盆腔器官脱垂及尿失禁患者阴道壁的核心蛋白聚糖mRNA水平与胶原含量的关系

目的探讨盆腔器官脱垂（pelvic organ prolapse,POP）及压力性尿失禁（stress urinary incontinence,sUI）患者阴道前壁组织中,核心蛋白聚糖（decorin,DCN）mRNA表达水平与阴道前壁组织Ⅰ型与Ⅲ型胶原含量变化的关系。方法将2007年3月至2008年3月南京军区福州总院476临床部妇产科收冶的58例绝经前、后妇女,根据是否存在盆腔器官脱垂及压力性尿失禁分为POP组（n=21）,POP＋SUI组（n=20）和对照组（n=17）。应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测两组妇女尿道周围结缔组织中Ⅰ型与Ⅲ型胶原含量;实时定量PCR法检测DCN mRNA表达水平。结果绝经前、后POP组和POP＋SUI组患者阴道前壁组织胶原含量均下降,与对照组比较,差异有显著意义（P〈0．01）。绝经前,POP组和POP＋SUI组患者阴道前壁组织中,DCN mRNA表达水平增强,与对照组比较,差异有显著意义（P〈0．05）;绝经后,POP组患者decorin基因表达水平增强,但与对照组比较,差异无显著意义（P〉0．05）。结论①绝经前、后,阴道壁组织的Ⅰ型与Ⅲ型胶原含量减少,胶原直径变细,支持力减弱,结缔组织弹性下降,从而引起盆腔器官脱垂或（和）压力性尿失禁;②盆腔器官脱垂及压力性尿失禁患者阴道组织蛋白聚糖类,可能通过影响盆底结缔组织胶原的代谢,影响盆底支持组织的力量和弹性性能,参与其发生、发展;③绝经后盆腔器官脱垂的发生机制复杂。     

盆腔器官脱垂患者阴道壁核心蛋白聚糖和转化生长因子-β_1mRNA表达水平及胶原含量的研究

目的 探讨盆腔器官脱垂(POP)患者阴道前壁组织中核心蛋白聚糖(DCN)和转化生长因子(TGF)-β_1mRNA表达水平及Ⅰ型胶原含量的变化.方法 将48例绝经前后妇女根据是否存在POP分为POP组(27例)和对照组(21例).应用酶联免疫吸附法检测两组患者阴道前壁组织中Ⅰ型胶原含量;实时定量PCR法检测DCN和TGF-β_1mRNA ACt值.结果 绝经前后POP组患者阴道前壁组织中Ⅰ型胶原含量分别为(47.94±6.82)、(41.82±5.96)mg/g总蛋白,对照组分别为(62.33±6.57)、(61.21±4.84)mg/g总蛋白,两组比较差异均有统计学意义(P<0.01).绝经前POP组患者阴道前壁组织中DCN mRNA △Ct值1.61±0.10,明显低于对照组2.77±0.60,TGF-β_1 mRNA△Ct值10.86±0.23,高于对照组9.87±0.92,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);绝经后两组患者阴道前壁组织中DCN和TGF-β_1mRNA ACt值比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 绝经后POP的发生与多因素有关.绝经前后阴道前壁组织中的Ⅰ型胶原含量减少,胶原直径变细,支持力量减弱,从而引发POP.绝经前POP患者阴道前壁组织中DCN与TGF-β_1可能通过影响盆底结缔组织胶原的代谢,影响盆底支持组织的力量和弹性性能,参与POP的发生.     

妊娠晚期妇女与同龄妇女盆底胶原组织的对比研究

目的:探讨妊娠晚期年轻孕妇子宫韧带组织胶原含量改变与盆底结构障碍的关系。方法:收集晚期妊娠组(n=10)及同龄对照组(n=12)需行全子宫切除共22例,每例取双侧主韧带及骶韧带组织,经病理切片,行Masson染色,观察其组织学特征。用免疫组化方法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原含量。结果:免疫组化和图像分析切片中可见浅棕色至深褐色的胶原阳性区域。作对比研究,晚期妊娠组胶原阳性反应区域、阳性单位均小于对照组,灰度大于对照组(P<0.01),差异有统计学意义。结论:妊娠晚期妇女盆底组织Ⅰ、Ⅲ型胶原含量减少,提示妊娠引起盆底结构松弛是产后尿失禁易发因素之一。     

晚期妊娠与围绝经期盆底松弛患者子宫主骶韧带Ⅲ型胶原含量的变化

目的:探讨妊娠晚期和围绝经期盆底松弛患者子宫主骶韧带的组织学改变及胶原含量变化与盆底松弛发生的关系。方法:以10例妊娠晚期因产科严重并发症而行全子宫切除术者为晚孕组,14例行全子宫切除术为围绝经期盆底松弛组,14例无盆底松弛因妇科疾病而行全子宫切除术者为同龄对照组。每例取主韧带及骶韧带组织经病理切片,经Masson染色,观察其组织学特征,并用免疫组化方法检测其Ⅲ型胶原含量。结果:晚孕组、围绝经期盆底松弛组主韧带Ⅲ型胶原阳性单位分别为10.29±1.56、9.62±2.43,与对照组的17.68±3.95比较,P<0.01,差异有意义。骶韧带Ⅲ型胶原阳性单位分别为12.88±3.21、10.34±3.62,与对照组的19.29±4.57比较,P<0.01,差异有意义。结论:①晚期妊娠所致盆底松弛与围绝经期盆底松弛的共同特征之一是Ⅲ型胶原含量减少;②妊娠所致盆底损伤、胶原结构代谢改变和胶原排列稀疏,提示胶原的分解增强可能是妊娠晚期盆底松弛发生的原因,也是导致产后盆底松弛及尿失禁的因素之一。     

葛根对盆底胶原蛋白代谢作用的研究

目的研究葛根对盆底功能障碍性疾病患者盆底阴道壁粘膜及韧带组织中I型和Ⅲ型胶原蛋白代谢影响,以探讨其临床应用价值。方法选择60例绝经后的盆底功能障碍性疾病患者并行阴式全子宫切除手术,30例术前予葛根治疗30天的患者为用药组,其余30例未使用任何外源性雌激素的患者为对照组。术中取阴道壁粘膜组织及宫骶韧带组织。再采用免疫组化二步法和图像分析检测I型和Ⅲ型胶原蛋白的含量。结果免疫组化及图像半定量分析结果显示,用药组阴道壁粘膜组织I型胶原阳性细胞或强阳性细胞的表达率均显著高于对照组（t值分别为13．09、12．14,均P〈0．01）;用药组宫骶韧带组织I型胶原阳性细胞或强阳性细胞的表达率均显著高于对照组（t值分别为12．23、8．88,均P〈0．01）;用药组阴道壁粘膜组织Ⅲ型胶原阳性细胞或强阳性细胞的表达率均显著高于对照组（t值分别为8．74、6．46,均P〈0．01）;用药组宫骶韧带组织Ⅲ型胶原阳性细胞或强阳性细胞的表达率均显著高于对照组（t值分别为6．68、5．92,均P〈0．01）。结论葛根通过增加盆底胶原蛋白的含量,能部分改善盆底功能障碍性疾病的症状,可以用于年老不能耐受手术的盆底功能障碍性疾病的术前准备以及绝经后轻度盆底功能障碍性疾病的患者。     

绝经后盆底组织TGF-β_1和CollagenⅠ、Ⅲ表达与SUI的关系

目的:探讨绝经后压力性尿失禁(SUI)患者盆底支持结构转化生长因子β1(TGF-β1)、胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ(CollagenⅠ、Ⅲ)与SUI的关系。方法:采用免疫组化方法,测定30例压力性尿失禁患者(SUI组)、28例盆底器官膨出(POP)患者(POP组)阴道前壁组织中TGF-β1及Collagen阳性率,并选择同期30例非卵巢功能性肿瘤和宫颈病变患者作为对照(对照组)。结果:SUI组、POP组及对照组患者阴道前壁组织中,TGF-β1表达阳性率分别为20.00%、14.30%、93.33%,SUI组与对照组比较,差异有极显著性(P<0.01);SUI组与POP组比较,差异无显著性(P>0.05)。3组患者阴道前壁组织中胶原Ⅰ含量的表达以辉度值为标准,在SUI组、POP组及对照组分别为98.62、98.15和100.03。SUI组与对照组比较,差异有极显著性(P<0.01);POP组与对照组比较,差异有极显著性(P<0.01);SUI组与POP组比较,差异无显著性(P>0.05)。3组患者阴道前壁组织中胶原Ⅲ含量的表达以辉度值为标准,在SUI组、POP组及对照组分别为98.46、98.23和100.12。SUI组与对照组比较,差异有极显著性(P<0.01);POP组与对照组比较,差异有极显著性(P<0.01);SUI组与POP组比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:绝经后SUI患者盆底支持结构的退行性病变与组织中的转化生长因子β1减少及胶原蛋白含量水平低下有关。     

盆腔器官脱垂患者阴道前壁中一氧化氮合酶的表达及意义

目的:通过检测女性盆底功能障碍性疾病患者阴道前壁中神经型一氧化氮合酶(Nitric Oxide Synthase,nNOS)的表达情况,探讨其在盆腔器官脱垂(POP)发生发展中的作用。方法:选取59例POP患者及46例非脱垂患者(对照组)的阴道前壁组织,采用免疫组织化学方法 (S一P法)检测59例脱垂患者的阴道前壁组织标本中神经型一氧化氮合酶的表达。结果:神经型一氧化氮合酶在未绝经组POP患者和对照组阴道前壁中的表达差异有统计学意义(P<0.01),神经型一氧化氮合酶在绝经组POP患者和对照组阴道前壁中的表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论:神经型一氧化氮合酶可能促进了POP的发生。     

螺内酯对急性前壁心肌梗死患者胶原增生的影响

目的 探讨口服螺内酯对急性前壁心肌梗死患者胶原增生的影响.方法 将急性前壁心肌梗死患者(急性前壁心肌梗死组)按随机数字表分为两组:常规治疗组,接受ACEI、β-受体阻滞剂、抗血小板药物、调脂药物等常规治疗;螺内酯组,在常规治疗基础上加用螺内酯治疗(40 mg,日1次口服).两组均在入院后第1、7、28和56天采血检测血清Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)浓度.选择健康志愿者30例作为生理对照组.结果 急性前壁心肌梗死组患者入院第1天检测血清PⅢNP浓度较生理对照组增加[(4.35±1.67)μg/L比(3.16±1.62)μg/L,P＜0.05].第56天时,螺内酯组血清PⅢNP浓度明显低于常规治疗组[(5.66±2.48)μg/L比(7.13±2.33)μg/L,P＜0.01].结论 螺内酯可有效抑制急性前壁心肌梗死患者心肌胶原的合成.     

电刺激对压力性尿失禁鼠模型阴道前壁Calpain 2和胶原的影响

目的通过模拟临床盆底电刺激(electrical stimulation,ES)治疗压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)的方法,分析ES对小鼠阴道前壁中Calpain 2和胶原的代谢影响。方法实验分为对照组(CON组)、SUI组、SUI+ES 50 Hz组,每组20只小鼠。构建小鼠SUI模型并进行造模评价,ES后取阴道前壁组织,应用Western Blot和RT-PCR方法比较3组组织中Calpain 2和胶原的表达变化,并在蛋白水平分析各组中Calpain 2与胶原Ⅰ、胶原Ⅲ相关性。结果 SUI+ES 50 Hz组小鼠阴道前壁Calpain 2的蛋白表达含量及mRNA均较SUI组显著升高(P0.05),SUI组胶原Ⅰ、Ⅲ的蛋白表达、mRNA水平与CON组相比较显著降低(P0.05),SUI+ES 50 Hz组经ES治疗后胶原Ⅰ、Ⅲ蛋白、mRNA表达水平有所升高(P0.05)。且在蛋白水平SUI+ES 50 Hz组中Calpain 2与胶原Ⅰ、胶原Ⅲ呈明显正相关(r=0.7251,P=0.0003;r=0.6869,P=0.0008)。结论 ES治疗可激活SUI盆底组织中Calpain 2蛋白,增加胶原含量;且在ES治疗SUI中,Calpain 2的变化与胶原变化密切相关,可能参与其治疗机制。     

POP患者盆底组织中MMP-3、TIMP-3的研究

目的:探讨盆腔器官脱垂(Pelvic floor prolapse,POP)患者阴道壁粘膜组织中基质金属蛋白酶-3(Matrix metalloproteinase-3,MMP-3)、组织金属蛋白酶抑制物-3(Tissue inhibitor of metalloproteinase-3,TIMP-3)表达,分析其与疾病发生的关系。方法:采用免疫组化方法,测定30例盆腔器官脱垂(POP)患者(POP组)阴道壁粘膜组织中MMP-3及TIMP-3阳性表达率,并选择同期20例非卵巢功能性肿瘤和宫颈病变患者作为对照(对照组)。结果:POP患者阴道壁粘膜组织中MMP-3表达显著高于对照组(P<0.05),TIMP-3表达显著低于对照组(P<0.05)。结论:POP患者盆底支持结构的退行性病变与阴道壁粘膜组织中胶原代谢活跃、胶原的分解增加有关。     

尘肺病患者血清PDGF和PⅢNP含量的测定

目的 探讨血小板源性生长因子(PDGF)和Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)在尘肺病发生、发展中的意义.方法 采用双抗体夹心法,测定77例尘肺病患者(包括32例矽肺、45例煤工尘肺)和77例健康对照者血清PDGF和PⅢNP的表达水平.结果 尘肺病患者血清PDGF和PⅢNP含量分别为(36.31±3.31)ng/ml、(12.59±2.24)ng/ml,对照组则分别为(23.99±2.14)ng/ml、(9.33±2.63)ng/ml,差异均有统计学意义(P＜0.05);矽肺患者血清PDGF和PⅢNP含量均高于煤工尘肺患者,差异有统计学意义(P＜0.05);尘肺血清PDGF和PⅢNP呈线性关系且含量随着期别的增加而降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 尘肺病患者血清PDGF和PⅢNP含量可能与尘肺病的发生、发展有关,能否作为尘肺病血清生物标志物有待进一步探讨.     

急性前壁心肌梗死后心肌胶原纤维合成与心功能的研究

目的　探讨未成功实现早期再灌注的急性前壁心肌梗死患者心肌胶原纤维合成以及左室收缩、舒张功能指标的变化规律。方法　应用放射免疫法测定 4 5例急性前壁心肌梗死患者发病后第 5天、15天、30天、90天血清Ⅰ型前胶原羧基端肽 (PⅠCP)和Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)含量。超声测定患者出院前、第 90天的左室舒张末期内径 (LVEDd)、左室射血分数(LVEF)、二尖瓣舒张早期血流速度峰值 (E) /二尖瓣舒张晚期血流速度峰值 (A)的比值。将第 90天的E/A比值与血清PⅠCP和PⅢNP水平作相关分析。 30例健康人作为正常对照。结果　急性前壁心肌梗死患者发病后第 5天、15天、30天、90天血清PⅠCP和PⅢNP水平分别与对照组比较均明显升高 (P <0 .0 1)。急性前壁心肌梗死组在出院前和第 90天时的LVEDd均明显大于对照组 ,LVEF和E/A比值均明显低于对照组 (P <0 .0 1)。第 90天的E/A比值与血清PⅠCP和PⅢNP水平均呈明显负相关 (P <0 .0 0 1)。结论　未成功实现早期再灌注的急性前壁心肌梗死患者血清PⅠCP和PⅢNP含量明显增高并持续 3个月以上。左室舒张功能障碍与心肌纤维化密切相关。     

非酒精性脂肪肝透明质酸、Ⅲ型前胶原肽、Ⅳ型胶原、层黏蛋白改变分析

目的探讨非酒精性脂肪肝患者血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层黏蛋白(LN)含量变化及其临床意义。方法经B超诊断的非酒精性脂肪肝患者采用放免法检测HA、PⅢP、Ⅳ-C、LN含量并以正常健康组作为对照。结果非酒精性脂肪肝组HA、PⅢP、Ⅳ-C、LN含量高于正常对照组,P<0.01,升高阳性率也高于正常对照组。结论非酒精性脂肪肝患者存在不同程度肝纤维化,以上指标检测对其肝纤维化判断有重要意义。     

基质金属蛋白酶-1及组织金属蛋白酶抑制物-1在盆腔器官脱垂患者阴道壁组织中的表达及意义

目的探讨患者阴道壁粘膜组织中基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)及组织金属蛋白酶抑制物-1(tissues inhibitor of metalloproteinase-1,)在盆腔器官脱垂患者(pelvic organ prolapse,POP)中的表达及意义,分析其与POP发生的关系。方法随机选取2011年1—12月住院手术治疗的POP患者25例作为POP组,选择同期非POP病变,其他经阴手术患者30例作为对照组。结果 MMP-1在阴道壁粘膜组织中的表达:POP组平均灰度值96.17,对照组平均灰度值85.65,比较差异有统计学意义(P<0.05)。TIMP-1在阴道壁组织中的表达:POP组平均灰度值87.17,对照组平均灰度值97.18,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 POP患者盆底支持结构的退行性改变与阴道壁粘膜组织中的胶原代谢活跃有关,联合检测MMP-1及TIMP-1对POP的诊断和治疗具有重要的临床意义。     

类风湿伴肺间质改变患者血中Ⅲ型前胶原变化的研究

用放免法检测 30例类风湿关节炎伴或不伴肺间质病变的患者血中Ⅲ型前胶原含量 ,并以 15例正常人为对照。结果显示 ,类风湿关节炎患者 ,血中Ⅲ型前胶原明显高于正常对照组 ,且类风湿关节炎伴肺间质改变患者的血中Ⅲ型前胶原含量也高于类风湿关节炎无肺间质改变者。提示 ,类风湿关节炎患者易合并肺间质病变 ,且Ⅲ型前胶原水平变化对反映其是否合并肺间质病变具有一定敏感性。     

牛磺酸对染矽尘大鼠肺组织Ⅰ和Ⅲ型胶原合成及比例的影响

目的 探讨牛磺酸对染矽尘大鼠肺组织不同时相Ⅰ、Ⅲ型胶原合成及比例的影响.方法 将Wistar大鼠144只随机分为对照组（生理盐水,普饲）、矽肺组（普饲）和牛磺酸组（牛磺酸饲料）给予气管内注入1 ml矽尘混悬液（50 mg/ml）,每组48只.分别在第1、3、7、14、21、28天时,用高效液相色谱法测定其血浆中牛磺酸含量;取肺组织制作石蜡切片,天狼猩红法染色,偏振光显微镜观察各组动物肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成及比例的变化,图像分析系统对其进行定量分析.结果 第7、14、21和28天,矽尘组Ⅰ型胶原含量分别比对照组增加3.84%、3.77%、3.73%、9.83%,差异有统计学意义（P＜0.01）.第7、21和28天时,牛磺酸组Ⅰ型胶原含量分别比矽尘组降低2.39%、1.62%和7.13%;与对照组比较,第14、21和28天Ⅰ型胶原含量分别增加2.12%、2.11%和2.70%,差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）.第28天时,牛磺酸组Ⅲ型胶原含量比矽尘组减少2.62%,差异有统计学意义（P＜0.05）.矽尘组Ⅰ/Ⅲ型胶原比例第7天开始增加,第28天时达到最大比值1.87,牛磺酸组Ⅰ/Ⅲ型胶原比例从第7天开始增加,且增加幅度高于矽尘组,第28天时增加幅度低于矽尘组.结论 牛磺酸对矽尘诱导大鼠肺组织不同时相的Ⅰ、Ⅲ型胶原合成抑制作用不同.     

女性盆底器官脱垂患者主韧带超微结构的研究

目的 通过透射电镜观察主韧带的超微结构,同时测量主韧带胶原原纤维直径,探讨盆底器官脱垂的发病机制.方法 选取深圳市龙岗中心医院妇科2006年6月至2007年6月确诊为盆底器官脱垂行阴式手术的10例患者为实验组,同期因子宫良性病变行阴式子宫切除术的10例患者为对照组.术中取主韧带标本,通过透射电镜观察主韧带超微结构的变化,并测量主韧带胶原原纤维直径.结果 ①实验组主韧带胶原束排列紊乱,呈扭曲状,可见断裂结构,由结缔组织填充;局部可见变性坏死区,周围有新生的胶原纤维,直径大小不等;还可见代谢活跃的成纤维细胞及大量的肌纤维细胞;②实验组主韧带胶原原纤维直径大于对照组,经比较有显著性差异(t=10.23,P＜0.05).结论 女性盆底器官脱垂患者存在胶原形态的异常,可能是导致女性盆底组织膨出的因素之一.     

TGF-β1、MMP-3及Collagen Ⅲ在POP患者子宫主韧带组织中的表达及意义

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及胶原蛋白Ⅲ型(Collagen Ⅲ)在盆腔器官脱垂(POP)患者子宫主韧带组织中的表达及意义。方法选取2017年1月至2018年5月治疗的POP患者45例(POP组),其中Ⅲ期25例,Ⅳ期20例,同时选取无POP患者50例作为对照组,采用免疫组化染色分析子宫主韧带组织中TGF-β1、MMP-3及Collagen Ⅲ表达情况,Western blot检测各指标表达的灰度值。结果 POP组TGF-β1和CollagenⅢ阳性表达率及平均灰度值均明显低于对照组(P<0.05),而MMP-3阳性表达率及平均灰度值明显高于对照组(P<0.05)。POP组绝经前后后患者TGF-β1、CollagenⅢ、MMP-3阳性表达率及平均灰度值差异具有统计学意义(P<0.05)。POP组Ⅲ期和Ⅳ期患者TGF-β1、Collagen Ⅲ、MMP-3阳性表达率及平均灰度值差异具有统计学意义(P<0.05)。POP患者TGF-β1、Collagen Ⅲ与MMP-3呈负相关(r=-0.563,-0.677,P<0.05),TGF-β1与Collagen Ⅲ呈正相关(r=0.441,P<0.05)。结论 POP患者子宫主韧带组织中MMP-3呈高表达,而TGF-β1与Collagen Ⅲ呈低表达,与绝经状况及病情程度可能有一定关系,且3者间表达有相关性。     

染矽尘大鼠血硅及尿硅含量与肺纤维化程度的关系

目的探讨染矽尘大鼠血、尿中硅含量与肺组织中羟脯氨酸、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原含量的关系。方法处理组采用气管灌注法注入矽尘混悬液建立大鼠矽肺模型,对照组采用同样处理但用生理盐水代替矽尘混悬液。两组取第28天大鼠的血液、尿液,经样品前处理后用原子吸收分光光度计检测;大鼠肺组织制作石蜡切片,采用天狼猩红染色法,用偏振光显微镜和图像分析系统对肺组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达进行分析;试剂盒检测肺组织羟脯氨酸含量。结果处理组大鼠血硅、尿硅、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原明显高于对照组(P<0.05),羟脯氨酸虽稍低于对照组,但无统计学意义(P>0.05);血硅、尿硅分别与Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原建立直线回归,有统计学意义(P<0.05),血硅、尿硅分别与羟脯氨酸建立直线回归,无统计学意义(P>0.05)。结论血硅、尿硅对早期矽肺纤维化程度可能有一定的指示意义。 更多还原     

心力衰竭患者血清胶原肽水平观察

笔者旨在探讨充血性心力衰竭(CHF)人群血清I型前胶原羧基端肽原(P I CP)与血清Ⅲ型前胶原氨基端肽原(PⅢNP)水平,研究其含量变化在CHF发病中的作用及临床意义.