钙网蛋白在心肌组织细胞氧化应激与缺血损伤构建中的表达与应用

背景：生物体内钙网蛋白具有调节细胞凋亡、应激、心血管炎症反应等多种生理和病理生理过程的功能。 目的：分析钙网蛋白在缺血再灌注损伤中的表达与应用。 方法：由作者检索1996/2010 PubMed数据库与中国知网数据库有关钙网蛋白结构、功能及在自身免疫、心脏发育中的作用、在缺血缺氧过程中表达的变化等方面的文献后,对钙网蛋白在氧化应激与缺血损伤中的表达变化进行了实验观察。 结果与结论：钙网蛋白通过协助蛋白质正确折叠和维持细胞内Ca2+稳态而参与调节细胞凋亡、黏附、类固醇敏感基因表达等,在心脏发生、发育和病理变化中发挥着重要作用。作者应用大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,通过酶联免疫吸附试验、免疫组织化学及RT-PCR 3种不同的检测方法,观察了钙网蛋白在心肌缺血再灌注损伤中的表达,结果显示缺血再灌注损伤诱导钙网蛋白高表达,进而激活内质网凋亡信号途径,诱导细胞损伤,加重心肌损伤。     

细胞外钙受体及其在心血管系统中的作用

细胞外钙受体也称为钙敏感受体 (extracellular calcium sensing receptor,CaR),对调节机体细胞外钙的平衡发挥着重要作用。该受体不仅分布在甲状旁腺、骨、肾、肠这些与钙转移和钙稳态调节有关的器官,还广泛分布于许多其他与钙的稳定无关的组织细胞中,并通过PLC,PIK和MAPK等细胞内信号转导途经起着除钙稳态调节以外重要的细胞内作用,如保护细胞抗凋亡、细胞增殖等生物学作用,在心血管系统中,CaR也有重要的生理病理作用,本文综述了近些年关于CaR的结构、功能和信号转导及它在心血管系统中的作用。     

钙粘附蛋白及其在骨组织形成中的研究进展

钙粘附蛋白(cadherin)是一类钙离子依赖性介导嗜同性细胞-细胞间粘附的跨膜糖蛋白,根据其分子结构可分为4类经典钙粘附蛋白、桥粒钙粘附蛋白、原钙粘附蛋白和钙粘附蛋白相关蛋白.钙粘附蛋白在胚胎发育、组织形成、肿瘤浸润转移及细胞信号转导等方面具有多种生物学功能.本文着重其在骨组织形成中的作用以及研究进展作一简要综述.     

钙粘着蛋白结构与功能研究进展

钙粘着蛋白家族,根据其序列特征,可分为4类:经典的钙粘着蛋白、桥粒钙粘着蛋白、原钙粘着蛋白和其它钙粘着蛋白相关蛋白.钙粘附蛋白通过与胞内结构蛋白相互作用,从而调节和控制细胞的活动.此外,钙粘附蛋白在细胞粘连之外可能也发挥了重要作用,并涉及了胚胎发育以及病理过程中细胞信号传导.     

钙结合蛋白Parvalbumin(小白蛋白)及其在中枢神经系统中的分布

<正> 钙离子具有多种生理作用。诸如肌肉兴奋—收缩偶联、糖原代谢、神经冲动传递、递质释放以及细胞分裂等各种生物学过程莫不依赖钙离子参与。钙离子与环磷酸腺苷一样被称为第二信使,它的作用是通过细胞内具有钙离子亲合力的钙结合蛋白来实现的,钙结合蛋白与钙离子的结合可将钙离子所携带的生物信息转化为生物效应,如肌钙蛋白C与钙离子结合后引起肌肉收缩,人们较为熟悉的钙调蛋白具有广泛的生物学意义,它与钙离子结合后可     

钙网蛋白的生物学功能及其与自身免疫疾病的关系

钙网蛋白(Calreticulin,CRT)最初被认为是内质网Ca2+结合蛋白,近年研究发现在细胞外也有表达,具有多种生物学功能,包括蛋白加工、细胞内钙调节、抗原递呈等。抗CRT抗体在多种自身免疫性疾病患者血清中存在,CRT可能是自身免疫性疾病致病因素之一。本文对CRT的生物学功能和它与自身免疫性疾病的关系作一综述。     

CGRP在实验性糖尿病大鼠C细胞表达的研究

糖尿病的主要病理生理变化是胰岛索缺乏，同时伴有其它多种内分泌紊乱和细胞因子表达异常。这些异常与糖尿病多种并发症有密切联系。降钙索基因相关肽(CGRP)由甲状腺滤泡旁细胞(C细胞)产生，主要对心血管系统和钙代谢具有调节作用，它可能与糖尿病时心血管系统并发症和钙代谢异常有关。     

钙网蛋白的生物学功能及其与自身免疫疾病的关系

钙网蛋白(Calreticulin，CRT)最初被认为是内质网Ca^2 结合蛋白，近年研究发现在细胞外也有表达，具有多种生物学功能，包括蛋白加工、细胞内钙调节、抗原递呈等。抗CRT抗体在多种自身免疫性疾病患者血清中存在，CRT可能是自身免疫性疾病致病因素之一。本文对CRT的生物学功能和它与自身免疫性疾病的关系作一综述。     

不同浓度钙卫蛋白对滋养细胞凋亡的影响

目的 研究不同浓度钙卫蛋白在滋养细胞凋亡过程中的影响,进而分析其在妊娠高血压疾病发病机理中的作用。方法 应用MTT法测定滴加钙卫蛋白后滋养细胞的吸光度值,以表达增殖活性,观察滋养细胞在透射电镜下形态结构的改变。结果 24 h和48 h的钙卫蛋白分别作用后,滋养细胞增殖活性随钙卫蛋白浓度增加而降低（r=-0.735;-0.750,P<0.01）。通过透射电镜观察,滋养细胞经钙卫蛋白处理后呈凋亡特征。结论 钙卫蛋白对滋养细胞有诱导凋亡作用,且凋亡率随药物浓度增加而升高。     

钙网织蛋白与肿瘤

钙网蛋白是一种多功能的内质网Ca2+结合蛋白,是未折叠蛋白反应的关键分子,参与调节钙平衡、蛋白质的折叠和加工、抗原提呈、细胞分化与凋亡等多种生物学功能。近年的研究表明,钙网蛋白在多种肿瘤中特异性表达,与肿瘤的发生、发展、诊断、预后以及治疗密切相关。本文对钙网蛋白与肿瘤关系的研究进展作一综述。     

海人藻酸致SD大鼠小脑损害机理及脑微灌流研究

目的:研究海人藻酸(KA)对损伤小脑组织局部细胞外液Ca~(2 )的影响。方法:采用鼠脑立体定位仪,微量注射KA损毁SD大鼠双侧小脑顶核,制备SD大鼠小脑共济失调模型;用脑微灌流技术检测损伤前后小脑组织细胞外液Ca~(2 )浓度。结果:病理学证实,KA注射部位的神经元大部分坏死、脱失,出现明显的神经变性损害;KA致小脑损伤后其局部组织细胞外液Ca~(2 )浓度立即下降。结论:SD大鼠小脑微量注射KA 1ul即可导致以神经元退变为主的病理学损害,证实了作为谷氨酸受体激动剂的KA是通过电压依赖性Ca~(2 )通道,使Ca~(2 )流入细胞内引起细胞内Ca~(2 )超载,导致大鼠小脑神经元的损害。     

慢性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞胞内钙的影响及其机制研究

目的:研究慢性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)胞内钙浓度(［Ca²⁺］_i)的影响及L-型钙通道和胞内钙库的作用,为缺氧性肺动脉高压(HPH)发病机制的进一步研究提供理论依据。 方法:复制大鼠缺氧性肺动脉高压动物模型，利用Fura－2/AM钙离子成像方法测定PASMCs在不同钙离子浓度细胞外液及L-型钙通道阻滞剂nifedipine和IP3R钙通道抑制剂肝素干预前后 ［Ca²⁺］_i变化。 结果:(1)缺氧＋含钙外液组PASMCs ［Ca²⁺］_i 显著高于对照＋含钙外液组（P<0.05）。缺氧＋含钙外液组PASMCs ［Ca²⁺］_i显著高于缺氧＋无钙外液组（P<0.05）。(2)缺氧nifedipine组PASMCs［Ca²⁺］_i在加药前后无显著差异（P>0.05）。（3）缺氧未干预组与缺氧肝素组PASMCs ［Ca²⁺］_i无明显差异（P>0.05）。 结论:慢性缺氧可使PASMCs的［Ca²⁺］_i增加。慢性缺氧引起［Ca²⁺］_i增加可能与细胞外钙内流有关，L-型钙通道和IP3R钙通道在调节［Ca²⁺］_i的过程中可能不独立发挥作用。     

Ca2+与内质网途径的细胞凋亡

细胞Ca2+稳态的维持主要是通过内质网进行的，Ca2+在细胞内的活动多与内质网有关，胞内\[Ca2+\]的变化可以引起内质网应激，而过度的内质网应激则会导致细胞的凋亡。由于内质网和线粒体在细胞内空间结构上的接近，内质网释放的Ca2+又会引起线粒体途径的凋亡。一些内质网相关的因素也参与Ca2+所引起的细胞内质网途径的凋亡。     

心血管组织钙化时内源性硫化氢系统下调

目的：观察心血管组织钙化时内源性硫化氢生成系统(CSE/H2S)的变化，以探讨内源性硫化氢在心血管组织钙化中的作用及血管钙化的细胞分子机制。方法：在维生素D3 (Vit D3)和尼古丁(nicotine)诱导大鼠血管钙化模型上，测定钙含量、［45Ca2+］沉积及碱性磷酸酶（ALP）活性判断心血管钙化程度,采用生化法测定血浆、心肌组织和主动脉H2S含量及CSE活性，半定量RT-PCR方法测定心血管组织CSE mRNA水平。结果：钙化组大鼠心肌组织钙含量较对照组高3.8倍,主动脉钙含量、［45Ca2+］ 沉积及ALP 活性分别较对照组高6.8倍、1.4倍和 1.9倍（P＜0.01）；钙化组大鼠血浆H2S含量较对照组低39%（P<0.01），心肌和主动脉组织的 H2S含量也分别较对照组低39%和31%，CSE mRNA表达也分别低28％和36％（P<0.01），CSE活性分别低56%和53%(P<0.01)。结论：钙化心血管组织CSE/H2S通路受抑制，内源性H2S生成减少。     

PAR-1对动员肺巨细胞癌PLA801D/PLA801C细胞内Ca~(2+)的作用

目的 通过研究PAR-1对肺巨细胞癌细胞高、低转移细胞株PLA801D和PLA801C[Ca~(2+)]I的影响,探讨PAR-1参与调节肺癌细胞转移相关功能的分子机制.方法 激光共聚焦显微镜检测PLA801D和PLA801C细胞[Ca~(2+)]I;将反义和正义PAR-1分别转染至PLA801D(D-)和PLA801C(C+)中;用thrombin和TRAP激活PAR-1,观察PAR-1对D-和C+的[Ca~(2+)]I影响.结果 PLA801D(荧光强度59.55,下同)和PLA801C(35.46)细胞之间的平均[Ca~(2+)]I差异有统计学意义(P<0.01).C+的[Ca~(2+)]I(45.77)明显高于其对照组CV(35.46,P<0.05),D-的[Ca~(2+)]I(48.42)明显低于对照组DV(59.55,P<0.05).C+和CV的[Ca~(2+)]I分别在加入thrombin 80 s和100 s后荧光强度分别达峰值48.19±9.84和45.64±9.87(P<0.05);二者均在加入TRAP60 s后达峰值,分别为111.31±25.00和52.93±11.21(P<0.05).D-和DV的[Ca~(2+)]I在加入thrombin 60 s后达峰值,分别为40.71±5.89和61.07±21.36(P<0.05),二者均在加入TRAP 40 s后达峰值,分别为84.98±11.23和102.58±21.48(P<0.05).结论 PLA801D和PLA801C的转移潜能可能与其细胞的[Ca~(2+)]I有关.激活PAR-1能够上调PLA801D和PLA801C的细胞内Ca~(2+)信号.PAR-1促进肺巨细胞癌转移的机制与上调细胞内Ca~(2+)有关.     

植物雌激素α-ZAL和17βE_2对大鼠单个心室肌细胞缩舒功能和胞内钙瞬时变化的影响

目的:比较植物雌激素α-ZAL和17βE2对大鼠心肌细胞缩舒和胞内钙瞬变的影响。方法:从成年雌性大鼠心脏分离单个心肌细胞,应用美国Ionoptix视频跟踪计算机图像分析系统在0.5Hz的电刺激下测定离体单个心肌细胞的收缩参数,其中包括最大收缩幅度(PS)、最大收缩幅度时间(TPS)、90%舒张幅度时间(TR90)和最大收缩速率(+dL/dttmax)及最大舒张速率(-dL/dttmax);同时用Fura2/AM钙荧光指示剂测定胞内钙浓度的变化。结果:10-9~10-5mol/L17βE2能使PS产生浓度依赖性的增加,最大增加35%,高浓度的17βE2对TPS有显著影响(P<0.05),能够使ΔFFI最大增加25%;而10-9~10-5mol/Lα-ZAL无论是心肌细胞缩舒功能还是胞内钙含量均无明显变化。且α-ZAL和17βE2对心室肌细胞静息状态下胞内钙浓度和胞内钙的荧光衰减率均无显著影响。结论:α-ZAL对心室肌细胞的作用与17βE2有很大不同,17βE2对心肌细胞缩舒有直接刺激作用,增强心肌收缩可能是通过胞内钙释放与胞外钙内流所介导;而α-ZAL无这种作用,它可能是通过抑制胞外钙内流和其抗氧化反应达到保护心室肌细胞的作用。     

体外循环红细胞变形能力与红细胞钙的关系

体外循环红细胞变形能力与红细胞钙的关系王涛＊王葵亮＊王静洁＊张善通＊由于Ｃａ２＋是维持细胞功能与结构完整的重要物质，因而具有广泛的生物学活性，在维持生物膜的稳定性、能量代谢中起着重要的作用。红细胞与其它组织细胞一样，具有完整的钙运转系统。而红细胞变形...     

甲状腺功能减退对新生仔鼠心肌肌浆网钙转运蛋白表达的影响

目的: 探讨甲状腺功能减退(甲减)对新生仔鼠心肌肌浆网钙转运蛋白肌浆网Ca²⁺-ATP酶(SERCA2a)、磷酸受纳蛋白(PLB) mRNA表达以及肌浆网Ca²⁺-ATP酶活性的影响,并观察左旋甲状腺素(L-T₄)替代治疗后以上指标的改变。方法: SD孕鼠自孕15 d起每天予丙基硫氧嘧啶(PTU)(50mg/d)灌胃至仔鼠出生并持续整个哺乳期,制成围生期甲减模型,并对部分甲减仔鼠自出生当天起每天腹腔注射L-T₄(20 μg /kg)。收集甲减、治疗及对照组出生3、5、7日龄的仔鼠心室肌组织(每组10只),应用实时荧光定量PCR方法检测SERCA2a及PLB mRNA含量,并同时采用荧光分光光度计法测定心肌细胞内游离钙(MyoCa²⁺)浓度,无机磷酸根法检测心肌肌浆网钙泵活性。结果: 实时荧光定量PCR结果显示甲减组新生仔鼠心肌SERCA2a mRNA水平下降(P<0.05),PLB mRNA水平升高(P<0.01),SERCA2a/PLB下降(P<0.01);L-T₄治疗组仔鼠SERCA2a mRNA水平较甲减组上升(P<0.05),PLB mRNA水平下降(P<0.05),SERCA2a/PLB上升(P<0.01)。心肌细胞内游离钙浓度检测结果显示甲减组心肌细胞MyoCa²⁺浓度较同日龄对照组升高(P<0.01);L-T₄治疗组仔鼠心肌细胞MyoCa²⁺浓度低于同日龄甲减组仔鼠(P<0.05)。酶活性检测结果显示甲减组仔鼠肌浆网Ca²⁺-ATP酶活性低于同日龄对照组(P<0.01);L-T₄治疗组仔鼠肌浆网Ca²⁺-ATP酶活性较同日龄甲减组仔鼠升高(P<0.05)。结论: 甲状腺激素缺乏可使新生大鼠肌浆网Ca²⁺-ATP酶活性降低,并下调SERCA2a表达,上调PLB表达;肌浆网钙转运蛋白SERCA2a与PLB参与调控围生期甲减诱发的新生仔鼠心功能下降。     

细胞胞浆Ca2+浓度的时-频分析及ELF脉冲电磁波产生的生物学窗效应

本研究以实验为基础，对细胞胞浆Ca^2＋浓度进行时-频分析，进而研究ELF脉冲电磁波在细胞胞浆Ca^2＋浓度时-频域内产生的生物学效应和生物学窗效应。结果表明：细胞胞浆Ca^2＋浓度在时-频域内有其固有的频谱特征，其中包括连续谱和离散谱。有的参数的电磁波可在细胞胞浆Ca^2＋浓度的时-频域内产生生物学效应而有的参数的电磁波却不能。若能够产生生物学效应，则有两个特征：一是使胞浆Ca^2＋浓度在时-频域内的连续谱变窄，具体表现为连续谱中的高能谱分量被抑制；二是使离散谱的分布和离散谱的频率发生了变化。同时，能够在细胞胞浆Ca^2＋浓度的时-频域内产生生物学效应的电磁波脉冲频率和脉冲强度是离散的和间隔的，这意味着，ELF脉冲电磁波能够在细胞胞浆Ca^2＋浓度的时-频域内产生生物学窗效应。本研究使用的脉冲频率范围内有两个频率窗，它们是16Hz和45Hz；使用的脉冲强度范围内有一个强度窗，是53V／m。     

钙离子浓度变化对大鼠缺血心室致颤阈值的影响及其与cAMP、cGMP及ATP的关系

本文目的是观察不同钙离子浓度([Ca~(2 )])对急性局部缺血大鼠心脏室颤阈(VFT)的影响及其与心肌cAMP、cGMP和ATP含量变化的关系。结果表明,[Ca~(2 )]与缺血心脏VFT下降幅度呈正相关(r=0.7998,p<0.05);而[Ca~(2 )]与缺血心肌cAMP/cGMP比值、ATP含量则呈负相关(分别r=-0.887、r=-0.864,均p<0.05);缺血心脏VFT下降幅度与cAMP/cGMP比值亦呈显著负相关(r=-0.992,p<0.01),提示心肌细胞内游离Ca~(2 )水平可能是缺血心室易颤性(VV)的决定因素;cAMP水平或cAMP/cGMP比值则可能是通过影响Ca~(2 )内流而起作用的间接因素;而ATP贮量对缺血心脏VFT下降可能有一定保护作用。