蒺藜总皂苷对缺氧复氧心肌细胞存活及损伤形态的影响

目的观察蒺藜总皂苷对模拟缺血再灌注心肌细胞损伤的影响。方法利用原代培养的SD乳鼠心肌细胞建立模拟心肌缺血再灌注模型,分为正常组、模型组和蒺藜总皂苷大、小剂量组,观察损伤后心肌细胞搏动频率、存活率及心肌酶的释放,并以光镜、电镜观察形态学变化。结果蒺藜总皂苷大、小剂量组模拟缺血再灌注后心肌细胞存活率均提高（P〈0．01或0．05）,心肌酶释放受抑（P〈0．01或0．05）,且大剂量组比小剂量组更为明显（P〈0．05）。应用蒺藜总皂苷还可改善损伤后的搏动功能（P〈0．01）,减轻细胞超微结构的损害。结论蒺藜总皂苷对模拟缺血再灌注损伤心肌细胞有保护作用。     

白藜芦醇预处理对心肌细胞缺血/再灌注损伤的保护作用

目的观察白藜芦醇预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法培养乳鼠心肌细胞,模拟I/R损伤,随机分为阴性对照组、缺血再灌组及白藜芦醇预处理组,采用台盼蓝穿透法及MTT比色法测定细胞活力,检测细胞培养液中LDH活性及心肌细胞Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-ATP酶活力。结果Res预处理可提高心肌细胞活力;稳定心肌细胞膜,抑制LDH释放;保护心肌细胞钠泵和钙泵功能,减轻再灌注损伤。结论白藜芦醇预处理对心肌缺血再灌注损伤有明显保护作用。     

蒺藜总皂苷对缺氧复氧损伤心肌细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2与bax表达的影响

目的观察蒺藜总皂苷（GSTT）对培养乳鼠心肌细胞模拟缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。方法利用原代培养的SD乳鼠心肌细胞建立模拟心肌缺血再灌注（M1／R）模型,分正常培养组、模型组和蒺藜总皂苷大、小剂量组。流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,免疫组化检测心肌细胞凋亡基因bcl-2、bax的表达。结果GSTT大、小剂量组均可显著降低细胞凋亡率（P〈0．05）。GSTT大剂量组可显著上调bcl2表达（P〈0．01）、下调bax表达（P〈0．05）,而GSTT小剂量组可上调bcl—2表达（P〈0．05）,但对bax表达无明显影响。结论GSTT可抑制模拟缺血再灌注损伤心肌细胞的凋亡,其作用可能是通过上调bcl-2、下调bax表达实现的。     

缺血预处理对兔心肌细胞凋亡的影响

 目的 探讨缺血预处理及缺血再灌注对兔缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响.方法 制备兔缺血预处理(ischemic preconditioning,IP)、缺血再灌注损伤(I/R)模型,采用末端脱氧核苷酶转换酶介导的生物素平移缺口末端标记技术(transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况.结果 RI组细胞凋亡率(43.37±4.82)%,IP组虽然也有一定的心肌细胞凋亡率(24.53±2.95)%,但较I/R组明显降低(P<0.01).IP组心肌梗死范围较I/R组明显减小.结论 心肌缺血再灌注损伤可诱发或加重心肌细胞凋亡,IP能明显减少缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡的发生率,能明显减少心肌梗死范围,减轻缺血再灌注损伤;IP能减少心肌梗死范围、减轻缺血再灌注损伤的机制可能与其能明显减少心肌细胞凋亡有关.     

阿托伐他汀对心肌细胞缺氧／复氧损伤的保护作用

目的探讨阿托伐他汀保护心肌细胞缺氧／复氧损伤的机制,为临床防治缺血再灌注损伤寻找新思路。方法分离SD乳鼠（出生1～3d）心肌细胞进行原代培养,建立H/R模型,取培养第3d的心肌细胞随机分成3组：正常对照组（CON组）、H,R组、H／R＋ATV组。应用MTS法检测心肌细胞的存活率;化学发光免疫分析法检测心肌细胞特异性损伤指标肌钙蛋白I（cTnI）的含量;采用SYBRGREEN荧光定量PCR检测各组HIF—1a、VEGFmRNA表达水平。结果与CON组比较,H／R组心肌细胞存活率明显降低（P〈0．05）,血清肌钙蛋白I明显升高（P〈O．05）,HIF—1a和VEGFmRNA表达水平显著升高（P〈0．05）;用阿托伐他汀预处理后心肌细胞存活率明显升高（P〈0．05）,血清肌钙蛋白I明显降低（P〈0．05）,HIF-1d和VEGFmRNA表达水平进一步升高（P〈0．05）。结论阿托伐他汀可能通过上调HIF-1a及VEGF的表达水平进而保护缺氧／复氧损伤的心肌细胞。     

美托洛尔对心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的美托洛尔对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响。方法通过建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，分别于不同时段给予美托洛尔干预，监测血流动力学、心肌梗死面积及其进行DNA ladder、TUNUL定性和定量评价心肌细胞凋亡。结果心肌缺血即刻和再灌注即刻给与美托洛尔治疗能显著减少心肌梗死面积（P〈0．05），降低心肌细胞凋亡水平（P〈0．05）。结论恰当的使用美托洛尔能明显减少再灌注后心肌梗死面积，降低心肌细胞凋亡水平，保护心功能。     

用99^Tc^m标记突触结合蛋白Ⅰ-C2A片段评价缺血预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的应用99^Tc^mO4^-标记突触结合蛋白Ⅰ-C2A片段（99^Tc^m-SytⅠ-C2A）评价缺血预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法（1）采用2-亚氨基噻吩盐酸盐（2-IT）方法标记SytⅠ-C2A片段,纸层析法测定99^Tc^m-SytⅠ-C2A放化纯,用喜树碱处理的Jurket细胞测定标记蛋白质活性。（2）制备心肌缺血再灌注大鼠模型（A组）和心肌缺血预处理大鼠模型（B组）各6只,分别由尾静脉注射99^Tc^m-SytⅠ-C2A7．4MBq,注射后1h处死动物,取出心脏,用生理盐水将心肌冲洗干净,并进行氯化三苯基四氮唑（TTC）染色,根据染色结果,分别取2组缺血损伤心肌和正常心肌,测量质量及放射性计数,比较2组缺血损伤心肌和正常心肌的每克组织百分注射剂量率（％ID／g）。采用SPSS12．0软件行统计分析,数据间比较用t检验。结果（1）标记后的99^Tc^m-SytⅠ-C2A放化纯为（98．90±0．43）％,标记蛋白质与喜树碱处理组细胞结合测定的放射性计数是未处理组细胞的（10．99±0．55）倍。（2）A组缺血损伤心肌摄取99^Tc^m-SytⅠ-C2A（2．41±0．32）％ID／g,正常心肌为（0．16±0．02）％ID／g;而B组缺血损伤心肌和正常心肌的放射性摄取则分别为（0．46±0．05）和（0．20±0．05）％ID／g。B组缺血损伤心肌的99^Tc^m-SytⅠ-C2A摄取量明显低于A组（t=8．52,P〈0．01）。结论99^Tc^m-SytⅠ-C2A可用于定量评价缺血预处理抑制心肌细胞凋亡而产生的对缺血再灌注致心肌损伤的保护作用。     

川芎嗪对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响

 目的 观察川芎嗪(Tetramethylpyrazine,TMP)对缺血心肌细胞凋亡以及病理组织学改变的作用.方法 采用大鼠心肌缺血再灌注(Myocardial ischemic reperfusion,MIR)损伤模型,用缺口末端标记技术(TDT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法检测MIR过程中不同时间点缺血心肌细胞凋亡的动态变化及川芎嗪对其影响,并采用电镜观察其病理组织学改变进行对照研究.结果 (1)非缺血心肌无TUNEL阳性细胞出现,MIR 60 min大鼠缺血心肌中可见TUNEL阳性细胞,120 min时TUNEL阳性细胞数目最多.(2)与单纯MIR大鼠相比,川芎嗪干预MIR大鼠缺血心肌细胞中TUNEL阳性细胞数明显减少,心肌缺血再灌注60 min时分别为(36.30±8.76)个,张和(24.70±7.15)个/张(P<0.05),120 min时分别为(48.43±23.87)个/张和(10.04±8.11)个,张(P<0.01).(3)电镜结果显示MIR 60 min时,心肌缺血性改变最明显,川芎嗪干预大鼠再灌注组心肌缺血损伤有一定减轻.结论 心肌缺血再灌注可诱导心肌细胞发生凋亡,且随再灌注时间的延长,心肌细胞凋亡数目逐渐增多.川芎嗪干预可使缺血心肌细胞凋亡减少,病理组织学改变亦有减轻.     

大鼠急性心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡与Bcl—2／Bax蛋白的表达

目的：为了证实急性心肌缺血再灌注过程中存在着不同程度的心肌细胞凋亡现象,初步研究心肌细胞凋亡与Bcl-2/Bax蛋白表达的关系。方法：电镜观察心肌细胞的超微结构变化,抽提心肌组织DNA琼脂糖凝胶电泳,TUNEL法原位标记凋亡的心肌细胞,免疫组化技术和图像分析技术检测心肌细胞内Bcl-2/Bax蛋白表达。结果：缺血及再灌注组电镜观察心肌细胞出现典型凋亡超微结构特征,TUNEL染色可见不同程度的心肌细胞凋亡阳性反应,DNA电泳显示在缺血再灌注2h组出现明显的DNA ladder,再灌注较在缺血组心肌细胞中Bcl-2表达明显降低（P＜0．05）,而Bax表达明显增高＊（P＜0．05）,结论：急性心肌缺血及再灌注能诱导不同程度的心肌细胞凋亡,Bcl-2/Bax基因对心肌细胞凋亡的发生有着重要的调控作用。     

异丙酚对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤时心肌c-fos基因表达的影响

目的观察异丙酚对离体大鼠全心缺血再灌注损伤心肌c-fos基因表达的影响,探讨其对缺血再灌注损伤心肌保护作用机制。方法Wistar大鼠36只,随机分为对照组和异丙酚组,每组又分为缺血前、缺血30min和复灌30min3个亚组。通过离体心肌灌注模型,采用免疫组化及RT-PCR观察心肌c-fos蛋白及c-fo smRNA表达水平的变化。结果与缺血前相比,缺血30min及再灌注30min亚组的c-fos蛋白的光密度值及c-fos mRNA表达水平均增加（P〈0．01）;与对照组相比,异丙酚各亚组的c-fos蛋白光密度值及c-fos mRNA表达水平均降低（P〈0．01）。结论c-fos基因参与了心肌缺血再灌注损伤的基因调节。异丙酚可减轻心肌c-fos基因的表达,并可避免或减轻心肌缺血再灌注损伤。     

促红细胞生成素对大鼠脑缺血再灌注后STATl和STAT3表达的影响

目的探讨促红细胞生成素（EPO）对大鼠局灶性脑缺血再灌注后信号转导与转录激活因子（STAT）1、磷酸化STATl（P．STATl）、STAT3、P—STAT3蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法将雄性sD大鼠80只完全随机分为假手术（A）组、单纯脑缺血再灌注（B）组、脑缺血再灌注＋生理盐水（c）组和脑缺血再灌注＋EPO（D）组,每组20只,采用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型。各组大鼠均于缺血2h后再灌注24h时,行MRI检查并计算缺血区异常信号相对面积值,Westernblot检测STATl、P—STATl、STAT3、P—STAT3蛋白表达水平的变化并计算相对灰度（rOD）值,原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡情况并计算细胞凋亡指数。应用单因素方差分析和q检验分析数据。结果MRIT,WI示B、C组在左侧大脑半球皮质及皮质下均可见大片脑缺血异常高信号影,D组仅皮质下脑实质内或仅皮质处可见斑片状脑缺血高信号影;与B、C组比较,D组异常高信号区相对面积明显减小[（28．00±4．60）％、（29．70±4．80）％和（21．10±2．40）％;F=11．285,P〈0．01]。STATl、STAT3蛋白在正常脑组织中表达,缺血再灌注及EPO干预对二者表达水平均无明显影响（F=0．806和1．558,均P〉0．05）。P—STATl在A组表达较低,rOD值为0．75±0．13,缺血再灌注后表达显著增加;与B、C组相比,D组P—STATl表达水平有所减少（B～D：2．08±0．15、2．05±0．16、1．92＋0．05;F=3．274,P〉0．05）。P—STAT3在A组表达也较低,rOD值为1．02±0．09,缺血再灌注后表达显著增加;与B、c组相比,D组P—STAT3表达明显增加（B—D：2．22±0．13、2．04±0．14、4．21±0．21;F=40．719,P〈0．01）。B、C组细胞凋亡指数分别为（42．00±1．30）％和（41．20±2．50）％,高于D组[（20．90±1．46）％;F=378．704,JP〈0．01]。结论EPO可增加脑缺血区域P—STAT3表达水平、降低P—STATl表达水平,从而减少脑细胞凋亡的数目、减小脑梗死面积。     

风筝皮瓣在拇指损伤修复及功能重建中的应用

目的研究风筝皮瓣在拇指损伤修复及其功能重建中的应用效果。方法选取我院2008--2012年间收治的100例拇指损伤患者,将其随机分为实验组和对照组各50例。对照组采用腹部皮片植皮,实验组取掌背动脉风筝皮瓣修复拇指掌侧缺损,并使用皮瓣桡侧神经吻合及髂骨移植等方式重建拇指骨结构及感觉功能。对术后皮瓣存活情况、患者神经功能及拇指运动功能进行评价。结果实验组50例患者皮瓣全部存活（100％）,再造拇指形态良好;对照组50例存活48例（96％）,且外形及质地等均较差。实验组优良率为100％,显著高于对照组的88％（P〈0．05）。实验组感觉恢复更好,S3级以上者实验组有45例（90％）,显著高于对照组的36例（72％）。两点分辨距离（2PD）实验组平均为（7．9±0．6）mm显著优于对照组的（10．4±1．2）mm（P〈0．05）。结论风筝皮瓣取用简单,旋转方便,血运可靠,成活率高,对于拇指损伤修复及功能重建有较好治疗效果。     

气管切开术在严重创伤患者救治中选择时机的分析

目的分析早期行气管切开术在救治严重创伤患者的相关指标及临床价值。方法收集我科在2002～2007年行气管切开术的293例严重创伤患者（ISS评分≥25分）,伤后1周内行气管切开术为早期组,〉1周为晚期组,分析比较两组患者的相关指标。结果早期组使用机械通气时问（9．83±1．37）天,晚期组（19．28±1．65）天（P〈0．01）;早期组在ICU治疗时间（13．94±1．25）天,晚期组（24．32±1．51）天（P〈0．01）;早期组总住院时间（78．17±12．32）天,晚期组（83．53±10．26）天（P〉0．05）;早期组肺部感染率16．4％,晚期组17．1％（P〉0．05）;早期组死亡率21．2％,晚期组18．3％（P〉0．05）。结论在救治严重创伤患者时,应根据患者的病情适时早期选择气管切开术,可缩短患者使用机械通气的时问和在ICU的治疗时间,但在肺部感染率、总住院时间以及死亡率上,时机选择的早晚则无相关性。     

白藜芦醇对重症急性胰腺炎大鼠炎性细胞因子的影响

目的观察白藜芦醇对重症急性胰腺炎（severeacutepancreatitis,SAP）大鼠血清炎性细胞因子的影响。方法取SD大鼠,经胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠制备SAP模型,分为假手术组、模型组、白藜芦醇组（20、10、5ms／kg）,每组16只。采用尾静脉注射给药,术后6h和12h分别于光镜下观察胰腺组织的病理学改变,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白介素-1（IL-1）和IL-6水平。结果白藜芦醇各剂量均能减轻胰腺组织的炎性反应,病理评分与模型组比较,明显降低（P〈0．01）;术后6h各剂量对应TNF-α[（89．0±19．2）、（84．7±16．0）、（105．6±22．3）ns／L]、IL-1[（109．3±19．8）、（114．5±30．2）、（135．5±29．2）ns／L]和IL-6[（185．3±28．8）、（201．5±44．0）、（213．0±30．7）ns／L],水平均明显低于模型组（P〈0．05或P〈0．01）。术后12h情况同术后6h。结论白藜芦醇通过减少炎性细胞因子的过度释放,对大鼠SAP具有保护作用。     

系统性红斑狼疮患者CD154的表达与炎症、心肌损伤指标的关系研究

目的测定系统性红斑狼疮（SLE）合并心肌损伤患者外周血单个核细胞CD154的表达水平,并与C反应蛋白（CRP）、心肌损伤指标之间进行相关分析,探讨CD154与患者炎症状态、心肌损伤的关系。方法①32例2010年4—10月在我院门诊或住院治疗的SLE患者,男2例,女30例。②给予心脏彩超测定左房前后径（LAD）、室间隔厚度（IVST）、左心室前后径（LVDd）、左心室重量指数（LYMI）、左心室射血分数（LVEF）,心电图检查,免疫比浊法测定C反应蛋白（CRP）、全自动生化分析仪化学发光免疫分析法测定CK—MB、肌钙蛋白（cTnI）,分离外周血单个核细胞,采用流式细胞仪分析检测CD154的表达水平。③根据心脏彩超、心电图检查、CK—MBII、肌钙蛋白结果,将有心肌损伤指标阳性的患者分为A组（20例）,心肌损伤指标阴性的患者分为B组（12例）;20例健康志愿者为正常对照。④资料采用卡方检验,以Spearman相关法,即多元线性回归分析1个因变量和多个自变量之间的线性关系,P〈0．05为差异有统计学意义。结果①A组外周血单个核细胞CD154的表达水平为（29．1±10．8）％、CRP为（68．4±12．2）mg／L均明显高于B组（11．9±8．2）％、（36．9±11．5）meCL,P〈0．01;正常对照组外周血单个核细胞CD154的表达（5．9±2．2）％显著低于A、B组,P〈0．01。②A组CK-MBⅡ为（9．7±3．6n）ng／ml、cTnI为（0．43±0．21）n加nl、IVST为（11．8±3．2）mm、LVMI为（110．51±18．64）g／m^2显著高于B组CK—MBⅡ为（2．3±0．8）ng/ml、cTnI为（0．22±0．09）ng／ml、IVST（9．6±1．1）mm、LVMI（90．78±9．53）g／m2（P〈0．01）;A组LVDd（50．3±6．6）mm、LAD（32．4±5．4）mm、亦高于B组LVDd（46．4±3．1）mm、LAD（28．2±4．6）mm（P〈0．05）;A组LVEF（56．2±14．8）％显著低于B组LVEF（64．7±10．3）％（P〈0．01）。③患者外周血单个核细胞CD154的表达水平与CRP、CK—MBII、cTnI、LVDd、LVIMI、IVST、LAD呈正相关[γ=0．343,γ=0．315,γ=0．437,γ=0．364,γ=0．448（均P〈0．01）;γ=0．266,γ=0．216（均P〈0．05）];与LVEF呈负相关（γ=-0．346,P〈0．01）。结论SLE合并心肌损伤患者外周血单个核细胞CD154的表达水平,显著高于无心肌损伤患者,并与炎症、心肌损伤明显相关,提示CD154在SLE患者的心血管事件的发生发展中可能起到重要作用,可能会成为SLE患者心血管事件的重要预测指标,进一步研究可能会为SLE心肌损伤带来新的治疗方法。     

微型皮片移植术应用于大面积深度烧伤的疗效观察

目的探讨Meek微型皮片移植术治疗大面积深度烧伤的临床疗效。方法 2008年4月—2012年4月期间,将80例大面积深度烧伤患者随机分为对照组(传统小邮票皮片移植术)和观察组(Meek微型皮片移植术),每组40例。对两组皮片成活率、手术植皮面积、供皮面积、手术时间、伤口愈合时间,以及术后随访期间愈合瘢痕及功能恢复情况,进行观察和比较。结果与对照组相比,观察组皮片成活率明显升高(95.0%比80.0%),供皮面积[(4.0±2.2)%比(12.5±2.0)%]总体表面积(TBSA)、手术时间[(2.0±0.5)min比(7.0±1.0)min]、伤口愈合时间[(12.0±3.5)d比(24.5±4.0)d]均明显缩短,术后随访期间愈合瘢痕及功能恢复明显好转(术后3个月时为77.5%比55.0%;术后6个月时为57.5%比35.0%;术后12个月时为37.5%比17.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Meek微型皮片移植术治疗大面积深度烧伤,能够明显提高皮片成活率、缩短手术时间、节省皮源、加速伤口愈合,临床疗效显著。     

MEBO联合负压辅助植皮修复臀部压疮疗效观察

目的观察湿润烧伤膏(MEBO)联合负压辅助植皮修复臀部压疮的效果。方法 19例老年臀部压疮患者在应用MEBO治疗至基底肉芽组织生长良好后,局麻下进行皮片移植修复创面,根据皮片固定方式将19例患者随机分为实验组(10例)和对照组(9例),实验组用改良型密闭式负压~([1])辅助固定移植皮片;对照组常规加压包扎固定移植皮片。对比观察两组患者压疮创面皮片存活率及创面愈合时间。结果术后第1次启视创面实验组皮片存活率为95.30%±3.38%,对照组皮片存活率为56.50%±8.45%,经t检验,P0.01,差异具有统计学意义;术后第2次启视创面,实验组皮片存活率为90.20%±7.05%,对照组皮片存活率为26.45%±5.62%,经t检验,P0.01,差异具有统计学意义;实验组创面平均愈合时间为41.36 d±8.07 d,对照组创面平均愈合时间为75.72 d±12.56 d,经t检验,P0.01,差异具有统计学差异。结论压疮创面经MEBO换药治疗至肉芽组织生长良好后,行皮片移植修复创面时,采用负压辅助固定移植皮片可提高皮片存活率,促进创面愈合,值得临床推广。     

非小细胞肺癌N2淋巴结转移的危险因素分析

目的研究多种影响因素与NSCLCN2淋巴结转移之间的关系。方法回顾性分析接受18F．FDGPET／CT检查和手术治疗的NSCLC患者,将其分为无N2淋巴结转移（非N2＋）和有N：淋巴结转移（N2＋）2组,采用x2检验或两样本t检验比较2组问性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、SUVmax、病理学类型及分化程度等影响因素的差异,然后将组间有统计学意义的影响因素及分组进行量化赋值,先后用单因素回归和多因素logistic回归分析确定对N：淋巴结转移有意义的危险因素。结果共纳入177例患者,其中男109例,女68例,年龄（60．1±10．6）岁。非N2＋（142例）和N;（35例）2组间的肿瘤大小[（36．1±19．7）mm和（49．3±24．4）mm]、SUV-（8．81±6．23和11．21±4．43）和分化程度（高分化：3和0例;中分化：74和11例;低分化：65和24例）差异均有统计学意义（t=-2．969和-2．633,疋。6．143,均P〈0．05）,而性别、年龄、肿瘤部位和组织学类型差异均无统计学意义（X2=0．374—4．999,t=0．836,均P〉0．05）。单因素分析显示,肿瘤大小、sUVmax及分化程度与N2淋巴结转移相关（r=0．201、0．245和0．185,均P〈0．05）;而多因素分析示,只有SUVmax与N2淋巴结转移之间的相关性具有统计学意义（P=0．546,P〈0．01）。NSCLCN：淋巴结的转移概率随着原发病灶SUVmax的增加而增加;当原发灶SUVmax≤2．5时,发生N：淋巴结转移的概率为0,而SUVmax〉7．5时概率为O．29。结论SUVmax是NSCLC发生N2淋巴结转移的危险因素。