汉坦病毒G2糖蛋白在昆虫细胞中的表达及其在免疫诊断中的应用

目的构建汉坦病毒(HV）Z10株包膜糖蛋白G2基因的重组表达载体，探索其在昆虫细胞中的表达及在免疫荧光诊断中的应用。方法以质粒pUCm—Z10M为模板设计引物，用聚合酶链反应(PCR)扩增Z10株G2基因片段，将G2片段克隆入pUCm—T质粒载体，碱法提取质粒pUCm-Z10-G2，酶切后将回收片段插入杆状病毒转移载体pFastBacHTa，构建重组体pFastBacHTa-Z10-G2，重组体转化感受态细胞E．coli DH10Bac后，经2轮筛选，提取重组质粒转染昆虫细胞sf9，并用间接免疫荧光技术检测表达的G2蛋白。结果获得含有编码HV Z10株的包膜糖蛋白G2基因的重组质粒，转染昆虫细胞表达出G2蛋白，与肾综合征出血热(HFRS)阳性血清反应，昆虫细胞内呈现特异性环状荧光。检测40份HFRS血清，与全病毒细胞抗原片的符合率为95％。结论成功构建HV Z10株包膜糖蛋白G2基因的表达载体，并在昆虫细胞中表达。可利用重组G2蛋白检测HV感染。     

乌鲁木齐地区儿童人偏肺病毒感染状况 初步研究

目的 了解人偏肺病毒(hMPV)在乌鲁木齐地区儿童呼吸道感染患者中的致病情况.方法 选取2006年11月至2007年4月因呼吸道感染于新疆维吾尔自治区人民医院儿科住院患儿和部分门诊患儿的呼吸道分泌物及咽拭子标本共209份.通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测hMPV的M基因片段.并对阳性标本进行测序,用BLAST及DNAStar软件进行分析.结果 共检出2例阳性标本,占总例数1.0%.将2份阳性标本扩增的hMPV M基因片段进行对比,同源性为83.8%.进一步选取GenBank中与本次扩增目的基因相同的hMPV M基因片段做基因进化树分析,结果提示2例标本可能属于不同的2种基因型.结论 hMPV是乌鲁木齐地区儿童呼吸道感染病原之一,在一个流行季节当地可同时有2种不同基因型的hMPV流行.     

新型隐球菌Cap10蛋白的重组表达及多克隆抗体制备

目的:重组表达新型隐球菌Cap10蛋白并制备特异抗体,为新型隐球菌的检测和诊断提供特异抗原和抗体。方法:选择CAP10基因开放阅读框架(ORF)抗原表位集中、保守性高的片段,经过大肠杆菌偏嗜的密码子优化后进行基因合成,将目的片段克隆至原核表达载体pQE30中构建重组蛋白表达载体pQE30-CAP10并鉴定,IPTG诱导重组蛋白在M15中表达,并用SDS-PAGE和Western blot鉴定;镍柱纯化后,免疫家兔制备抗血清。结果:在大肠杆菌中成功表达Cap10,其纯度大于95%;二免后家兔血清抗体效价达到200万以上。结论:获得了高纯度的Cap10蛋白及高效价的多克隆抗体,为新型隐球菌的检测和致病机制研究奠定了基础。     

广州地区儿童急性呼吸道感染患者中偏肺病毒的感染调查

目的 了解广州地区14岁以下急性呼吸道患儿人类偏肺病毒(humanmetapneumovirus,hMPV)的感染情况,分析广州地区儿童感染hMPV的流行病学特征及临床特征,为hMPV的预防和治疗提供一些依据.方法 2006年9月至2008年8月,在广州某医院的儿科门诊及住院部的急性呼吸道患儿中采集521份鼻咽拭子标本,提取总核酸,用逆转录聚合酶链反应(RT-PER)扩增hMPV的核蛋白(N)基因的213个核苷酸片段,对16份强阳性的扩增产物进行测序和序列分析,同时对采集病例的流行病学资料进行统计分析.结果 521份标本用RT-PCR方法检测后,共有39份标本为N基因阳性,检出率为7.49%,hMPV发病高峰期在10月和4月份,对N基因进行序列测序与分析,结果与北京株BJ1897N基因的同源性高达99%,与泰国AY550156株N基因的同源性高达97%,基因型别以B型为主.结论 广州地区的儿童急性呼吸道感染中hMPV感染是原因之一,且以6岁以下的儿童感染为主,但不同性别的感染率差异无统计学意义,感染hMPV的临床症状主要表现为:高热、咳嗽、头痛、咽痛、卡他症状、肺部影像学改变等,其中大部分患者表现有高热和咳嗽,且有41.03%的hMPV患者合并感染其他呼吸道病毒.     

杭州市拱墅区女性人乳头瘤病毒感染和基因型分布特征

目的分析杭州市拱墅区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染和HPV基因型分布。方法选择2015-2018年杭州师范大学附属医院就诊的16-82岁女性,进行HPV基因型检测和回顾性分析。结果调查对象HPV检测总阳性率为29.27%(11560/39488);阳性率最高的5种HPV基因型为HPV52(6.71%)、HPV16(4.01%)、HPV58(3.21%)、HPV81(3.03%)、HPV53(2.95%);≤20岁、21-30岁、31-40岁、41-50岁、51-60岁、61-70岁、≥71岁调查对象的HPV阳性率分别为48.8%、29.7%、27.4%、28.2%、33.3%、31.3%、23.3%。结论杭州市拱墅区女性HPV感染以≤20岁和51-60岁为主,优势基因型为HPV52、HPV16、HPV58。     

汉坦病毒G2囊膜蛋白基因的克隆及其免疫原性的初步研究

目的 构建汉坦病毒G2囊膜蛋白基因真核表达载体，进一步研究其免疫效果。方法 采用PCR方法扩增出G2基因，亚克隆于pcDNA3．1／HisB载体，重组阳性克隆进行酶切和测序鉴定。将重组质粒免疫BALB／C小鼠，用间接免疫荧光法(1FA)检测免疫小鼠血清中抗汉坦病毒76～118株的交叉抗体。结果 5只免疫小鼠血清中均检测到特异性的抗汉坦病毒76～118株的交叉抗体，与对照组相比有显著性差异，其滴度为1：10．99。结论 G2囊膜蛋白基因构建成功并能刺激机体产生特异性抗体，但其效价不高，该研究结果为研制有效的HFRS核酸疫苗奠定一定的实验基础。     

Sp110基因5'-UTR rs11679983 SNP与肺结核易感相关性研究

[目的]探讨Sp110基因5'-UTR rs11679983位点单核苷酸多态性对重庆籍汉族人群肺结核易感性的影响.[方法]采用病例一对照研究,选择100名初治涂阳肺结核患者和106名非结核病对照,运用ASA-PCR技术检测研究对象的基因型,比较Sp110基因5'-UTR rs11679983位点基因型频率及等位基因频率分布. [结果]Sp110基因5'-UTR rs11679983位点A/A、A/G、G/G基因型频率在病例组分别为21.00%、56.00%、23.00%;对照组分别为41.51%、54.72%、3.77%;两组间基因型分布差异有统计学意义(X2=18.11,P<0.001).Logistic回归分析显示rs11679983A/G与肺结核相关(OR=2.84,95%CI:1.76～4.59,P<0.001). [结论]Sp110基因rs11679983位点基因多态与肺结核易感性相关.     

狂犬病毒糖蛋白基因在原核系统中的表达及纯化

[目的]选取狂犬病毒糖蛋白富集表位基因片段进行克隆、表达和纯化,以期获得能应用于血清学诊断的纯化重组蛋白。[方法]从狂犬病毒感染的Vero细胞上清液中提取病毒RNA,通过RT-PCR扩增CTN株糖蛋白表位富集区基因片段,与表达载体pPROEX HTb连接,构建重组表达载体,在BL21（DE3）中表达,重组蛋白经Western blot鉴定活性,最后用电洗脱法纯化重组蛋白。[结果]重组表达质粒在大肠杆菌中表达高产量的重组蛋白,Western blot结果显示,重组蛋白具有免疫活性,用电洗脱法纯化后的重组蛋白具有较高的纯度,测定蛋白含量为1.07 mg/ml。[结论]狂犬病毒糖蛋白富集表位基因片段能在大肠杆菌中成功表达,重组蛋白具有免疫活性,并可通过电洗脱法纯化,为狂犬病疫苗免疫血清抗体检测试剂的研制奠定了基础。     

沙眼衣原体60kDa外膜蛋白基因的克隆与表达

目的 克隆和表达沙眼衣原体60kDa外膜蛋白(Omp2)基因。方法 D型沙眼衣原体感染McCoy细胞后，抽提基因组DNA，经PCR扩增出omp2基因片段，与pUCm—T克隆载体连接，酶切纯化后克隆到原核表达载体pQE30，构建重组表达载体pQE30／omp2，PCR、酶切及测序鉴定。IPFG诱导表达，SDS—PAGE检测有无蛋白的表达。结果 (1)获得长约1650bp的PCR产物，酶切结果显示所构建的重组质粒已成功地克隆了omp2基因，序列分析结果与已知omp2序列相同；(2)SDS—PACE检测表达产物，在相对分子量60kDa处有表达条带；(3)诱导表达之菌体超声破碎后，目的蛋白主要以包涵体形式存在。结论 获得了Ct omp2基因片段，并在E．coli M15中成功表达。     

P糖蛋白表达及MDR-1基因G2677T/A多态性与急性冠状动脉综合征患者相关性研究

目的通过检测临床长期服用氯吡格雷的急性冠状动脉综合征(ACS)患者淋巴细胞上多耐药基因1(MDR-1)G2677T/A多态性及表达的P糖蛋白(P-gp),探讨P-gp表达和G2677T/A多态性与ACS之间的相关性。方法运用RT-PCR及测序法检测服用氯吡格雷1年以上的ACS患者(53例)淋巴细胞上G2677T/A表达,采用流式细胞计数(FCM)检测P-gp表达。选取31例健康体检者作为对照组。结果 1病例组G2677T/A阳性率(58.5%)高于健康对照组(3.2%),差异有统计学意义(P<0.05)。2病例组G2677T/A多态性G/G型、T/T型和A/A型的表达率分别为67.7%、22.6%、9.7%,对照组分别为71.4%、14.3%和14.3%;两组各基因型的表达率相比差异均无统计学意义(P>0.05)。3G2677T/A各基因型P-gp表达:T/T型P-gp值为0.240±0.182,A/A型为0.181±0.135,G/G型为0.165±0.142,阴性为0.151±0.126;T/T基因型与阴性相比差异有统计学意义(P<0.05),其余各型与阴性相比差异无统计学意义(P>0.05)。4各基因型的优势比(OR):G/G型为0.317,T/T型为0.408,A/A型为0.029。结论 G2677T/A多态性与长期服用氯吡格雷的ACS或PCI患者多药耐药有一定相关性,G/G基因型P-gp表达量最低,可能为一具有保护性的基因型。     

Benzene in blood and phenol in urine in monitoring benzene exposure in industry

Determinations of benzene concentration in blood and of phenol in urine were made by head-space gas chromatography techniques on samples taken near the end of the work day from two groups of workers potentially exposed to low levels of benzene in the work-place atmosphere. Preliminary results suggest that benzene in blood is more reliable than phenol tests for assessing both exposure and uptake of benzene. Normal values of phenol in urine (10 mg/liter or less) were found in nearly all those cases in which benzene was detected in the blood.     

2012年绵阳市蔬菜中农药残留状况

目的 了解绵阳市2012年市售蔬菜中农药残留情况,为食用蔬菜监管提供依据.方法 全部样品均按照GB/T 5009-2003的方法进行农药的残留检测.依据GB 2763-2005《食品中农药最大残留限量》进行判定.结果 2012年共检测蔬菜165份,农药检出率和超标率分别为72.12％和23.64％.豆类、根茎类、叶菜类、瓜果菜类和食用菌类蔬菜检测农药残留超标率分别为8.00％、23.53％、36.00％、5.26％和27.03％,差异有统计学意义(x2=11.41,P＜0.01).不同种类农药超标率差异有统计学意义(x2 =62.42,P＜0.01).夏季和冬季蔬菜农药超标率差异无统计学意义(x2=3.44,P＞0.05).结论 绵阳市叶菜类蔬菜中农药残留情况较为严重,应采取有效措施,加强蔬菜的监督管理,从源头禁止高毒农药的使用,加大蔬菜种植、销售环节的监测,确保市民食用蔬菜的安全.     

2019年中国肿瘤流行病学研究进展

恶性肿瘤已成为中国居民的主要死因之一。近些年来,中国政府积极推进肿瘤预防和控制领域的研究工作,取得了很大的进步。本文简要汇总中国在肿瘤流行病学领域的研究进展,具体包括2019年的肿瘤负担、癌症危险因素及其干预、筛查和早期发现、癌症防治专项行动(2019-2022年)方案等方面,以期为我国肿瘤防治工作的有效开展提供技术支撑和理论依据。     

芜湖地区儿童隐孢子虫病调查

1989年5月~9月,对安徽省芜湖市五所医院儿科就诊的腹泻患儿进行隐孢子虫病调查。粪检腹泻患儿3 498人,卵囊检出率1.9%。男女检出率无差异;6个月内的患儿中未检出卵囊阳性者;86.2%的卵囊阳性者分布于7个月~4岁年龄段;乡村患儿的卵囊检出率2倍于城市患儿;病例呈高度散发状态;卵囊检出率从6月下旬开始上升,在本调查中,92.5%的病例分布于6月下旬~9月。所见病例,从临床表现到大便性状均无特殊,且均呈自限性,病程似较文献报道者为短。     

2003年汕头市住院婴儿住院情况分析

目的调查住院婴儿疾病分布情况。方法利用SAS8．0对汕头市2003年住院婴儿2923例病例进行统计分析。结果婴儿住院的病因包括：早产、新生儿窒息、呼吸道及消化道感染、新生儿黄疸以及先天性疾病等；造成婴儿死亡的前5位病因主要是出生窒息、窘迫、先天性肺炎、新生儿吸人性肺炎以及先天性心脏畸形；婴儿的住院时间越长，入院情况越危急，受到医院感染的机会越大；入院婴儿平均住院日为7．089天，平均住院费用3717．834元。结论婴儿发病入院主要由于先天性疾病以及后天感染，这是家庭及社会进行婴儿健康干预与促进的重点。     

谈神经内科医院感染危险因素及护理对策

目的：了解引起神经内科住院患者医院感染的危险因素，采取有效的护理措施，以降低医院感染的发生率和死亡率。方法：结合多年临床经验，对医院感染不同的危险因素进行分析及提出护理对策。结论：神经内科医院感染发病率较高，获得途径以外源为主，针对主要危险因素的发生原因，我们应加强病房管理，严格执行消毒隔离制度，合理应用抗生素，加强基础护理和健康教育，缩短住院天数，以降低神经内科医院感染的发病率。     

Musculoskeletal pain in ragpickers in a southern city in Brazil

BACKGROUND: Ragpickers are informal workers who collect recyclable materials to earn a small wage. Their life and working conditions are extremely precarious. The ergonomic hazards and musculoskeletal pain in a sample of ragpickers in Pelotas, a city in southern Brazil are examined. METHODS: Two comparison groups were available: a matched sample of non-ragpickers from the same poor neighborhoods, and a random sample of the general population of the city. The cross-sectional study gathered data by interview on 990 individuals in 2004. Musculoskeletal pain was assessed using the Standardized Nordic Questionnaire. RESULTS: Ragpickers reported higher prevalences for most awkward postures and ergonomic exposures compared to neighbors with other demanding manual jobs. The prevalence within the last 12 months of low back pain (LBP), lower extremity pain (LEP), and upper extremity pain (UEP) among ragpickers were 49.2%, 45.1%, and 34.9%, respectively; levels similar to those reported by neighborhood controls. Both ragpickers and non-ragpickers reported considerably higher ergonomic exposures, and more prevalent LBP, than the general population. CONCLUSIONS: Ragpickers experience many occupational hazards and ergonomic stressors. Their overall prevalence of musculoskeletal pain was similar to a comparison group with other physically demanding manual jobs. For LBP, this prevalence was substantially higher (49% vs. 35%) than in the general population.     

Correlation among cadmium levels in river sediment, in rice, in daily foods and in urine of residents in 11 prefectures in Japan

Objective: The objective of this study is to examine if overall correlation exists among cadmium levels (Cd) in the general environment, dietary Cd intake, and Cd body burden of local residents. Methods: Eleven prefectures in Japan were selected as the areas where large-scale data on Cd levels in urine of adult women (40–49 and 50–59 years of age, respectively) were available to calculate geometric mean (GM) values for each of the prefecture. Other data were cited from published or previously established databases on Cd in the sediments of river bottoms (as a representative of Cd in the environment), Cd in rice for local consumption, and Cd in daily food duplicate samples collected from local women populations, and calculated for GM values for the prefectures. The GM values were subjected to correlation matrix and regression analysis. Results: Marginally significant (P<0.10) correlation was detected between Cd in sediment and Cd in rice. Furthermore, correlation of Cd in sediment was significant with Cd in total foods (P<0.05) and possibly with Cd in urine (P<0.05–0.10). Importance of data on Cd in rice paddy soil as a missing link is discussed. Conclusions: Correlation was demonstrated in the flow of Cd transport from the environment (expressed as Cd contents in river sediments) to humans (in terms of Cd in urine) among general populations in Japan.     

张家港市从业人员肠道沙门菌检测

目的了解张家港市区从业人员沙门菌属的带菌情况及流行趋势,以有效控制相关传染病的发生。方法对张家港市2005-2009年121 370名进行健康体检的从业人员肛拭样品沙门菌检测结果进行分析结果共检出沙门菌菌株373株,总检出率为0.31%,2005-2009年沙门菌检出率分别为0.52%、0.37%、0.24%、0.22%和0.23%,夏秋季沙门菌的检出率明显高于冬春季（χ2=140.503,P〈0.01）,从检出的373株沙门菌的血清型分布情况看,该地区主要以B、C、E群为多见,血清型以德尔卑占优势,其次为山夫登堡、罗米他。结论 2005-2009年张家港市从业人员沙门菌检出率呈逐年下降趋势,且有明显季节区别。