重度子痫前期子宫小动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的改变

目的研究重度子痫前期患者子宫小动脉平滑肌大电导钙激活钾通道的改变。方法选取2012年6月至2013年3月在泸州医学院附属医院产科住院分娩的20例患者的临床资料,其中临床诊断为重度子痫前期(severe preeclampsia,SPE)且无其它并发症和合并症进行剖宫产手术10例为SPE组;同期无产科并发症和合并症的足月孕产妇因其他原因行剖宫产手术终止妊娠者10例为正常晚孕(normal late pregnancy,NLP)组。取行剖宫产手术患者的子宫小动脉,采用急性酶分离法分离出小动脉平滑肌细胞,按平滑肌细胞的来源分为重度子痫前期组和正常足月妊娠组,采用单通道膜片钳技术记录子宫小动脉平滑肌细胞BKCa通道电流。结果妊娠期子宫小动脉平滑肌细胞BKCa通道单通道电流能被Ib TX通道特异阻断剂阻断,具有电压和钙离子浓度依赖性;在细胞贴附式膜片下,重度子痫前期组与正常足月妊娠组相比,BKCa通道开放概率减少(P0.01),电流幅值减小(P0.01)、平均开放时间减少(P0.01)、平均关闭时间无明显变化。结论重度子痫前期患者子宫小动脉平滑肌细胞BKCa通道活性降低。     

子宫平滑肌细胞膜的收缩相关蛋白

妊娠后,机体内分泌环境发生显著变化,一系列收缩相关蛋白在子宫肌细胞膜协调表达,包括子宫收缩/舒张激动剂受体(催产素受体、前列腺素受体、β肾上腺素受体、促肾上腺皮质激素释放激素受体)、影响细胞兴奋性的离子通道蛋白以及使细胞相互耦连的缝隙连接.它们共同使孕期子宫大部分时间保持静息,而临产后触发强烈的宫缩.对于子宫肌细胞收缩相关蛋白的研究将有助于对子宫收缩机能紊乱性疾病如早产、产后出血等的治疗.     

动脉粥样硬化兔主动脉平滑肌细胞钙激活钾通道变化及其对钙敏感性的研究

[目的]探讨动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)主动脉平滑肌细胞钙激活钾通道(Calcium-activatedPotas-siumChannel,KCa)变化及其对钙的敏感性。[方法]用酶消化法获取单个主动脉平滑肌细胞,通过膜片钳记录技术检测AS兔主动脉平滑肌细胞KCa通道的活性,并在浴液中分别加入不同浓度的Ca2+,以Pclamp7.0应用软件实时采样记录通道的开放概率(Po)、平均开放时间(To)、平均关闭时间(Tc)和电流幅值(Am),并以加钙前作对照观察上述参数的变化。[结果]AS组KCa通道的活性明显高于对照组;与加Ca2+前比较,对照组Po增加了(22.35±9.43)倍,而AS组仅增加了(5.31±0.42)倍(P<0.01)。[结论]AS兔血管平滑肌细胞KCa通道的活性明显增加,可能是AS血管发生代偿性扩张的机制之一;该通道对Ca2+的敏感性降低,可能是促进AS发展的因素之一。     

瘦素对子宫内膜间质细胞分泌白细胞介素的影响

目的:观察瘦素对体外培养人子宫内膜间质细胞(ESC)分泌白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的影响,探讨瘦素对女性生殖生理的调节作用。方法:采用ELISA方法测定加入不同浓度瘦素时ESC分泌IL-6和IL-8的含量。结果:在ESC细胞上清液中瘦素能刺激IL-6、IL-8的产生,不同浓度瘦素刺激IL-6、IL-8分泌量不同,各组间比较有显著性差异(P<0·05,P<0·01)。结论:瘦素是细胞因子在子宫内膜产生的一种附加调节剂,通过调节局部细胞因子而调节生殖生理过程。     

大电导钙激活钾通道β1亚基与子痫前期的相关性研究

目的：探讨胎盘组织和子宫平滑肌组织中大电导钙激活钾通道β1亚基（KCNMβ1）的表达,及其与子痫前期发病的关系。方法：轻、重度子痫前期组（研究组）和正常孕妇组（对照组）孕妇的胎盘组织及子宫平滑肌组织中KCNMβl mRNA的表达通过荧光定量PCR技术检测。采用ELISA法检测三组孕妇血清KCNMβl浓度变化水平。结果：各研究组中孕妇血清的KCNMβl水平、胎盘组织及子宫平滑肌中KCNMβl mRNA表达水平均明显低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）;而轻、重度子痫前期组比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：孕妇血清中KCNMβl表达降低,胎盘组织和子宫平滑肌中KCNMβl mRNA的表达降低与子痫前期的发病密切相关,可能参与了子痫前期的病理生理过程。     

运动应激对慢性吸烟大鼠肺动脉平滑肌钾通道BKca及Kv1.5表达的影响

目的观察运动应激对慢性吸烟大鼠肺动脉平滑肌大电导的钙激活的钾通道(BKca)和电压依赖性延迟整流钾通道Kv1.5蛋白和mRNA表达的影响.方法复制大鼠慢性吸烟模型后进行运动训练,测定其血浆中皮质醇浓度,采用HE染色、免疫组织化学染色、原位杂交等方法检测肺组织病理形态学改变和BKca、Kv1.5的表达变化.结果(1)吸烟运动组运动后血浆中皮质醇浓度[(1 528.7±469.7)ng/L]明显高于全部运动训练后次日晨[(672.4±235.7)ng/L],差异有统计学意义(P＜0.01).(2)HE染色显示,吸烟对照组肺组织出现明显的慢性炎症反应,吸烟运动组炎症反应轻于吸烟对照组.(3)吸烟对照组肺动脉BKca mRNA[积分光密度值(OD)值大动脉0.220 6±0.041 5,小动脉0.393 5±0.137 8]和蛋白(OD值大动脉0.263 4±0.121 9,小动脉0.099 5±0.085 1)表达低于正常对照组,吸烟运动组BKca mRNA(OD值大动脉0.502 2±0.113 4,小动脉0.640 8±0.213 5)表达高于吸烟对照组,但对小动脉的蛋白表达无影响.(4)吸烟对照组肺动脉Kv1.5 mRNA(OD值大动脉0.935 4±0.3290,小动脉0.501 2±0.117 0)和蛋白(OD值大动脉1.111 2±0.331 0,小动脉0.473 6±0.1250)表达低于正常对照组,在小动脉吸烟运动组Kv1.5蛋白(OD值0.744 5±0.269 0)高于吸烟对照组,大动脉则无变化.结论适当运动应激可降低慢性吸烟对大鼠肺动脉平滑肌钾通道BKca和Kv1.5表达的抑制作用,运动引起的皮质醇分泌增加可能是其机制之一.     

妊娠期高血压疾病钾通道功能的改变

目的 探讨妊娠期高血压疾病患者血管平滑肌细胞膜上钾电流之变化,为其病因研究提供理论依据.方法 对15例妊娠期高血压疾病孕妇及5例正常孕妇的胎盘采用急性酶解分离制备单个胎盘血管平滑肌细胞;全细胞膜片钳技术记录胎盘血管平滑肌细胞膜上钾通道电流情况.结果 ①妊娠期高血压疾病各组的细胞静息膜电位均增大,与对照组相比,有显著性差异(P＜0.01);②胎盘血管平滑肌细胞膜电容在各组间无显著性差异(P＞0.05);③与对照组相比,妊娠期高血压疾病各组胎盘血管平滑肌细胞钾电流密度均减小,差异具有显著性意义(P＜0.001).结论 妊娠期高血压疾病胎盘动脉血管平滑肌细胞的静息膜电位增大,钾电流密度减小.推测妊娠期高血压疾病发生可能与钾通道功能改变有关.     

下丘脑神经元钙激活钾通道的温度效应

目的研究新生SD乳鼠下丘脑神经元钙激活钾通道的温度敏感性.方法采用膜片钳技术内面向外式.结果随着温度的增加,通道的电导及开放概率显着增加.37℃、39℃时电导的Q₁₀为1.63和1.86,开放概率的Q₁₀为2.83和3.56,通道的开放、关闭时间都具有温度依赖性缩短.结论下丘脑钙激活钾通道具有高度的温度敏感性,对它的进一步研究可能有助于阐明体温调节的本质因素.     

子宫内膜异位症患者腹腔液和血清IL-6、IL-15的临床分析

目的 探讨腹腔液和血清白细胞介素(IL)-6、IL-15与子宫内膜异位症(EM)的关系.方法 EM组为EM患者74例(其中Ⅰ～Ⅱ期26例,Ⅲ～Ⅳ期48例),对照组为卵巢良性畸胎瘤或行输卵管结扎术患者46例,采用双抗体夹心ELISA法测定两组患者腹腔液和血清IL-6、IL-15的水平.结果 EM组腹腔液和血清IL-6[(1017.81±361.98)ng/L和(455.47±161.52)ng/L]均高于对照组[(284.63±70.50)ng/L和(149.37±43.09)ng/L],EM组Ⅲ～Ⅳ期腹腔液和血清IL-6[(1253.44±189.63)ng/L和(556.50±93.34)ng/L]较Ⅰ～Ⅱ期[(582.81±107.75)ng/L和(268.96±63.48)ng/L]升高,差异均有统计学意义(P<0.01),腹腔液和血清IL-6呈正相关(r=0.950,P=0.01).EM组腹腔液IL-15[(333.45±63.94)ng/L]较对照组[(203.85±70.52)ng/L]升高,差异有统计学意义(P<0.01),EM组和对照组血清IL-15比较差异无统计学意义(P>0.05);EM组Ⅲ～Ⅳ期腹腔液和血清IL-15与Ⅰ～Ⅱ期比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 腹腔液IL-6、IL-15的改变可能与EM的发病机制有关,血清IL-6可能成为诊断EM并评估其分期的无创性指标之一.     

肥大细胞脱颗粒对子宫平滑肌肿瘤生物特征的影响

目的:探讨浸润的肥大细胞状态对子宫平滑肌肿瘤生物特征的影响。方法:选取子宫平滑肌瘤12例,子宫恶性未定平滑肌肿瘤10例,子宫平滑肌肉瘤7例,光镜观察和形态计量组织学特征、肥大细胞颗粒面积、内皮第Ⅷ因子相关抗原表达,流式细胞仪检测瘤细胞凋亡率,并分析肥大细胞颗粒面积与其它指标之间的相关关系。结果:肿瘤细胞数量为子宫平滑肌瘤最少、恶性未定平滑肌肿瘤居中、平滑肌肉瘤最多。肥大细胞颗粒面积百分比为平滑肌瘤最高,未定平滑肌肿瘤居中,平滑肌肉瘤最低;瘤细胞数与肥大细胞颗粒面积比呈负相关。平滑肌瘤内皮细胞第Ⅷ因子相关抗原阳性染色面积最低,平滑肌肉瘤最高;第Ⅷ因子相关抗原阳性染色面积与肥大细胞颗粒面积比呈负相关。平滑肌瘤瘤细胞凋亡率最低,平滑肌肉瘤最高;瘤细胞凋亡率与肥大细胞颗粒面积比呈负相关。结论:肥大细胞释放颗粒提高了子宫平滑肌肿瘤的恶性度,促进肿瘤血管的增生。     

镉对大鼠Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase影响的实验研究

目的 研究不同剂量镉对大鼠钠钾ATP酶(Na^ -K^ -ATPase)和钙ATP酶(Ca^ -ATPase)的影响,以探讨镉中毒的细胞分子学机制。方法 大鼠按体重随机分成4组,第1组为对照组,皮下注射0．9％氯化钠,第2～4组为镉染毒组,分别皮下注射3,5,7μmol／kg的氯化镉溶液,注射容量均为2ml／kg。染毒6周后,测定尿中乳酸脱氢酶(LDH)、尿蛋白、尿镉和肝、肾组织中Na^ -K^ -ATPase及Ca^2 -ATPase的活力。结果 随着镉染毒剂量的增加,各组大鼠尿LDH、尿蛋白和尿镉含量均逐渐递增,呈现明显的剂量-效应关系;同时,肝、肾组织中的：Na^ -K^ -ATPase和Ca^2 -ATPase活力也随之增加。结论 随着镉染毒剂量的增加,大鼠肝、肾组织损伤逐渐加重,同时伴随着细胞膜上Na^ -K^ -ATPase和Ca^2 -ATPase的变化,这可能与细胞内钙稳态的破坏有关。     

高半胱氨酸对血管平滑肌细胞和胞浆Ca~(2+)的影响

动脉粥样硬化是心、脑血管疾病的常见类型,由此而引起的心绞痛、心肌梗死是发达国家和发展中国家主要的死亡原因。尽管动脉粥样硬化的研究取得了很大的进展,但其危险因素和致病机理目前还不清楚。　　高半胱氨酸（ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ,Ｈｃｙ）是甲硫氨酸代谢的一个中间产物。早在１９６４年,Ｍｕｄｄ等［１］报道了高半胱氨酸尿症病人胱硫醚β合成酶缺陷。随着研究的进一步深入,越来越多的研究表明,Ｈｃｙ是引起动脉粥样硬化的一个独立危险因素［２］。　　血管平滑肌增生是动脉粥样硬化的主要病理特征［３］。已有研究表明,Ｈ…     

混配农药对家兔诱发电位及脑组织ATP酶的影响

目的研究混配农药对家兔中枢神经系统功能的影响及其机制。方法将家兔随机分为混配农药染毒A组（丙溴磷与氰戊菊酯混配染毒组）、混配农药染毒B组（丙溴磷与灭多威？昆配染毒组）和1个对照组，每组6只。3个染毒组分别给予3种染毒剂量进行染毒，于染毒前后进行家兔体感染诱发电位（SEP）及染毒后大脑组织三磷酸腺苷（ATP）酶活力的测定。结果与对照组比较，2个混配农药染毒组的高剂量组染毒后SEP的N1、P1、N2波潜伏时均显著延长（P〈0．01），2个混配农药染毒组的高中剂量组染毒后的Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的活力明显下降（P〈0．05。P〈0．01）。结论一定剂量的混配农药可导致家兔中枢神经系统功能的的改变，这种改变可能与大脑组织中N^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2^＋-ATP酶活力的下降有关．     

0.4 mT工频磁场对骨骼肌肌质网囊泡游离钙离子转运的影响

目的探讨工频磁场对骨骼肌肌质网钙转运动力学的影响.方法利用动态光谱法检测0.4 mT、50 Hz正弦磁场辐照过的骨骼肌肌质网Ca2+转运和钙泵活性,用3H-兰尼碱结合实验检测Ca2+释放通道的活性,用荧光偏振法检测肌质网膜的流动性等.结果 0.4 mT、50 Hz正弦磁场辐照导致提取的肌质网囊泡Ca2+摄取初速率由每秒(29.18±3.90) pmol/mg下降到(24.60±3.81) pmol/mg,钙泵的活性由每分钟(0.93±0.05) μmol/mg下降到(0.69±0.07) μmol/mg;导致Ca2+释放初速率由每秒(4.83±0.82) pmol/mg上升到(5.65±0.43) pmol/mg,3H-兰尼碱结合度由(1.10±0.12) pmol/mg上升到(1.16±0.13) pmol/mg,分别上升了15%和5%.结论 0.4 mT工频磁场辐照引起的肌质网Ca2+摄取下调和Ca2+释放上调是由于肌质网钙泵活性降低和Ca2+释放通道活性升高所致.     

苯并(a)芘对猪主动脉内皮细胞钙依赖型钾通道的影响

[目的]研究苯并 (a)芘[benzo(a)pyrene ,BaP]对血管内皮细胞钙依赖型钾通道 (Ca2 + _dependentK+ channel,KCa)的影响及其意义。[方法]原代培养猪主动脉血管内皮细胞 ,不同浓度的BaP(0、0.1、0.5、1、5、10μmol/L)染毒24h,以全细胞膜片钳技术检测各组细胞KCa 的变化情况。[结果]随BaP浓度的逐渐升高 ,内皮细胞膜KCa 开放程度扩大。在膜电位为 +40mV时 ,对照组和BaP染毒组 (0.1、0.5、1、5、10μmol/L)的外向电流分别为 (350.12±53.23)、(372.35±54.56)、(765.25±86.55)、(897.44±79.33)、(1245.65±89.75)、(1810.23±65) pA ,其中BaP(0.5、1、5、10μmol/L)染毒组的外向电流值与对照组相比 ,差异有显著性(P<0.05)。[结论]BaP升高血管内皮细胞内Ca2 +浓度 ,可能引起KCa 开放程度扩大。     

微波辐照致大鼠心肌细胞凋亡机制的研究

目的探讨微波辐照诱导心肌细胞凋亡的分子病理机制。方法本实验以峰值功率密度950mW/cm2(9500W/m2)的脉冲微波辐照大鼠心肌细胞0、30、60、120s后,观察心肌细胞形态变化,检测心肌细胞凋亡率和多种凋亡相关基因的表达,以及心肌细胞内外Ca2 、钙调蛋白、钙通道蛋白的变化。结果辐照后心肌细胞呈现出典型的细胞凋亡形态。辐照60s后6、24h,心肌细胞凋亡率分别为(36.76±5.31)%和(26.44±3.94)%,与对照组(2.36±0.87)%相比较差异有显著性(P<0.01),心肌细胞凋亡率与辐照剂量呈正相关。Bax、p53、c-myc表达显著增强(P<0.01),Bcl-2表达一过性增强,随后明显降低(P<0.01)。细胞内Ca2 明显降低,同时细胞外Ca2 显著升高。与对照组相比,钙调蛋白、钙通道蛋白的表达呈有规律下降性变化(P<0.01),并与辐照时间呈正相关。结论心肌细胞是微波辐照损伤的敏感细胞,微波辐照可诱导心肌细胞凋亡,并存在剂量-效应关系。钙离子、钙调蛋白、钙通道蛋白以及多种基因参与微波辐照引起的心肌细胞凋亡,并发挥重要调控作用。     

镉对体外培养肾组织中Ca2+-ATPase的影响及尼莫地平的干预作用

目的 探讨镉对肾组织中Ca2+-ATPase的影响及尼莫地平(Nimo)对其的干预作用. 方法 在体外条件下,测定CdCl2对肾组织Ca2+-ATPase及乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶 (ALP)、尿N-乙酰-D-氨基葡萄苷酶(NAG)等多种肾损伤标志酶活力的作用及N imo干预处理后的影响.结果在低浓度CdCl2组,Ca2+-ATPase的活力明显升高,100 mg/L CdCl2组Ca2+-ATPase的活力为(42.12±3.35)μmol Pi.g-1 .h-1,与对照组[(31.23±2.59)μmol Pi.g-1.h-1]的差异有显著性(P＜0.05);而随CdCl2浓度升高,Ca2+-ATPase活力受到明显抑制, 200 mg/L CdCl2组的Ca2+-ATPase活力为(20.67±2.46)μmol Pi.g-1.h -1,明显低于对照组,差异有显著性(P＜0.05).而染镉前经Nimo预处理后,200 mg/L CdCl2+Nimo组的NAG活力,100、150、200 mg/L CdCl2+Nimo组的LDH活力及150、200 mg/L CdCl2+Nimo组的ALP活力均低于单纯染CdCl2组,差异有显著性( P＜0.05);100 mg/L CdCl2+Nimo组的Ca2+-ATPase活力低于、而200 mg /L CdCl2+Nimo组则高于单纯CdCl2组,差异均有显著性(P＜0.05). 结论 CdCl2对Ca2+-ATPase活力的影响是双相的,Nim o可部分解除CdCl2对Ca2+-ATPase活力的抑制,并具有减轻镉性肾损伤的能力 .     

二硫化碳对小鼠心肌细胞肌浆网Ca2+-ATP酶基因表达的影响

目的探讨二硫化碳(CS2)对小鼠心肌细胞肌浆网Ca2 -ATP酶(SERCA2 a)表达的影响机制。方法将48只昆明小鼠分为4组给予不同剂量CS2(0~800 mg/m3)吸入染毒5周后,提取心肌的总RNA,运用逆转录聚合酶链反应技术来检测染毒小鼠心肌细SERCA2 a表达水平的变化。结果染毒前后体重差异无显著性(P>0.05),随着染毒剂量的增大,小鼠心肌细胞SERCA2 a的表达逐渐降低,与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论CS2能降低小鼠心肌SERCA2 a的mRNA表达水平。     

二氧化硫衍生物对大鼠海马神经元外向钾电流特性的影响

[目的 ]研究大鼠海马神经元去极化激活的外向钾电流的特征 ,并在此基础上初步探讨SO2 衍生物对此外向电流的影响。 [方法 ]利用全细胞膜片钳技术。 [结果 ]短时去极化至 -60mV以上电位可引发快速上升的外向电流 ,之后缓慢衰减至一平台。当保持电位改变时 ,该峰电流与平台电流的幅度均会发生变化 ,但前者较后者变化显著。试验中测得峰电流与平台电流的翻转电位分别为 (-76 1± 5 97)mV和 (-83 6± 4 13 )mV ,与用Nerst方程计算出的本试验细胞外液与电极内液的钾离子平衡电位EK=-88mV接近 ,说明该外向电流是钾电流 ,且提示此外向电流包括两种成分 ,即峰电流IA 和平台电流IK。SO2 衍生物可剂量依赖地增大此两种成分的外向钾电流 ,使二者增大 5 0 %的SO2 衍生物剂量分别为 2 6 19μmol/L和 14 5 0 μmol/L。[结论 ]大气SO2 污染可能与一些中枢神经系统疾病的发生以及衰老有关。     

P13K、P38 MAPK及ERK1/2抑制剂对EGF诱导的血管平滑肌细胞迁移的实验研究

目的 探讨P13K抑制剂Wortmannin、P38 MAPK抑制剂SB202190及ERK1/2抑制剂PD98059对表皮生长因子(EGF)诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMCs)迁移的影响.方法 以1%FCS血清孵育为对照,用EGF(10ng/ml)刺激,平行加入PD98059(PD组)、SB202190(SB组)和Wortmannin(WT),划痕损伤实验分析VSMCs迁移情况.结果 划痕后24 h,EGF组VSMCs迁移较对照组明显(P<0.01),WT组、SB组及PD组与EGF组相比都明显抑制VSMCs迁移(P<0.01),但三个抑制剂组之间差异无统计学意义(P>0.05);划痕后30 h,EGF组VSMCs迁移仍较对照组明显(P<0.01),WT组、SB组及PD组与EGF组相比则明显抑制VSMCs迁移(P<0.01),且三个抑制剂组之间差异有统计学意义,其中SB组较WT组和PD组抑制VSMCs的迁移更明显(P<0.01).结论 EGF诱导VSMCs迁移可能通过P13K、P38 MAPK及ERK1/2途径起作用,且P38 MAPK途径作用更明显.