亲和素-生物素酶复合物酶联免疫吸附技术应用于检测HBsAg的研究

作者应用免疫化学 ABC-ELISA 作人群血清中 HBsAg 的检测,验证了该法在检测 HBsAg 方面具有高敏感性。ABC-ELISA 与 ELISA、R-PHA 及 RICEPA 三种方法相比,HBsAg 的检出率按其敏感程度高低为 ABC-ELISA>ELISA>R-PHA>RICEPA。ABC-ELISA 与经典 ELISA单独相比,其HBsAg 检出率由 ELISA的16.07％提高到 ABC-ELISA 的23.58％,并且可将ELISA漏检的32例 HBsAg 携带者检出。此外,该法在检测 HBsAg中还具有特异性高,操作简便和快速等优点。     

圆斑酶联免疫吸附试验诊断囊虫病——诊断结果的薄层扫描定量分析

以囊尾蚴囊液抗原做圆斑酶联免疫吸附试验,对几组血清进行检测,５４例囊虫病患者中５０例呈阳性反应,阳性率９２．５９％（阳性终点滴度１∶５０～１∶６４００）,４５例健康人中１例呈假阳性反应,假阳性率为２．２２％（终点滴度１∶５０～１∶１００）。在血清１∶２００稀释时阳性率为８３．３３％,无假阳性反应。除包虫病患者血清与囊液抗原有较高交叉反应外（１２／２０）,其它疾病与囊液抗原均无交叉反应。应用薄层扫描技术,以峰面积比值（Ｐ／Ｎ值）为指标,对结果进行定量分析并取得良好结果,解决了该方法不能定量分析的不足。     

生物素-亲和素酶联免疫吸附试验系统检测兔抗伤寒杆菌抗体的实验研究

以国产生物素(B)及亲和素(A)试剂,初步建立了检测免疫血清中抗伤寒杆菌H及O抗体水平的BA—ELISA系统。检出抗H及抗O抗体的敏感性(以GMT计),较常规ELISA高6～7倍;较传统的肥达氏试验高11～22倍。除与副伤寒甲、乙及伤寒Vi血清有轻度交叉反应外,与其他各种菌的抗血清均呈阴性.丁不同天对8份阳性血清经6次重复试验,所得变异系数均<11％,提示本试验系统稳定性良好。     

用酶联免疫吸附试验（微量间接法）诊断人体囊尾蚴病

人囊尾蚴病是一种严重危害人类健康的人畜共患寄生虫病，其免疫诊断法很多。本文采用ＥＬＩＳＡ微量间接法，对１９９例囊虫病人、正常人和其他患者作了检测。囊虫病人１３６例中，检测阳性１２６人，阳性率为９２．６％。实验表明，本法敏感性与特异性强，重复性良好，是值得推广应用的囊虫免疫诊断方法之一。     

生物素—链霉亲和素系统在检测MHV抗体中的应用

采用生物素—链霉亲和素系统(BSA)试剂建立测定MHV抗体的BSA-ELISA法,并与SPA-ELISA法比较。结果表明,前者本底极低,敏感性比后者提高4倍,阳性检出率提高1倍,且经阻断试验证明其特异性高。因此,该法在检测实验动物的特异性抗体方面,具有很大的应用潜力。     

生物素—亲和素酶联免疫吸附试验检测脑脊液结核抗体方法的建立

报道生物素——亲和素酶联免疫吸附试验(BA-ELISA)检测脑脊液抗 PPD-IgG 方法的建立,并对最佳检测条件进行了探讨。取代试验和阻断试验证明本法特异性较高,并有较好的可重复性。其抗体滴度为常规 ELISA 的4倍。本法检测脑脊液抗体滴度灵敏度为95.2％,特异度为100％,应能在临床应用中成为脑膜结核免疫学诊断的一种较常规 ELISA 更敏感的方法。     

生物素-亲和素系统检测弓形虫病的研究

①目的建立简易、实用的生物素－亲和素系统（ＡＢＣ）的免疫酶染色试验（ＡＢＣ－ＩＥＳＴ）和斑点酶联免疫吸附试验（ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）的方法，以检测弓形虫病的微量抗体。②方法以全虫和可溶性虫体为抗原，在常规ＩＥＳＴ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的基础上，加用ＡＢＣ，观察其特异度和敏感度。③结果ＡＢＣ－ＩＥＳＴ和ＡＢＣ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的特异度和常规法相同，但敏感度有显著提高。④结论ＡＢＣ法可应用于微量抗体及早期感染的检测。     

生物素-亲和素系统在MR靶向成像中的应用

目的：探讨利用生物素-亲和素系统的靶向定位效应和生物放大作用，提高MR分子成像的敏感性。方法：制备生物素化HAb18单克隆抗体并测定其生物素化程度及抗原结合活性。将8只荷人肝细胞癌裸鼠静脉注射生物素化单克隆抗体600μg，24h后腹腔注射80μg亲和素，30min后再静脉给予Gd-DTPA-链霉亲和素。对实验动物行MR扫描，测量SET1WI平扫及增强后10、30min及2、6、12、24h图像内肿瘤、肝脏、肌肉的信号强度，绘制信号强度-时间曲线，并计算其强化率及对比度噪声比。结果：HAb18单克隆抗体经生物素化后，每个抗体分子平均可结合20个分子生物素，其抗原结合活性约为91％。增强后肿瘤信号强度缓慢升高．在注射对比剂后第6小时，肿瘤的强化率、比度噪声比达到最大值，与其他各时间点有显著性差异。肝脏在注射对比剂后第6小时的信号强度达到最高，而后信号强度下降．增强后12h的信号强度与平扫相似。肌肉表现为轻度强化，增强后各时间点的信号强度与平扫相比无明显差异。结论：利用生物素．亲和素技术对肿瘤进行MR靶向成像，具有特异性强化作用并能延长肿瘤的强化时间．但Gd—DTPA—SA的血池效应也造成了肝脏的持续强化。     

链酶亲和素-生物素ELISA检测人心肌肌钙蛋白T

目的 建立人心肌肌钙蛋白T (cTnT)链酶亲和素-生物素（SAB）双抗体夹心酶联免疫分析（ELISA）方法,诊断急性心肌损伤性疾病。方法 以固相化单抗3F7捕捉样品中cTnT,生物素化3H12单抗为检测抗体,加入SA-HRP,显色。根据已知不同浓度标准cTnT显色后D(l)值的标准曲线,检测待测样品cTnT含量。结果 cTnT的最低检测值为0.15 ng/ml,批内变异系数为3.8%,批间变异系数为11.2%,回收率为98%。35例急性心肌损伤患者cTnT含量为(0.68±0.17) ng/ml,明显高于52例正常人对照组(0.20±0.03) ng/ml(P<0.01)。结论 本方法灵敏、特异、稳定,可用于临床急性心肌损伤疾病的诊断。     

生物素-亲和素系统在MR靶向成像中的应用

目的探讨利用生物素-亲和素系统的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子成像的敏感性。方法制备生物素化HAb18单克隆抗体并测定其生物素化程度及抗原结合活性。将8只荷人肝细胞癌裸鼠静脉注射生物素化单克隆抗体600 μg,24 h后腹腔注射80 μg 亲和素,30 min后再静脉给予Gd-DTPA-链霉亲和素。对实验动物行MR扫描,测量SE T1WI平扫及增强后10、30 min及2、6、12、24 h图像内肿瘤、肝脏、肌肉的信号强度,绘制信号强度-时间曲线,并计算其强化率及对比度噪声比。结果HAb18单克隆抗体经生物素化后,每个抗体分子平均可结合20个分子生物素,其抗原结合活性约为91%。增强后肿瘤信号强度缓慢升高,在注射对比剂后第6小时,肿瘤的强化率、比度噪声比达到最大值,与其他各时间点有显著性差异。肝脏在注射对比剂后第6小时的信号强度达到最高,而后信号强度下降,增强后12 h的信号强度与平扫相似。肌肉表现为轻度强化,增强后各时间点的信号强度与平扫相比无明显差异。结论利用生物素-亲和素技术对肿瘤进行MR靶向成像,具有特异性强化作用并能延长肿瘤的强化时间,但Gd-DTPA-SA的血池效应也造成了肝脏的持续强化。     

生物素-亲和素-ELISA及其在传染病诊断中的应用

综述生物素-亲和素-酶联免疫吸附试验技术的原理、方法及其在传染病诊断中的应用研究,根据生物素-亲和素与酶的联结方式,本法主要有三种类型:即生物素-亲和素-酶标生物素法;生物素-酶标亲和素法和亲和素-生物素酶复合物法,三者均有较高的敏感性和特异性,已试用于多种微量抗原和抗体的检测,为流感杆菌、结核杆菌(结核性脑膜炎)、布鲁氏杆菌、乙型肝炎病毒、人疱疹病毒、日本乙型脑炎病毒和日本血吸虫等传染病、地方病的免疫学诊断提供了一种比常规酶联免疫吸附试验更灵敏的新方法。晚近,该技术也已在微生物学、病毒学、寄生虫学、免疫学、生物化学、病理学以及临床多学科中进行着应用研究,具有广阔的前景。     

生物素－链霉亲和素系统在检测MHV抗体中的应用

采用生物素－链霉亲和素系统（ＢＳＡ）试剂建立测定ＭＨＶ抗体的ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ法，并与ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ法比较。结果表明，前者本底极低，敏感性比后者提高４倍，阳性检出率提高１倍，且经阻断试验证明其特异性高。因此，该法在检测实验动物的特异性抗体方面，具有很大的应用潜力。     

链霉亲和素-生物素放大免疫酶法在鼻咽癌诊断中的临床应用

目的分析链霉亲和素-生物素放大免疫酶法在鼻咽癌检测当中的临床价值。方法选取2009年3月至2013年1月在孝感市中心医院就诊具有高度鼻咽癌危险的患者326例,分别进行链霉亲和素-生物素放大免疫酶法和常规免疫酶法检验,对链霉亲和素-生物素放大免疫酶法与常规免疫酶法在鼻咽癌患者117例与鼻咽癌高危人群但是无鼻咽癌患者209例的IgA/VCA和IgA/EA的检出率进行观察。结果在鼻咽癌患者中,链霉亲和素-生物素放大免疫酶法的IgA/VCA检出阳性率为99.16%,高于常规免疫酶法的92.31%,IgA/EA检出阳性率为78.63%,高于常规免疫酶法的56.41%(P<0.05)。鼻咽癌高危人群但是无鼻咽癌患者,链霉亲和素-生物素放大免疫酶法的IgA/VCA检出阳性率为24.88%,与常规免疫酶法检出阳性率(23.92%)差别无统计学意义(P>0.05),IgA/EA检出阳性率为3.83%,而常规免疫酶法为0。结论链霉亲和素-生物素放大免疫酶法能够较常规免疫酶法更为灵敏地诊断鼻咽癌。     

酶联免疫吸附试验在梅毒患者检测中的应用价值

①目的　评价酶联免疫吸附试验 (ELISA)在梅毒患者血清学检测中的应用价值。②方法　对 78例梅毒患者和 2 0例系统性红斑狼疮患者血清分别进行苍白螺旋体血球凝集试验 (TPHA)、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验 (TP -ELISA)和甲苯胺红不加热血清试验 (TRUST) ,对TRUST结果进行OD值分布分析 ,并对 2 0例梅毒患者进行治疗前后变化进行比较分析。③结果　 78例梅毒患者阳性率分别是 1 0 0 %、1 0 0 %、84.6 % ,TRUST阳性标本的TP -ELISAOD值 90 %以上 >1 .0 ,而TRUST阴性的标本其TP -ELISAOD值 90 %以上 <1 .0 ,治疗后TPUST滴度下降 1 7例 ,无变化 2例 ,升高 1例 ,其中有 5例经治疗后完全转为阴性 ,而ELISA测定结果治疗前后均为阳性。④结论　TP -ELISA的敏感性、特异性均优于TRUST ,与TPHA符合率高 ,是梅毒检测和筛查的一种良好方法。     

应用ABC-ELISA和SPA-ELISA诊断华枝睾吸虫病的初步比较

本文应用生物素-亲和素过氧化物酶联免疫吸附试验(ABC—ELISA)检测华枝睾吸虫病患者血清IgG抗体,并与常规SPA-ELISA比较。前法与粪检的阳性和阴性符合率分别为100％和87％,后法分为100％和95.7％。用SPA-ELISA检测12份日本血吸虫病兔血清未见交叉反应。由于SPA-ELISA操作简便,试剂价廉,因此更适宜于基层单位推广使用。     

酶联免疫吸附试验应用于梅毒螺旋体感染诊断中的检验意义探讨

目的:探讨酶联免疫吸附试验应用于梅毒螺旋体感染诊断中的检验效果.方法:本次研究的对象均为2015年10月至2016年10月来该院就诊的梅毒螺旋体感染患者,共57例,同时选取同时期在我院接受治疗的非梅毒螺旋体感染患者56例作为对照组,两组患者均采用酶联免疫吸附试验进行梅毒螺旋体感染诊断,探讨酶联免疫吸附试验诊断梅毒螺旋体感染的效果.结果:对照组56例患者中,检出梅毒的有1例,阳性率为1.79％,研究组57例患者中,检出梅毒的有55例,阳性率为96.49％,研究组明显高于对照组(P＜0.05;酶联免疫吸附试验应用于梅毒螺旋体感染诊断中的检测敏感性为96.49％(55/57),特异性为98.21％ (55/56).结论:酶联免疫吸附试验诊断梅毒螺旋体感染具有较高的敏感性和特异性,具有重要的临床意义.     

生物素-链霉亲和素-过氧化物酶法快速诊断呼吸道合胞病毒感染

目的：建立检测下呼吸道感染婴幼儿粘膜细胞呼吸道合胞病毒（RSV）抗原的方法。方法：以生物素标记兔抗RSV抗体，鼻咽部粘膜细胞涂片与该抗体作用后加链霉亲和素-过氧化物酶反应，二氨基联苯胺显色，显微镜下观察结果。结果：RSV抗原总阳性率为41．6％，临床典型和可疑病例抗原检出率分别为47．9％和44．9％，临床不典型者阳性率12．5％（X2=7．9，P＜0．05）。阳性标本中细胞着成棕色，易与阴性标本相区别。结论：本法简便、快速，具有一定敏感性和特异性，适合于基层推广应用。     

快速酶联免疫吸附试验诊断囊虫病与间接血凝试验的比较

<正> 酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断囊虫病已有报道。此法敏感性高,特异性强,但操作费时,使用不便。我们通过反复试验,建立起快速ELISA 试验方法,使操作流程由原来的7小时缩短至1小时,实际应用中与间接血凝试验(IHA)作了比较,在快速简便、敏憨性等方面取得了满意结果,现报道如下。     

碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶斑点酶联免疫吸附试验方法的建立

本文建立碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)斑点酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对实验条件加以选择,同时检测了鼠源单克隆抗体(McAb)及甲胎蛋白(AFP)及免疫球蛋白G(IgG).结果表明:该法所选用的3种包被液,pH9.5 0.05 mol/L碳酸缓冲液,pH7.2 TBS,pH7.6 PBS无差异。底物溶液以坚固红溶液较理想。6种鼠源McAh腹水稀释8000～32000倍仍能测定。另外,可检测AFP,IgG最小量分别为10.94μg/L和152.03μg/L.APAAP-斑点ELISA可望用于McAb筛选和微量抗原的检测。     

酶联免疫吸附试验在产前筛查中的应用

目的:探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)方便、快捷、准确地应用于产前筛查。方法:采集孕周15周~23+6周的孕中期孕妇静脉血,分离血清-20℃保存,1周内检测血清中AFP、β-F-HCG的浓度,并通过专用软件进行唐氏综合征(DS)、神经管缺陷(NTD)的风险系数评估。结果:1828例孕妇中筛查出高危169例,阳性率为9.24%,其中DS高危160例,NTD高危8例,两者同为高危者1例。有144例高危者做产前诊断,在这144例产前诊断的孕妇中,确诊DS3例,染色体色体异常5例,异常率为5.56%(8/144)。