Toll样受体2和Toll样受体4在免疫应答衣原体感染中的作用

衣原体是重要的人类病原体,其能够导致多种疾病的发生.由衣原体引起的许多人类疾病被认为是免疫病理学介导的.已经证明Toll样受体(TLRs)是多种病原体感染的主要模式识别受体( PRRs),在起始固有免疫应答,建立适应性免疫应答中发挥着重要作用.在TLR家族中,TLR2和TLR4与衣原体感染的相关性研究备受关注,在识别衣原体感染、调节宿主的早期免疫应答、炎症反应和病理形成中执行着关键性的作用.研究TLR2和TLR4在免疫应答衣原体感染中的作用可以更好地理解TLRs介导的分子免疫机制,可能有助于研发免疫治疗的分子靶标,最终有效预防、控制衣原体感染引起的疾病.     

Toll样受体与树突状细胞

Toll样受体(TLR)在介导固有免疫和适应性免疫应答中有重要作用,可以表达于多种免疫细胞,包括树突状细胞(DC).了解Toll样受体的免疫学基础、与DC之间的联系以及其在免疫耐受干预方面的作用很有必要.     

Toll样受体2和Toll样受体4在HBV感染后的免疫作用

Toll样受体（TLR）是启动固有免疫和调节适应性免疫的重要分子,参与肝脏对病毒及细菌的免疫TLR2、TLR4过程。在HBV的慢性化进程中,TLR2、TLR4与Thl和Th2的免疫平衡及调节性T细胞（Treg）的免疫抑制相关,HBV感染后,HBcAg刺激巨噬细胞产生TNF—α的作用需要TLR2参与,HBeAg的表达与否与TLR2的表达状态有关,而TLR4通过诱导iNOS的表达和激发HBV特异性免疫在体内抗HBV过程中起重要作用：     

Toll样受体在适应性免疫中的作用与相关机制研究进展

TLRs是一类模式识别受体，能够被微生物的特异性成分和某些宿主分子所激活，在固有免疫系统中起着决定性的作用。同时大部分病原体通过TLPs激活抗原提呈细胞(主要是树突状细胞)上调其MHC分子表达，启动CD4^ T细胞向Th1型细胞分化。而当机体遭遇多细胞寄生虫感染或接触变应原时，CD4^ T细胞则向1112型细胞分化，这一类免疫反应可能是通过一系列不同于TLRs的固有识别系统进行调控，但究竟是通过目前未知的PRRs还是通过缺失自身标记的机制对病原体进行识别目前还不明了。进一步了解TLRs调节适应性免疫的过程不但能够发展治疗感染性疾病的新途径，而且可能为变态反应和某些自身免疫疾病发病机理深入研究以及治疗和防治提供新方法。     

Toll样受体9与自身免疫性疾病

Toll样受体9(TLR9)可识别细菌和病毒DNA中未甲基化的胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤(CpG DNA)序列,激活固有免疫应答和适应性免疫应答,促进宿主抵抗感染性疾病.近年的研究显示,TLR9活化在自身免疫性疾病发生发展中起重要作用,干预或操控TLR9介导的免疫反应有望成为治疗自身免疫性疾病的新策略.     

Toll样受体2、4对病毒囊膜蛋白的识别

TLR2、4是TLRs家族中重要的成员,通过识别囊膜病毒的PAMPs/DAMPs,活化依赖和非依赖于MyD88的信号通路,诱导促炎性细胞因子和趋化因子等的释放,介导先天性抗病毒免疫反应。本文就TLR2、4的基本概况、结构特征、抗病毒信号通路以及对不同囊膜病毒的天然免疫反应等相关研究进展进行简要综述。     

Toll样受体的研究进展

Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)是近年来备受关注的一种病原体识别受体,它在固有免疫中通过对病原体相关的分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMP)的识别发挥作用,通过刺激信号的级联反应导致细胞因子的产生和协同刺激因子的表达,在天然免疫和获得性免疫中起到了桥梁的作用。鉴于TLR在免疫学,分子生物学以及临床研究中的重要意义,自发现至今,众多相关的研究不断展开。本综述将回顾TLR发现以来主要的研究进展,探讨TLR的临床联系以及展望未来TLR可能的研究方向。     

Toll样受体家族与天然免疫

Toll受体是近年来发现的跨膜信号传递受体蛋白 ,它在哺乳动物、昆虫及植物的信号转导通路中有类似的作用。TL R可选择性识别病原微生物而启动天然免疫 ,因此 ,它在宿主的天然免疫中具有重要作用。本文主要对 TL R家族的研究进展及其在天然免疫中的作用加以综述     

Toll样受体在卵巢癌中作用的研究进展

卵巢恶性肿瘤是病死率最高的妇科疾病,严重威胁女性的健康.固有性免疫系统发挥重要免疫防御作用,作用的关键是对病原体的识别,这一识别主要是通过Toll样受体(TLRs)完成的.TLRs是近年免疫学研究的焦点,其不仅通过对病原微生物的病原相关分子模式的识别激活固有性免疫应答,还引起细胞因子的释放,上调共刺激分子的表达,为适应性免疫的启动提供必要的活化信号.因此,TLRs在很多疾病的发生和进展中起重要作用.阐明TLRs和固有免疫在卵巢恶性肿瘤中的作用可能会为研究者提供一个更好地了解这种疾病的分子机制.此外,利用TLRs的激动剂或拮抗剂有希望成为对抗卵巢恶性肿瘤的新的免疫治疗方法.     

SIGIRR-EGFP真核表达载体构建及在H292细胞中的亚细胞定位研究

目的 通过增强型绿色荧光蛋向示踪技术,观察SIGIRR(single Ig IL,1R-related molecule)在人气道上皮细胞株H292中的分布特点及对上皮细胞天然免疫功能的影响.方法 构建SIGIRR-EGFP融和蛋白的真核表达载体,运用脂质体转染的方法转染人气道上皮细胞株H292,再利用激光共聚焦显微镜对其进行亚细胞定位研究.经LPS刺激后,ELISA检测转染前 后上皮细胞TNF-α分泌水平的差异.结果 构建的融和蛋白表达载体SIGIRR-EGFP经EooR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后,电泳显 示其条带大小为4.7 kh和1.23 kb左右,经测序证实SIGIRR的序列与GenBank公布的人cDNA序列完全一致.激光共聚焦显示pEGFP-N1空载体转染表达的绿色荧光蛋白在H292细胞中均匀分布,而重组载体SIGIRR-ECFP表达的融和蛋白在H292细胞核周(膜)和细胞膜边缘上有连续分布现象.经LPS刺激后,pEGFP-N1转染的细胞和未转染细胞TNF-α水平无显著性差异(P＞0.05),而SIGIRR-EGFP转染细胞与pEGFP-N1转染细胞相比,显著降低了TNF-α的产生(P＜0.01).结论 成功构建了SI-GIRR-EGFP融和蛋白的真核表达载体,并利用绿色荧光蛋白标记的方法显示了SIGIRR分子在H292细胞中细胞膜分布.过表达的SIGIRR降低了上皮细胞IPS诱导的炎症因子TNF-α产生.     

Pathological role of Toll-like receptor signaling in cerebral malaria

Toll-like receptors (TLRs) recognize malaria parasites or their metabolites; however, their physiological roles in malaria infection in vivo are not fully understood. Here, we show that myeloid differentiation primary response gene 88 (MyD88)-dependent TLR signaling mediates brain pathogenesis of severe malaria infection, namely cerebral malaria (CM). A significant number of MyD88-, but not TIR domain containing adaptor-inducing IFN-beta (TRIF)-deficient or wild-type (WT) mice survived CM caused by Plasmodium berghei ANKA (PbA) infection. Although systemic parasitemia was comparable, sequestration of parasite and hemozoin load in the brain blood vessels was significantly lower in MyD88-deficient mice compared with those in TRIF-deficient or WT mice. Moreover, brain-specific pathological changes were associated with MyD88-dependent infiltration of CD8+, CCR5+ T cells and CD11c+ dendritic cells, including CD11c+, NK1.1+ and B220+ cells, and up-regulation of genes such as Granzyme B, Lipocalin 2, Ccl3 and Ccr5. Further studies using mice lacking various TLRs suggest that TLR2 and TLR9, but not TLR4, 5 and 7, were involved in CM. These results strongly suggest that TLR2- and/or TLR9-mediated, MyD88-dependent brain pathogenesis may play a critical role in CM, the lethal complication during PbA infection.     

Toll样受体信号通路中MyD88的研究进展

MyD88是Toll样受体信号通路中的重要转导蛋白,其依赖的信号通路以及调控的基因产物在固有免疫和适应性免疫中均发挥着关键作用。本文对MyD88及其依赖的信号通路做一简要综述,以期为临床预防和治疗疾病提供新的思路和方法。     

Contribution of Toll-like receptor signaling to germinal center antibody responses

Toll-like receptors (TLRs) have emerged as one of the most important families of innate immune receptors for initiating inflammation and also for promoting adaptive immune responses. Recent studies have examined the ability of TLRs to promote antibody responses, including T-cell-dependent antibody responses. Initial study suggested that TLR stimulation promotes primarily an extrafollicular antibody response, which rapidly produces moderate affinity antibodies made by short-lived plasma cells. Recent studies, however, have shown that TLRs can also enhance the germinal center response, which produces high affinity class-switched antibody made by long-lived plasma cells. TLR stimulation can increase the magnitude of the latter response and also enhance selection for high affinity IgG. This review summarizes recent advances in understanding the roles of TLRs in B cells and also in other cell types for enhancement of antibody responses, with an emphasis on T-cell-dependent and germinal center antibody responses.     

MyD88-铜绿假单胞菌表位核酸疫苗的构建及其真核表达

目的:构建重组MyD88基因的铜绿假单胞菌(PA)表位核酸疫苗,并研究其在真核细胞中的表达.方法:将PA的OprF的三个中和性B细胞表位及一个外源通用T细胞表位串联,表位之间用赖氨酸间隔,采用重叠PCR方法合成全基因,并在此序列前插入组织纤溶酶原激活物(tPA)的信号肽基因,将获得的片段与MyD88基因分别克隆到pIRES载体的两个多克隆位点,构建真核双表达重组质粒pIRES-tPA-OprF-MyD88.电穿孔法将pIRES-tPA-OprF-MyD88转入COS-7细胞,通过Western blot检测其细胞上清tPA-OprF蛋白及细胞内MyD88蛋白的表达.结果:构建的真核表达质粒pIRES-tPA-OprF-MyD88,经电转COS-7细胞后,在其培养的上清液及细胞内检测到目的蛋白.结论:成功构建pIRES-tPA-OprF-MyD88表达载体,并在转染的真核细胞中得以有效地表达,为研究PA预防性疫苗奠定了实验基础.     

Inflammation, cancer and chemoresistance: taking advantage of the toll-like receptor signaling pathway

The association between chronic inflammation and cancer has long been observed. Furthermore, NF- κ B activation and the subsequent production of cytokines, chemokines, growth factors, and antiapoptotic proteins has been found to be involved in cancer progression and chemoresistance. However, the signals inducing NF- κ B in cancer cells are still not well understood. Here, we reviewed the association between chronic inflammation and cancer, the role of NF- κ B and its inhibitors as potential anticancer drugs, and Toll-like receptors as possible signal initiators for NF- κ B activation and inflammation-induced carcinogenesis and chemoresistance. Furthermore, we propose that, the stimulation of Toll-like receptors by microbial components and/or endogenous ligands may represent the initial signal promoting a proinflammatory environment that will enhance tumor growth and chemoresistance.     

RNA干扰抑制MyD88表达对小鼠骨髓树突状细胞生物学活性的影响

目的:采用RNA干扰技术抑制小鼠骨髓树突状细胞(DC)髓样分化因子88(MyD88)的表达,并检测其对细胞生物学活性的影响,为DC的临床应用奠定基础。方法:针对MyD88基因,采用化学合成法合成3对MyD88 siRNA(序列1、序列2及序列3),并转染DC2.4细胞。采用半定量RT-PCR及Western blot分别从mRNA和蛋白质水平检测DCMyD88的表达情况,筛选其中一对高效RNA(序列3)转染DC2.4细胞(RNA干扰组),以未转染RNA的DC2.4细胞作为对照组,分别给予1 mg/L的脂多糖(LPS)刺激。流式细胞术(FCM)检测DC细胞表面CD80、CD86及MHC-Ⅱ分子的变化,ELISA法检测DC分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-12(IL-12)的浓度,免疫细胞化学检测DC核因子-κB(NF-κB)的表达,混合淋巴细胞培养检测T细胞增殖能力,观察RNA干扰对LPS促DC成熟的影响。结果:与空白对照组相比,序列2组及序列3组DC的mRNA和蛋白质表达分别降低90%和85%、92%和88%,差异有统计学意义;脂质体对照组、无义siRNA对照组及序列1组DC的mRNA和蛋白质表达无显著差异。经LPS刺激后,与对照组相比,RNA干扰组CD80、CD86及MHC-Ⅱ分子的表达,TNF-α、IFN-γ及IL-12的浓度及T细胞增殖能力均显著下降,且未见明显NF-κB核转位。结论:RNA干扰技术能显著下调小鼠DC MyD88的表达,并显著抑制LPS促DC成熟的效应,为以DC MyD88为靶向、相关疾病的基因治疗提供了新思路和手段。     

黄芩苷对结核分枝杆菌作用下TLR2-MyD88信号通路的影响

目的:观察黄芩苷是否存在对TLR2和MyD88的调节,以探寻其抗结核的可能作用机制。方法:取黄芩苷单体作用于感染结核杆菌的U937单核巨噬细胞,分别采用RT-QPCR、Western blot和FCM方法检测用药前后TLR2和MyD88的表达。结果:与对照组相比,模型组TLR2及MyD88表达均显著降低(P<0.05);而与模型组相比,黄芩苷组TLR2及MyD88 mRNA表达则显著增高(P<0.05),TLR2蛋白表达亦显著增高(P<0.05)。结论:黄芩苷具有上调TLR2和MyD88的作用,从而为黄芩苷抗结核机制的揭示提供了依据。