甘氨双唑钠影响宫颈癌SiHa细胞对顺铂的敏感性研究

目的:甘氨双唑钠（CMNa）是中国研制的新型放疗增敏剂,对喉癌、鼻咽癌等的放射增敏研究均已取得显著效果,但对化疗药的增敏效果如何,目前仍不肯定。本文以子宫鳞癌SiHa细胞为靶细胞,分析CMNa是否可影响宫颈鳞癌SiHa细胞株对顺铂（PDD）的敏感性。方法：不浓度PDD、CMNa及两药联合作用于SiHa细胞,通过形态学观察、MTT细胞活力测定等方法检测对SiHa细胞敏感性的影响。结果：不同浓度的PDD对宫颈癌细胞的生长均有抑制作用,而不同浓度CMNa对SiHa细胞影响不显著。两药合用可大大增强PDD对SiHa细胞生长的抑制。结论：联合应用CMNa可提高PDD对肿瘤细胞的敏感性,为临床制定宫颈癌化疗方案提供理论依据。     

甘氨双唑钠联合小剂量顺铂对非小细胞肺癌患者放疗增敏的护理

<正>肺癌是我国常见的恶性肿瘤之一,其中近2/3为非小细胞肺癌[1]。放射治疗是非小细胞肺癌的主要治疗手段之一,但总体疗效仍不够理想[2]。甘氨双唑钠和顺铂对实体瘤乏氧细胞有明显的放射增敏作用,可提高实体瘤放射治疗的近期疗效,提高肿瘤治愈率。2010年6月至2012年12月本科室采用甘氨双唑钠联合小剂量顺铂对25例非小细胞肺癌患者行放疗增敏治疗,取得了较好疗效,现报告如下。1资料与方法1.1临床资料本组25例患者,其中:男16例,女9例,年龄32~65岁,中位年龄51.6岁,均符合样本纳入标准:病理或细胞学确诊为非小细胞肺癌,临床分期Ⅲ期(Ⅲa或干性Ⅲb);无明显心、肺、肝、肾功能异常卡氏评分分有可测量及可评估的病     

甘氨双唑钠对食管癌放射治疗增敏作用的临床研究

目的探讨注射用甘氨双唑钠（CMNa）对于食管癌的放射增敏作用及不良反应。方法各期符合入组条件并有病理证实的食管癌患者63例，按随机对照原则，分为试验组（A组，放疗加甘氨双唑钠）和对照组（B组，单纯放疗）。A组患者放疗前使用CMNa 800mg／m^2，给药后1h内接受放疗，每周3次，连续用药至放疗结束（6～7周）。B组行单纯放疗。放疗中每周查血常规及观察各种不良反应。放疗前、放疗后3周和放疗结束第7周，分别进行胸部CT、食管钡餐片、肝肾功能和心电图以观察疗效和不良反应。结果A组CR率高于B组，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。A组患者治疗达到CR和PR的中位照射剂量均低于B组，但无统计学差异。两组患者不良反应发生率比较，无统计学意义。结论注射用CMNa对食管癌的放射治疗有较肯定的放射增敏作用，同时并不增加不良反应，其远期疗效及不良反应有待进一步观察。     

甘氨双唑钠对宫颈鳞癌放射增敏的临床观察及护理

[目的]探讨注射用甘氨双唑钠(CMNa)对子宫颈鳞癌的放射增敏作用、不良反应及护理对策。[方法]采用平行对照随机分组的方法,将40例宫颈鳞癌病人分为放射增敏组(A组)和对照组(B组),两组放疗方案相同。A组放疗同时给予CMNa800mg/m2,给药后30min~60min内接受放疗,每周3次,至放疗结束;B组行单纯常规放疗。观察两组近期疗效和各种不良反应。[结果]A组完全缓解率明显高于B组(P<0.05),两组不良反应及其严重程度比较无差异。[结论]使用CMNa对宫颈鳞癌有放射增敏作用,在提高完全缓解率同时并未增加不良反应。但在使用CMNa过程中要重视用药的护理,加强健康教育,达到CMNa放射增敏的有效作用,使放疗计划顺利完成。     

甘氨双唑钠对宫颈鳞癌放射增敏的临床观察及护理

[目的]探讨注射用甘氨双唑钠（CMNa）对子宫颈鳞癌的放射增敏作用、不良反应及护理对策。[方法]采用平行对照随机分组的方法，将40例宫颈鳞癌病人分为放射增敏组（A组）和对照组（B组），两组放疗方案相同。A组放疗同时给予CMNa 800mg／m^2，给药后30min～60min内接受放疗，每周3次，至放疗结束；B组行单纯常规放疗。观察两组近期疗效和各种不良反应。[结果]A组完全缓解率明显高于B组（P〈0．05），两组不良反应及其严重程度比较无差异。[结论]使用CMNa对宫颈鳞癌有放射增敏作用，在提高完全缓解率同时并未增加不良反应。但在使用CMNa过程中要重视用药的护理，加强健康教育，达到CMNa放射增敏的有效作用，使放疗计划顺利完成。     

甘氨双唑钠和塞来昔布联合应用对宫颈癌Hela细胞同步放化疗的影响

目的:探讨甘氨双唑钠和塞来昔布联合应用对宫颈癌Hela细胞同步放化疗(顺铂10μg/mL+放疗2 Gy)的影响,为将两药联合作为同步放化疗增敏剂应用于临床上中晚期及复发宫颈癌的治疗提供实验依据。方法:用不同浓度的甘氨双唑钠及塞来昔布分别处理Hela细胞24 h后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的增殖活性,并求出无毒浓度;用两药的无毒浓度分别及同时联合同步放化疗处理Hela细胞24 h后,MTT法检测细胞的增殖活性,倒置显微镜及透射电镜观察细胞形态的改变。结果:联合组对细胞增殖的抑制作用比同步放化疗组更显著,且两药联合组的抑制作用强于单药联合组及同步放化疗组;倒置显微镜及透射电镜下两药联合组细胞呈现出凋亡形态。结论:甘氨双唑钠和塞来昔布对Hela细胞同步放化疗有增敏作用,且两药与同步放化疗联合应用有一定的协同增敏效应。     

甘氨双唑钠（CMNa）对食道癌放射治疗增敏作用的研究

目的 :初步评价甘氨双唑钠的放射增敏作用及其安全性。方法 :各期食道癌病人 6 3例 ,均符合入组条件并有病理证实 ,按随机、对照、双盲的原则 ,分为试验组 (A组 )和对照组 (B组 )。A组病人放疗同时使用CMNa 80 0mg/m2 ,每周 3次 ,连续用药至放疗结束 ,6周或 7周 ,分别进行CT或X线拍片以观察疗效。放疗中每周测血常规及观察各种不良反应 ,每 3周查肝、肾功能及心电图。结果 :A组的CR率高于B组 ,两组差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。A组病人治疗达到PR和CR时的中位照射剂量均低于B组 ,但由于病例较少 ,未观察到统计学差异 ;两组病人不良反应发生率比较无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :提示CMNa对食道癌的放射治疗有较肯定的放射增敏作用 ,在推荐临床使用剂量范围内未发现明显不良反应。能否降低放疗剂量有待于Ⅲ期临床试验进一步累积探讨     

甘氨双唑钠在恶性肿瘤放疗中的增敏作用

目的探讨甘氨双唑钠对恶性肿瘤放射治疗的增敏作用及其安全性。方法84例恶性肿瘤患者分为增敏放疗组（A组）和单纯放疗组（B组）。A组42例,用甘氨双唑钠800mg／m^2给药,于30min内完成静脉滴注,在60min内进行常规放疗,每周3次,连续用药至疗程结束;B组仅接受常规放疗。结果A组完全缓解26例（45．2％）,B组42例完全缓解19例（23．8％）,A组疗效明显优于B组（P〈0．05）;两组毒副作用无显著差异（P〉0．05）。结论甘氨双唑钠对恶性肿瘤放射治疗增敏效果明显,毒副作用较小,安全性好。     

甘氨双唑钠配合放疗治疗食管癌的临床应用与护理

甘氨双唑钠（CMNa）是我国自行设计、筛选、研制的一种新型放化疗增敏剂^[1]，我科对27例食管癌患者进行静脉用药（CMNa）加放射治疗。现将护理体会报告如下。     

甘氨双唑钠对食道癌放射治疗增敏作用的疗效观察及护理

目的探讨甘氨双唑钠对食道癌放射治疗增敏作用的疗效及护理。方法对2002年6月-2003年6月100例经病理学检查确诊的食道癌病人随机分为综合组和单放组。综合组50例,用甘氨双唑钠以80mg/m^2剂量用100ml生理盐水稀释溶解,于30min内完成静脉滴注,并在60min内进行常规放疗,每周2～3次,连续用药至疗程结束,总用药量在6000～9000mg,放疗总剂量在64～68Gy/42～48d;单放组按常规放疗。结果近期疗效：综合组食道癌CR率66%,单放组26%,2组比较有统计学意义;生存率：综合组的1、2、3年生存数分别是38、22、19例,单放组是26、16、10例,2组比较1、3年生存数有统计学意义;2组不良反应比较无统计学意义。结论甘氨双唑钠对食道癌放射治疗增敏作用疗效好,副作用小,安全性好,值得推广使用。     

川芎嗪对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响及其分子机制

目的:研究川芎嗪对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响,并探讨其与趋化因子CXCR4表达水平之间的关系。方法:体外培养人宫颈癌HeLa细胞,经川芎嗪作用48 h后,应用MTT法检测川芎嗪对HeLa细胞增殖活性的抑制,然后采用流式细胞仪检测经川芎嗪处理的实验组与以磷酸盐缓冲液处理的对照组中HeLa细胞的细胞周期分布;应用蛋白印迹法半定量及免疫荧光实验定性检测川芎嗪处理后趋化因子受体CXCR4表达水平的改变。结果:川芎嗪对人宫颈癌HeLa细胞的增殖有明显的抑制作用,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。经川芎嗪处理后的HeLa细胞G0/G1期增多,S期细胞减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。川芎嗪能够下调人宫颈癌HeLa细胞的CXCR4蛋白表达。结论:川芎嗪对人宫颈癌细胞HeLa的增殖有明显抑制作用,其抑制作用可能与下调HeLa细胞中CXCR4蛋白的表达有关。     

胰岛素联合顺铂对人宫颈癌细胞株HeLa生长的影响

目的：观察胰岛素（INS）联合顺铂（DDP）对人宫颈癌 HeLa 细胞生长及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法体外培养的人宫颈癌细胞株（HeLa）经INS、DDP单独或联合作用后,MTT检测细胞增殖抑制情况;Annexin V-FITC双染流式细胞术分析细胞凋亡;流式细胞仪检测不同加药处理组的细胞周期时相变化情况;Western blot 印迹方法检测细胞中 JNK2、p-JNK2及caspase-3蛋白的表达情况。结果 MTT结果显示：INS无抑制细胞增殖作用,DDP单药组与联合用药组均能抑制细胞的增殖,两药联合时细胞增殖抑制率明显高于DDP单药组,差异有统计学意义（P=0.000）,细胞凋亡结果显示：INS无促细胞凋亡的作用,联合用药组的细胞凋亡率明显高于DDP单药组（P〈0.01）。细胞周期结果显示：DDP、INS单药均能促进细胞由G1期向S期转变;联合用药组HeLa细胞S期比例增加更加明显,与DDP组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。Western blot 结果显示：实验组与对照组比较,JNK2蛋白水平无明显变化, p-JNK2、caspase-3于DDP组及 DDP＋INS 组中表达增加,联合用药时增加更为明显,与DDP组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）,而在INS组中三种蛋白表达变化均不明显。结论 INS 可增强DDP对宫颈癌HeLa细胞的毒性作用,其机制可能与协同DDP促进细胞由G0期步入S期,上调p-JNK2及 caspase-3蛋白表达有关。     

三氧化二砷对人宫颈癌细胞放射增敏的体外实验

目的:三氧化二砷(As2O3)具有显著的抗肿瘤效应,且已进入临床研究阶段,在体外实验中将其作为生物材料用于人宫颈癌细胞放射效应研究中,探讨其是否具有辐射增敏作用。方法:实验于2006-01/2007-04在重庆医科大学超声研究所(国家级重点实验室)完成。实验分组:①空白对照组(不做任何处理)。②单纯照射组:将其8×103个细胞悬浮于新鲜培养液中,在室温下行60Coγ射线照射,平均剂量率为62.89cGy/min,根据实验要求照射2Gy。③As2O3组:在培养液中加入1.0μmol/LAs2O3共培养。④As2O3 照射组:加入1.0μmol/LAs2O3后进行60Coγ射线照射。实验评估:用MTT法及平板克隆形成试验检测各实验组人宫颈癌细胞株HeLa细胞存活分数和集落形成率,AO/EB荧光染色法检测各组细胞凋亡率的变化,流式细胞仪测定Bcl-2蛋白的表达。结果:As2O3 照射组细胞存活分数和集落形成率较As2O3组及单纯照射组明显下降,与As2O3组和单纯照射组比较差异具有显著性(P<0.01),而As2O3 照射组细胞凋亡率明显增加,Bcl-2蛋白的表达明显下降,与As2O3组或单纯照射组比较差异皆具有显著性(P<0.01)。结论:As2O3对宫颈癌HeLa细胞具有辐射增敏作用,其增敏作用与As2O3增加照射后肿瘤细胞的凋亡率有关。     

p21WAF1/GIP1基因转染人宫颈癌Hela细胞对顺铂敏感性的影响

目的 探讨转染p21^WAF1／GIP1基因（p21基因），对宫颈癌Hela细胞生长抑制作用及p21基因转染Hela细胞对顺铂敏感性的影响。方法 应用脂质体转染技术，将质粒peDNA3转入人宫颈癌Hela细胞中，经G418筛选，转染阳性克隆细胞连续传代培养，并采用中性红摄入法测定顺铂对p21基因转染人宫颈癌Hela细胞增殖抑制作用，流式细胞仪（FCM）检测细胞周期变化。结果 经G418筛选，Hela细胞全部死亡，转染质粒peDNA3的Hela细胞存活，并可连续传代。p21基因转染后，细胞生长明显受到抑制，细胞周期停滞于G1期，与对照组相比，细胞周期G1期比例明显增加。同时p2l表达阳性的Hela细胞对顺铂敏感性增强。结论 p2l基因转染能使Hela细胞出现生长抑制并对顺铂化疗作用敏感性明显增强。     

紫杉醇与顺铂联合化疗对宫颈鳞癌细胞株HCE1作用的实验研究

目的 观察紫杉醇加顺铂联合化疗在宫颈鳞癌细胞株HCE1中的协同效应,指导进一步临床应用.方法 (1)培养宫颈鳞癌细胞株HCE1,观察活细胞生长情况并摄片.(2)实验分组及检测:①终浓度为20 μmol/L、40 μmol/L、80 μmol/L的紫杉醇培养HCE1细胞;②终浓度为20 μg/ml、40 μg/ml、80 μg/ml顺铂培养HCE1细胞;③紫杉醇联合顺铂培养HCE1细胞,通过MTT比色法检测培养24 h、48 h、72 h后细胞增殖活力,并计算细胞生长抑制率;流式细胞仪分别检测24 h、48 h、72 h三个不同时间点的细胞凋亡发生率,并分析细胞周期改变.结果 (1)紫杉醇处理后凋亡细胞明显增多,细胞缩小变圆,细胞膜出泡等.(2)经终浓度分别为20 μmol/L、40 μmol/L、80 μmol/L紫杉醇处理HCE1细胞24 h时,细胞抑制率分别为(9.5±0.66)%、(17.1±1.51)%、(33.3±1.77)%,48 h时,细胞抑制率分别为(28.0±2.27)%、(45.2±3.15)%、(66.0±2.95)%,72 h时,细胞抑制率分别为(39.4±2.81)%、(66.2±7.02)%、(81.5±1.78)%;经终浓度分别为20 μg/ml、40 μg/ml、80 μg/ml顺铂处理HCE1细胞24 h时,细胞抑制率分别为(3.6±0.56)%、(6.5±0.98)%、(14.1±2.52)%,48 h时,细胞抑制率分别为(6.5±0.46)%、(9.9±1.35)%、(20.0±3.05)%,72 h时,细胞抑制率分别为(14.1±3.05)%、(42.1±3.90)%、(59.4±4.26)%;联合处理组以48 h 20 μmol/L紫杉醇联合20 μg/ml顺铂对HCE1细胞的增殖抑制作用为例,细胞增殖抑制率为(30.2±3.34)%,综上可见紫杉醇和顺铂以时间和剂量依赖性特点抑制宫颈癌细胞的增殖,紫杉醇联合顺铂对人宫颈癌HCE1细胞的增殖抑制具有协同作用.(3)流式细胞仪细胞周期分析表明,紫杉醇处理组G1期细胞比例有所增加,S期细胞比例明显降低,顺铂处理组G1期细胞比例明显降低,反之S期细胞比例明显升高,紫杉醇联合顺铂处理组G1期细胞比例和S期细胞比例介于紫杉醇处理组和顺铂处理组之间.以20 μmol/L紫杉醇作用HCE1细胞48 h为例,G1期细胞比例和S期细胞比例分别为(86.0±3.01)%、(9.1±0.66)%,40 μg/ml顺铂作用HCE1细胞48 h G1期细胞比例和S期细胞比例分别为(2.1±0.26)%、(92.2±6.24)%,20 μmol/L紫杉醇联合40 μg/ml顺铂作用HCE1细胞48 h G1期细胞比例和S期细胞比例分别为(13.2±0.78)%、(80.5±2.46)%.(4)细胞凋亡分析表明,紫杉醇处理组细胞凋亡率较对照组升高,呈时间和剂量依赖性特点;顺铂处理组细胞凋亡率较对照组也升高,呈时间和剂量依赖性特点;紫杉醇联合顺铂处理组细胞凋亡率较单药处理组高.结论 紫杉醇与顺铂联合对宫颈癌细胞的抑制作用明显增强,提示紫杉醇可与顺铂对宫颈癌细胞增殖的抑制产生协同作用.     

外源性子宫珠蛋白基因对宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨人子宫珠蛋白（UG）基因对宫颈癌Hela细胞系细胞增殖及凋亡的影响。方法构建真核细胞表达载体pcDNA3．1-UG（＋），以脂质体介导法稳定转染体外培养的人宫颈癌Hela细胞，同时转染空载体pcDNA3．1质粒，以未转染细胞为对照，转染成功后分别命名为pcDNA3．1-UG（＋）／Hela组、pcDNA3．1／Hela组、Hela组。应用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、Western blot方法分析目的基因表达，并采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞凋亡。结果pcDNA3，1-UG（＋）／Hela组UGmRNA及UG蛋白出现明显的高表达，与对照组细胞相比差异有统计学意义（P〈0．05）；pcDNA3．1UG（＋）／Hela组细胞生长速度明显慢于未转染Hela细胞，其细胞凋亡率与未转染Hela细胞相比差异也有统计学意义；然而pcDNA3．1／Hela组细胞生长速度和凋亡率均无明显变化。结论转染UG基因能诱导Hela细胞凋亡及抑制Hela细胞生长。     

The characterization of two human cervical carcinoma HeLa sublines resistant to cisplatin

Human cervical carcinoma HeLa cells were made resistant to cisplatin by one of two schedules; “acute” (cells repeatedly treated with cisplatin for 1 h in serum-free medium—CA cells) or “continuous” (cells treated repeatedly for 24 h in complete medium—CK cells). The sensitivity of CA and CK sublines to cisplatin and various other antineoplastic drugs was determined by the modified MTT staining procedure. The possible involvement of glutathione (GSH), glutathioneS-transferases (GST) and metallothioneins (MT) in cisplatin resistance was examined. The results show that acutely treated CA cells became more resistant to cisplatin than CK cells. The resistance to cisplatin does not involve either glutathione or glutathione transferase. The increased levels of metallothioneins might be involved in the development of resistance. The sensitivity of CA and CK sublines to the selected drugs was different from that of the parent cells. Both sublines became cross-resistant to vincristine and methotrexate, but only CA cells exhibited cross resistance to etoposide doxorubicin and 5-fluorouracil. Thus, the development of resistance to cisplatin is a consequence of numerous intracellular alterations that are reflected in cell response to a variety of anticancer drugs. The response depends on the schedule of resistance development and on the nature of the secondary agent.     

苯乙酸联合5-氟尿嘧啶、顺铂对喉癌细胞株凋亡的影响及在荷瘤鼠动物模型中的作用观察

目的探讨苯乙酸（PA）联合5-氟尿嘧啶（5-fu）、顺铂（CDDP）对喉癌细胞株凋亡的影响及在荷瘤鼠动物模型中的联合用药治疗。方法采用苯乙酸联合应用5-Fu、CDDP作用于喉癌细胞,应用流式细胞仪、荷瘤鼠模型等方法,观察联合用药组与单一药物组对喉癌细胞凋亡作用,并制作荷瘤鼠模型进行动物体内实验。结果苯乙酸和5-Fu、CDDP化疗药物联合应用可以明显增强对喉癌细胞株（Hep-2）细胞生长增殖抑制作用,促进细胞形态转化,显著提高促凋亡作用。荷瘤鼠实验模型的结果表明,联合用药可以减少化疗药物剂量及减少耐药性,减轻毒副作用及并发症的发生,为喉癌临床治疗提供了理论基础。     

顺铂作用于人肝癌细胞系HepG2后对肿瘤干细胞标志物的影响

目的研究顺铂作用于人肝癌细胞系HepG2后对肿瘤干细胞标志物的影响。方法培养HepG2人肝癌细胞,以对数生长期的细胞为研究对象,分成对照组和实验组,对照组不予特殊处理,实验组予以顺铂处理并测定细胞生长抑制率、移行愈合率,并测定相关肿瘤标记物P53、caspase-3、caspase-8、CD133、腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)等的表达变化。结果细胞生长抑制率:随着药物浓度增加而增强,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。细胞移行愈合率:实验组细胞移行愈合率明显低于对照组(P0.05),9μmol/L顺铂组移行愈合率明显低于6μmol/L顺铂组(P0.05)。相关肿瘤标记物P53、caspase-3、caspase-8随着药物浓度增加而各指标表达增强,与对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。细胞免疫荧光方法显示随着顺铂浓度的增加,CD133、ABCG2、ICAM-1的表达增强。结论顺铂可能通过上调肿瘤标记物P53、caspase-3、caspase-8的表达,从而抑制人肝癌细胞HepG2的生长,并抑制HepG2细胞的迁移愈合,但会使其耐药性也增加。