星形细胞瘤中p15与p27基因的表达及相关性研究

目的 探讨p15与p27基因与星形细胞瘤发生、发展,恶性程度的关系.方法 采用S-P免疫组化法染色观察50例人星形细胞瘤组织中p15和p27基因蛋白的表达情况.结果 p27基因在低级别及高级别星形细胞瘤平均阳性细胞百分率分别为(38.16±10.79)%、(11.00±3.24)%.p15基因在低级别与高级别星形细胞瘤平均阳性细胞百分率分别为(32.53±12.46)%、(10.50±2.01)%.结论 p15与p27基因蛋白的平均阳性细胞百分率与星形细胞瘤的病理分级和恶性程度有密切关系,可能在星形细胞瘤发生,发展中起重要作用.     

p14ARF和p53蛋白表达与脑胶质瘤发生发展的相关性研究

目的：探讨脑胶质瘤中p14^ARF和p53蛋白表达与不同病理级别脑胶质瘤的相关性及两者之间的相互作用。方法：应用免疫组织化学技术检测31例不同病理分级脑胶质瘤中的上述遗传学改变,5例脑挫裂伤脑组织为正常对照。结果：p14^ARF和p53蛋白在低级别（Ⅰ,Ⅱ级）和高级别（Ⅲ,Ⅳ级）脑胶质瘤中的表达阳性率分别为75．00％和30．43％,12．50％和69．57％。两蛋白在低级别和高级别中的表达差异均有显著性（P〈0.05）。p14^ARF表达水平与脑胶质瘤病理分级之间呈显著负相关性（r=0．571,P〈0．01）,即随着肿瘤恶性度的升高而降低。而突变型p53蛋白正相反,与病理分级呈显著正相关性（r=0．472,P≤0．01）,即随着肿瘤恶性度增高而增高。p14^ARF和p53蛋白之间在肿瘤中存在明显的相互作用（P〈0．05）。结论：p14^ARF和p53蛋白表达异常可导致细胞周期调控失常和细胞异常增殖,并且二者之间存在协同作用,可加速脑胶质瘤恶性演进。     

U87胶质瘤细胞p53基因全场cDNA克隆及序列分析

目的克隆U87胶质瘤细胞p53基因编码序列,并对其序列进行分析。方法根据NCBI GenBank中p53 cDNA序列设计引物,利用RT-PCR技术从U87胶质瘤细胞总RNA中对p53基因编码序列进行克隆;并通过DNAMAN软件将克隆序列与NCBI GenBank中序列进行比对,分析U87细胞中p53基因编码序列特点。结果经测序验证,成功克隆了p53基因编码序列,通过序列比对发现U87细胞中p53基因72位密码子为精氨酸残基。结论成功克隆了U87细胞中p53基因编码序列,分析发现U87细胞中p53基因表达产生的是72位密码子为含精氨酸残基的p53野生型蛋白,为进一步研究U87细胞中p53基因功能特性及其与胶质瘤的相关性奠定了基础。     

p33ING1b在胶质瘤中的表达及意义

目的：检测抑癌基因p33ING1b在脑胶质瘤中的表达及其意义。方法：选取行脑胶质瘤手术切除的新鲜胶质瘤组织标本66例及正常脑组织15例,应用S-P免疫组织化学方法检测p33ING1b在瘤组织及正常组织中的表达。结果：p33ING1b在66例胶质瘤标本中的阳性表达率为71.2%（47/66）,而在正常组织中全部为阳性表达（100%）;且随着肿瘤级别的增高,p33ING1b的表达水平呈明显的下降趋势。结论：p33ING1b在胶质瘤组织中低表达,且与肿瘤恶性程度密切相关,检测其表达水平将为判断肿瘤的恶性程度、确定治疗策略及评估预后提供一定的帮助。     

p53和Ki67在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨p53和Ki67在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法采用S-P免疫组织化学法检测10例正常脑组织及208例人脑胶质瘤组织中p53和Ki67的表达。结果p53和Ki67在正常脑组织中均无表达。p53在Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组织中的阳性表达率分别为52．8％和74．1％,Ki67在Ⅰ-Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组织中的阳性表达率分别为17．8％和67．1％。p53在Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤组织中的表达明显高于其在正常脑组织和Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组织中的表达（x^2=22．004,P=0．000;x^2=9．610,P=0．002）。p53在Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组织中的表达明显高于其在正常脑组织中的表达（x^2=10．336,P=0．001）。Ki67在Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组织中的表达明显高于其在正常脑组织和Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组织中的表达（x^2=16．765,P=0．000;x^2=51．596,P=0．000）。而Ki67在正常脑组织中及Ⅰ～Ⅱ级胶质瘤组织中的表达差异无统计学意义（x^2=2．143,P=0．143）。结论p53和Ki67在脑胶质瘤的发生中可能起重要作用,二者与胶质瘤的恶性程度相关。     

p16抑癌基因在大肠癌组织中的表达及其意义

目的：探讨抑癌基因p16在大肠癌组织中的表达及其表达与肿瘤的分化程度、临床分期的关系。方法：采用免疫组化SP方法对45例大肠癌组织中p16基因进行检测.结果：45例大肠癌组织中p16基因表达的阳性率为62．2％，在高分化、中分化、低分化大肠癌中p16基因的阳性率分别为84．1％、53．4％和29．3％。DukesA、B期大肠癌p16基因的阳性率明显高于DukesC、D期（P＜0．05）。结论：p16基因表达缺失与大肠癌的发生有关，且p16基因的表达与大肠癌的分化程度、临床分期有关。     

p19与p53在人脑胶质瘤中的表达及相关性的研究

细胞周期调节异常与肿瘤发生、发展的关系日益受到重视，当抑癌基因缺失、突变、易位而失活时，可引起基因转录和翻译功能的异常，使细胞恶性增殖，最终引起肿瘤的发生。因此检测肿瘤抑癌基因的表达对研究肿瘤发生的机制具有重要意义。我们应用免疫组织化学方法检测了59例胶质瘤手术标本抑癌基因p19，和p53蛋白表达，以探讨二者与胶质瘤的相关性及生物学意义。     

外源性p16基因治疗鼠C6脑胶质瘤的体内实验研究

目的 研究p16基因抑制脑胶质瘤生长的作用。方法 将p16基因表达缺失的大鼠C6胶质瘤细胞（对照组）和转染外源性p16基因的C6细胞（转染组）种植于SD大鼠右侧尾状核，荷载C6脑前质瘤鼠用p16cDNA原位治疗（治疗组），并以空载体治疗作为对照（空载组）每组10只，观察各组大鼠一般情况。生存期，MRI动态变化及病理改变，通过原位杂交及免疫组化染色检测肿瘤p16mRNA及蛋白表达，以AgNOR平均计数检测增殖活性，以Tunel法检测细胞凋亡。除治疗组1只尚有残留外，余瘤体消失，转染组和治疗组肿瘤细胞增有p16mRNA蛋白表达，且增殖活性下降，但凋亡不增加。结论 转染外源性p16基因后的C6胶质瘤细胞致瘤性显著降低，且对荷载脑胶质瘤鼠具有明显的治疗作用。有可能成为恶性胶质瘤基因治疗的优选靶之一。     

胆囊癌p53、p73和p21WAF1蛋白的表达

目的 探讨p53、p73和p21WAF1基因在胆囊癌中的表达.方法 应用免疫组化SP法检测48例胆囊癌、32例癌旁组织、20例正常胆囊组织p53、p73和p21WAF1蛋白的表达,分析p73和p21WAF1相互关系.结果 48例胆囊癌中,p53、p73和p21WAF1蛋白阳性表达率分别为56.2%、52.1%和43.8%,均高于癌旁组织和正常组织(P<0.01).胆囊癌中p73蛋白的表达与Nevin分期有关(P<0.05),p21WAF1蛋白的表达与淋巴结转移、Nevin分期有关(P<0.05).结论 p53、p73和p21WAF1基因在胆囊癌高表达,提示三者在胆囊癌发生发展中起重要作用.胆囊癌中p73与p21WAF1表达无相关性.     

p16和p53蛋白在星形细胞瘤中的表达及其意义

p16和p53是肿瘤抑制基因，p16又称为多肿瘤抑制基因(multiple tumor suppresor，MTS1)，其抑癌机理与细胞周期调控密切相关，p53也参与细胞周期的调控。我们应用免疫组织化学方法检测86例星形细胞瘤中p16和p53突变蛋白的表达，探讨其在不同级别星形细胞瘤中的表达及意义。     

钙粘素与Ki-67和p16在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的探讨钙粘素(E-cadherin,E-cd)、p16和Ki-67在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法采用免疫组织化学方法检测53例胶质瘤和12例正常脑组织中的E-cd、p16蛋白和Ki-67的表达。结果E-cd和p16在正常脑组织中的阳性表达率均为100％;E-cd在Ⅰ-Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为53．6％、20．0％,各级肿瘤组织之间以及与对照组之间均有显著性差异(P<0．05);p16在Ⅰ-Ⅱ级和Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为57．1％、24．0％,肿瘤组织学分级之间有显著性差异(P<0．05),与对照组之间也有显著性差异(P<0．01);而且E-cd和p16二者在胶质瘤中的表达呈正相关(P<0．05);Ki67在不同级别的肿瘤组织中的阳性细胞为1％-30％,各级肿瘤之间以及与对照组之间的阳性表达率有非常显著性差异(P<0．01)。结论E-ed、p16和Ki-67在胶质瘤的发生发展过程中起重要作用,并且对于评估胶质瘤的恶性程度及预后有重要意义。     

p14ARF蛋白与脑胶质瘤发生发展的相关性研究

目的探讨p14ARF蛋白与脑胶质瘤发生、发展及细胞生物学特性的关系,试图为脑胶质瘤发病机制的阐明及基因治疗提供新的理论依据和思路。方法选取68例不同级别的脑胶质瘤标本,用免疫组织化学法检测p14ARF蛋白表达的改变。结果p14ARF蛋白缺失率在Ⅰ～Ⅱ级为10.0%,Ⅲ级为25.0%,Ⅳ级为43.3%,p14ARF蛋白缺失率随脑胶质瘤恶性程度增高呈上升趋势(P<0.05)。结论p14ARF蛋白异常可导致细胞周期调控失常及细胞增殖活性升高,促进脑胶质瘤的恶性演进。     

脑胶质瘤中p33ING1蛋白表达及其与细胞凋亡和增殖关系的研究

目的检测p33 ING1蛋白在脑胶质瘤中的表达,探讨其与肿瘤细胞增殖、凋亡及肿瘤恶性程度的关系。方法应用免疫组化S-P法分别检测p33 ING1和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达,并用TUNEL法做原位细胞凋亡检测,实验数据进行统计分析。结果50例脑胶质瘤中p33ING1蛋白表达的总阳性率为90%（28/50）,随着胶质瘤恶性度的增高其表达水平下降,而且表达水平与细胞凋亡指数（AI）呈正相关与细胞增殖指数（PI）呈负相关（P〈0.01）。结论胶质瘤细胞中抑癌基因p33ING1的表达可促进细胞凋亡,抑制细胞过度增殖,与胶质瘤恶性程度密切相关。检测其表达水平的变化对胶质瘤的诊断、治疗及判断预后均有重要指导意义。     

p53在涎腺良恶性肿瘤中的表达及意义

目的　探讨p5 3基因在涎腺良、恶性肿瘤的表达及其肿瘤生物学特性的关系。 方法　采用免疫组化SP法检测了 2 0例多形怀腺瘤 (pleomorphicadenoma ,PA)、12例腺淋巴瘤 (adenolyphoma ,AL)、19例恶性多形性腺瘤 (malignantpleomorphicadenoma ,MPA)和 2 5例腺样囊性癌 (adenoidcarcinoma ,ACC)中突变p5 3基因的表达产物p5 3蛋白。 结果　p5 3蛋白在两种恶性涎腺肿瘤中的检出率 (5 0 .0 % )显著高于在两种良性涎腺肿瘤中的检出率 (6 .3% ) (P <0 .0 5 ) ;在MPA中的检出率 (5 2 .6 % )显著高于在PA中的检出率 (10 .0 % ) (P <0 .0 5 ) ;晚期恶性涎腺肿瘤 (TNM分型为Ⅲ -Ⅳ期 )的p5 3检出率 (78.9% )显著高于早期恶性涎腺肿瘤 (TNM分期为 :Ⅰ -Ⅱ期 )的检出率 (2 8.0 % ) (P <0 .0 5 )。 结论　p5 3基因在PA恶变过程中起着一定作用 ;p5 3蛋白检测可作为判断涎腺恶性肿瘤临床分期和估计预后的参考指标。     

p73与p53在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其相关性的研究

目的：研究抑癌基因p73及突变型p53蛋白在人上皮性卵巢肿瘤组织中的表达及其临床意义,进一步探讨卵巢上皮性肿瘤的发生发展机制。方法：检测102例卵巢上皮性肿瘤组织中p73及p53蛋白的表达情况,应用SPSS11．5统计软件进行检验,综合患者的手术病理分期、组织类型、病理分级以及预后等重要的相关因素来分析每种蛋白表达的差异及其相关性。结果：①p73蛋白在良性肿瘤中无表达,而在交界性肿瘤和卵巢癌中均有表达,与组织分化有关,与临床分期无明显相关性。②p53蛋白在良性肿瘤中无表达,而在交界性肿瘤和卵巢癌中均有表达,与临床分期、病理分级及有无腹水和淋巴结转移相关。③p73表达与p53表达呈显著正相关。④p53蛋白累积与生存预后呈显著负相关,而p73表达与生存时间无关。结论：①p73基因异常表达可能参与了卵巢上皮性肿瘤的发生发展。②在卵巢上皮性恶性肿瘤中,p73过表达与p53表达状况明显相关。     

恶性间皮瘤p53基因点突变和蛋白表达

p53基因是在人类多数肿瘤中发生高频突变的肿瘤相关性最强的抑癌基因，其突变特征为80%的点突变均集中在进化的高保区内，即对应的第5-8外显子部位. 恶性间皮瘤是一种与接触石棉有明确关系的间叶源性肿瘤. 为深入阐明p53基因在人恶性间皮瘤发生发展中的作用，应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和免疫组化技术研究了34例恶性间皮瘤p53 基因的点突变情况. 结果表明： 56%(19/34)的病例存在p53基因的点突变，突变率在不同的组织学类型之间有一定的差异；在所发现的22次突变中有16次均发生在第7外显子，表明第7外显子是本组恶性间皮瘤的突变热点所在；免疫组化染色：23%（8/34）的病例P53蛋白免疫组化染色为阳性，阳性率低于基因突变率. 以上资料提示p53基因突变可能在恶性间皮瘤的癌变机制中起着重要作用.     

RT—PCR方法检测结直肠癌组织中MTS1／p16基因的表达

目的：探讨人结直肠癌组织中MTS1/p16基因的缺失情况。方法：60例手术切除组织标本均取自结直肠癌患者,其中包括结直肠癌组织35例,癌旁组织15例及结直肠正常粘膜组织10例。所有组织标本均利用逆转录聚合酶链反应来检测MTS1/p16基因的等位缺失情况。结果：17.14%(6/35)的结直肠癌组织标本出现MTS1/p16基因的等位缺失,而癌旁组织及正常结直肠粘膜均未出现。结论：MTS1/p16基因的缺失对结直肠癌的进展可能起着一定促进作用。