乳腺癌循环肿瘤细胞检测及其研究进展

循环肿瘤细胞(CTC)为肿瘤发生转移的重要原因.检测CTC能早期发现肿瘤的转移及复发.在乳腺癌中,CTC检测与其他检测方式相比有较高的可重复性和敏感性,并能更早地提供预后信息.     

微阵列技术用于检测乳腺癌人表皮生长因子受体2基因状态

目的探讨细胞核微阵列技术及组织微阵列技术用于检测乳腺癌组织中HER-2基因扩增和蛋白表达状态。方法将248例乳腺癌普通组织蜡块制成组织微阵列组,应用免疫组织化学法（IHC）和荧光原位杂交法（FISH）分别检测HER-2基因和蛋白表达。两种检测方法的-致性采用检验,并以FISH检测结果为金标准,绘制IHC检测乳腺癌HER-2表达的ROC曲线图。结果248例乳腺癌FISH与IHC检测结果-致性分析显示：Kappa=0．711,P=0．000,两种检测方法的-致性尚可。IHC检测乳腺癌HER-2ROC曲线下面积为0．888,P=0．000,约登指数为0．700,准确率为87．9％。IHC（＋＋）中4例为17号染色体单体型,占FISH阳性病例总数的5．26％（4／76）。IHC（＋＋＋）中5例为17号染色体多倍体型,FISH检测均为阴性,占FISH阴性总例数的2．9％（5／172）。IHC的检测可以较好地反映出FISH的结果。结论细胞核微阵列及组织微阵列技术用于检测乳腺癌HER．2基因状态有着节约实验成本、同一性好、结果可靠的优点。     

乳腺癌患者循环肿瘤细胞检测及其临床意义

乳腺癌已被证实是一种全身性的疾病,其发展早期即可出现远处播散和转移,血液中检测出肿瘤细胞即是重要证据.而肿瘤细胞进入外周血即是肿瘤远处转移的前提,是肿瘤转移的主要途径之一.在外周血中检测到肿瘤细胞提示存在肿瘤微转移并有可能进一步发展为远处转移.随着循环肿瘤细胞（circulating tumor cells, CTCs）检测技术的敏感性和特异性不断提高,其在外周血中的含量与乳腺癌的诊断﹑治疗和预后有密切的关系, 这一点已被大多数研究者所证实.本文简要综述了目前对乳腺癌患者的CTCs检测方法以及其对临床的指导意义,并对其临床运用前景进行了展望.     

乳腺癌循环肿瘤细胞

循环肿瘤细胞的播散是乳腺癌转移与复发的重要事件.检测循环肿瘤细胞,对判断患者预后、评价治疗效果、监测转移复发、指导治疗等有着重要的临床意义.完善循环肿瘤细胞的检测技术,研究循环肿瘤细胞的生物学特性及其机制,是乳腺癌循环肿瘤细胞研究需要解决的主要难题.目前,乳腺癌循环肿瘤细胞研究在检测技术及其指标的联合应用、低增殖活性循环肿瘤细胞研究等方面均取得了一定进展.     

卡马西平促进乳腺癌SKBR-3细胞中人表皮生长因子受体-2的降解

目的探讨卡马西平对乳腺癌细胞SKBR-3中人表皮生长因子受体-2(HER-2)表达的影响及其机制。方法分别用卡马西平、赫赛汀、17烯丙胺-17脱甲氧格尔德霉素(17-AAG)处理乳腺癌细胞SKBR-3,通过Western blot检测HER-2蛋白的表达;通过RT-PCR检测HER-2 mRNA的表达;通过免疫沉淀检测热休克蛋白90(HSP90)的分子伴侣功能及乙酰化水平;通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性。结果10μmol／L卡马西平处理即可降低乳腺癌细胞SKBR-3中HER-2蛋白水平,100μmoL／L卡马西平则在蛋白和mRNA水平均抑制HER-2的表达。卡马西平处理可以使HSP90乙酰化水平升高,并且破坏HSP90的分子伴侣功能。卡马西平对赫赛汀的促HER-2降解作用有协同作用。100μmol/L卡马西平+290μg/ml赫赛汀处理组、100μmol／L卡马西平+1μmol／L 17-AAG处理组的细胞增殖率分别为27．8％±3．0％和26．9％±2．8％,分别明显低于单独赫赛汀或17-AAG处理组(P均<0．01)。结论卡马西平可能通过破坏HSP90的分子伴侣功能、提高HSP90的乙酰化水平,降低了乳腺癌细胞SKBR-3中HER-2的表达水平,并且与赫赛汀和17-AAG有协同作用。卡马西平在肿瘤治疗中有潜在的应用价值。     

循环肿瘤细胞在乳腺癌个体化诊治中的研究进展

循环肿瘤细胞从实体肿瘤病灶中脱离进入血液循环,携带了肿瘤细胞的特性,并且随疾病进展发生着改变,为临床上相对无创地获取肿瘤细胞样本提供了独有的机遇与挑战。近年来,大量的研究探索将循环肿瘤细胞应用于乳腺癌临床决策中,肯定了其在各期乳腺癌疾病进展及预后预测中的作用。同时,富集及检测技术的发展,为利用循环肿瘤细胞数目及其分子生物学特性进行疾病进展监测、药物疗效评估、指导乳腺癌个体化治疗选择以及寻找药物治疗新靶点带来了希望。现就循环肿瘤细胞在乳腺癌治疗决策中的最新研究进展予以简要综述。     

乳腺癌循环肿瘤细胞生物学特性的研究进展

目的：总结乳腺癌循环肿瘤细胞生物学特性相关的研究进展。方法：以“乳腺肿瘤、循环肿瘤细胞和微转移”为关键词,系统检索PubMed、Ovid、EMBASE、WebofScience的中国生物医学文献数据库等医学数据库（2000-01—2011—12）。纳入标准：乳腺癌循环肿瘤细胞生物学特性。根据纳入标准,符合分析的文献34篇。结果：乳腺癌循环肿瘤细胞具有高度异形性,细胞增殖活性低,表达激素受体、血管生成相关分子等多种标志,且与上皮细胞间质化、肿瘤干细胞及肿瘤自身种植等密切相关。循环肿瘤细胞具有与原发灶、转移灶内肿瘤细胞明显不同的生物学特征。结论：乳腺癌循环肿瘤细胞具有自身独特的生物学特性,进一步深入研究其生物学特性有助于加深对肿瘤播散和转移机制的认识。     

乳腺癌血清肿瘤标志物和循环肿瘤细胞检测的研究进展

 随着分子生物学的发展,乳腺癌的治疗正逐步进入分子分型治疗的时代,为了给患者提供更加有效的个体化治疗,研究者们不断努力寻找乳腺癌新的治疗靶点、疾病监控指标以及疗效预测和预后评估的指标,日益深入的研究显示血清肿瘤标志物和循环肿瘤细胞的检测在乳腺癌治疗中有重要价值。现就近年乳腺癌血清肿瘤标志物和循环肿瘤细胞检测的相关临床研究作一综述。     

乳腺癌循环肿瘤细胞检测方法的研究进展

目的:对乳腺癌循环肿瘤细胞(CTC)检测方法进行简要总结和评述.方法:以乳腺肿瘤和CTC为关键词,检索1995-01-2010-05 PubMed、MEDLINE、EMBASE、Science Direct、Springer、CNKI和维普数据库的相关文献.纳入标准:关于CTC检测方法的文献.根据纳入标准符合分析文献39篇.结果:伴随近年生物学技术的飞速发展,CTC的检测敏感性和特异性显著提高.目前,CTC检测方法多由富集分离和标记鉴定两部分组成.Cell Search系统和实时定量逆转录聚合酶链反应法是目前最常用的CTC检测方法,前者特异性较好、可获取形态学信息并可计数,后者敏感性更高.结论:CTC检测方法众多,但尚缺乏公认的检测标志和标准的检测流程.进一步提高CTC的检测效率有助于加深对其应用价值的认识.     

早期乳腺癌患者手术对循环肿瘤细胞的影响

目的探讨早期乳腺癌(EBC)患者手术对循环肿瘤细胞(CTC)的影响。方法选取2008年1月至2015年1月间山东省临沂市沂水中心医院收治的134例EBC患者。所有患者均接受根治术或保乳切除术。比较134例EBC患者的肿块体积大小、淋巴结转移、人类表皮生长因子受体2(HER-2)、激素受体和组织学分级等与循环肿瘤细胞(CTC)检出率和检出数量的关系。分析手术前后患者CTC检出率和检出数量。结果 EBC患者肿块体积大小、淋巴结转移、激素受体和组织学分级等与CTC检出率和检出数量间差异无统计学意义(P>0.05)。CTC检测水平仅与HER-2表达有关,HER-2阳性患者CTC检出率明显高于HER-2阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。HER-2阳性患者与HER-2阴性患者CTC检出数量方面差异无统计学意义(P>0.05)。EBC患者手术前、手术后3~4 d、手术后7~8 d和手术后20~30 d(首次化疗前)CTC检出率分别为35.8%、53.7%、37.3%和36.6%,CTC检出数量分别为(2.2±1.5)个、(5.6±2.1)个、(3.5±1.7)个和(2.3±1.4)个。手术后3~4 d CTC水平比较手术前明显升高,差异有统计学意义(2=5.815,P<0.05)。手术后7~8 d降至术前水平,差异无统计学意义(P>0.05)。首次化疗前,CTC仍维持在手术前水平,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CTC水平与EBC患者HER-2的表达明显相关,CTC检测可作为预测乳腺癌患者治疗反应的一个重要指标。     

循环肿瘤细胞检测技术的研究进展

循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTCs）是导致发生肿瘤远处转移和复发的必要前提。随着靶向治疗的不断进步,对于无法取得肿瘤组织的晚期癌症患者,CTCs可作为一种肿瘤组织替代物指导患者治疗方案的选择。精确计数以及分子生物学分析对于肿瘤患者的预后判断、疗效评价以及个体化治疗均有重要的指导作用。随着CTCs检测技术不断发展,CTCs检测的准确性明显提高。本文针对CTCs的检测技术进行综述。      

壳聚糖纳米粒介导人表皮生长因子受体2小干扰RNA抑制乳腺癌细胞迁移

目的以壳聚糖纳米粒作为人类表皮生长因子受体2小干扰RNA（HER-2siRNA）的载体转染人乳腺癌细胞SK—BR-3,观察HER-2沉默对其体外迁移能力的影响。方法采用离子凝胶法制备壳聚糖．HER．2siRNA纳米粒,原子力显微镜观察纳米粒的形态。分4组进行转染,分别加入转染试剂壳聚糖-HER-2siRNA纳米粒（实验组）、Lipofectamine^TM2000和HER-2siRNA（阳性对照组）、壳聚糖-阴性对照siRNA纳米粒（阴性对照组）和空白壳聚糖纳米粒（空白组）。-步法逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot鉴定HER-2在SK—BR-3细胞中的表达变化。Transwell小室法检测HER-2siRNA对细胞体外迁移能力的影响。统计分析采用单因素方差分析、K—WH秩和检验。结果成功制备了壳聚糖-siRNA纳米粒,呈球形,大小约100nm。实验组能有效抑制HER-2mRNA和蛋白的表达以及SK—BR-3细胞的体外迁移能力,与阴性对照组和空白组相比差异有显著的统计学意义（P均=0．000）。结论壳聚糖纳米粒介导的HER-2siRNA能有效抑制人乳腺癌细胞SK—BR-3中HER-2的表达及其体外迁移能力。     

乳腺癌患者血清人表皮生长因子受体2胞外域检测的临床研究现状

目前，全世界用于人表皮生长因子受体（human epidermal growth fator receptor，HER）-2／neu基因的检测方法很多，主要有免疫组织化学法（immunoh istochemistry，IHC）、     

乳腺癌患者外周血中循环肿瘤细胞的检测及临床意义

目的:探讨乳腺癌患者外周血中循环肿瘤细胞（circulating tumor cell,CTC）检测的临床意义。方法:应用纳米基底富集分离及免疫荧光染色方法检测CTC数目变化和CTC-Her2表达,分析CTC与临床病理特征的关系。结果:乳腺癌患者外周血中CTC的检出率明显高于乳腺良性病变（43.9％ vs 0）,两者比较差异有统计学意义（P＜0.05）。CTC检测与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、组织类型、淋巴结转移及激素受体ER和PR表达无关（P＞0.05）。CTC检测与脉管内查见癌栓相关（P＜0.05）。组织学Her2阳性与CTC-Her2阳性具有较高的一致性。结论:CTC可能反应乳腺癌的转移能力,CTC检测可以作为判断乳腺癌预后的新指标。CTC-Her2检测可能有助于实时Her2状态的判断。     

乳腺癌循环肿瘤细胞临床应用研究进展

目的:总结乳腺癌循环肿瘤细胞(CTC)的临床应用价值.方法:以乳腺肿瘤、CTC、微转移为关键词,检索1999-01-2008-11 PubMed、Ovid、Science Direct、Springer、CNKI和维普数据库的相关文献.纳入标准:关于CTC或微转移与乳腺癌预后或辅助治疗疗效关系的文献.共纳入分析43篇文献.结果:初次治疗前转移性乳腺癌患者CTC≥5个/7.5 mL或Ⅰ～Ⅲ期乳腺癌患者CTC阳性均可提示预后不良;第1个周期化疗后转移性乳腺癌患者CTC增加到或仍维持在≥5个/7.5 mL提示治疗无效或效果不佳.辅助治疗期间Ⅰ～Ⅲ期乳腺癌患者外周血CTC的变化情况与疗效密切相关;原发肿瘤细胞HER-2阴性而CTCHER-2为阳性的患者仍可获益于Herceptin治疗.结论:检测乳腺癌CTC有助于准确的判断顸后,并为及时评判和监测辅助治疗效果提供依据,有利于患者的个体化治疗,具有重要的临床应用价值.     

早期乳腺癌hMAM mRNA阳性循环肿瘤细胞检测及其临床意义

 目的 研究早期乳腺癌hMAM mRNA阳性循环肿瘤细胞检测的临床意义。 方法 巢式RT PCR检测50例早期乳腺癌患者术后辅助治疗前外周血hMAM mRNA阳性细胞,随访。24例乳腺良性疾病患者和20例健康体检志愿者作对照。 结果 早期乳腺癌患者术后辅助治疗前外周血有核细胞hMAM mRNA阳性率26.0%,与良性乳腺疾病患者（4.2%）、健康体检志愿者（0%）比较,差异有统计学意义(分别为P=0.025、P=0.012);其hMAM mRNA阳性率与癌组织HER2过表达相关（P=0.037）;13例阳性患者中8例（61.5%）随访出现复发转移（P=0.004）,中位无瘤生存期明显降低（P=0.002）。 结论 hMAM mRNA是检测乳腺癌循环肿瘤细胞较为理想的分子标记物。早期乳腺癌患者术后辅助治疗前hMAM mRNA阳性循环肿瘤细胞检测,可能是预测复发转移和预后不良的辅助指标。     

新辅助化疗对乳腺癌疗效和雌激素受体孕激素受体Ki-67和人表皮生长因子受体2表达的影响分析

目的了解新辅助化疗（NAC）在局部进展期乳腺癌治疗前后ER、PR、Ki-67及HER-2的变化,探讨其与新辅助化疗疗效之间的相关关系。方法 46例接受新辅助化疗的乳腺癌患者纳入研究,分析患者术前弹射式空芯针穿刺活检标本和术后大标本癌组织ER、PR、Ki-67和HER-2表达的变化。患者化疗前行乳腺肿瘤粗针穿刺活检并免疫组化方法检测肿瘤组织ER、PR、Ki-67和HER-2的表达。化疗后评估疗效并对接受手术的患者的手术标本通过同法检测各指标的表达。结果新辅助化疗前后ER、PR、Ki-67和HER-2的表达均发生了改变,新辅助化疗前ER、PR、Ki-67和HER-2阳性表达的肿瘤组织新辅助化疗后下调（ER：82.6%和80.4%;PR：78.3%和71.7%;Ki-67：39.1%和30.4%;HER-2：28.3%和26.1%）,但没有统计学意义（P〉0.05）。ER、PR、Ki-67和HER-2阳性表达疗效有效率与阴性表达有效率分别为ER：68.4%和50.0%;PR：66.7%和60.0%;Ki-67：77.8%和57.1%;HER-2：53.8%和69.7%。ER、PR、Ki-67、HER-2表达状态与化疗效果均无明显的关系（均P〉0.05）。结论新辅助化疗可以改变ER、PR、Ki-67和HER-2的表达,本临床研究未发现ER、PR、Ki-67和HER-2的变化与局部进展期乳腺癌的新辅助化疗疗效有相关关系。     

循环肿瘤细胞在乳腺癌中的研究进展

对于乳腺癌患者可以通过Cell Search系统自动检测外周血中循环肿瘤细胞(CTC)数目.近期相关研究的结果提示对于晚期乳腺患者而言,CTC水平可以用来预测患者预后并早期预测对治疗的反应.但是在早期乳腺癌中CTC的预测价值并不确切.进一步了解CTC的生物学特性以及明确其作为预后预测的应用价值仍需要大型前瞻性临床研究结...     

乳腺癌患者循环肿瘤细胞检测研究进展

0引言肿瘤转移是乳腺癌治疗失败的首要原因。乳腺癌患者循环血中的微转移经常规病理检查和影像检查如X线、CT等均难以发现。早在1999年,Ghos-