疏肝利胆汤抑制兔胆结石形成的作用及机制研究

[目的]观察疏肝利胆汤对胆石症家兔胆汁成分和胆汁成石趋势的影响。[方法]将30只家兔随机分为正常对照组、胆结石病理组、疏肝利胆汤治疗组,正常对照组每日喂普通颗粒饲料100g;胆结石病理组每日喂含1.2%高胆固醇饲料100g;疏肝利胆汤治疗组每日喂含1.2%高胆固醇饲料100g及疏肝利胆汤13ml,喂养8周,观察疏肝利胆汤对胆石症家兔胆汁成分和胆汁成石趋势的影响。[结果]疏肝利胆汤组胆汁中的总胆固醇、胆汁成石指数显著低于胆结石病理组,胆囊成石率也较结石组低,差异有统计学意义。[结论]疏肝利胆汤能够显著降低胆汁中的胆固醇含量,抑制胆石成石趋势,减少胆囊结石的发生。     

脾切除对猪血清致大鼠肝纤维化的影响

[目的]研究脾切除对猪血清致大鼠肝纤维化的影响.[方法]雄性Wistar大鼠37只,随机分为正常组、模型组、切脾组和假手术组.采用猪血清腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型,观察大鼠肝脏病理与胶原染色,检测大鼠肝功能和肝脏羟脯氨酸(Hyp)水平.[结果]猪血清腹腔注射12周后,模型组、切脾组和假手术组大鼠肝脏有纤细至较粗的完整的纤维间隔形成.与正常组大鼠相比,模型组、切脾组和假手术组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性明显升高[(46.79±4.76)、(52.50±4.49)、(51.90±3.47)U/L,P＜0.05],白蛋白明显下降[(28.03±1.41)、(27.86±1.66)、(28.82±1.37)g/L,P＜0.01,＜0.05],Hyp明显升高[(303.77±32.59)、(332.62±54.06)、(300.17 ±48.05)μg/g湿肝重,P＜0.01],而总蛋白和总胆红素无明显变化.与模型组相比,切脾组ALT活性明显高于模型组(P＜0.05),Hyp与模型组相比有增高的趋势.[结论]切除脾脏不能阻止猪血清致大鼠肝纤维化模型的形成.     

七方胃痛胶囊对实验性胃溃疡大鼠一氧化氮与热休克蛋白70的影响

[目的]探讨中药七方胃痛胶囊抗溃疡的机制及提高溃疡愈合质量(QOUH)的应用价值.[方法]40只Wistar大鼠制作乙酸诱发大鼠胃溃疡模型后第3天随机分为4组:对照组,雷尼替丁胶囊组,七方胃痛胶囊大、小剂量组.用硝酸还原酶法检测血清一氧化氮(NO).取大鼠胃组织,测量溃疡面积.以免疫组化染色切片观测溃疡边缘黏膜组织炎症细胞数、新生血管数,并测定溃疡边缘黏膜组织热休克蛋白(HSP)70的表达情况.[结果]七方胃痛胶囊组的溃疡指数明显低于雷尼替丁组和对照组(P＜0.05,＜0.01);再生黏膜的新生血管数明显高于雷尼替丁组和对照组(P＜0.05,＜0.01);固有层炎症细胞浸润数明显低于雷尼替丁组和对照组(P＜0.01,＜0.05);血清NO溃疡边缘黏膜组织的HSP70水平均明显高于雷尼替丁组和对照组(P＜0.05,＜0.01).[结论]七方胃痛胶囊抗溃疡的作用机制与提高血清NO及溃疡边缘黏膜组织HSP70水平有关,且能降低溃疡指数与炎症细胞浸润,增加再生黏膜的新生血管生成,对于提高QOUH有一定的价值.     

复方参七消痞汤对慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织病理形态及血清生长激素皮表皮生长因子的影响

[目的]观察参七消痞方(SQ)对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠组织病理形态及血清生长激素(GH)、表皮生长因子(EGF)的影响.[方法]通过N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)综合其他因素建立CAG大鼠模型(14周),之后再随机分为模型组、摩罗丹组、叶酸组、参七消痞组.模型组给予0.9％氯化钠1 ml/0.1 kg灌胃,摩罗丹组摩罗丹3.6 g/kg灌胃,叶酸组叶酸2 mg/kg灌胃,参七消痞组参七消痞汤9 g/kg灌胃,共计8周.另从实验开始造模时设立空白对照组.每周监测大鼠体重,第22周取材,观察大鼠胃病理组织学改变,测量胃窦区褶皱处胃黏膜腺体厚度(L1)/黏膜肌层厚度(L2)的比值;腹主动脉取血分离血清,放免法检测血清GH、EGF水平.[结果]参七消痞组与模型组相比,肉眼及镜下观察均大鼠胃黏膜组织病理形态有不同程度的改善,L1/ L2比值提高(P＜0.01);血清GH水平有升高趋势(P＜0.05),血清EGF水平显著升高[(0.84±0.17)、(0.72±0.17)μg/L,P＜0.01].[结论]复方参七消痞汤能明显改善CAG大鼠的胃黏膜病变,其治疗机制可能与升高血清EGF水平有关.     

健脾益气方促进胃黏膜修复机制研究

[目的]研究健脾益气中药对大鼠胃黏膜保护和修复的机制,观察大鼠胃黏膜表皮生长因子受体(EG-FR)和血清一氧化氮(NO)的变化.[方法]采用乙酸致溃疡大鼠模型,以SABC免疫组织化学方法观察溃疡周围胃黏膜的EGFR并进行图像分析,用镀铜镉还原比色法测定血清NO3-/NO2-代表血清NO水平.[结果]模型组胃黏膜EGFR表达较对照组增加(P＜0.01),中药组进一步升高(P＜0.01).模型组血清NO3-/NO2-明显低于对照组(P＜0.01),中药组血清NO3-/NO2-则显著高于模型组(P＜0.01).[结论]中药健脾益气方通过EGFR和NO促进胃粘膜保护和修复.     

柴茵丹参汤治疗利福平肝损伤的实验研究

[目的]观察柴茵丹参汤对大鼠利福平(RFP)肝损伤的治疗作用,并探讨其机制.[方法]RFP灌胃21 d诱导大鼠肝损伤模型,柴茵丹参汤、甘利欣、护肝片分别治疗14 d后,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性、血清和肝组织丙二醛(MDA)水平、肝组织病理变化及超微结构.[结果]柴茵丹参汤、甘利欣、护肝片可在不同程度上降低ALT活性(P＜0.01,＜0.05,＜0.01);柴茵丹参汤、护肝片可明显减少血清和肝组织MDA水平(P＜0.01,＜0.01,＜0.05,＜0.05),而甘利欣效果稍差(P＜0.05);3种药物可减轻肝组织细胞水肿、脂肪变性及点状坏死;柴茵丹参汤可减轻肝细胞线粒体肿胀、内质网扩张,减少凋亡的肝细胞数量,甘利欣、护肝片也可减轻肝细胞超微结构改变,但脂肪代谢异常.[结论]柴茵丹参汤对RFP肝损伤有一定的治疗作用.     

壳脂胶囊对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织PPAR-γ、IR的作用研究

[目的]探讨壳脂胶囊对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织PPAR-γ、IR的影响.[方法]高脂饮食饲喂SD大鼠以制备非酒精性脂肪性肝炎模型,造模同时进行药物干预.干预8周后,自动生化分析仪检测血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、总胆固醇（CHO）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、甘油三酯（TG）水平,苏木精-伊红染色、油红O染色观察肝组织病理,RT-PCR检测PPAR-γmRNA和IR mRNA,Western-blot检测PPAR-γ和IR蛋白表达.[结果]与模型组比较,壳脂胶囊能明显降低血清TG、CHO、LDL、AST、ALT水平（P＜0.01）;壳脂胶囊组脂肪变性和炎症反应程度均较模型组有一定的减轻;壳脂胶囊组大鼠PPAR-γ和IR的蛋白和基因表达水平均高于模型组（P＜0.05）.[结论]壳脂胶囊可能通过上调肝组织PPAR-γ、IR蛋白及PPAR-γ mR-NA、IR mRNA的表达,改善胰岛素抵抗,进而调解脂肪代谢,改善肝脏功能,达到防治NASH的目的.     

丹参注射液联合谷胱甘肽液治疗对脂肪肝大鼠脂质损伤的保护作用

[目的]探讨丹参注射液联合谷胱甘肽(古拉啶)溶液治疗对脂肪肝大鼠脂质损伤的保护作用.[方法]用高脂饲料建立大鼠非酒精性脂肪肝模型,并用丹参注射液联合古拉啶溶液进行治疗,观察药物对脂质损伤保护作用的影响.[结果]丹参注射液、古拉啶溶液及联合用药后血清总胆固醇(TC)水平分别与模型组比较差异均有统计学意义(P＜0.01,＜0.05);丹参注射液、古拉啶溶液治疗后组织中三酰甘油(TG)水平分别与模型组比较P＜0.05及P＜0.01.丹参注射液降低血清中丙二醛(MDA)水平(P＜0.05),联合用药降低组织中MDA水平(P＜0.05),古拉啶溶液升高组织中超氧化物歧化酶(SOD)水平(P＜0.05).[结论]丹参注射液、古拉啶溶液及联合用药均具降血脂、改善脂质过氧化作用;联合用药在阻止肝纤维化增生方面略有优势.     

鳖甲煎丸对肝纤维化大鼠作用机制研究

[目的]探讨鳖甲煎丸抗肝纤维化的作用机制.[方法]采用复合因素建立肝纤维化大鼠模型.将大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、鳖甲煎丸高剂量组、鳖甲煎丸等剂量组.秋水仙碱组[0.11mg/（kg·d）]、鳖甲煎丸高剂量组[2.2 g/（kg·d]及鳖甲煎丸等剂量组[1.1 g/（kg·d]分别予以相应药物灌胃,模型组及正常组给予等剂量的0.9％氯化钠灌胃,共6周.采用比色法检测血清丙氨酸氨基转移酶,天冬氨酸转氨酶（ALT、AST）水平,苏木精-伊红染色观察肝组织病理学变化及肝纤维化程度,免疫组化方法检测肝组织瘦素、瘦素受体表达水平.[结果]鳖甲煎丸能降低大鼠血清ALT、AST水平,减轻肝脏炎症及纤维化程度（均P＜0.01）;抑制模型大鼠肝组织瘦素及瘦素受体的表达（P＜0.01）.[结论]鳖甲煎丸能有效减轻模型大鼠肝纤维化的病理程度.其作用机制可能与降低大鼠血清ALT、AST水平,抑制大鼠肝组织瘦素及瘦素受体的表达密切相关.     

胃肠舒泰颗粒对鼠血胃动素及胃肠运动的影响

[目的]观察胃肠舒泰(WCST)颗粒对小鼠胃排空及小肠推进作用和大鼠血清胃动素(MOT)的影响.[方法]ICR小鼠100只,胃排空实验、小肠推进实验各选50只,分别随机分为5组,空白对照组、WCST颗粒小、中、大剂量组及西沙比利组,观察各组胃排空及小肠推进率.SD大鼠50只,亦分5组,观察WCST颗粒对大鼠血清MOT的影响.[结果]WCST颗粒大、中剂量组小鼠胃排空率及小肠推进率较空白对照组均明显增快(P＜0.05～＜0.01),大、中剂量组大鼠血清中MOT亦明显增高(P＜0.05～0.01).[结论]WCST颗粒具有促进小鼠胃排空及小肠推进率和升高大鼠血清MOT的作用.这一机制可能与促进内源性MOT释放有关.     

血浆脂蛋白在胆囊胆固醇结石形成中的作用研究

目的：探讨血浆脂蛋白在胆囊胆固醇结石形成中的作用。方法：用常规生化方法分别测定了56例胆囊胆固醇结石及24例非胆石对照患者血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）,低密度脂蛋白（LDL）的含量。结果：胆石组血清TC、HDL、LDL以及TG／TC比值均与对照组有显著性差异（P＜0．01或P＜0．05）。并且胆囊胆固醇结石组血清TG与TG／TC比值呈显著正相关关系。结论：本实验结果提示：血浆脂蛋白的变化,可能因影响体内的胆固醇及胆汗酸等代谢而与胆囊胆固醇结石的形成密切相关,TC、TG的测定及TG／TC比值可以作为间接反映胆囊胆固醇结石成核的参考指标。     

Effects of sphingolipid synthesis inhibition on cholesterol gallstone formation in C57BL/6J mice

Background: Sphingolipids play a very important role in cell membrane formation, signal transduction and plasma lipoprotein metabolism. The first rate‐limiting step in the sphingolipid biosynthetic pathway is catalyzed by serine palmitoyltransferase (SPT), and myriocin is a potent and specific inhibitor of SPT. We investigated the impact of SPT inhibition on cholesterol gallstone formation in C57BL/6J mice. Methods: Three groups of eight‐week‐old C57BL/6J mice were utilized. Each group consisted of 20 mice; group A, B, and C were fed normal chow, lithogenic diet with phosphate buffered saline, and lithogenic diet with myriocin (0.3 mg/kg), respectively, for 6 weeks. The ceramide levels in both serum and bile were assessed by high performance liquid chromatography analysis. Protein expression of ERK, JNK and p38 in the extracted gallbladder were determined by Western‐blot analysis. Results: Myriocin treatment caused a significant decrease in the rate of cholesterol gallstone formation. The lithogenic diet mice (group B) showed the highest ceramide activities in both the serum and bile among all the tested groups and there was significant suppression of the ceramide levels in both the serum and bile of the myriocin‐treated mice (group C, p < 0.05). Phosphorylation of p38 in the gallbladder was increased in the lithogenic‐diet mice and the expression of phosphorylated p38 was significantly suppressed in the myriocin treated mice. Conclusions: SPT inhibition by myriocin suppressed gallstone formation and the levels of ceramide in both the serum and bile. p38 in the cellular signaling pathways might be associated with cholesterol gallstone formation.     

The Expression of Hepatic Carboxypeptidase E is Decreased in Patients with Cholesterol Gallstone

Background/Aims:

Decreased carboxypeptidase E (CPE) expression is associated with numerous pathophysiological conditions. This study aimed to investigate the potential function of hepatic CPE in cholesterol gallstone formation.

Patients and Methods:

Patients with cholesterol gallstone (CGS group) and patients without cholesterol gallstones (non-CGS group) were enrolled. The serum total cholesterol, triglyceride, and biliary composition were analyzed. Eight liver samples from two patients without CGS and six patients with CGS were subjected to cDNA microarray analysis. Hepatic CPE expression was detected by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR), Western blot, and immunohistochemical analysis. Plasma CCK level was measured by ELISA.

Results:

cDNA microarray identified CPE as a gene downregulated in the CGS group. RT-PCR showed that CPE mRNA level was lower in CGS group than in control (P < 0.05, t-test). Moreover, Western blot and immunohistochemistry analysis showed that CPE protein level was significantly lower in CGS group than in the control group. In addition, plasma CCK level was lower in CGS group than in the control group. A positive correlation was found between serum CCK level and hepatic CPE mRNA level (r2 = 0.713, P = 0.003).

Conclusions:

Down-expression of liver CPE may reduce the secretion of serum CCK and contribute to the formation of cholesterol gallstone.     

中药胆宁片治疗胆囊胆固醇结石作用机制的实验研究

[目的]探讨胆宁片对胆固醇结石豚鼠胆汁中黏蛋白及血清IL-2水平的影响.[方法]雌性豚鼠60只,体重（300±20）g,随机分为空白组、模型组、胆宁片组和熊脱氧胆酸组,每组15只;除空白组外,采用“高胆固醇致石食饵诱发法”建立豚鼠胆固醇结石模型,并于造模成功后分别对各治疗组予药物干预,胆宁片组灌服胆宁混悬液0.52 g· kg-1·d-1,熊脱氧胆酸组灌服熊脱氧胆酸混悬液0.05 g·kg-1·d-1,模型组与空白组均灌服等容量的生理盐水,8周后观察各组豚鼠一般情况、胆汁中黏蛋白及血清IL-2水平.[结果]胆宁片可显著降低豚鼠胆固醇结石成石率,并能显著降低胆囊黏蛋白及血清IL-2水平（P＜0.05,P＜0.01）.[结论]胆宁片能直接调节胆囊黏蛋白等相关促成核因子,同时能通过调节血清中IL-2间接调控胆囊黏蛋白水平,从而调控成核过程,对胆囊胆固醇结石有一定的治疗作用.     

缬草提取物对类脂质代谢的影响与对胆囊结石治疗作用的关系

目的：研究缬草提取物对胆囊结石的治疗作用对血浆载脂蛋白、血清及胆汁类脂水平影响的关系。方法：大耳白种 家兔，手术植入人胆固醇为主的混合结石 。实验组灌喂缬草提取物，对照组灌喂等容、等渗盐水，8周后取出胆囊结石称重，取胆总管胆汁测胆固醇、磷脂、总胆汁酸浓度；取血清查载脂蛋白A1、B及胆固醇、磷脂、总胆汁酸水平。结果：实验组胆囊结石平均重量较对照组明显减轻（P＜0．01），结石消失率达75％；实验组血清胆固醇及总胆汁酸水平低于对照组（P＜0．05，P＜0．01），载脂蛋白A1高于对照组（P＜0．01），载脂蛋白B低于对照组（P＜0．01），胆总管胆汁酸实验组高于对照组（P＜0．05）。结论：缬草提取物对胆囊结石有明显治疗作用，其治疗作用与其对血清载脂蛋白及对血、胆汁内的类脂质水平改变有关。     

复方甘枣宁预防大鼠非酒精性脂肪肝的实验研究

[目的]研究复方甘枣宁对高脂饮食诱发的大鼠脂肪肝的预防作用.[方法]采用高脂饲料喂饲制作大鼠非酒精性脂肪肝模型,同时以复方甘枣宁灌胃,12周后检测血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,并作病理组织学观察,同时称体重、肝脏重,计算肝指数.[结果]复方甘枣宁明显减轻肝组织内脂肪变性,降低血清TC与AST水平.[结论]复方甘枣宁对高脂饮食诱发的大鼠非酒精性脂肪肝具有一定的预防作用.     

养肝利胆颗粒对胆固醇结石小鼠肝脏基因表达的影响

[目的]探讨养肝利胆颗粒对胆固醇结石C57小鼠肝脏基因表达的影响。[方法]38只C57BL／6雌性小鼠随机分为正常对照组（n=10）、模型组（n=15）和养肝利胆颗粒组（n=13）。其中后2组小鼠采用高脂饮食诱发法建立胆固醇结石模型。造模同时,养肝利胆颗粒组小鼠予养肝利胆颗粒2．1g·kg^-1·d^-1灌胃治疗。8周后观察各组小鼠的成石率,并用OligO GE Array芯片检测肝脏基因表达的改变。[结果]正常对照组成石率为0;模型组成石率为73．33％;养肝利胆颗粒组成石率为30．77％,明显低于模型组（P〈0．01）。模型组较正常对照组上调基因34条,养肝利胆颗粒组较模型组下调基因12条。[结论]养肝利胆颗粒可以通过调控胆固醇脂质代谢、炎症应答等相关基因表达来发挥防治胆石症的作用。     

胆囊结石患者胆囊壁CCK-AR mRNA表达及血浆CCK-8水平与胆囊排空功能的关系

目的探讨胆囊结石患者胆囊收缩素(CCK)-A受体(AR)mRNA表达及血浆CCK-8水平与胆囊排空功能的关系。方法60例胆囊结石患者(结石组)和30例无胆囊结石而行上腹部手术者(对照组),术前用B超测定胆囊排空功能,RT-PCR技术检测胆囊壁CCK-ARmRNA,放射免疫法检测血浆CCK-8。结果结石组CCK-ARmRNA为0.59±0.11,与对照组的0.91±0.06相比,P<0.01;结石组中,胆囊收缩减弱者的CCK-ARmRNA为0.52±0.06,与收缩正常者的0.70±0.07相比,P<0.01;结石组血浆CCK-8为(42.91±2.88)pmol/L,与对照组的(31.50±1.62)pmol/L相比,P<0.05;结石组术前血浆CCK-8为(42.91±2.88)pmol/L,与术后的(34.21±2.56)pmol/L相比,P<0.05。结论CCK-AR、CCK-8在胆囊运动调节中发挥重要作用。     

高胆固醇饮食对胆结石形成的研究

通过高胆固醇饮食对胆结石形成的动物试验 ,探讨高胆固醇饮食的成石原因和机理 ,为在饮食上预防胆结石的形成提供试验依据 ,为胆结石的临床治疗和病人的康复提出理论依据 ,并为今后胆固醇结石的研究提供适宜的动物模型。本研究以狗作为试验动物 ,用 0 3%的高胆固醇饲料进行试验喂养 ,连续喂养 6周 ,观察动物胆结石的形成 ,测定血中胆固醇和甘油三酯水平 ,分析胆汁中成分的改变。在试验四周内试验组动物形成胆结石 ,且成石率为 10 0 % ,结石直径为 1mm～ 11mm。试验组动物血清胆固醇和甘油三酯水平显著提高 (p <0 0 1) ,胆汁中胆固醇和胆固醇结晶显著升高 (p <0 0 1)。通过高胆固醇膳食 ,试验动物血清及胆固醇和甘油三酯水平增加 ,胆汁中胆固醇增加 ,成石性胆汁形成。提示胆固醇代谢的异常变化在胆囊结石中起作用。     

三七总皂苷对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝组织脂质沉积及NO/iNOS/NF-κB通路的影响

目的 研究三七总皂苷(PNS)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠肝脏脂质沉积及一氧化氮(NO)-诱导型一氧化氮合酶(iNOS)-核因子κB(NF-κB)信号通路的影响.方法 随机将40只雄性BALB/c小鼠分为对照组、模型组、三七总皂苷(PNS)干预组和辛伐他汀干预组,每组10只.采用高脂饲料持续喂养法建立NAFL...