乐肝复方合剂对体外培养大鼠肝细胞的保护作用

[目的]探讨乐肝复方合剂对四氯化碳损伤体外培养大鼠肝细胞的保护作用.[方法]体外培养大鼠肝细胞,用四氯化碳处理制作肝细胞损伤模型,观察乐肝复方合剂对损伤肝细胞内琥珀酸脱氢酶(SDH)、酸性磷酸酶(ACPase)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性及糖原含量的影响.[结果]乐肝复方合剂可显著提高损伤肝细胞内SDH,G-6-Pase活性,提高糖原含量,抑制ACPase活性.[结论]乐肝复方合剂对四氯化碳损伤体外培养大鼠肝细胞具有保护作用.     

熊胆对四氯化碳所致培养肝细胞损伤的影响

用酶组织化学法探讨了熊胆对四氯化碳所致培养肝细胞损伤的保护及其药理作用。将Wistar系大鼠肝细胞体外培养4～5d,取生长良好的培养瓶分为正常组、损伤组、实验组、SOD组,在各组培养瓶中取肝细胞生长盖玻片,显示SDH,G-6-pase,ANAE,ACP等酶活性。结果,正常组肝细胞SDH,G-6-pase,ANAE,ACP活性均阳性;损伤组肝细胞SDH,G-6-pase,ANAE活性明显降低,而ACP活性明显增强;实验组和SOD组肝细胞SDH,G-6-pase,ANAE,ACP活性基本相似,接近于正常水平,可见熊胆对损伤肝细胞具有良好的保护作用。     

TNF-α对亚低温条件下大鼠肝细胞糖代谢的影响

目的 探讨TNF-α对亚低温条件下大鼠原代肝细胞糖代谢的影响及其机制.方法 培养SD大鼠原代肝细胞6天,分别在不同浓度TNF-α及不同温度下培养8 h,观测培养肝细胞中葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性及细胞培养液中葡萄糖浓度的变化.结果 在较低浓度TNF-α时G-6-Pase的活性降低,在较高浓度TNF-α时G-6-Pase的活性升高.亚低温组与常温组两组间G-6-Pase的活性变化无明显差异.亚低温组与常温组间葡萄糖的浓度仅在较高浓度TNF-α时有差异.结论 TNF-α对培养原代肝细胞的糖代谢有影响,在TNF-α浓度较高时温度对培养原代肝细胞糖的代谢有影响.     

花生四烯酸对高脂饮食大鼠全身胰岛素抵抗及肝糖输出影响的研究

目的 观察花生四烯酸对大鼠全身胰岛素抵抗及肝糖输出紊乱的预防作用.方法 将230～250 g24只雄性Wistar大鼠随机分为3组:正常组(8例),高脂组(8例),高脂+花生四烯酸组即预防组(8例).饲养12周.饲养至第12周实验终点时进行口服葡萄糖耐受实验.断头处死各组处于空腹状态下的大鼠,取肝脏,蒽酮法测定肝糖原含量,并用RT-PCR法检测磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)及糖原合酶(GS)mRNA水平.结果 高脂组与正常对照组比较,肝糖原含量(P<0.01)、葡萄糖-胰岛素指数显著升高(P<0.01),但基础状态下体重差异无显著性.预防组和高脂组比较,肝糖原含量(P<0.05)、葡萄糖-胰岛素指数(P<0.01)显著降低,但与正常对照组比较,肝糖原舍量(P<0.01)、葡萄糖-胰岛素指数(P<0.01)显著升高.高脂组与正常对照组比较,G-6-Pase mRNA水平显著升高(P<0.01),PEPCKmRNA水平略有升高,但差异无显著性.预防组和高脂组比较,PEPCK mPNA水平(P<0.05)、G-6-PasemRNA水平显著降低(P<0.01),但3组大鼠GS mRNA差异没有显著性.结论 花生四烯酸预防高脂诱导的全身胰岛素抵抗和肝糖输出紊乱作用明显,但不彻底.相关的PEPCK、G-6-Pase mRNA水平显著降低,但GS mRNA水平没有显著性差异.     

丹参与三七对四氯化碳致大鼠急性肝损伤的保护作用

目的　观察丹参与三七配伍对四氯化碳 (CCl4 )化学性急性肝损伤的保护作用。方法　建立CCl4 致大鼠急性肝损伤模型 ,设丹参与三七配伍大、中、小剂量组和正常对照组及模型对照组 ,通过测定各组动物血清谷丙转氨酶 (ALT)、山梨醇脱氢酶(SDH)活性及肝糖原、肝脏系数和观察肝脏组织病理学变化 ,以评价肝脏损伤程度和药物的保护作用。结果　丹参与三七配伍治疗后 ,各剂量组大鼠血清ALT、SDH活性及肝脏系数均降低 (P <0 .0 1) ,肝糖原合成增加 (P <0 .0 1) ,肝脏组织病理损伤得到明显改善 ,且呈明显的量效关系。结论　丹参与三七配伍对损伤肝组织的修复 ,肝细胞再生显示良好的治疗作用     

糖尿病新型分子靶点葡萄糖-6-磷酸酶活性的检测及应用

目的:研究利用葡萄糖脱氢酶偶联反应测定葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的活性,并推荐其作为一种常用的实验室检测方法。方法:以胶原酶原位灌注消化的方法分离大鼠肝细胞,用含10?S的1640培养液进行原代培养。待细胞贴壁后分别换用新鲜的含葡萄糖和不同浓度栎精的培养液培养16 h,随后利用葡萄糖脱氢酶偶联反应测定酶的活性。结果:各组G-6-Pase的活性不全相同,其差别具有统计学意义(F=114.423,P<0.05);高糖组与对照组相比较,G-6-Pase的活性明显增加(P<0.05);不同浓度栎精组G-6-Pase的活性下降,均低于高糖组(P<0.05),但其组间差异无统计学意义(P>0.05),没有呈现出剂量依赖性变化。结论:利用葡萄糖脱氢酶偶联反应测定葡萄糖-6-磷酸酶活性,是目前值得推崇的一个检测速度较快、结果较稳定的方法。此外,栎精能够有效逆转高糖诱导的G-6-Pase活性增加,利用它对于G-6-Pase活性的干预作用可能改善糖尿患者的高血糖状态。     

南水北调东线工程能否使血吸虫病疫区北移的研究——Ⅱ 山东受水区钉螺生殖腺组织和酶组织化学观察

目的 了解放养在山东济宁的钉螺睾丸卵巢组织化学及酶组织化学变化情况。方法 采用组织化学及酶组织化学方法，检测钉螺生殖腺组织中细胞色素氧化酶(CCO)、乳酸脱氢酶(LDH)、5’-核苷酸酶(5’-NT)、萄葡糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)和琥珀酸脱氢酶(SDH)。结果 北移钉螺睾丸卵巢的糖原、DNA和组蛋白含量减少；CCO、5-NT、LDH和G-6-Pase活性降低；睾丸内SDH活性增高。结论 北移钉螺睾丸卵巢代谢异常是导致生殖功能减退的重要因素。     

悦肝胶囊对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

[目的 ]探讨悦肝胶囊对酒精性肝损伤小鼠肝脏的保护作用 .[方法 ]采用酒精诱导方法制备小鼠肝细胞损伤模型 ,观察悦肝胶囊对其肝细胞形态结构和琥珀酸脱氢酶、酸性磷酸酶活性的影响 ,同时采用油红O法观察中性脂肪 .[结果 ]悦肝胶囊减轻酒精所致小鼠肝细胞的损伤 ,增强琥珀酸脱氢酶的活性 ,降低酸性磷酸酶的活性 ,减少肝细胞中脂肪滴空泡 .[结论 ]悦肝胶囊对酒精所致小鼠肝细胞的损伤具有保护作用 .     

大鼠心肌细胞葡萄糖—6—磷酸酶活性的超微结构定位

本实验对大鼠心房及心室的心肌细胞葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)活性进行了电镜观察,G-6-Pase反应产物见于肌浆网(SR)和核被膜内。我们发现心肌细胞内G-6-Pase活性呈现异质性分布,周围连接肌浆网(PJ-SR)和内部连接肌浆网(IJ-SR)内的G-6-pase反应产物较多,核被膜内含量较少,而网状肌浆网(N-SR)则含量稀少,或者缺乏。本文对心肌细胞内G-6-Pase的可能功能意义进行了讨论。     

几种胃肠肽对四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的保护作用及其机制

目的　研究表皮生长因子 (EGF)、神经降压素 (NT)、降钙素基因相关肽 (CGRP)对四氯化碳 (CCl4)急性损伤的在体大鼠肝脏和离体培养肝细胞的保护作用 ,并探讨其机制。　方法　第一步建立大鼠 CCl4损伤模型 ,设立对照组、损伤组及各胃肠肽保护组 ,于注射 CCl4前 30 min、前 10 min,后 10 min注射各胃肠肽 ,2 4h后测定血清酶学水平、肝匀浆 SOD活性及 MDA含量 ,观察肝脏形态学变化 ;第二步建立大鼠离体培养肝细胞损伤模型 ,设对照组、损伤组及不同浓度胃肠肽预处理组 (胃肠肽提前 1h加入 ) ,2 4h后测上清液酶学水平、肝细胞内 SOD活性和 MDA含量 ,以台盼蓝染色试验计算肝细胞存活率 ,观察形态学变化 ;第三步以 Fura- 2 / AM和 DPH荧光探针测定肝细胞内游离钙和膜流动性 ,观察对肝细胞有直接保护作用的胃肠肽对这两个指标的影响。　结果　 (1) EGF、NT、CGRP明显降低 CCl4损伤后大鼠血清酶学水平、肝匀浆 MDA含量 ,使 SOD活性回升 (P<0 .0 1) ,改善肝脏病理学变化。(2 ) EGF、NT明显降低原代培养肝细胞 CCl4损伤后上清液酶学水平、MDA含量 ,提高 SOD活性和细胞存活率 (P<0 .0 1) ,改善形态学变化。CGRP对上述指标和形态学改变无明显影响。(3) EGF、NT明显对抗肝细胞 CCl4损伤后胞内 [Ca2 + ]i的增高和膜流动