骨髓间充质干细胞对急性肺损伤大鼠氧化应激的影响

目的观察骨髓间充质干细胞对内毒素性急性肺损伤的保护作用及机制。方法健康4月龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠8只,用于骨髓间充质干细胞分离培养;SPF级雄性SD大鼠90只,随机分成:正常对照组(A组);内毒素组(B组)、骨髓间充质干细胞高剂量组(C组)、骨髓间充质干细胞低剂量组(D组)、骨髓间充质干细胞对照组(E组)。于造模后6、24、72小时,处死动物,每个时间点6只。分别取肺组织,测定肺湿质量/干质量。检测肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)及髓过氧化物酶(MPO)含量。观察肺组织病理学改变。结果 LPS的24小时组死亡1只,两个骨髓间充质干细胞治疗组与模型组相比,肺组织SOD的活力明显增高,MDA和MPO含量显著降低(P<0.05);病理明显的改善,肺湿质量/干质量降低。正常对照组和骨髓间充质干细胞组相比,上述指标差异无统计学意义。结论骨髓间充质干细胞对内毒素性急性肺损伤有一定保护作用,其机制与抗氧化能力有关。不同种属骨髓间充质干细胞移植后,未见明显损伤。     

内毒素致大鼠急性肺损伤模型的建立

目的建立经尾静脉注射脂多糖致大鼠急性肺损伤动物模型。方法大鼠尾静脉注射5 mg/kg脂多糖,造成急性肺损伤,于注射脂多糖2 h后,分别测定动脉血气分析、血清蛋白含量、肺泡灌洗液中蛋白、细胞间粘附分子-1的含量、肿瘤坏死因子-α、白介素-8,计算肺湿/干重比、肺通透指数,观察肺组织病理学改变。实验设置生理盐水对照组。结果肺组织病理切片提示脂多糖组肺间质大量炎性细胞浸润,出血、水肿,而生理盐水组肺组织损伤轻微。对照组肺湿/干重比、肺泡通透指数、肺泡灌洗液中中性粒细胞比均显著低于脂多糖组(P<0.05),而动脉血氧分压则高于脂多糖组(P<0.05)。脂多糖组肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α、细胞间粘附分子-1、白介素-8浓度高于对照组(P<0.05)。结论此模型基本符合急性肺损伤诊断标准及动物模型的考察指标符合临床,说明本模型是成功可靠的。     

依布硒啉对心肌缺血再灌注损伤大鼠心功能的保护作用及其机制

目的探讨依布硒啉(Ebs)对心肌缺血再灌注损伤大鼠心功能的保护作用及其机制。方法取24只雄性大鼠,结扎其冠状动脉左前降支30 min、灌注90 min制作心肌缺血再灌注损伤模型,观察Ebs对大鼠心功能、心肌酶学和脂质过氧化的影响。结果Ebs能够对抗心肌缺血再灌注引起的左心室内压(LVSP)、左心室内压最大上升与下降速率(±dp/dtmax)、动脉血压下降,并能够稳定心肌组织Na -K -ATPase和Ca2 -Mg2 -AT-Pase活性,降低丙二醛(MDA)含量和增高SOD活性。结论提示依布硒啉(Ebs)对大鼠心肌缺血再灌注引起的心功能减弱具有明显的保护作用,其机制可能为改善能量代谢障碍,抑制自由基生成或清除氧自由基。     

急性肺损伤的氧化作用与抗氧化研究进展

急性肺损伤(ALI)是临床常见的呼吸系统急症,发病率高,确切发病机制不甚明确,临床治疗效果欠佳。本文对近几年ALI的氧化作用研究和抗氧化对ALI的治疗作用和相关研究进展,以及抗氧化作用对ALI的治疗前景作一综述。     

依达拉奉对急性肺损伤大鼠肺组织凋亡的影响

目的探讨依达拉奉治疗急性肺损伤(ALI)大鼠的作用及其机制。方法将48只清洁级Wistar成年大鼠随机分为对照组、ALI组和依达拉奉(EDA)组,之后给予EDA治疗。治疗后第7天留取肺脏组织,行苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织形态,Western印迹和免疫组织化学法检测肺组织Bcl-2和Bax表达。结果 HE染色显示ALI组肺组织表现肺结构部分破坏,肺泡部分肺泡壁塌陷且水肿严重,部分肺泡腔扩大,大量炎性细胞浸润,肺泡隔显著增厚,明显的局部出血;与ALI组相比,EDA组肺组织结构破坏较轻,水肿也明显减轻,仅有少量炎性细胞浸润。Western印迹结果显示,与ALI组相比,EDA组抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平明显增高,促凋亡蛋白Bax表达水平显著降低,酶切-caspase3蛋白表达明显下调(均P<0.01)。免疫组化结果表明,与ALI组相比,核浆中的Bcl-2表达水平明显增高,Bax表达水平明显降低(均P<0.01)。结论 EDA在ALI大鼠肺组织中上调Bcl-2和下调Bax蛋白水平来降低细胞凋亡,同时其可能通过减少Caspase3依赖途径的凋亡来保护肺组织。     

虎杖对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的治疗作用

目的 探讨虎杖(polygonum cuspidatum,PC)煎剂对脂多糖(LPS)诱导Wistar大鼠急性肺损伤(ALI)的治疗作用,并探讨其可能机制和临床意义.方法 给大鼠静注LPS复制Au动物模型.首先动态观察ALI的形成过程,给予LPS后2 h已形成明显的ALI(病理切片证实).随机将72只Wistar大鼠分成4组,每组18只.对照组(静注生理盐水1 ml/kg体重),LPS组(静注LPS,5 mg/kg体重),PC组(正常大鼠每天PC煎剂灌胃,5 ml·次-1·只-1,1次/d,共7 d);PC治疗组(给予LPS 2 h后开始灌胃,灌注Pc煎剂5 ml·次-1·只-1,1次/d,共7 d).每组大鼠分别于2、48 h和7 d三个时间点各处死6只,按时相观察和收集样本,进行测定和病理切片检查.测定肺系数、肺湿重/肺干重(W/D)、肺含水率,光镜观测肺组织病理变化,检测在实验性ALI大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、血栓素B2(TXB2)、髓过氧化物酶(MPO)等细胞因子、炎性介质的表达.各组大鼠动脉血气分析比较.结果 给予LPS后肺W/D和血清TNF-α、IL-6、TXB2含量及肺组织MPO活性显著高于对照组(P<0.05,P<0.01).而给予PC煎剂可显著缓解上述变化(P<0.01).LPS组氧分压(PaO2)较对照组显著降低,二氧化碳分压(PaCO2)显著升高(均P<0.01);PC治疗组PaO2显著高于LPS组(P<0.05),PaCO2显著低于LPS组(P<0.05).PC组与对照组差异不显著.结论 静注LPS(5 mg/kg)可成功复制ALI动物模型.ALI的发生和发展与血清TNF-α、IL-6、TXB2等炎性因子有密切关系.PC通过降低上述炎症因子释放减轻病理损伤在治疗ALI中有一定应用前景.     

大承气汤对脂多糖所致老年大鼠急性肺损伤的作用

目的 探讨大承气汤(DD)在脂多糖(LPS)所致老年大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用.方法 将140只SD老年大鼠随机分为对照组、LPS组(经气管内滴注LPS复制ALI模型)、DD+LPS组和DD组.各组大鼠于给药后4或8 h处死,测定肺系数;光镜观察肺组织形态学改变;化学法检测肺组织丙二醛(MDA)含量以及支气管肺泡灌洗液(BALF)的中性粒细胞(PMN)数目和蛋白含量的变化.各组再取7只动物,右心导管法监测并记录给药前及给药后2、4、6、8 h时的平均肺动脉压(mPAP).结果 气管内滴注LPS可引起mPAP明显升高(P＜0.01),肺组织明显的形态学改变;肺系数和肺组织MDA含量增加(P＜0.01);BALF中PMN数目和蛋白含量增加(P＜0.01).给予DD后,mPAP明显降低,肺组织损伤减轻,肺系数和肺组织MDA含量下降(P＜0.05),BALF中PMN数目和蛋白含量减少(P＜0.01). 结论 DD具有抗LPS所致老年大鼠ALI的作用.     

地塞米松对急性肺损伤大鼠信号转导细胞外信号调节激酶的影响

目的观察地塞米松对急性肺损伤(ALI)大鼠细胞信号转导中细胞外信号调节激酶(ERK)表达的影响,从而为临床治疗提供理论依据。方法健康雄性SD大鼠随机分为脂多糖(LPS)模型组(静脉注射5.0mg/kgLPS)、LPS+地塞米松低、中、高(0.2mg/kg、1.0mg/kg、5.0mg/kg)3个剂量组和对照组,每组5只,4h时测定动脉血气,肺湿/干(W/D)比值,Bradford法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)和血浆中蛋白浓度并计算肺通透指数(LPI=BALF蛋白含量/血浆蛋白含量),Westernblot法检测不同剂量地塞米松对p-ERK蛋白表达的影响;另取大鼠,在注射LPS后1h、4h、8h、12h和0h(对照组:注射生理盐水)5个时相点(每个时相点5只)分别用Westernblot法检测地塞米松对p-ERK蛋白表达的影响。结果 LPS模型组大鼠动脉血气各项指标、肺W/D比值、LPI及肺组织p-ERK表达显著高于对照组(P0.05或P0.01)。地塞米松中、高剂量组能显著降低LPS诱导的ALI大鼠动脉血气分析、肺W/D比值、LPI(P0.05或P0.01),同时还能显著抑制LPS诱导的ALI大鼠肺组织p-ERK蛋白表达(P0.05);地塞米松在注射LPS后4h时能显著抑制p-ERK的蛋白表达。结论地塞米松抑制LPS诱导的ALI大鼠肺组织通透性增加和ERK的表达,可能这种通过抑制ERK活化的作用,对ALI的预后有益。     

臭氧预处理对内毒素血症大鼠急性肺损伤的影响及其机制探讨

目的：观察臭氧预处理对脂多糖（ LPS）诱导的内毒素血症大鼠急性肺损伤（ ALI）的影响,并探讨其机制。方法将40只Wistar大鼠随机分成NS、LPS、OZ、OL组各10只。 OZ、OL组给予臭氧1 mg/kg（50μg/mL）,1次/d,连续10 d;LPS、OL组于第11天腹腔注射LPS 12．5 mg/kg;NS组仅腹腔注射等量生理盐水。给药8 h后处死所有大鼠,留取肺组织标本。测定肺组织湿/干重比值（ W/D）,电镜下观察肺组织病理变化,免疫组化SP法检测肺组织水通道蛋白1（AQP-1）表达。结果 NS、OZ、LPS、OL组肺组织W/D分别为3．87±0．14、3．92±0．21、5．78±0．15、4．32±0．25;LPS组高于NS组,OL组高于NS组但低于LPS组,P均＜0．01;NS组与OZ组比较,P＞0．05。电镜下,LPS组肺泡Ⅱ型上皮细胞出现明显病理改变, OL组病理损伤有所减轻。 NS、OZ、LPS、OL组肺组织AQP1蛋白表达量分别为0．215±0．032、0．207±0．041、0．165±0．013、0．194±0．011;LPS、OL组较NS组表达降低,OL组较LPS组表达增加,P均＜0．01。结论臭氧预处理可以减轻LPS血症大鼠ALI程度,增加肺组织AQP1表达可能是其作用机制之一。     

白介素17在脂多糖致大鼠急性肺损伤中的表达及地塞米松的影响

目的 观察白介素17(IL-17)在脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤(ALI)模型的表达,并观察小剂量地塞米松(1 mg/kg)对其影响.方法 将成年健康雄性SD大鼠48只随机分为正常对照组(C组),LPS致ALI组(ALI组),地塞米松组(D组).腹腔注射LPS 5 mg/kg制作大鼠ALI模型,后立即腹腔注射地塞米松1 mg/kg制作D组.于2h、6h两点各组处死8只大鼠,提取左支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar alveolar lavage fluid,BALF)和右肺组织.测定各组肺脏湿/干质量比值(W/D),以及各组肺组织病理形态学变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)测BALF中IL-17、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 ①ALI组大鼠肺组织W/D比值及TNF-α明显升高,各时点与C组相比差异有统计学意义(P＜0.05),病理切片出现肺水肿、肺组织炎性细胞浸润、肺出血等典型ALI表现,大鼠ALI模型造模成功;②与C组比较,2h点ALI组大鼠BALF中IL-17含量无明显差异,6h点IL-17含量显著升高,差异有统计学意义(P＜0.0S);③与ALI组相比,地塞米松组能显著降低IL-17的表达,两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IL-17参与了LPS致大鼠ALI过程,6h时显著表达,早期应用小剂量地塞米松能降低大鼠ALI模型BALF中IL-17的表达.     

红景天苷对脂多糖所致急性肺损伤治疗作用的研究

目的:观察红景天苷（SDS）对脂多糖（LPS）引起的大鼠急性肺损伤（ALI）的治疗作用,并初步探讨其作用的机制。方法: 将36只SD大鼠随机分为生理盐水（NS）对照组、LPS组和LPS+SDS组(每组n=12),通过向气管内滴注LPS建立大鼠ALP模型。采用微量注射泵向大鼠右颈外静脉注射液体并留置的给药方法,NS组和LPS组注射NS并留置4 h;LPS+SDS组先于气管内滴注LPS,0.5 h后再注射SDS并留置4 h。4.5 h后处死实验动物,取肺组织观察其形态学改变,测定肺湿/干质量的比值（W/D）、肺泡灌洗液（BALF）中蛋白的含量及肺组织匀浆中TNF-α、IL-6、IL-10、乳酸脱氢酶(LDH)和髓过氧化物酶(MPO)的含量。结果: 形态学观察表明,LPS组肺组织水肿,有点、片状出血及大量的炎性细胞浸润,肺泡间隔显著增厚,肺泡腔变窄、结构消失。LPS+SDS组的肺组织损伤明显减轻,肺组织结构趋于正常,肺泡腔及支气管腔炎细胞及渗出物与LPS组相比明显减少。LPS组肺W/D与NS组相比明显增加（P<0.05）,BALF中蛋白的含量显著增加（P<0.05）,肺组织匀浆中TNF-α、IL-6、IL-10、LDH和MPO的含量显著增加（P<0.05）;而给予SDS治疗后,肺W/D、BALF中蛋白含量、肺组织匀浆中TNF-α、IL-6、LDH和MPO的含量与LPS组相比均明显减少（P<0.05）,IL-10含量显著增加（P<0.05）。结论: SDS对LPS所致ALI具有治疗作用,这种治疗作用可能与其通过抑制肺组织中炎症介质的作用有关。     

蛋白酶抑制剂对全氟异丁烯吸入致 ALI 大鼠氧化应激的影响

目的：研究探讨蛋白酶抑制剂(抑肽酶)对全氟异丁烯(PFIB)吸入致 ALI 大鼠炎症因子的影响。方法健康清洁级成年雄性 Sprague-Dawley 大鼠40只,根据体质量随机分成5组：生理盐水对照组(简称 A 组)、ALI 组(简称 B 组)、抑肽酶治疗组(5 mg/kg、15 mg/kg 和30 mg/kg,简称 C、D、E 组,),每组8只。将 B、C、D、E 组大鼠经头部暴露于自制 PFIB 动态吸入染毒系统装置染毒5 min。染毒30 min 后,各组大鼠均经腹腔注射生理盐水或配置好的不同浓度抑肽酶溶液。24 h后结束实验,处死大鼠,获取 BALF、肺组织样本,检测肺湿重与肺干重比(W/D),BALF 总蛋白含量,肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量,光镜下肺组织病理学和免疫组织化学检查,并将数据进行统计学分析。结果 B 组、C 组、D 组、E 组的肺湿与干重比、BALF总蛋白含量和 MDA 含量升高,与 A 组比较差异有统计学意义(P <0.05),B 组、C 组、D 组、E 组的 SOD 含量下降,与 A 组比较差异有统计学意义(P <0.05)。E 组肺湿与干重比、BALF 总蛋白及MDA 含量均低于 B 组、C 组、D 组,差异有统计学意义(P <0.05);E 组 SOD 含量高于 B 组、C组、D 组,差异有统计学意义(P <0.05)。肺组织病理学检查显示,C 组、D 组、E 组较 B 组的肺组织水肿情况减轻、炎性细胞浸润减少,肺损伤程度降低,以高剂量最为显著。免疫组织化学检查示, C 组、D 组、E 组的核因子κB 的表达较 B 组为低。结论蛋白酶抑制剂抑肽酶能通过抗氧化应激及抑制炎性反应,来减轻 PFIB 吸入导致的 ALI。     

肥胖小鼠急性肺损伤模型的生物学特点

目的探讨LPS诱导的肥胖小鼠急性肺损伤模型的生物学特点。方法按照处理方式的不同分为四组:NC/NS组、NC/LPS组、DIO/NS组、DIO/LPS组,采用LPS腹腔注射的方法诱导小鼠急性肺损伤的动物模型。记录生存时间,计算不同实验组的生存率;观察各实验组中急性肺损伤各指标(肺组织病理学变化、湿干比、髓过氧化物酶活性、支气管肺泡灌洗液中炎症因子表达)。结果肥胖组与正常组小鼠急性肺损伤模型生存率无显著差异;肥胖组小鼠急性肺损伤模型肺组织病理学评分、湿干比、髓过氧化物酶活性较正常小鼠显著升高;肥胖组小鼠急性肺损伤模型支气管肺泡灌洗液中IL-10表达水平较正常小鼠显著降低,但TNF-α表达水平无显著差异。结论肥胖组小鼠炎症反应水平较正常小鼠显著升高,这可能与抗炎细胞因子IL-10水平降低有关。     

大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤中的氧化应激

目的 探讨大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤中的氧化应激反应机制.方法 18只雄性SD大鼠随机分成对照组、6h组、24 h组,每组6只.复制大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤模型,6h组、24 h组大鼠分别在烟雾吸入后6h或24 h行安乐死,ELISA法检测大鼠肺组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)浓度,荧光定量PCR法行肺组织iNOS mRNA、γ-GCS mRNA定量.结果 6h组、24 h组大鼠肺组织匀浆中的MDA、NO、iNOS、γ-GCS浓度、iNOS mRNA和γ-GCS mRNA的相对表达量均高于对照组,且NO浓度、iNOSmRNA和γ-GCS mRNA的相对表达量24 h组高于6h组(P值均＜0.05);而6h组和24 h组GSH浓度均低于对照组,且24 h组低于6h组(P值均＜0.05).结论 在大鼠棉花烟雾吸入性肺损伤中,氧化应激反应加剧,同时抗氧化体系的激活不足以对抗氧化应激损伤,氧化/抗氧化体系失衡,导致肺损伤逐渐加重.     

Low-dose dexamethasone alleviates lipopolysaccharide-induced acute lung injury in rats and upregulates pulmonary glucocorticoid receptors

Background and objective: The major causes of mortality among patients who survive acute lung injury/ARDS (ALI/ARDS) are due to the extensive tissue remodelling and fibrosis. Use of high‐dose glucocorticoids to reduce these inflammatory and fibroproliferative responses has been shown to do more harm than good. Recently, Meduri et al. found that the early use of low‐dose prolonged methylprednisolone in patients with severe ALI/ARDS significantly relieved the systemic inflammatory response and improved pulmonary and extrapulmonary organ function. This study investigated the therapeutic effect of low‐dose dexamethasone (Dex) on inflammation and fibrosis in LPS‐induced ALI in rats and its influence on the expression of the pulmonary glucocorticoid receptor (GR). Methods: Eighty Wistar rats were randomly divided into four groups: a control group (intraperitoneal normal saline injection (5 mL/kg) throughout experiment, n = 24); the LPS model group (LPS injection (5 mg/kg) for 3 days and normal saline thereafter, n = 24); the LPS + Dex group (LPS injection for 3 days and Dex solution (5 mg/kg) thereafter, n = 16); and the Dex group (normal saline injection (5 mL/kg) for 3 days and Dex solution (5 mg/kg) thereafter, n = 16). Levels of tumor necrosis factor‐α, matrix metallopeptidase‐9 and procollagen N‐terminal propeptide type I in BAL fluid were examined by ELISA on the third, seventh and fourteenth days after injection. Pulmonary hydroxyproline content was measured and histological examination was performed with haematoxylin–eosin and Victoria blue‐ponceau. Pulmonary distribution of GR‐positive cells was examined immunohistochemically, and expression of GR mRNA and protein was determined by RT‐PCR and western blot analysis. Results: Histological assessments showed that pulmonary fibrosis occurred in parallel with inflammation in the rat ALI model. Compared with the LPS group, the inflammation and fibrosis parameters were significantly improved in the LPS + Dex group at different periods after injection (P < 0.05 or P < 0.01), although parameters in the LPS + Dex group were not as good as those of the control group. GR mRNA and protein expression in the LPS + Dex group were markedly higher than that of the LPS group on the seventh and the fourteenth days (both P < 0.01). Western blotting showed that Dex also promoted the nuclear translocation of GR protein. Conclusion: Low‐dose Dex can reduce pulmonary inflammation and fibrosis after LPS‐induced ALI in rats and can elevate GR expression in the lung, probably through upregulating GR levels and promoting the nuclear translocation of GR protein.     

Bilirubin influence on oxidative lung damage and surfactant surface tension properties

To study the hypothesis that hyperbilirubinemia might reduce in vivo oxidative lung damage while also diminishing lung surfactant surface tension properties during acute lung injury, we performed a randomized study in a rabbit model of acute lung injury. Twenty rabbits were randomized to receive bilirubin or saline intravenously. Acute lung injury was induced by lung lavages with saline. Lung tissue oxidation was evaluated by measuring total hydroperoxide (TH), advanced oxidation protein products (AOPP), and protein carbonyls (PC) in bronchial aspirate (BA) samples. Surface surfactant activity was studied in BA samples using a capillary surfactometer. Bilirubin BA concentration increased in bilirubin-treated rabbits, while it remained undetectable in controls. A similar increase in TH, AOPP, and PC bronchial aspirate concentrations was found in both the study and control groups, while surfactant surface activity was lower in the bilirubin than in the control group. We conclude that during hyperbilirubinemia, bilirubin enters the lung tissue, where it can be detected in BA fluid. Bilirubin is not effective as an antioxidant agent and exerts a detrimental effect on lung surfactant surface tension properties. These findings may have relevance to the management of premature neonates suffering from respiratory distress syndrome and hyperbilirubinemia.     

气体信号分子硫化氢在油酸致大鼠急性肺损伤中的作用

目的:探讨胱硫脒-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)/硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)系统在急性肺损伤(acute lunginjury,ALI)中的作用。方法:尾静脉注射油酸(oleic acid,OA)制备大鼠ALI模型为OA组,对照组注射等量生理盐水,注射OA前给予硫氢化钠(NaHS)(14μmol/kg)作为NaHS+OA组,单纯给予NaHS(14μmol/kg)作为NaHS组,分别测定血浆及肺组织H2S生成量、CSE活性、3-巯基丙酮酸转硫酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)活性、肺组织及血浆中丙二醛(MDA)、共轭二烯(Diene)键含量;并对肺部病变进行评定。结果:与对照组比较,OA组肺组织CSE、MPST活性及H2S浓度呈现下降趋势(P<0.01),血浆H2S浓度升高(P<0.01),血浆及肺组织MDA及Diene键含量升高(P<0.01);与OA组比较,NaHS+OA组血浆及肺组织MDA和Diene键含量明显下降(P<0.01)。结论:内源性CSE/H2S系统参与了OA致大鼠ALI的病理生理过程;给予外源性H2S可以减轻ALI时肺脏脂质过氧化损害。     

肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对小鼠肺组织氧化损伤的保护作用

[目的]探讨肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(TNFR-Fc)通过下调氧化应激减轻急性肺损伤(ALl)小鼠肺组织破坏的可能机制.[方法]SPF级8周龄BALB/c小鼠共54只,雌雄各半,平均体重20g,按随机数字表法分为脂多糖组、干预组和对照组,每组16只.各组均经气管滴入脂多糖复制ALl小鼠模型,TNFR-Fc组在滴入脂多糖前24h腹膜腔注射TNFR-Fc(0.4mg/kg).滴入脂多糖后0h和2h分别处死8只小鼠并收集肺脏组织,测量肺湿/干重比,行肺泡灌洗并通过BCA法检测BALF中蛋白含量,ELISA法检测外周血肿瘤坏死因子(TNF)-α浓度,组织病理半定量评分评价肺损伤程度,比色法测定肺组织匀浆中丙二醛浓度并计算总抗氧化能力,RT-PCR法检测iNOS、Nox1、Nox2、Nox4、XO及SOD等氧化相关基因转录水平.[结果]TNFR-Fc干预组小鼠血清TNF-α浓度[(119±51)mg/L]、BALF蛋白含量[(539±89)mg/L]及肺组织损伤病理评分均低于脂多糖组[(635±89),(793±87)mg/L,均P＜0.01],而肺湿/干重比二者差别无统计学意义(P＞0.05).干预组小鼠肺组织丙二醛水平(22.5±3.9)与脂多糖组(25.4±3.2)相比较低,但差异无统计学意义(P＞0.05),总氧化能力明显高于脂多糖组(P＜0.05).干预组小鼠肺组织Nox1、Nox2、Nox4及XO基因转录强度与脂多糖组相比较低(均P＜0.05),二者SOD基因表达强度差异无统计学意义(P＞0.05).[结论]TNFR-Fc可通过降低TNF-α浓度,控制TNF-α对炎症氧化应激的活化作用,并下调Nox1、Nox2、Nox4及XO等基因表达,减轻组织氧化损伤和ALI的肺组织损害.     

Inhibitory effect of melatonin on lung oxidative stress induced by respiratory syncytial virus infection in mice

Abstract: Previous research has shown that antioxidant (butylated hydroxyanisole) treatment ameliorates respiratory syncytial virus (RSV)‐induced disease and lung inflammation. Melatonin has been reported to exhibit a wide varieties of biological effects, including antioxidant and anti‐inflammation, and has no evident toxicity and side effect. But it is not known whether melatonin would modify RSV‐induced lung disease and oxidative stress. The present study was to establish the involvement of oxidative stress in the pathogenesis of RSV‐induced lung inflammation, and to investigate the protective effect of administration of melatonin in mice with RSV‐induced oxidative pulmonary injury for 4 days. Malondialdehyde (MDA), an end product of lipid peroxidation, and glutathione (GSH) and superoxide dismutase (SOD) and nitric oxide (NO) levels were evaluated in lung tissue homogenates by spectrophotometry. Hydroxyl radical (˙OH), one of the indicators of free radical formation, was also detected in lung homogenates by Fenton reaction. Tumor necrosis factor‐a (TNF‐a) concentrations in mouse serum were measured with ELISA assay. The results demonstrated that the mice intranasally inoculated with RSV resulted in oxidative stress changes by increasing NO, MDA and ˙OH levels, and decreasing GSH and SOD activities, whereas administration of melatonin significantly reversed all these effects. Furthermore, melatonin inhibited production of proinflammatory cytokines such as TNF‐a in serum of RSV‐infected mice. These results suggest that melatonin ameliorates RSV‐induced lung inflammatory injury in mice via inhibition of oxidative stress and proinflammatory cytokine production and may be as a novel therapeutic agent in virus‐induced pulmonary infection.