肢体缺血再灌注后的肺损伤和细胞凋亡及NO的效应

目的：探讨肢体缺血再灌注（LIR）后肺的损伤性变化以及细胞凋亡在肺损伤发生中的作用；探讨一氧化氮（NO）对LIR后肺组织细胞凋亡的影响。 方法：采用本室常规方法复制大鼠LIR模型，给予外源性一氧化氮合酶底物（L-Arg）和一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)处理，采用原位末端标记法（TUNEL）检测缺血4 h再灌注4 h时各组动物肺组织细胞凋亡情况；采用放免法检测凋亡相关细胞因子TNF-α在肺组织的表达，结合计算机分析系统对结果进行定量分析；采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax、caspase-3、TNF-α蛋白表达情况，结合自动图像分析系统对其结果进行定量分析；在光镜下观察肺组织的形态学改变。结果：大鼠LIR后4 h，肺泡Ⅱ型上皮细胞、肺血管内皮细胞呈凋亡改变,肺组织TNF-α、caspase-3、Bax明显上调,Bcl-2表达下调。L-Arg处理组，凋亡细胞数明显减少，肺组织TNF-α、caspase-3、Bax的表达情况与IR组相比明显减弱，Bcl-2表达明显增强；L-NAME处理组动物肺组织TNF-α、caspase-3、Bax的表达情况与IR组相比明显增强，Bcl-2表达明显减弱。结论：细胞凋亡参与了大鼠LIR后急性肺损伤的发生，且与TNF-α有关；NO可通过减弱细胞凋亡相关因子TNF-α的表达，减轻LIR后肺组织的细胞凋亡。     

高迁移率族蛋白1对内毒素急性肺损伤大鼠中性粒细胞凋亡改变的影响

目的 观察体外高迁移率族蛋白1（HMGB1）对内毒素急性肺损伤（ALI）大鼠中性粒细胞（PMN）凋亡改变的影响，以探讨HMGB1在ALI发病机制中的作用。方法 脂多糖注射复制大鼠急性肺损伤模型，在LPS致伤后不同时相点（有或无正丁酸钠干预时）获取肺组织、外周血中性粒细胞（PMN）、支气管肺泡灌洗液（BALF）。RT-PCR检测肺组织HMGB1 mRNA表达，流式细胞术（FCM）、Giemsa染色及TUNEL法检测PMN的凋亡改变。结果 与对照组比较，LPS急性肺损伤大鼠PMN凋亡率逐渐减低，鼠BALF中PMN凋亡开始时间及无存活细胞时间明显延长；LPS致伤后6-24h肺组织HMGB1 mRNA表达明显增高。正丁酸钠（SB）处理组动物肺组织于伤后6、12h肺组织HMGB1 mRNA表达均显著抑制，与LPS组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）；形态学检查显示，LPS致伤后大鼠肺组织出现水肿及明显的病理变化，SB干预可减轻肺损伤的严重程度。致伤后肺损伤程度与肺组织HMGB1表达水平及PMN凋亡改变有关。结论 LPS致伤后，鼠肺HMGB1 mRNA高表达发生较晚，但持续较长时间；SB处理可削弱LPS诱导的PMN凋亡延迟及抑制，下调肺组织HMGB1 mRNA表达。HMGB1可能参与内毒素急性肺损伤时PMN的凋亡延迟及抑制效应。     

血必净注射液通过降低细胞紧密连接的通透性减轻LPS诱导的脓毒症大鼠肺微血管内皮细胞损伤

目的 探究血必净注射液(XBJ)对脂多糖诱导的脓毒症大鼠肺微血管内皮细胞损伤的作用及其对细胞紧密连接通透性的影响。方法 选择大鼠肺微血管内皮细胞，利用5μg/mL的脂多糖(LPS)处理大鼠肺微血管内皮细胞24 h,构建大鼠脓毒症肺损伤细胞模型，XBJ治疗组采用生药浓度2.5、5、10、25、50 mg/mL的XBJ共同进行干预24 h。CCK-8检测各组细胞活性，筛选最佳XBJ浓度；Hoechst染色检测各组细胞凋亡率；Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和cleaved caspase3的表达；Transwell小室检测单层大鼠肺微血管内皮细胞通透性；Western blot检测紧密连接相关蛋白ZO-1、ZO-2和occludin的表达。结果 CCK8实验结果显示，XBJ的最佳浓度为10mg/mL。LPS处理后，大鼠细胞凋亡率明显升高，凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的比值和cleaved caspase3的表达水平增加；而XBJ治疗后，细胞凋亡率下降。LPS处理导致FITC-dextran含量显著增加，ZO-1、ZO-2和Occludin的蛋白表达水平降...     

内毒素性急性肺损伤大鼠内源性H2S/CSE体系的变化

目的：观察内毒素性急性肺损伤（ALI）大鼠内源性硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶（H2S/CSE）体系、IL-1β和IL-10的动态变化。方法:健康雄性SD大鼠共80只，随机分为Ⅰ（对照）组；Ⅱ（LPS 1 h）组；Ⅲ（LPS 3 h）组；Ⅳ（LPS 6 h）组；Ⅴ（LPS 9 h）组；Ⅵ（LPS 12 h）组。给予LPS复制内毒素性ALI大鼠模型，分别于1、3、6、9、12 h处死，观察光镜和电镜下肺组织形态学改变，检测肺系数、肺湿/干重比、血浆中H2S含量、肺组织CSE活性、血清中IL-1β和IL-10的动态变化。结果:⑴LPS 1 h组，光镜和电镜下肺组织形态学无明显改变，肺系数、肺湿/干重比、血浆中H2S的含量和肺组织CSE活性与对照组比较无明显变化，血清中IL-1β和IL-10含量明显高于对照组(IL-1β，P<0.05；IL-10，P<0.01)。⑵LPS 3、6、9、12 h组，光镜和电镜下肺组织明显受损，超微结构明显改变，肺系数和肺湿/干重比明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)，血浆中H2S的含量和肺组织CSE活性明显低于对照组（P<0.05 或P<0.01) ，血清中IL- 1β和IL-10的含量明显高于对照组(P<0.01)。结论:内源性H2S/CSE体系、IL-β和IL-10参与内毒素性ALI的病理生理过程。     

胰岛素对烟雾吸入性损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的 探讨胰岛素对烟雾吸入性损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法 将成年清洁级雌性SD大鼠66只随机分为3组,正常对照组6只、吸入性损伤组和胰岛素治疗组各30只.胰岛素治疗组于烟雾吸入性损伤后皮下注射胰岛素5 U/kg,吸入性损伤组同样致伤后于相同部位注射等体积的生理盐水,正常对照组不做任何处理.各组均在伤在2 h、6 h、12 h、24 h、48 h监测血糖值.光镜进行肺组织切片病理形态学观察.采用原位末端标记法TUNEL观察肺组织细胞凋亡,免疫组织化学染色法检测抗凋亡蛋白Bcl-2及Bax的表达变化.结果 光镜观察HE切片,正常对照组大鼠肺泡结构清晰完整.吸入性损伤组大鼠肺组织肺泡间隔增宽、炎细胞浸润,胰岛素治疗组与吸入性损伤组比较病理表现有所减轻.凋亡指数（AI）、Bax 和 Bcl-2在各时间点均明显高于正常对照组（P〈0.01）.胰岛素治疗组伤后2 h AI、Bax和Bcl-2和吸入性损伤组间差异无统计学差异（P〉0.05）,但12 h以后两组AI、Bax和Bcl-2比较时差异均有高度统计学意义（P〈0.01）,24 h各值达高峰,差异也具有高度统计学意义（P〈0.01）.结论 吸入性损伤后早期给予胰岛素可以直接促进Bcl-2蛋白表达,抑制Bax等促凋亡蛋白的表达,对吸入性损伤后肺脏组织细胞的凋亡有抑制作用,在肺损伤早期起到保护肺组织作用.     

长春西汀注射液减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤

目的:观察长春西汀注射液对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的作用,并研究初步的作用机制。方法:雄性Wistar大鼠50只,随机分为正常对照组(control)、模型组(ALI组)以及长春西汀低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只。正常对照组股静脉注射0.9%氯化钠注射液(5 m L/kg);模型组股静脉注射LPS 10 mg/kg;长春西汀低、中和高剂量组股静脉注射LPS 10 mg/kg,30 min后分别腹腔注射长春西汀注射液0.2 mg/kg、0.7 mg/kg和1.2 mg/kg。伊红染色观察肺部组织病理学切片,TUNEL法检测肺组织的细胞凋亡,分光光度法检测并计算肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,Western blot法检测肺组织中NF-κB、ICAM-1、VCAM-1、Bax与Bcl-2的蛋白水平。结果:与模型组相比,采用长春西汀给药后,明显减轻急性肺损伤的肺组织结构损伤与炎性细胞浸润,降低肺组织凋亡的细胞数与MPO活性,下调细胞中NF-κB、ICAM-1、VCAM-1与Bax的蛋白表达水平,上调Bcl-2的蛋白表达水平。结论:长春西汀注射液对急性肺损伤大鼠的肺组织具有保护作用,可能与降低肺组织中MPO活性,以及调控NF-κB、ICAM-1、VCAM-1、Bax与Bcl-2蛋白表达水平有关。     

肠淋巴途径在二次打击大鼠肺组织细胞凋亡中的作用

目的： 观察结扎肠系膜淋巴管对二次打击大鼠肺组织细胞凋亡、凋亡相关基因以及TNF-α、IL-6水平的影响。方法： 雄性Wistar大鼠45只，均分为结扎组、未结扎组、假手术组，以失血、LPS复制二次打击模型，结扎组行肠系膜淋巴管结扎术。在手术创伤后24 h，选择肺固定位置制作切片，TUNEL法检测细胞凋亡率，免疫组化法检测Bcl-2和Bax蛋白表达；并制备肺组织匀浆，ELISA法检测血清、肺匀浆TNF-α、IL-6。结果： 二次打击后，未结扎组肺组织细胞凋亡率、Bax表达、血清及肺匀浆TNF-α、IL-6明显高于假手术组及结扎组，Bcl-2表达显著低于假手术组及结扎组（P<0.01，P<0.05），细胞凋亡以上皮细胞为主；结扎组肺组织细胞凋亡率与假手术组比较无显著差异（P>0.05），肺组织Bcl-2表达显著增高，Bax表达显著低于假手术组（P<0.01，P<0.05）。结论： 阻断肠淋巴途径可减轻失血-LPS致大鼠肺组织细胞凋亡，其机制可能与肠系膜淋巴管结扎降低促细胞凋亡介质TNF-α、IL-6水平、提高Bcl-2表达有关。提示二次打击的肠源性淋巴液在大鼠急性肺损伤的发病过程中发挥着重要作用。     

过氧化物酶增殖体激活受体α在急性肺损伤大鼠肺组织的表达及其意义

目的: 观察内毒素(LPS)复制的急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织过氧化物酶增殖体激活受体α（PPARα）表达的变化,探讨PPARα在ALI中可能的作用。方法: 将40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、LPS致伤1 h组、2 h组、4 h组和8 h组。用LPS(5 mg/kg) 静脉注射复制大鼠ALI模型，分别在LPS致伤后1 h、2 h、4 h、8 h时处死大鼠，测定各组肺组织湿/干重比（W/D）及肺组织病理变化；采用RT-PCR法检测肺组织中PPARα mRNA的表达；采用免疫组化法检测肺组织中PPARα的表达。结果: LPS致伤后2 h、4 h、8 h肺组织W/D均显著高于对照组（均P< 0.01）；LPS致伤后2h、4h PPARα mRNA表达分别显著低于对照组（均P < 0.01）；而LPS致伤4h和8h组PPARα表达阳性细胞数显著低于对照组（均P< 0.05）。结论: PPARα在ALI大鼠肺组织表达降低。表明PPARα在急性肺损伤的发病机制中具有重要作用。     

NG-硝基-L-精氨酸对大鼠内毒素性肺线粒体损伤的影响

目的： 观察非选择性一氧化氮合酶(NOS)抑制剂NG-硝基-L-精氨酸(L-NA)对急性肺损伤大鼠肺线粒体功能的影响，并探讨其改善急性肺损伤的作用机制。方法: 将SD大鼠随机分为空白对照组、急性肺损伤组、L-NA治疗组，采用舌静脉注射脂多糖(LPS)复制大鼠急性肺损伤模型，于大鼠急性肺损伤3h后给L-NA治疗3h，断头放血处死大鼠，迅速取出肺脏，匀浆器混匀后，低温差速离心法提取肺线粒体，测定线粒体总ATP酶、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总一氧化氮合酶（T-NOS）、诱生型一氧化氮合酶（iNOS）、结构型一氧化氮合酶（cNOS）的活性，以及线粒体肿胀度、膜流动性和线粒体一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）含量；电镜观察大鼠肺线粒体超微结构的改变及治疗药对此改变的影响。结果: 在大鼠内毒素性急性肺损伤后，肺脏组织中线粒体表现为肿胀、膜流动性降低，线粒体中的T-NOS和iNOS活性显著升高，线粒体NO生成明显增加，而cNOS活性无明显变化；线粒体总ATP酶、SOD、GSH-Px活性均明显下降，线粒体MDA含量明显升高。急性肺损伤3h给予L-NA治疗3h,与急性肺损伤组相比，一氧化氮合酶活性有所改变，NO生成显著下降，总ATP酶、SOD、GSH-Px活性均显著升高，MDA含量下降。电镜结果显示内毒素性急性肺损伤后肺脏组织细胞水肿，线粒体肿胀、嵴断裂、溶解、消失；L-NA能改善内毒素性急性肺损伤引起的细胞水肿、线粒体肿胀和空泡化。结论: L-NA能明显抑制急性肺损伤后线粒体一氧化氮合酶活性，减少NO生成，改善线粒体能量供应，增加线粒体抗氧化作用，从而减轻急性肺损伤。     

人参提取物对内毒素所致小鼠脾细胞损伤的保护作用

目的 观察人参提取物在内毒素脂多糖(LPS)所致的SIRS／MODS中对脾细胞的作用。方法 通过HE、TUNEL染色和透射电镜比较注射人参提取物(GS)后再注射LPS时的脾脏形态学及凋亡情况，并用免疫组织化学的方法检测Bcl-2，Fas，FasL的表达。结果 随LPS作用时间的延长，脾损伤逐渐加重。动脉周围淋巴鞘细胞碎片及TUNEL阳性细胞增多，电镜观察可见到凋亡的淋巴细胞。而人参组细胞损伤明显减轻。Bcl-2的表达随着LPS作用时间的延长而减少，Fas，FasL则增强。人参提取物主要阻止Bcl-2表达减少。结论 人参提取物对LPS脾细胞损伤有保护作用，其作用机制与增强Bcl-2表达有关。     

脂多糖对人脐静脉内皮细胞ET-1、eNOS、iNOS mRNA表达的影响

目的：观察脂多糖（LPS）对人脐静脉内皮细胞ET-1、eNOS、iNOSmRNA表达的影响，在分子水平上进一步探讨LPS影响人脐静脉内皮细胞分泌ET-1、NO的机制。方法：选用体外培养的第3代人脐静脉内皮细胞，以100 μg/L浓度的LPS与之共孵育6 h。提取总RNA，运用半定量RT-RCR的方法，对ET-1、eNOS、iNOS mRNA的表达情况进行分析。结果：ET-1的灰度比值分别为：正常对照组0.82，LPS组1.32；eNOS的灰度比值分别为：正常对照组1.20，LPS组0.65；iNOS组的灰度比值分别为：正常对照组0.20，LPS组0.19。结论：低浓度的LPS对人脐静脉内皮细胞ET-1 mRNA的表达有促进作用，对eNOS mRNA的表达有抑制作用，对iNOS mRNA的表达则无显著作用。     

缺血预处理对大鼠小体积供肝一氧化氮合酶的影响及意义

目的:探讨缺血预处理（IPC）对大鼠小体积肝移植术后肝脏组织eNOS和 iNOS mRNA表达的影响及意义。 方法:60只SD大鼠随机分为3组（每组10对）:无热缺血组（NWI）、单纯缺血再灌注组（WI）和缺血预处理组（IPC）。用双袖套法建立大鼠小体积肝移植模型。肝组织eNOS mRNA和iNOS mRNA的表达检测用荧光定量PCR法。 结果:IPC后肝组织eNOS mRNA表达较IPC前高(P<0.05)。供肝再灌注后0.5、1、2及 3 h，各组肝组织eNOS mRNA表达均高于术前(P<0.05)，NWI组和WI组eNOS mRNA表达无显著差异（P>0.05），IPC组eNOS mRNA表达高于其它两组(P<0.05或P<0.01)。各组肝组织iNOS mRNA均在供肝再灌注后1h开始表达，术后 2 h 和 3 h IPC组iNOS mRNA表达低于WI组(P<0.05或P<0.01)，NWI组iNOS mRNA表达又低于IPC组(P<0.05或P<0.01)。 结论:IPC可能通过促进供肝再灌注后早期eNOS mRNA表达和抑制再灌注后晚期iNOS mRNA表达而保护小体积供肝。     

Time-Dependent Alterations of VEGF and Its Signaling Molecules in Acute Lung Injury in a Rat Model of Sepsis

Molecular mechanisms of sepsis-associated acute lung injury (ALI) are poorly defined. Since vascular endothelial growth factor (VEGF) is a potent vascular permeability and mitogenic factor, it might contribute to the development of ALI in sepsis. Thus, using lipopolysaccharide (LPS)-induced (15 mg/kg, intraperitoneal) endotoxemic rat model, we studied the timeline (1, 3, 6, and 10 h) of pulmonary VEGF expression and its signaling machinery. Levels of pulmonary VEGF and its angiogenic-mediating receptor, Flk-1, were downregulated by LPS in a time-dependent manner; levels of plasma VEGF and its permeability-mediating receptor, Flt-1, in contrast, was upregulated with time. In addition, blockade of Flt-1 could improve the downregulated pulmonary VEGF level and attenuate the elevated plasma and pulmonary levels of TNF-α, followed by improvement of arterial oxygenation and wet-to-dry weight ratio of the lung. Expression of signaling, pro- and or apoptotic factors after LPS administration were as follows: phosphorylated Akt, a downstream molecule was downregulated time dependently; endothelial nitric oxide synthase levels were significantly reduced; pro-apoptotic markers caspase 3 and Bax were upregulated whereas levels of Bcl-2 were downregulated. The present findings show that VEGF may play a role through the expression of Flt-1 in LPS-induced ALI. Moreover, downregulation of VEGF signaling cascade may account for LPS-induced apoptosis and impaired physiological angiogenesis in lung tissues, which in turn may contribute to the development of ALI induced by LPS.     

吸烟大鼠一氧化氮合酶和一氧化氮的变化

目的:观察吸烟对大鼠肺组织iNOS、eNOSmRNA和蛋白表达以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中NO的影响, 探讨不同类型的NOS在吸烟所致慢性气道炎症中的作用。方法:选用Wistar大鼠80只随机分为对照组, 被动吸烟组, iNOS抑制剂L-NIL干预组及NOS抑制剂L-NAME干预组。用免疫组化法检测iNOS及eNOS的蛋白表达, 用RT-PCR检测iNOS及eNOSmRNA的表达, 用Griess法测定BALF中的NO^-₂/NO^-₃含量。结果:吸烟大鼠肺组织中iNOSmRNA及其蛋白表达增加, eNOSmRNA及蛋白表达下降, BALF中细胞总数及NO^-₂/NO^-₃显著增加(P＜0.05)。在体实验发现, L-NIL使BALF中细胞总数及NO^-₂/NO^-₃下降(P＜0.05);L-NAME对BALF中细胞总数及NO^-₂/NO^-₃无显著影响(P＞0.05)。结论:吸烟大鼠肺组织iNOSmRNA和蛋白表达增加, eNOSmRNA和蛋白表达减少。活化的iNOS产生大量NO促进炎症发展。     

Galantamine protects against lipopolysaccharide-induced acute lung injury in rats

Lipopolysaccharide (LPS)-induced endotoxemia triggers the secretion of proinflammatory cytokines and can cause acute lung injury (ALI). The high mobility group box 1 (HMGB1) protein plays an important role as a late mediator of sepsis and ALI. Galantamine (GAL) is a central acetylcholinesterase inhibitor that inhibits the expression of HMGB1. This study evaluated the effects of GAL by measuring levels of inflammatory mediators and observing histopathological features associated with LPS-induced ALI. Sixty 8-10 week old male Sprague-Dawley rats (200-240 g) were randomized into three groups as follows: control group, LPS group (7.5 mg/kg LPS), and LPS+GAL group (5 mg/kg GAL before LPS administration). Histopathological examination of lung specimens obtained 12 h after LPS administration was performed to analyze changes in wet-to-dry (W/D) weight ratio, myeloperoxidase (MPO) activity, and HMGB1 expression level. Additionally, plasma concentrations of tumor necrosis factor-α, interleukin-6, and HMGB1 were measured using an enzyme-linked immunosorbent assay at 0 (baseline), 3, 6, 9, and 12 h after LPS administration. Mortality in the three groups was recorded at 72 h. LPS-induced ALI was characterized by distortion of pulmonary architecture and elevation of MPO activity, W/D weight ratio, and levels of pro-inflammatory cytokines, including tumor necrosis factor-α, interleukin-6, and HMGB1. Pretreatment with GAL significantly reduced the LPS-induced lung pathological changes, W/D weight ratio, levels of pro-inflammatory cytokines and MPO activity (ANOVA). Moreover, GAL treatment significantly decreased the mortality rate (ANOVA). In conclusion, we demonstrated that GAL exerted a protective effect on LPS-induced ALI in rats.     

嗜酸性粒细胞通过调节巨噬细胞极化减轻脂多糖诱导的急性肺损伤

目的：观察体外嗜酸性粒细胞（Eos）对巨噬细胞极化的影响,以及体内注射嗜酸性粒细胞对脂多糖（LPS） 诱导的急性肺损伤（ALI）的作用及其相关机制。方法：原代培养小鼠巨噬细胞,在嗜酸性粒细胞存在或不存 在的情况下,将细胞暴露于脂多糖和干扰素-γ（IFN-γ）以模拟ALI,采用荧光定量PCR 检测各组巨噬细胞中促 炎及抗炎因子的表达,采用免疫印迹法检测巨噬细胞过氧化物酶增殖物激活受体γ（PPARγ）蛋白的表达;将 PPARγ siRNA（si-PPARγ）转染小鼠巨噬细胞,采用免疫印迹法检测巨噬细胞的极化情况;Balb/c 小鼠随机分为 对照组、ALI 组和ALI+Eos 组,ALI 组为通过气管内注射LPS 诱导ALI,ALI+Eos 组给予尾静脉注射嗜酸性粒细 胞,对照组尾静脉注射生理盐水。监测动物7 d 的存活情况。在LPS 注射后3 h 和24 h 处死动物,通过组织学评估 左肺损伤程度,荧光定量PCR 检测右肺促炎和抗炎细胞因子mRNA水平,采用免疫印迹法检测右肺组织PPARγ 蛋白的表达,流式细胞术检测肺泡巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和CD206 的百分比。结果：与嗜酸性 粒细胞共培养后,用LPS+IFN-γ 刺激巨噬细胞,其肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素（IL）-6 mRNA水平 呈剂量依赖性下降;而IL-10 mRNA 水平和PPARγ 活性呈剂量依赖性增加。巨噬细胞与嗜酸性粒细胞共培养后, 其iNOS 表达增加和重组人精氨酸酶1（Arg1）表达减少,呈剂量依赖性逆转。转染si-PPARγ 抑制了嗜酸性粒细 胞促进巨噬细胞向M2表型分化的作用。静脉注射嗜酸性粒细胞显著提高了ALI 小鼠的存活率,且显著改善小鼠 的肺组织损伤,降低肺组织IL-6 和TNF-α mRNA水平,增加IL-10 mRNA 水平和PPARγ 活性。此外,嗜酸性粒 细胞干预增加了肺泡巨噬细胞CD206 的百分比,而iNOS 的百分比明显降低。结论：嗜酸性粒细胞通过促进巨噬 细胞M2型极化改善LPS 诱导的ALI。     

CEPO调控新生大鼠缺氧缺血性脑损伤Bcl-2、Bax基因表达的研究

目的 观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）脑组织Bcl-2、Bax基因表达变化及氨基甲酰化促红细胞生成素（CEPO）干预对其表达的影响,探讨CEPO发挥脑保护作用的可能机制.方法 将新生7日龄SD大鼠建立HIBD模型,利用RT-PCR检测缺氧缺血和CEPO干预后2h、12h、24 h、48 h、72 h凋亡基因Bcl-2、Bax的mRNA表达的改变.结果 与假手术组相比,缺氧缺组在2h、12h、24 h、48 h、72 h脑组织中Bcl-2、Bax的表达均增加（P＜0.05）,与缺氧缺血组相比,CEPO干预组在不同时间点Bcl-2表达增加（P＜0.05）,Bax表达下降（P＜0.05）.结论 在新生大鼠HIBD中Bcl-2、Bax mRNA的表达发生改变,调控二者的表达水平可能是CEPO发挥脑保护的作用机制之一.     

Ghrelin 通过AKT/ ERK 信号通路对LPS 诱导的肺泡上皮细胞凋亡的影响

目的:研究Ghrelin 对内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)所致的肺泡域型上皮细胞(A549)凋亡的影响及其机制。方法:CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测LPS 刺激对A549 的细胞毒性;原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;流式细胞术检测细胞内一氧化氮(NO)的产生;Western blot 检测诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、AKT、ERK、p-AKT、p鄄ERK 信号通路蛋白以及cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2 凋亡相关蛋白的表达。结果:CCK-8 检测结果显示LPS 可显著抑制A549 细胞的增殖,降低细胞活力;TUNEL 检测发现Ghrelin 可显著抑制LPS 导致的A549 细胞的凋亡(P<0.05);LPS 可以促进iNOS 的表达,增加细胞内NO 的产生,并同时抑制AKT、ERK 通路的活性,上调下游促凋亡蛋白Bax 以及终末凋亡蛋白cleaved caspase-3 的表达,下调抗凋亡蛋白Bcl-2 的表达,而应用Ghrelin 预处理后可以逆转LPS 对AKT、ERK 通路活性的抑制,继而下调Bax 以及cleaved caspase-3 的表达,上调Bcl-2 的表达,差异均具有统计学意义(P<0.05),但Ghrelin 对细胞内NO 的产生无明显影响。结论:Ghrelin 可以通过上调AKT 及ERK 通路的活性抑制LPS 诱导的肺泡上皮细胞凋亡,但不能降低iNOS 诱导产生NO 的水平。