抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa单克隆抗体对原发性血小板减少性紫癜诊断价值的研究

目的 旨在探讨血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa单克隆抗体（Ⅱb/Ⅲa McAb）检测对原发性血小板减少性紫癜（ITP）的诊断价值。方法 共检测成人慢性ITP114例，应用Ⅱb/Ⅲa McAb(SZ-21 SZ-22)与ITP患者的血小板共同孵育，用吸光度计检测其吸光度值并与正常值相比较（做为结合值），如此值＜0．5为阳性，即判定患者血小板膜上原已结合有抗Ⅱb/Ⅲa的自身抗体。同时用竞争性酶联免疫吸附法检测患者的血小板相关IgG(PA IgG)。以非ITP性血小板减少患者做为对照组。结果 114例成人慢性ITP中，GPⅡb/Ⅲa检测阳性率为49％；非ITP组无1例假阳性。ITP组PAIgG阳性率为64％；非ITP组假阳性率为26．6％。结论 实验证实本检测法特异性好，操作简单技术稳定，对ITP的诊断、疗效观察及发病机理研究具有实用价值。     

血小板无力症的诊治新进展

血小板无力症(Glanzmann thrombasthenia,GT)是由于血小板膜表面整合素αⅡbβ3障碍导致的先天性出血性疾病,由于该病的罕见性,很少临床医生对GT有丰富的经验,治疗仍面临着许多挑战.本文就这几年来GT的临床表现、实验室检查、分子基础和治疗措施的新进展做一综述,期望能帮助临床医生进一步提高对该病的诊...     

抗人血小板单克隆抗体APt4诱导血小板活化机制的研究

抗人血小板单克隆抗体ＡＰｔ＿４可特异的诱导正常人及１例巨大血小板病（ＢＳＳ）患者的血小板聚集，而对２例Ⅰ型血小板无力症（ＧＴ）患者的血小板无致聚作用。ＡＰｔ＿４的Ｆ（ａｂ＇）＿２不能诱导血小板的活化，但能与血小板特异结合并抑制ＡＰｔ＿４的ＩｇＧ，ＡＤＰ，胶原和肾上腺素诱导的血小板聚集。多种血小板抑制物可阻断ＡＰｔ＿４诱导的血小板聚集。免疫试验结果表明Ａｔｐ＿４识别血小板膜表面分子量为１４万和９．７万的糖蛋白。综上所述，ＡＰｔ＿４诱导血小板活化的机制可能与钙离子的存在，能量代谢中ｃＡＭＰ的降低，ＡＤＰ的释放和抗体Ｆｃ段的存在有关。     

CD9单克隆抗体对人血小板膜纤维蛋白原受体调控特征研究

目的　研究两种 Ｃ Ｄ９ 单克隆抗体（ Ｍｃ Ａｂ） Ｈ Ｉ１１７ 和 Ｓ Ｊ９ Ａ４ 对人血小板膜纤维蛋白原受体功能的调控作用及其可能的作用机制。方法　利用１２５ Ｉ标记人纤维蛋白原（ Ｆｇ） ,观察 Ｈ Ｉ１１７ 和 Ｓ Ｊ９ Ａ４作用下血小板 Ｆｇ 特异性结合量,反映血小板膜上 Ｆｇ 受体的暴露情况,并观察无 Ｆｇ 存在条件下,由 Ｈ Ｉ１１７ 和 Ｓ Ｊ９ Ａ４ 诱导的 Ｆｇ 受体暴露后的变化。结果　 Ｈ Ｉ１１７ 和 Ｓ Ｊ９ Ａ４ 均能显著诱导血小板与 Ｆｇ 特异性结合,而在无 Ｆｇ 存在时,两种 Ｍｃ Ａｂ 诱导的 Ｆｇ 受体会很快“关闭”,失去结合 Ｆｇ 的能力;抑制蛋白激酶 Ｃ（ Ｐ Ｋ Ｃ） 活性,应用 Ａｓｐｉｒｉｎ 、 Ａｐｙｒａｓｅ 和（ 或） Ｐ Ｇ Ｉ２ 预处理血小板,能不同程度地抑制 Ｈ Ｉ１１７ 和 Ｓ Ｊ９ Ａ４ 诱导的血小板膜 Ｆｇ 受体暴露。结论　 Ｈ Ｉ１１７ 和 Ｓ Ｊ９ Ａ４ 均能诱发血小板膜 Ｆｇ 受体暴露,两者诱发人血小板 Ｆｇ 受体暴露可能是三条途径综合作用的结果：即二磷酸腺苷释放、血栓烷生成和环磷酸腺苷途径,而 Ｐ Ｋ Ｃ激活可能是三条途径的共同通路。     

血小板膜GPⅡb／Ⅲa活性与缺血性心脑血管疾病

目的：探讨血小板膜GPⅡb／Ⅲa与心脑血管病之间的关系以及GPⅡb／Ⅲa受体拮抗剂在心脑血管病治疗中的地位。资料来源：应用计算机检索Medline1993—01／2005-12关于血小板膜GPⅡb／Ⅲa与心脑血管病关系的文章。检索词“platelet，GPⅡb／Ⅲa，ischemic heart disease，ischmic stroke”，并限定文章的语种类为English。同时利用计算机检索中国期刊全文数据库1994—01／2005-12的相关文章，限定文章语言种类为中文，检索词“血小板，血小板糖蛋白GPⅡb／Ⅲa复合物，冠心病，缺血性脑卒中”。资料选择：对资料进行初审，纳入标准：①血小板膜GPⅡb／Ⅲa活性与血小板激活机制。②血小板膜GPⅡb／Ⅲa活性与心脑血管病相关性。③血小板膜GPⅡb／Ⅲa拮抗剂的作用特点。排除标准：排除重复性研究。资料提炼：共收集到符合上述要求的文献41篇，排除28篇重复性研究。13篇符合纳入标准。其中7篇关于血小板膜GPⅡb／Ⅲa活性与血小板激活机制及与心脑血管病相关性研究，6篇关于血小板膜GPⅡb／Ⅲa拮抗剂作用特点。资料综合：血小板活化在缺血性心、脑血管病的发生、发展中起重要作用，而血小板膜GPⅡb／Ⅲa与纤维蛋白原等黏附蛋白结合，是多种因素引起血小板活化的最终共同通路，因此，血小板GPⅡb／Ⅲa与缺血性心脑血管病密切相关。GPⅡb／Ⅲa受体拮抗剂是一类新的非常有前途的抗血小板药。结论：血小板GPⅡb／Ⅲa与缺血性心脑血管病密切相关。GPⅡb／Ⅲa受体拮抗剂是一类新的非常有前途的抗血小板药。     

血小板膜GPⅡb/Ⅲa活性与缺血性心脑血管疾病

目的:探讨血小板膜GPⅡb/Ⅲa与心脑血管病之间的关系以及GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂在心脑血管病治疗中的地位。资料来源:应用计算机检索Medline1993-01/2005-12关于血小板膜GPⅡb/Ⅲa与心脑血管病关系的文章。检索词“platelet,GPⅡb/Ⅲa,ischemicheartdisease,ischmicstroke”,并限定文章的语种类为English。同时利用计算机检索中国期刊全文数据库1994-01/2005-12的相关文章,限定文章语言种类为中文,检索词“血小板,血小板糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物,冠心病,缺血性脑卒中”。资料选择:对资料进行初审,纳入标准:①血小板膜GPⅡb/Ⅲa活性与血小板激活机制。②血小板膜GPⅡb/Ⅲa活性与心脑血管病相关性。③血小板膜GPⅡb/Ⅲa拮抗剂的作用特点。排除标准:排除重复性研究。资料提炼:共收集到符合上述要求的文献41篇,排除28篇重复性研究。13篇符合纳入标准。其中7篇关于血小板膜GPⅡb/Ⅲa活性与血小板激活机制及与心脑血管病相关性研究,6篇关于血小板膜GPⅡb/Ⅲa拮抗剂作用特点。资料综合:血小板活化在缺血性心、脑血管病的发生、发展中起重要作用,而血小板膜GPⅡb/Ⅲa与纤维蛋白原等黏附蛋白结合,是多种因素引起血小板活化的最终共同通路,因此,血小板GPⅡb/Ⅲa与缺血性心脑血管病密切相关。GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂是一类新的非常有前途的抗血小板药。结论:血小板GPⅡb/Ⅲa与缺血性心脑血管病密切相关。GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂是一类新的非常有前途的抗血小板药。     

血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa的结构及激活机制研究进展

1974年Nurden和Caen发现血小板聚集障碍引起的的血小板无力症主要分子机制是膜缺失GPⅡb／Ⅲa，从而开展了GPⅡb／Ⅲa与血小板聚集的相关性研究，此后一系列的研究证实，     

直接MAIPA对免疫性和非免疫性血小板减少性紫癜的鉴别诊断

目的检测免疫性与非免疫性血小板减少患者血小板膜糖蛋白特异性自身抗体，评价该方法在免疫性和非免疫性血小板减少性紫癜鉴别诊断中的价值。方法应用改良直接单克隆抗体俘获血小板抗原技术(MAIPA)检测血小板膜糖蛋白(GPⅡh／Ⅲa、GP I b和GPI a／Ⅱa)特异性自身抗体。结果免疫性血小板减少患者自身抗体阳性率(76．4％)显著高于非免疫性血小板减少患者(3．6％)(P＜0．05)。直接MAIPA诊断免疫性血小板减少的敏感性为76．4％，特异性为96．4％，阳性预测值为97．1％。GPⅡh／Ⅲa特异性自身抗体阳性的免疫性血小板减少患者血小板计数与自身抗体吸光度比值呈显著负相关(r=-0．338，P＜0．05)。结论直接MAIPA检测血小板膜糖蛋白特异性自身抗体对于鉴别免疫性与非免疫性血小板减少有一定意义。     

GPⅡb/Ⅲa抑制剂抗血小板机理及临床应用进展

GPⅡb/Ⅲa糖蛋白复合物在血小板聚集过程中起关键作用,GPⅡb/Ⅲa抑制剂也逐渐开始应用于血栓性疾病的预防和治疗。本文着重综述GPⅡb/Ⅲa在血小板聚集中的作用及GPⅡb/Ⅲa抑制剂在抗血小板聚集的临床应用。     

血小板相关抗体IgG初筛不能提高单克隆抗体特异性俘获血小板抗原对免疫性血小板减少性紫癜诊断的敏感性

目的评价血小板相关抗体IgG（PAIgG）初筛能否提高单克隆抗体特异性俘获血小板抗原（MAIPA）技术对免疫性血小板减少性紫癜（ITP）诊断的敏感性。方法用酶联免疫吸附竞争法检测PAIgG，改良MAIPA技术检测抗血小板GPⅡb／Ⅲa、GPⅠb／Ⅸ特异性抗体；190例血小板减少症患者同时行PAIgG及MAIPA检测，其中132例为ITP患者；采用Kappa检验进行两种诊断试验的一致性分析。结果单做PAIgG及PAIgG与MAIPA并联诊断ITP的敏感度分别为85．6％和90．2％，较单做MAIPA（53．0％）分别提高32．6％与37．2％；特异度分别为29．3％和24．1％，较单做MAIPA（81．0％）则分别下降51．7％与56．9％；PAIgG与MAIPA串联诊断ITP的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为48．5％、86．2％、88．9％和42．4％，均与单做MAIPA相当。ITP与非免疫性血小板减少症患者PAIgG与MAIPA测定结果之间的Kappa值分别为0．129与0．012，即两种试验对ITP及非免疫性血小板减少症诊断的一致性均较差。结论PAIgG检测不能作为MAIPA的过筛试验。     

血小板特异性抗体对特发性血小板减少性紫癜诊断价值的研究

目的:检测特发性血小板减少性紫癜及非免疫性血小板减少症患者抗血小板特异性抗体与血小板相关抗体,评价其在特发性血小板减少性紫癜中的诊断价值。方法:用流式细胞仪检测血小板相关抗体PAIgG,PAIgA,PAIgM;用改良单克隆抗体特异性俘获血小板抗原技术检测抗血小板膜糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa,GPⅠb/Ⅸ)特异性自身抗体。结果:血小板相关抗体在特发性血小板减少性紫癜组敏感度为80%,在非免疫性血小板减少症组为63.3%。改良单克隆抗体特异性俘获血小板抗原法检测抗GPⅡb/Ⅲa和GPⅠb/Ⅸ抗体,在特发性血小板减少性紫癜组中的敏感度分别为53.3%和30%;在非免疫性血小板减少症组中除1例GPⅠb/Ⅸ阳性外,其余均为阴性;2组检出率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血小板相关抗体敏感度较高,但特异度较低;抗血小板特异性抗体敏感度虽较低,但特异性较高,可鉴别特发性血小板减少性紫癜和非免疫性血小板减少症。可作为特发性血小板减少性紫癜的特异性诊断指标。     

冠状动脉介入术围术期血小板膜糖蛋白表达水平的变化及其临床意义

目的:动态观察急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者介入术前、术后血浆中血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(platelet glycoproteinⅡb/Ⅲa,GPⅡb/Ⅲa)、血小板膜糖蛋白Ⅵ(platelet glycoprotein Ⅵ,GPⅥ)浓度的变化,探讨其临床意义。方法:将94例行冠状动脉造影的患者,根据其临床表现、心电图、血生化检查和冠状动脉造影结果分为肌钙蛋白T(tro-ponin T,TnT)阳性ACS组(TnT+ACS组,n=35)、TnT阴性ACS组(TnT-ACS组,n=38)和冠状动脉正常组(n=21)。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定3组患者在冠状动脉介入术前即刻、术后6 h和术后24 h时间点的GPⅡb/Ⅲa和GPⅥ的浓度。结果:TnT+ACS组与TnT-ACS组和冠状动脉正常组比较,各个时间点的GPⅡb/Ⅲa浓度均显著升高(P<0.05)。TnT-ACS组中术后6 h的GPⅡb/Ⅲa的浓度显著高于术前和术后24 h(P<0.05)。TnT+ACS组术前、术后6 h及术后24 h的GPⅥ浓度均比冠状动脉正常组显著升高(P<0.05)。TnT+ACS组术后6 h及术后24 h的GPⅥ浓度较术前显著升高(P<0.05)。结论:动态检测血浆中GPⅡb/Ⅲa、GPⅥ浓度的变化能反映ACS患者体内血小板的活化情况,GPⅡb/Ⅲa和GPⅥ的检测对冠状动脉介入术后血栓形成的风险评估有一定临床意义。     

血小板膜表面自身抗体表达与大剂量地塞米松治疗ITP疗效的关系

有统计学意义(P<0.05),GPⅠb自身抗体对疗效没有明显影响(P>0.05).结论 血小板膜GPⅡb/Ⅲa特异性自身抗体检测可作为ITP患者口服大剂量地塞米松疗效预测的潜在指标.     

八个遗传性血小板无力症家系基因型和表型分析

目的 对8个遗传性血小板无力症(GT)家系进行血小板膜糖蛋白(GP Ⅱb/Ⅲa)临床特性分析和基因突变检测.方法 采用血小板聚集试验观察血小板对各种诱聚剂的反应,流式细胞术检测血小板表面αⅡb和β3的含量;PCR法对先证者GPⅡb/Ⅲa基因所有外显子及其侧翼序列进行扩增;PCR产物纯化后直接测序,检测其基因突变.对突变位点进行直接测序,以排除基因多态性.结果 8个家系的先证者PLT计数均正常,血小板形态分散,出血时间(BT)延长,凝血象正常;对二磷酸腺苷(ADP)、凝血酶、肾上腺素、胶原、花生四烯酸等多种诱聚剂反应低下,而对瑞斯托霉素反应基本正常;流式细胞仪检测结果显示,除家系2先证者为Ⅲ型GT和家系6先证者为Ⅱ型GT外,其余家系各先证者均为Ⅰ型GT.基因分析共发现12种不同类型的突变,分别为G10A、G1412T、G1199A、1525delC、G2223T、C2671T、2930delG、IVS15(-1)delG、A2334C、C1750T、69-79del和C470A.家系3先证者在GP Ⅱb/Ⅲa基因未检测到突变.结论 GPⅡb/Ⅲa基因突变是导致血小板无力症的主要原因.G10A、69-79del、C470A、G1412T、G2223T、C2671T和1525delC是导致遗传性血小板无力症的新的基因突变位点.     

巨核细胞形态及血小板聚集功能检测在特发性血小板减少性紫癜诊疗中的应用研究

目的研究特发性血小板减少性紫瘕（ITP）患者骨髓象中的巨核细胞数量、分类、形态变化,血小板聚集功能在lTP治疗前后的变化。方法骨髓细胞学计数巨核细胞数量、分类,应用血小板聚集试验。检测20名正常人和24例ITP患者治疗前后的血小板聚集活性。结果TTP患者的巨核细胞数量、分类、形态与正常人之间有明显差异;治疗前后血小板聚集活性有明显差异。结论TTP患者的出血倾向与血小板数量、血小板的聚集功能下降有关,治疗后可以通过改善血小板数量和质量,促进血小板的聚集功能,纠正TTP患者的出血倾向。     

小剂量利妥昔单抗联合环孢素A对难治复发性特发性血小板减少性紫癜的疗效评价

目的 探讨小剂量利妥昔单抗联合环孢素A对难治复发性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者CD20+、血小板计数的影响及安全性评价.方法 选择自贡市第四人民医院2014年1月至2016年1月收治的58例难治复发性ITP患者进行研究,随机分为对照组和观察组,各29例.对照组患者给予地塞米松,观察组患者给予小剂量利妥昔单抗联合...     

血小板TLR4表达在脓毒症血小板减少症发病中的作用

目的 明确脓毒症血小板表达Toll样受体4(TLR4)变化与血小板活化的关系及对预后的影响.方法 前瞻、对照的临床试验设计.选天津市第一中心医院ICU 2008年5月至2009年12月收治的脓毒症患者64例,除外恶性肿瘤、免疫系统疾病、心肺复苏后、终末期肝或肾功能衰竭及入院24 h内死亡等患者.门诊查体健康志愿者15例为对照组,比较健康对照组和脓毒症组入院时和第3,5,9天外周静脉血血小板计数(PC)及参数(MPV,PDW)、血小板TLR4表达、血小板活化膜糖蛋白GPIⅠb/Ⅲa的PAC-1表达、血浆sCD40L及TNF-α浓度变化及关系;脓毒症组中分为血小板减少症即TCP组(至少1次低于150×109 L-1,27例)和非TCP组(37例),比较两组治疗前后(入院时及入院第9天)TLR4,PAC-1,sCD40L和TNF-α及APACHEⅡ评分、ICU住院时间、出血发生率以及28 d死亡率差异.基于时间测量组间数据比较采用可重复测量的单因素方差分析,两组间参数的比较采用独立样本t检验,计数资料进行x2检验.结果 与健康对照组比较,脓毒症组PC减低(P=0.006),伴随MPV,PDW增大(P=0.046,P＜0.001);血小板FLR4及PAC-1表达同时上调(P＜0.001),且两种受体变化正相关;血浆中sCD40L和TNF-α浓度显著上升(P＜0.001).TCP组PAC-1表达、TNF-α浓度治疗前后均高于非TCP组(P=0.023,P=0.011);治疗后TCP组sCD40L、血小板TLR4表达显著高于非TCP组(P=0.047,P=0.001).TCP组比非TCP组出血发生率高(P=0.024)、ICU住院时间长(P=0.013)、APACHEⅡ评分高(P＜0.01)、28 d病死率高(P=0.048).结论 脓毒症患者血小板TLR4表达上调及伴随的血小板活化与脓毒症血小板减少症发病密切相关,脓毒症并发TCP可能是预后不良标志.

Abstract：

Objective To unravel the relationship between Toll-like receptor 4 (TLR4) expression in platelets and the activation of platelet in thrombocytopenia (TCP) in case of sepsis. Method A total of 64 patients with sepsis were prospectively studied with control. Platelet count (PC), mean platelet volume (MPV),platelet distribution width (PDW),platelet TLR4 expression, platelet PAC-1 expression, sCD40L and TNF-α concentrations were compared between healthy control group (15 cases) and sepsis group on admission and 3 d,Sd,and 9 days after admission. The changes of MPV and PDW in TCP and non-TCP subgroups of sepsis before and after treatment were recorded. Prognostic index was analyzed. Results The PC was lower in sepsis group (P=0.006), and MPV and PDW were higher in sepsis group than those in healthy control group (P = 0.046, P =0.001). Platelet TLR4 and PAC-1 expressions, and sCD40L and TNF-α levels also increased more significantly in sepsis group (P ＜ 0.001). PAC-1 expression and TNF- level were higher in TCP group than those in non-TCP group before and after treatment (P = 0.023, P = 0.011). The sCD40L concentration and platelet TLR4 expression were significantly higher in treated TCP groups than in non-TCP group (P = 0.047, P = 0.001). Compared with non-TCP,the rate of bleeding was higher (P = 0.024) and the length of ICU stay was longer (P = 0.013).The APACHE Ⅱ score and the 28-day mortality were higher in TCP group (P ＜ 0.01, P = 0.048). Conclusions The elevation of platelet TLR4 expression in sepsis along with platelet activation is closely related to the incidence of thrombocytopenia. The occurrence of TCP is a poor prognosis sign of sepsis.     

替罗非班对急性冠脉综合征患者血小板CD40L及血清MMP-9水平的影响

目的观察盐酸替罗非班对急性冠脉综合征（ACS）患者血小板CD40L表达、血清MMP-9水平的影响。方法ACS患者60例,随机分为试验组与对照组,应用流式细胞术及明胶酶谱法分别检测药物治疗前及48小时后血小板CIMOL及血清MMP-9水平。结果试验组血小板CIMOL及血清MMP-9升高水平较对照组低（P〈0．05）。结论替罗非班可以减弱ACS患者血小板CD40L、血清MMP-9表达,对预防ACS患者进一步的心脏缺血事件有积极作用。     

脓毒症患者血小板功能相关指标检查及临床意义

目的探讨脓毒症患者血小板聚集功能及P选择素、活化GPⅡb/Ⅲa等血小板活化指标的变化及其意义。方法检测56例脓毒症患者血小板聚集功能及P选择素、活化GPⅡb/Ⅲa的变化。将脓毒症患者分为器官功能不全组和器官功能正常组进行比较分析,并与50例健康对照组进行比较。结果脓毒症患者血小板聚集率显著升高,与健康对照组比较差异有统计学意义(P0.05),血小板表面表达的P选择素、活化GPⅡb/Ⅲa明显升高,与健康对照组比较差异有统计学意义(P0.05);器官功能不全组血小板聚集率及血小板表面表达的P选择素、活化GPⅡb/Ⅲa与器官功能正常组比较显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论脓毒症患者血小板处于高激活状态,血小板聚集率显著升高,易导致患者发生血栓,血小板聚集率及活化指标可作为判断脏器功能损害的指标之一。