IgA_1对肾足细胞分泌VEGF、Col-Ⅳ的影响及复方积雪草2号的干预作用

目的:探讨复方积雪草2号对IgA1诱导的小鼠肾足细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)、IV型胶原(Col-IV)的影响。方法:用体外实验的方法,将小鼠肾足细胞经培养及传代,分成正常组、模型组、复方积雪草2号高、中、低剂量组、泼尼松龙组及缬沙坦7组,用IgA1诱导并分别予以上述各药进行干预24小时,用RT-PCR及ELISA法分别检测VEGF、Col-IV的mRNA及其蛋白质的表达。结果:IgA1刺激可以使小鼠足细胞VEGF与Col-IV表达明显升高(P0.05),泼尼松龙、缬沙坦和复方积雪草2号的干预均能明显降低小鼠足细胞VEGF的高表达,与模型组相比,P均0.05;而且泼尼松龙和复方积雪草2号还能明显降低足细胞Col-IV的高表达,与模型组相比,P均0.05。结论:复方积雪草2号可抑制肾足细胞由IgA1诱导造成的VEGF、Col-IV的高表达。     

复方积雪草对高IgA血清诱导小鼠肾足细胞表达VEGF的影响

目的:探讨复方积雪草对IgA肾病患者的高IgA血清诱导小鼠肾损伤的保护作用及其机理。方法:用IgA肾病患者的高IgA血清刺激小鼠足细胞,用复方积雪草含药血清进行干预,并以强的松龙作为阳性对照,运用RT-PCR方法检测足细胞VEGFmRNA表达的变化。结果:高IgA血清刺激可以使小鼠足细胞VEGFmRNA表达明显升高(P<0·001),强的松龙和复方积雪草的干预均能明显降低小鼠足细胞VEGFmRNA的高表达(与空白对照组相比,分别P<0·01,P<0·05)。结论:复方积雪草可能通过抑制VEGF的表达而减轻IgA肾病患者的高IgA血清造成的肾损伤。     

复方积雪草2号治疗IgA肾病大鼠的实验研究

目的:观察复方积雪草2号对IgA肾病(IgAN)模型大鼠蛋白尿、血尿及肾脏病理改变的改善情况.方法:复合免疫法制造大鼠IgAN模型,分设正常对照,模型,缬沙坦,复方积雪草2号高剂量、中剂量、低剂量6组.观察各组大鼠尿红细胞、尿蛋白及肾组织病理变化.结果:①模型组血尿、蛋白尿较正常组明显增多,各治疗组的血尿、蛋白尿均较模型组改善(P＜0.05),其中复方积雪草2号改善血尿作用优于缬沙坦(P＜0.05).②免疫荧光镜下观察模型组大鼠肾小球系膜区有较强IgA荧光,光镜下系膜基底膜面密度明显增加,而毛细血管袢面密度明显减少;各治疗组系膜区内的IgA荧光强度、系膜增生情况均较模型组明显改善(P＜0.05).③电镜下模型组系膜细胞增生,基质明显增多,有足突融合,各治疗组足突融合情况均较模型组明显改善(P＜0.05).结论:复方积雪草2号能降低IgAN大鼠肾组织内IgA的沉积、减少系膜增生、减轻足细胞融合,从而改善IgAN大鼠的肾脏损害,减少蛋白尿、血尿.     

糖肾宁对KK-Ay小鼠肾脏病理及足细胞凋亡的影响

目的观察糖肾宁对KK-Ay小鼠肾脏病理及足细胞凋亡的影响。方法利用KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病模型,将造模成功的KK-Ay小鼠随机分为模型组、糖肾宁组及缬沙坦组。另外选取相同数量的C57BL/6J小鼠作为正常对照组。糖肾宁组小鼠予20 g·kg~(-1)·d~(-1)的糖肾宁灌胃,缬沙坦组小鼠予10 mg·kg~(-1)·d~(-1)的缬沙坦灌胃,正常对照组及模型组予等剂量蒸馏水灌胃。灌胃时长为12周。分别在灌胃0、4、8、12周时检测24 h尿蛋白,灌胃12周后心尖取血检测血肌酐及尿素氮水平。HE、PAS染色观察各组小鼠肾脏病理改变,免疫组化及RT-PCR检测各组小鼠足细胞Caspase-3蛋白表达,TUNEL染色观察各组小鼠足细胞凋亡情况。结果①与正常对照组比较,模型组小鼠24 h尿蛋白、血清肌酐、尿素氮水平明显升高(P0.05)。与模型组比较,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠24 h尿蛋白、血清肌酐、尿素氮水平明显降低(P0.05)。②与正常对照组比较,模型组小鼠肾小球系膜细胞增多,细胞外基质增生;与模型组比较,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠肾小球系膜细胞减少,细胞外基质增生减轻。③与正常对照组比较,模型组小鼠足细胞Caspase-3蛋白及mRNA表达明显上调(P0.05);与模型组比较,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠足细胞Caspase-3蛋白及mRNA表达明显下调(P0.05)。④与正常对照组比较,模型组小鼠足细胞凋亡数目明显升高(P0.05);与模型组比较,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠足细胞凋亡数目明显降低(P0.05)。结论糖肾宁能够降低糖尿病肾病蛋白尿,改善肾功能,其机制可能与其改善肾脏病理及减轻足细胞凋亡有关。     

糖肾宁对KK-Ay小鼠肾脏病理及足细胞凋亡的影响

目的观察糖肾宁对KK-Ay小鼠肾脏病理及足细胞凋亡的影响。方法利用KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病模型,将造模成功的KK-Ay小鼠随机分为模型组、糖肾宁组及缬沙坦组。另外选取相同数量的C57BL/6J小鼠作为正常对照组。糖肾宁组小鼠予20 g·kg-1·d-1的糖肾宁灌胃,缬沙坦组小鼠予10 mg·kg-1·d-1的缬沙坦灌胃,正常对照组及模型组予等剂量蒸馏水灌胃。灌胃时长为12周。分别在灌胃0、4、8、12周时检测24 h尿蛋白,灌胃12周后心尖取血检测血肌酐及尿素氮水平。HE、Masson、PAS染色观察各组小鼠肾脏病理改变,免疫组化及RT-PCR检测各组小鼠足细胞Caspase-3蛋白表达,TUNEL染色观察各组小鼠足细胞凋亡情况。结果①与正常对照组比较,模型组小鼠24 h尿蛋白、血清肌酐、尿素氮水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠24 h尿蛋白、血清肌酐、尿素氮水平明显降低(P<0.05)。②与正常对照组比较,模型组小鼠肾小球系膜细胞增多,细胞外基质增生;与模型组比较,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠肾小球系膜细胞减少,细胞外基质增生减轻。③与正常对照组比较,模型组小鼠足细胞Caspase-3蛋白及mRNA表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠足细胞Caspase-3蛋白及mRNA表达明显下调(P<0.05)。④与正常对照组比较,模型组小鼠足细胞凋亡数目明显升高(P<0.05);与模型组比较,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠足细胞凋亡数目明显降低(P<0.05)。结论糖肾宁能够降低糖尿病肾病蛋白尿,改善肾功能,其机制可能与其改善肾脏病理及减轻足细胞凋亡有关。     

复方积雪草对局灶节段性硬化大鼠E-钙粘素表达的影响

目的:观察复方积雪草对局灶节段硬化性(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)模型大鼠E-钙粘素(E-Cadherin,E-cad)表达的影响,探讨其防治肾纤维化的作用及机制。方法:建立局灶节段硬化性FSGS大鼠模型,分为正常组、模型组、复方积雪草组和苯那普利对照组。采用定量PCR和免疫组化法分别测定肾组织E-cad的基因和蛋白的表达。结果:模型组大鼠出现局灶节段性肾小球硬化,肾间质纤维化程度也较为明显,肾组织中的E-cad基因表达和肾小球足细胞、肾小管上皮细胞E-cad蛋白表达均明显降低,经复方积雪草干预后肾组织病变程度减轻,肾小球足细胞、肾小管上皮细胞E-cad基因和蛋白表达均有所升高,疗效与苯那普利相似。结论:复方积雪草可上调FSGS大鼠肾组织E-cad基因和蛋白表达,从而保护肾小球足细胞及抑制肾小管上皮细胞转分化,可能是防治肾纤维化程度的重要机制之一。     

糖肾宁对KK-Ay小鼠足细胞上皮间质转分化的作用研究

目的探讨糖肾宁对KK-Ay小鼠足细胞上皮间质转分化的影响。方法采用KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病小鼠模型,随机分为模型组、糖肾宁组及缬沙坦组,每组10只,并将10只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。各组小鼠干预给药12周后处死,心尖取血、摘取双侧肾脏,进行相应指标检测。使用酶联免疫法检测血清肌酐及尿素氮水平,PAS染色观察各组小鼠肾组织细胞外基质增生情况,免疫组化检测各组小鼠肾组织Collagen I及FN蛋白表达,WB及RT-PCR检测各组小鼠足细胞P-cadherin和FSP-1的蛋白及mRNA表达。结果 (1)与正常对照组相比,模型组小鼠血清肌酐、尿素氮水平明显升高(P0.05);与模型组相比,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠血清肌酐、尿素氮水平明显降低(P0.05)。(2)与正常对照组相比,模型组小鼠肾小球细胞外基质明显增生,基质蛋白Collagen I及FN表达上调(P0.05);与模型组相比,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠肾小球细胞外基质增生减轻,基质蛋白Collagen I及FN表达明显下调(P0.05)。(3)与正常对照组相比,模型组小鼠足细胞P-cadherin蛋白及mRNA表达明显下调(P0.05),FSP-1蛋白及mRNA表达明显上调(P0.05);与模型组相比,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠足细胞P-cadherin蛋白及mRNA表达明显上调(P0.05),FSP-1蛋白及mRNA表达明显下调(P0.05)。结论糖肾宁能够抑制糖尿病肾病小鼠足细胞上皮间质转分化,可能是其减轻肾小球细胞外基质增生、延缓疾病进展的分子机制。     

通心络调控p38 MAPK通路抑制细胞外基质沉积的研究

目的观察通心络对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾组织p38 MAPK信号通路、TGF-β1及细胞外基质FN、Col-Ⅳ的影响,探讨其抑制糖尿病肾病肾脏纤维化的作用机制。方法采用自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病模型,随机分为模型组、通心络组和缬沙坦组各15只,设C57BL/6J小鼠15只为正常组;造模组连续给药12周,比较各组KK-Ay小鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、体重(body weight,BW)、肾重(kidney weight,KW)、肾重指数=KW/BW;24小时尿微量白蛋白(24 hours urinary microalbumin,24 h m ALB);血清肌酐(serum creatinine,SCr)、血清尿素(Urea)的水平;检测转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、p38、P-p38、纤维连接蛋白(fibronectin,FN),Ⅳ型胶原蛋白(Collagen in Serum-Ⅳ,Col-Ⅳ)等表达水平。结果与正常组比较,模型组空腹血糖、体重、肾重、肾重指数、24h m ALB、SCr、Urea均明显升高(P!0.05),肾组织P-p38、FN、Col-Ⅳ蛋白表达升高(P0.05)。与模型组比较,通心络组和缬沙坦组FBG无明显变化(P0.05);体重、肾重减轻、肾重指数、24h m ALB、SCr、Urea均降低(P0.05),肾组织P-p38、FN、Col-Ⅳ蛋白表达减少(P0.05),但给药组间无显著差异(P0.05)。各组间p38表达均无统计学差异(P0.05)。结论提示通心络无明显降糖作用;通心络可降低自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠24 h m ALB、SCr、Urea,保护肾功能;通心络可抑制TGF-β1、P-p38蛋白的过度表达,减少FN、Col-Ⅳ等细胞外基质在肾组织的沉积,从而抑制肾脏的纤维化,延缓糖尿病肾病的发生发展。     

保肾通络方对DN模型小鼠肾脏病理改变 及足细胞损伤的影响研究

目的:探讨保肾通络方对糖尿病肾病(DN)模型小鼠肾脏病理改变及足细胞损伤的影响。方法:KK-Ay小鼠随机分为模型组、保肾通络方组、缬沙坦组,另外选取10只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。KK-Ay小鼠予高脂饲料喂养4周,造成糖尿病肾病(DN)小鼠模型,C57BL/6J小鼠予普通饲料喂养。造模成功后,保肾通络方组按生药20g/kg每日灌胃,缬沙坦组按10mg/kg每日灌胃,正常对照组和模型组灌胃等量蒸馏水。实验期间正常对照组普通饲料自由饮食,其他各组高脂饲料自由饮食,连续干预12周。比较干预前和干预4、8、12周时各组小鼠24h尿蛋白定量,比较各组小鼠干预12周后血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平以及肾脏足细胞裂孔隔膜蛋白(nephrin)、结蛋白(desmin)的蛋白和m RNA表达,观察各组小鼠肾组织苏木精-伊红(HE)、过碘酸雪夫(PAS)染色后病理形态。结果:与正常对照组相比,模型组小鼠24h尿蛋白定量和Scr、BUN水平明显升高(P0.05);与模型组相比,保肾通络方组与缬沙坦组小鼠上述指标明显降低(P0.05)。与正常对照组比较,模型组小鼠肾组织体积增大,系膜细胞增生,细胞外基质增多;与模型组比较,给药组小鼠肾组织体积减小,系膜细胞数目减少,细胞外基质增生减轻。与正常对照组相比,模型组小鼠足细胞nephrin蛋白及m RNA表达水平下调(P0.05),desmin蛋白及m RNA表达水平上调(P0.05);与模型组相比,给药组小鼠足细胞nephrin蛋白及m RNA表达水平上调(P0.05),desmin蛋白及m RNA表达水平下调(P0.05)。保肾通络方组与缬沙坦组上述指标比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论:保肾通络方可以降低DN模型小鼠尿蛋白水平,改善肾功能,减轻肾脏病理改变,延缓DN进展,其分子机制可能与上调DN小鼠足细胞nephrin蛋白表达,下调desmin蛋白表达,减轻足细胞损伤有关。     

基于HK-2细胞转分化研究益肾化瘀方抗肾间质纤维化机制

目的:观察益肾化瘀方含药血清对人近端肾小管上皮细胞株(HK-2)细胞转分化过程中γ干扰素(IFN-γ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)表达的影响,探究该方抗肾间质纤维化机制。方法:将体外培养的HK-2细胞随机分为:正常对照组,缬沙坦含药血清组,AngⅡ刺激组,5%、10%、20%益肾化瘀方含药血清组,分别干预12、24、48 h。检测各组细胞IFN-γ、TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅳ的表达情况。结果:与正常对照组同期比较,AngⅡ刺激组IFN-γ表达量显著降低(P<0.05),TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅳ表达量显著升高(P<0.05);与AngⅡ刺激组同期比较,10%、20%益肾化瘀方含药血清组及缬沙坦组IFN-γ表达量显著升高(P<0.05),各治疗组IFN-γ表达量显著降低(P<0.05);其中20%益肾化瘀方含药血清组与缬沙坦含药血清组各指标表达量无显著性差异。结论:益肾化瘀方含药血清可通过上调IFN-γ及下调TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅳ的表达保护肾脏。     

谈人参在《伤寒论》中的应用

人参为五加科植物人参的根。最早见于《神农本草经》,列为上品,书云:“人参味甘微寒,主补五脏,安精神,定魂魄,止惊悸,除邪,明目,开心,益智。”其味甘、微苦,性微温。归脾(胃)、肺、心经。具有大补元气,补脾益肺,益气生津,宁心安神之功效。在《伤寒论》中,仲景应用人参共40次,入     

阴阳升降理论探析与启迪

通过梳理《内经》及相关医家关于阴阳升降的论述,探讨阴阳升降的内容及阴阳升降的不同内涵。从阐述人体生理变化和脏腑特点、阐述疾病的病机、解释治则治法和方药配伍应用等方面分析阴阳升降对临床的启迪作用。     

非酒精性脂肪肝诊治的问题及对策

目的探讨非酒精性脂肪肝临床治疗中有效对策。方法结合近代非酒精性脂肪肝治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治非酒精性脂肪肝。结果中西医结合防治此病有效。结论中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。     

《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》虚劳病精气神调治原则与方法

从中医精气神辨识角度认识虚劳病,总结虚劳病病因病机。通过观察面容、形态、神色、五官、舌象、脉象等辨识精气神状态,确立虚劳病精气神调治原则。在精气神辨识理论指导下,对《金匮要略·血痹虚劳病脉证并治》相关条文、方药进行解析,总结虚劳病相关治则治法。根据精气神调养原则,为虚劳病临床应用提供指导。     

五脏补血法理论及临床应用探讨

血液的生成与五脏关系密切,据此确立五脏补血法:养心补血法、健脾补血法、润肺补血法、滋肝补血法、益肾补血法。     

全蝎配伍蜂房之祛风攻毒作用探析

通过梳理古本草文献中全蝎、蜂房的有关记载和现代临床对该药对的配伍应用,探讨并阐释该药对祛风攻毒增效的作用机制,认为全蝎配蜂房,药力迅捷,内走脏腑,外达肢节,透骨搜风,既可祛风通络止痛,又可攻毒散结消痈.尤其适宜于治疗风湿顽痹、痈疽恶疮、癌肿等.     

高脂血症诊治研究中问题及策略

目的:探讨高脂血症诊临床治疗中有效对策。方法:结合近代高脂血症诊治疗研究现状部分问题,运用中医辨证和辨病论治结合现代药理学研究进展方法,防治高脂血症。结果:中西医结合防治此病有效。结论:中西医结合辨证和辨病结合论治防治此病为有效对策。     

从“方药离合”看中医学的方药共荣

通过对历代方剂与本草的应用演变和发展过程的论述,揭示了中医方药共荣关系,并以黄柏、升麻等药为例,强调方药配伍运用是方药共荣的核心环节.随后,结合中医发展的现实环境,分析了坚持方药共荣的正确方向,对于防止重药轻方的错误倾向,提高中医临床疗效,启迪现代研究思路,均具有重要的学术价值和现实意义.     

丹栀逍遥散及其提取物镇静催眠作用研究

目的探讨丹栀逍遥散原方及提取物镇静催眠作用。方法将小鼠分为14组,正常对照组、原方组及各组分低中高剂量组,通过测定小鼠自主活动次数,采用戊巴比妥钠延长睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量镇静催眠协同作用实验观察丹栀逍遥散原方及各提取物镇静催眠作用。结果丹栀逍遥散原方及提取物均无改变小鼠自主活动的功能,表明均无中枢兴奋性作用;丹栀逍遥散石油醚提取液高、中剂量具有显著延长戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间的作用(P<0.01或P<0.05),石油醚提取液高剂量能明显增加阈下剂量戊巴比妥钠睡眠小鼠个数(P<0.01)。结论丹栀逍遥散石油醚提取部位可能为丹栀逍遥散的中枢抑制作用的有效部位。     

骨关节疾病病证结合模型的构建与评价研究进展

从骨关节疾病病证结合动物模型的构建和评价两方面来对该类模型的研究进展进行综述。对骨关节疾病病证结合动物模型的研究意义、模型构建模式等环节及模型的评价方法和标准等方面分别进行阐述。同时指出骨关节疾病病证结合模型研究中存在的问题,并提出相应建议。