单克隆抗体HIP2对人CFU—GM及CFU—AML体外作用的研究

刺激型抗人血小板单克隆抗体－ＨＩＰ２在体外有刺激人造血祖细胞集落形成的作用，本研究结果显示：ＨＩＰ２对正常人和急性髓系白血病初诊及缓解患的粒单系造血祖细胞集落产率有明显刺激作用，而对ＡＭＬ祖细胞集落产率无明显刺激作用，为临床ＡＭＬ患在化疗抑制期及骨髓移植造血抑制期用该抗体加速造血恢复提供了实验依据。     

国际各类品种血小板膜糖蛋白单克隆抗体试剂对血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测技术的影响

本研究按国际输血学会第14届国际血小板免疫学研讨会和合作研究项目的要求,分析比较国际常用血小板膜糖蛋白单免隆抗体（McAb）各类品种对血小板抗原McAb特异性免疫固定检测技术（MAIPA）检测血小板抗体结果的影响。向参加该研究的30个实验室发放10份含已知血小板抗体特异性的血清和1份阴性对照血清样本,以及9份不同类别（GPⅡb／Ⅲa、GPⅠa／,Ⅱa、GPⅠb／Ⅸ及GPⅣ）及克隆编号的血小板膜糖蛋白McAb和统一的实验研究技术方案,各参加实验室按方案进行检测并反馈结果数据,比较同一糖蛋白种类不同的McAb对MAIPA检测结果的影响。结果表明：GPⅡb／Ⅲa中AP2,Gi-5,PL2—73等几种McAb的平均S／CO值较高;GPⅠa／Ⅱa的McAb中MBC202．2和143．1的平均S／CO值较高;GPⅠb／Ⅸ的McAb中142．11和CLB—MB45（C042b）的平均S／CO值较高;GPⅣ的McAb中131．4的平均S／CO值较高。结论不同的McAb品种对样本的检测结果存在差异,McAb对MAIPA的灵敏度有重要影响。用MAIPA法检测血小板抗体时应同时使用相同糖蛋白种类而不同克隆号的McAb,以防止血小板抗体的漏检。     

PNAS-2蛋白单克隆抗体的制备和初步鉴定

本研究制备凋亡相关蛋白PNAS-2的单克隆抗体,并对其进行初步鉴定,为PNAS-2蛋白功能研究提供必需工具。以PNAS-2的合成肽为免疫原,通过动物免疫、细胞融合、克隆化制备抗PNAS-2蛋白的单克隆抗体,并用Western blot、免疫荧光、ELISA实验对单克隆抗体的特异性、效价、亚型进行了检测。结果表明：获得了稳定的分泌型杂交瘤细胞株S-31-7,属IgG1λ亚型,腹水效价为1：8000;Western blot测得分子量为28kD的单条特异性条带;免疫荧光实验显示胞浆中有阳性反应。结论：制备的单克隆抗体特异性好、效价高,能够作为深入研究PNAS-2蛋白功能的有利工具。     

针对血小板Ⅱb／Ⅲa受体的单克隆抗体在治疗冠心病…

本文简述了针对血小板糖蛋白Ⅱｂ／Ⅲａ受体的单克隆抗体治疗冠心病的原理及Ｉ期临床试验中的研究进展。     

单克隆抗体逆转多药耐药性研究进展

体外及动物实验发现抗P-糖蛋白单抗MRK_(16)、MRK_(17)等能与P-糖蛋白表达细胞膜表面的抗原决定簇结合,使P-糖蛋白构象改变,阻止药物外流,增加细胞内药物浓度。同时可通过免疫反应产生CDC和ADCC,杀伤耐药细胞。尤其是鼠人嵌合型抗P-糖蛋白单抗具有特异性好、细胞毒作用强和免疫原性低等特点。而且抗P-糖蛋白单抗与环孢菌素、IFN、脂质体包被药物等联合应用具有协同作用,为逆转MDR开辟了一条新的途径。     

单克隆抗体逆转多药耐药性研究进展

体我及动脉实验发现抗Ｐ－糖蛋白单抗ＭＲＫ１６，ＭＲＫ１７等能与Ｐ－糖蛋白表达细胞膜表面的抗原决定族结合，使Ｐ－糖蛋白构象改变，阻止药物外流，增加细胞的内药物浓度。     

血红蛋白A2单克隆抗体的制备与鉴定

本研究目的是制备鼠抗人血红蛋白A2（HBA2）单克隆抗体（McAb）并进行初步鉴定。将正常人胎肝组织匀浆离心并分离出人胎肝核总蛋白,用人胎肝核总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并通过间接ELISA法、Western blot及免疫组织化学的方法对单克隆抗体进行特异性鉴定,通过免疫沉淀和Uni-ZAPXR表达文库筛选鉴定抗原。结果表明：通过间接ELISA筛选获得分泌AEE091抗体的杂交瘤细胞1株,其分泌的单克隆抗体Ig亚类（型）为IgG1（κ）;Western blot结果显示,该抗体识别分子量为15kD的蛋白;Western blot识别AEE091免疫沉淀获得的分子量为15kD的抗原;同时应用单克隆抗体AEE091对人肝脏cDNA表达文库（Uni-ZAPXR）进行筛选,筛选所获得的阳性噬菌斑测序结果显示两个阳性克隆插入序列均为HBA2。结论：经筛选获得了分泌AEE091抗体的杂交瘤细胞株。AEE091抗体能特异识别HBA2抗原,因而其在HBA2的功能研究和珠蛋白生成障碍性贫血筛查等方面具有应用价值。     

抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa单克隆抗体对原发性血小板减少性紫癜诊断价值的研究

目的 旨在探讨血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa单克隆抗体（Ⅱb/Ⅲa McAb）检测对原发性血小板减少性紫癜（ITP）的诊断价值。方法 共检测成人慢性ITP114例，应用Ⅱb/Ⅲa McAb(SZ-21 SZ-22)与ITP患者的血小板共同孵育，用吸光度计检测其吸光度值并与正常值相比较（做为结合值），如此值＜0．5为阳性，即判定患者血小板膜上原已结合有抗Ⅱb/Ⅲa的自身抗体。同时用竞争性酶联免疫吸附法检测患者的血小板相关IgG(PA IgG)。以非ITP性血小板减少患者做为对照组。结果 114例成人慢性ITP中，GPⅡb/Ⅲa检测阳性率为49％；非ITP组无1例假阳性。ITP组PAIgG阳性率为64％；非ITP组假阳性率为26．6％。结论 实验证实本检测法特异性好，操作简单技术稳定，对ITP的诊断、疗效观察及发病机理研究具有实用价值。     

2型糖尿病与血栓标志物关系的探讨

目的：探讨２型糖尿患者的血管性假血友病因子（ＶＷＦ）、血小板α颗粒膜蛋白－１４０（ＧＭＰ－１４０）、可溶性纤维蛋白单体复合物９ＳＦＭＣ）等３项血栓分子标志物的临床意义。方法：采用ＥＬＩＳＡ法测定６０例２型糖尿病患者血清ＶＷＦ,ＧＭＰ－１４０和ＳＦＭＣ含量,并与３０例健康人比较。结果：２型糖尿病组ＶＷＦ,ＧＭＰ－１４０,ＳＦＭＣ均较健康人组高（Ｐ〈０．０１）,其中有合并症比无合并恙组亦明显增高（Ｐ〈     

重组人脂蛋白相关磷脂酶A2的原核表达及单克隆抗体制备

目的构建重组人脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的原核表达质粒,制备重组人Lp-PLA2,并通过免疫诱导获得人Lp-PLA2的单克隆抗体。方法以人cDNA文库为模板,通过PCR的方法获得PLA2G7基因的编码区序列,并与原核表达载体pET32a进行连接,构建原核表达质粒,转化大肠杆菌Rostta(DE3)。通过在30℃0.2mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)条件下诱导蛋白表达,经过纯化获得重组人Lp-PLA2;免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体;并通过酶联免疫吸附试验法测定效价,检测抗体特异性。结果通过NotⅠ和SalⅠ双酶切及测序证实原核表达质粒构建成功;经纯化得到47×103左右的蛋白,与Lp-PLA2抗体进行蛋白免疫印迹法杂交呈阳性,表明已得到重组人Lp-PLA2。通过对小鼠免疫,最终获得单克隆抗体,效价为1∶2×106,与纤维蛋白原、C-反应蛋白无交叉反应。结论成功获得重组人Lp-PLA2,并制备得到了效价较高的单克隆抗体,为后续Lp-PLA2检测试剂盒的开发奠定了基础。     

抗IL—2R单克隆抗体在肾脏移植中的应用及护理

白介素－２受体单克隆体抗可以对被同种异体移植物激活的Ｔ细胞克隆选择性地产生免疫抑制作用,从而达到预防急性排斥反应的目的,人源化ＩＬ－２Ｒ单克隆抗体了Ｚｅｎａｐａｘ（ｄａ－ｃｌｉｚｕｍａｂ）和Ｓｉｍｕｌｅｃｔ（ｂａｓｉｌｉｘｉｍａｂ）可将肾移植急性排斥反应的发生率降低２７％－４０％,综述了Ｚｅｎａｐａｘ和Ｓｉｍｕｌｅｃｔ的作用机理、临床应用、毒副作用和护理。     

GL50单克隆抗体对多发性骨髓瘤细胞体外生长的抑制和促凋亡作用

目的分析ICOS／GL50分子在多发性骨髓瘤（Multiple myeloma,MM）细胞XG-2上的表达,探讨GL50单克隆抗体（mAb）11C4对XG-2体外生长的生物学效应。方法采用免疫荧光标记和流式细胞术检测XG2细胞表面ICOS／GL50等共刺激分子的表达,台盼蓝染色计数检测不同浓度11C4mAb对XG-2细胞体外生长的作用。RT-PCR法检测XG-2细胞中Bcl-XL和Bax mRNA的表达。结果ICOS／GL50分子共表达于XG-2细胞表面,11C 4mAb可显著抑制XG-2细胞的体外生长,并诱导其凋亡。结论11C4 mAb对MM细胞XG-2的体外生长具有显著的抑制及促凋亡作用,为MM的临床生物治疗提供新的靶点。     

蛇毒与血小板膜糖蛋白作用的研究

本文从分子生物学水平概述近来蛇毒与血小板作用研究的最新进展，阐述了蛇毒通过直接或间接作用于血小板膜糖蛋白Ｉｂ或Ⅱｂ／Ⅲａ复合物，激活或抑制血小板功能而发挥其作用的机理，为蛇毒的临床运用提供理论指导。     

人骨髓间充质干细胞的鉴定:抗SH2和SH3单克隆抗体的制备与应用

间充质干细胞（MSC）是能够自我更新和分化成一种或多种间叶组织的骨髓或其它组织中的一种干细胞，至今还没有类似于CD34识别造血干细胞一样的公认的抗原用于确认间充质干细胞。为了分离和鉴定MSC，本研究选取抗SH2和SH3这两种应用较广泛的抗体。从SH2和SH3杂交瘤细胞接种小鼠获得的腹水中提纯SH2和SH3两种抗体，并用流式细胞术和免疫组织化学的方法鉴定贴壁培养的骨髓间充质干细胞；用免疫磁珠分选方法从骨髓单个核细胞中分选SH2和SH3阳性的细胞；用流式细胞仪双标的方法检测SH2和CD105抗体在间充质干细胞上的阳性率。结果表明：SH2和SH3在间充质干细胞上的阳性率均在80％，分选阳性细胞中80％的细胞为间充质干细胞，阴性细胞中间充质干细胞的比例不足1％。标记了SH2后的间充质干细胞CD105的阳性率不足1％。结论：SH2和SH3是骨髓间充质干细胞的特异性的标记物，可用于间充质干细胞的分离和鉴定。抗CD105抗体和抗SH2抗体在分离和鉴定MSCs上具有同等效力．     

NG2细胞在脊髓损伤中的作用

脊髓损伤(SCI)后轴突几乎没有再生能力,如何克服SCI后抑制轴突再生的环境、促进轴突再生已成为SCI修复的研究热点。NG2细胞在调控少突胶质细胞应答神经纤维损伤并形成胶质瘢痕过程中起重要作用。     

抗人红细胞血型糖蛋白A非多态性表位单克隆抗体的制备和鉴定

目的制备抗人红细胞血型糖蛋白A(Glycophorin A,GPA)非多态性表位单克隆抗体并鉴定其特性。方法用小鼠B淋巴细胞杂交瘤技术获得分泌单抗-GPA非多态性表位的杂交瘤细胞株;鉴定抗体特异性和亚型;通过和各种酶处理细胞的反应确定单抗结合抗原位点的特性。结果得到的2株抗-GPA非多态性表位的单克隆细胞株Q6D7和Q7C9,均属IgG1亚类、Kappa型轻链,所针对的抗原位点均抗胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶处理,对无花果酶、木瓜酶、唾液酸酶敏感。结论制备获得2株抗-GPA非多态性表位单克隆抗体。