适合于以上 3 种抗癫痫治疗药物的同时监测。     

LC-MS/MS方法检测血中甲基丙二酸含量及应用分析

目的 建立一种LC-MS/MS方法 测定血清MMA,用于MMA血症的诊断以及治疗效果的监测.方法 收集2009年4-12月205份健康体检者和146份患者血清,用液-液萃取方法 萃取样本,用自制饱和盐酸-正丁醇进行衍生,采用氮气吹干,色谱柱为Discovery C18(50 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为甲醇和水(含0.1%甲酸,V/V),梯度洗脱,液相分离后进入串联质谱进行分析测定,选择性反应监测模式,以标准品制作标准曲线,同位素内标法定量,以血清样本测定2、25、80μg/L3个浓度的加样回收率,以质控样本测定准确度、精密度和稳定性.检测205份健康人血清,用于临床验证.数字表法随机抽取13份血清,测定结果 与德国MDI实验室进行比对,用配对t检验分析测定数据.结果 方法 线性范围2～100μg/L,标准曲线相关系数R2＞0.995.MMA衍生物保留时间为10.5 min,在此实验条件下丁二酸与MMA不互相干扰,批内RSD≤6.4%,批间RSD≤5.0%,回收率为96.42%～103.33%,检出限为1 μg/L,分析准确度94.2%～108.2%.样本常温放置至少6 h稳定、-20℃下至少可以存放70 d稳定、冻融10次稳定,衍生物在4 ℃下至少存放5 d稳定.溶血样本组与未溶血样本组测定值中位数(四分位数)分别为102.53(13.84～302.33)μg/L和39.52(11.94～203.08)μg/L,差异有统计学意义(T=8,P＜0.05).本实验室与德国MDI实验室测定结果 中位数(四分位数)分别为32.82(24.50～100.42)μg/L和32.20(26.65～93.30)μg/L,差异无统计学意义(T=7,P＞0.05).健康成年人(18～58岁)158名,血清MMA测定值(18.46±10.49)μg/L,健康未成年人(1～17岁)47名,血清MMA测定值(22.38±11.45)μg/L.结论 成功建立了LC-MS/MS方法 准确测定血清MMA浓度,样本前处理简单,方法 灵敏度高,特异性强,可重复性好,可以用于MMA血症的筛查、诊断和治疗效果的监测.     

液相色谱串联质谱法检测肝癌细胞N6- 甲基腺嘌呤核苷甲基化水平

目的 建立同时测定N⁶-甲基腺嘌呤核苷(m⁶A)和腺嘌呤核苷(A)的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。方法 HepG₂和L₀₂细胞mRNA经分离、消化为核苷,再经含对乙酰氨基酚为内标的甲醇沉淀处理。色谱柱为Agilent Proshell 120 EC-C₁₈柱,流动相为0.1 g/dl甲酸水-甲醇(82:18),流速0.4 ml/min,柱温为30 ℃。质谱检测模式为多反应监测(DMRM)模式,测定m⁶A和A的浓度,计算细胞m⁶A甲基化水平。 结果 建立的LC-MS/MS法检测m⁶A和A的浓度分别在0.15～50.00 ng/ml和1.50～500.00 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r > 0.999),日内、日间精密度均小于15.00 %,准确度为93.67 %～101.10 %,回收率为91.46 %～97.60 %,基质效应为90.26 %～99.27 %,样品稳定性良好。HepG₂和L₀₂细胞m⁶A甲基化水平分别为(0.73 ± 0.11)%和(1.26 ± 0.22)%。结论 该方法准确、快速、稳定和灵敏,可用于检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。     

液相色谱-串联质谱法监测血清茶碱浓度及室间质量评价

目的对液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测茶碱进行方法学评价,探讨其在茶碱治疗药物监测(TDM)中的应用。方法在血清添加放射性核素内标茶碱-D6,经蛋白沉淀稀释后采用LC-MS/MS测定。以Capcell C18 MGⅢ(100 mm×2.0 mm,5μm)为分析柱进行反相色谱分离;以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水[20∶80(v/v)]为流动相,流速为0.3 m L/min;以电喷雾离子化串联四级杆质谱、正离子多反应监测进行定量检测。用建立的方法从2008年起连续参加卫生部临检中心茶碱TDM室间质量评价。结果 LC-MS/MS检测茶碱的线性范围为1~50μg/m L,批内和批间精密度分别为2.26%~6.65%和4.70%~6.84%,准确度分别为94.14%~104.00%。单个样品的监测分析时间为3.5 min。冻融(-30℃室温反复解冻3次)、室温放置24 h、自动进样器放置24 h、长期保存(-30℃放置28 d)的稳定性均良好。LC-MS/MS测定结果与室间质量评价靶值偏差为2.75%,斜率为1.04,相关系数(r2)为0.983。结论该LC-MS/MS采用放射性内标稀释,具有简单、快速、特异性和灵敏度较好的特点,连续6年测定结果符合全国室间质量评价要求,可用于茶碱的临床TDM。     

液相色谱-串联质谱法测定人血浆中二甲双胍的浓度

目的采用液相色谱-串联质谱法测定人血浆中二甲双胍的浓度。方法血浆样品用乙腈(含0.1%甲酸)沉淀蛋白后用二氯甲烷反洗后进行分析。使用Agilent C8(75 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱。流动相:A泵:5 mmol/L醋酸铵(三乙胺调pH值至7.5),B泵:乙腈。线性梯度洗脱,流速0.4 mL/min。采用电喷雾离子源,多反应离子监测。用于定量分析的离子对二甲双胍为130.2/71.1,内标吗啉胍为172.2/60.2。结果线性范围为50～2 000 ng/mL,最低定量限为50 ng/mL,预处理回收率为81.7%～98.0%,二甲双胍的基质效应<9.97%,日内和日间相对标准偏差均<5.2%。结论液相色谱-串联质谱法快速、简便、灵敏度高,是一种适用于人血浆中药物浓度的测定及药物动力学和生物利用度研究的方法。     

液质联用色谱测定聚丙烯酰胺水凝胶中丙烯酰胺含量

目的探讨聚丙烯酰胺水凝胶中丙烯酰胺含量的可靠测定方法。方法采用液质联用色谱(HPLC-MS/MS)和同位素稀释定量技术,以选择反应监测(SRM)方式测定医用聚丙烯酰胺样本及20例聚丙烯酰胺临床样本中的丙烯酰胺含量。以丙烯酰胺标准品为对照,样本经水溶液振荡提取,硅藻土柱净化。色谱条件:MG120 C18色谱柱(5μm粒径,150 mm×4.6 mm),柱温均26℃;流动相为甲醇∶0.1%甲酸=1∶9,流速为0.6 mL/min;进样量为10μL。结果丙烯酰胺分离良好。峰面积与浓度呈良好的线性关系,线性范围可达3 000μg/L。加标水平在50μg/L时,回收率为103.1%,相对标准差(RSD)为6.20%。医用聚丙烯酰胺样本中丙烯酰胺含量为3.9×10-9~3.1×10-8g/L。20例聚丙烯酰胺临床样本中丙烯酰胺含量为(14.39±6.40)×10-9g/L。结论该方法样本处理简单,准确度高,灵敏度高,适合聚丙烯酰胺水凝胶中丙烯酰胺含量的测定。     

成人不同浓度七氟醚诱导无肌松气管插管时瑞芬太尼的半数有效量

目的确定在不同浓度七氟醚复合瑞芬太尼诱导无肌松气管插管时瑞芬太尼的半数有效量（ED50）。方法 2009年7月-2009年11月择期手术患者60例,ASAI～II,年龄20～59岁,按照入室的顺序随机分为Ⅰ组（2%七氟醚组）和Ⅱ组（3%七氟醚组）,预冲8%七氟醚诱导,眼睑反射消失后,调节七氟醚呼气末浓度分别维持在2%或3%,同时按照序贯法注入瑞芬太尼,瑞芬太尼注射90s后气管插管。记录麻醉诱导前、患者意识消失时、插管前1min、插管后1min及插管后3min心率、平均动脉压的变化。结果 2%、3%的七氟醚复合瑞芬太尼诱导气管插管时瑞芬太尼的半数有效量（ED50）及其相对应的95%可信区间分别为0.585μg/kg及0.533～0.626μg/kg和0.492μg/kg及0.451～0.572μg/kg。结论 2%、3%的七氟醚复合瑞芬太尼诱导气管插管时瑞芬太尼的半数有效量及其相对应的95%可信区间分别为0.585μg/kg及0.533～0.626μg/kg和0.492μg/kg及0.451～0.572μg/kg。     

HPLC-MS/MS法检测血浆伏立康唑、泊沙康唑和伊曲康唑浓度的方法建立及在白血病患者用药监测中的应用

目的建立同时测定白血病患者血浆伏立康唑、泊沙康唑和伊曲康唑浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),并应用于此三种药物的常规治疗药物监测,为其在临床合理使用提供血药浓度依据。方法色谱柱为Ultimate XB-C18,柱温60℃,流动相:甲醇(0.1 ml/dl甲酸)和水(0.1 ml/dl甲酸和2 mmol/L乙酸铵),流速:0.8 ml/min,梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,MRM扫描,监测伏立康唑m/z 350.1281.2和伏立康唑-d3 m/z 353.1284.2;泊沙康唑m/z 701.4683.4和泊沙康唑-d4 m/z 705.4687.4;伊曲康唑m/z 705.3392.2和伊曲康唑-d9 m/z 714.5401.4。用含伏立康唑、泊沙康唑与伊曲康唑相应同位素内标甲醇液对白血病患者血浆样本进行蛋白沉淀处理,进行质谱检测,内标法定量,对各自检测结果作四分位分析。结果在0.1～10.0μg/ml范围内,伏立康唑峰面积/伏立康唑-d3峰面积与伏立康唑浓度线性关系良好,Y=1.58X+0.011 6(R=0.998 7);泊沙康唑峰面积/泊沙康唑-d4峰面积与泊沙康唑浓度线性关系良好,Y=1.38X+0.021 7(r=0.998 2);伊曲康唑峰面积/伊曲康唑-d9峰面积与伊曲康唑浓度线性关系良好,Y=1.42X+0.032 5(r=0.999 1)。此三种药物日内及日间相对标准偏差(RSD)均小于5%,平均回收率为95%～105%。1 000份白血病患者伏立康唑浓度四分位结果为Q1～Q3:0.3～1.7μg/ml;1 000份白血病患者泊沙康唑浓度四分位结果为Q1～Q3:0.4～1.4μg/ml。结论建立了同时测定白血病患者伏立康唑、泊沙康唑和伊曲康唑浓度的HPLC-MS/MS法,该方法前处理简单,检测耗时短,检测结果准确度和稳定性好,可适用于临床检测。     

液相色谱串联质谱法检测血浆12种神经酰胺方法建立与性能评价

目的建立一种稳定、灵敏的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测人血浆12种神经酰胺方法。方法收集2021年10月至2022年10月在遵义医科大学及其各附属医院健康体检的438名表观健康人群, 建立12种神经酰胺生物参考区间。采用氘代同位素作为内标, 使用ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm, 1.7 μm)色谱柱进行分离, 流动相为水(含0.1%甲酸)和异丙醇:乙腈(1∶1, v/v, 含0.1%甲酸), 流速0.4 ml/min, 梯度洗脱。使用Qlife Lab 9000 Plus三重四极杆质谱建立LC-MS/MS检测12种神经酰胺的方法。并从线性、定量下限、精密度、回收率和稳定性几个方面对该方法进行性能评价。结果该方法通过了线性、定量下限、回收率、精密度、稳定性的性能评价。12种神经酰胺批内和批间精密度为1.3%～14.3%, 正确度通过加标回收实验验证, 回收率在91.9%～111.0%, 最低定量下限范围为0.001～0.100 μmol/L, 标准曲线显示出良好的线性关系(r>0.990), 稳定性实验显示12种神经酰胺在生物基质中及不...     

固相萃取-超高效液相色谱串联三重四级杆质谱法同时测定禽蛋中双酚A、双酚F和双酚S

目的 建立液相色谱串联三重四级杆质谱法检测禽蛋中双酚A、双酚F和双酚S方法。方法 样品采用乙腈提取,使用Oasis HLB固相萃取小柱净化,通过C18色谱柱分离,甲醇-水为流动相,采用电喷雾负离子模式和多反应监测模式检测,内标法定量。结果 双酚A和双酚F在1.0～50μg/kg浓度范围呈线性关系（r≥0.999）,检出限为0.3μg/kg,定量限为1.0μg/kg;双酚S在0.1～20μg/kg浓度范围呈线性关系（r≥0.999）,检出限为0.05μg/kg,定量限为0.15μg/kg。利用该方法测定禽蛋中双酚A、双酚F和双酚S,加标回收率为86.7%～106.3%,相对标准偏差（RSD）为3.1%～7.2%。结论 该方法快速便捷、准确稳定,可以满足禽蛋中双酚A、双酚S和双酚F的检测需求。     

高效液相色谱-串联质谱法检测人血浆中5-羟色胺

目的建立高效、准确的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定人血浆中5-羟色胺(5-HT)的方法,并应用于临床及科研的生物样本检测。方法该方法采用奥卡西平作为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白,用初始流动相稀释后经Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8色谱柱进行分离,流动相为0.2%甲酸水-乙腈,梯度洗脱。采用电喷雾离子源(ESI),正离子、多反应监测模式(MRM)进行监测,用于定量分析的离子为质荷比(m/z)177→160。结果 5-HT在10～800ng/mL范围内线性良好(r0.999),定量下限为10.0ng/mL。待测物日内、日间相对标准偏差均小于15%。符合生物样品分析要求。结论本方法适合临床及科研的生物样本中5-HT的快速检测。     

液相色谱串联质谱检测血清万古霉素方法的建立及临床验证

目的建立一种基于同位素内标法定量的血清万古霉素液相色谱串联质谱检测方法(LC-MS/MS), 并进行临床应用评估。方法方法学评价类研究。收集2021年3月至2022年6月就诊于浙江大学医学院附属邵逸夫医院且接受万古霉素静脉给药治疗的221例患者的临床血清样本, 其中男142例, 女79例, 年龄(59.31±15.32)岁, 检测其谷浓度。收集体检中心30名体检结果均正常的表观健康人剩余血清样本作为空白基质用于方法学评价, 其中男 15 名, 女 15 名, 年龄(35.65±9.86)岁。使用AB Sciex Triple Quad 4500 MD 液相色谱串联质谱系统, 采用Phenyl-Hexyl色谱柱进行分离, 柱温40 ℃, 以含0.1%甲酸的水溶液和含0.1%甲酸的甲醇溶液梯度洗脱, 以万古霉素-[d12]三氟乙酸盐作为内标(IS), 建立定量方法, 并对方法的敏感度、特异度、线性、回收率、精密度、基质效应、残留进行性能验证。结果万古霉素的检出限是0.2 mg/L, 最低定量限是0.5 mg/L, 在浓度1～50 mg/L范围内线性关系良好(R2=0.998 4), 准确度...