3种中药单体成分对肺念珠菌的抗菌活性

目的 观察3 种中药单体成分对肺念珠菌体外的抗菌活性.方法 采用试管药基法,将桂皮醛、丁香酚、藿香酮倍比稀释成2.5～0.019 5 μL/mL,对致病性肺念珠菌(白色念珠菌、热带念珠菌、克柔氏念珠菌)进行最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC)实验观察.结果 桂皮醛对白色念珠菌、热带念珠菌MIC 为0.019 5 μL/mL,克柔氏念珠菌为0.039 1 μL/mL;白色念珠菌、热带念珠菌MFC 为0.039 1 μL/mL,克柔氏念珠菌为0.078 11 μL/mL.丁香酚对3 种念珠菌MIC 为0.078 1 μL/mL,对白色念珠菌MFC 为0.078 1 μL/mL,热带念珠菌、克柔氏念珠菌为0.156 2 μL/mL;藿香酮对白色念珠菌、热带念珠菌MIC 为0.156 2 μL/mL,克柔氏念珠菌为0.312 5 μL/mL;对白色念珠菌MFC 为0.156 2 μL/mL,热带念珠菌、克柔氏念珠菌为0.312 5 μL/mL.对照组氟康唑对白色念珠菌、热带念珠菌MIC 为0.313 μL/mL,对克柔氏念珠菌为2.5 mg/mL.结论 3 种中药单体成分对念珠菌均有很强的抗菌作用,其抗菌作用由强到弱依次为桂皮醛、丁香酚、藿香酮.克柔氏念珠菌对氟康唑显示耐药.     

桂皮油藿香油复合物对曲霉菌抗菌活性及机理的研究

目的探讨桂皮油和藿香油复合物对烟曲霉、黄曲霉体外抗菌活性及药物作用于烟曲霉菌后形态和超微结构的变化。方法采用试管药基倍比稀释法,用桂皮油藿香油复合物对烟曲霉、黄曲霉进行MIC测定,对烟曲霉进行扫描电镜(SME)和透射电镜(TEM)的观察。结果桂皮油藿香油复合物对烟曲霉MIC均值为桂皮油0.129 mg/ml,藿香油0.064mg/ml;对黄曲霉MIC均值为桂皮油0.257 mg/ml,藿香油0.129 mg/ml。药物作用于烟曲霉后SEM下,24～72 h菌丝粗细不一,形态不规则,胞壁脱落,呈碎片状。TEM下,24～72 h细胞水肿,细胞器大部分溶解消失,呈空泡状。结论桂皮油藿香油复合物对烟曲霉、黄曲霉有很强的抗菌活性,作用于烟曲霉菌后,菌丝胞壁很快溶解脱落,呈不规则或碎片状,细胞内水肿,细胞器消失,细胞变性死亡。     

复方桐叶烧伤油的抗菌作用研究

目的:探讨复方桐叶烧伤油的抗菌作用.方法:采用琼脂扩散法、试管法、点试法测定抑菌或杀菌浓度.结果:复方桐叶烧伤油对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌的最低抑菌浓度(MIC)依次为31.3mg/ml、31.3mg/ml、62.5mg/ml、125mg/ml、125mg/ml;对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌、乙型溶血链球菌的MBC均为62.5mg/ml;对革兰氏阴性菌绿脓杆菌、大肠杆菌的MBC均为125mg/ml;对真菌的MBC为125mg/ml.     

花仙宫血胶囊对大鼠子宫平滑肌的作用

目的:研究花仙宫血胶囊对大鼠在体和离体子宫平滑肌的作用,为其临床应用提供药理学依据。方法:通过大鼠离体和在体子宫实验,以子宫收缩幅度、频率及收缩强度等为指标,观察不同剂量花仙宫血胶囊对正常和缩宫素影响下的大鼠离体及在体子宫平滑肌收缩活性的影响。结果:花仙宫血胶囊0.26mg/ml、0.52mg/ml、1.04mg/ml 3个剂量组均能增加大鼠离体子宫平滑肌收缩幅度和活动力,与空白组比较有显著性差异﹙P<0.01,P<0.05﹚。0.52mg/ml剂量组还可增加大鼠离体子宫自发性收缩频率,与空白组比较有显著性差异﹙P<0.01﹚。0.52mg/ml剂量组花仙宫血胶囊有促进缩宫素对离体子宫平滑肌收缩的作用,使缩宫素的强直性收缩变为幅度增大的节律性收缩。花仙宫血胶囊0.26mg/ml、0.52mg/ml、1.04mg/ml 3个剂量组还可增强大鼠在体子宫对缩宫素引起的子宫平滑肌收缩的幅度、平均收缩峰张力和平均张力等,与空白组比较有显著性差异﹙P<0.01,P<0.05﹚。结论:花仙宫血胶囊对正常和缩宫素诱发的大鼠离体和在体子宫平滑肌收缩活性有明显增强作用。     

3种植物药单体对肺曲霉生物活性实验

目的：探讨3种植物药单体有效活性成分的抗真菌作用,对肺曲霉进行体外生物活性的MIC和MFC实验。方法：采用试管药基法,将桂皮醛、丁香酚、藿香酮倍比稀释成2.5～0.0098μg/mL的浓度,对致病性肺曲霉（烟曲霉、黄曲霉）进行MIC和MFC实验观察。结果：桂皮醛对烟曲霉MIC均值为0.0391μg/mL,黄曲霉MIC均值为0.0781μg/mL,MFC均为0.0781μg/mL;丁香酚对烟曲霉、黄曲霉MIC均值为0.0781μg/mL,MFC0.1562μg/mL;藿香酮对烟曲霉、黄曲霉MIC均值为0.1562μg/mL,MFC0.3125μg/mL;对照组氟康唑对烟曲霉、黄曲霉MIC和MFC均〉2.5mg/mL。结论：3种植物药单体对烟曲霉、黄曲霉均显示有较强的生物活性,其生物活性依次为桂皮醛、丁香酚、藿香酮。氟康唑对烟曲霉、黄曲霉均显示耐药。     

姜黄素对5种非白念珠菌菌丝及生物膜形成的抑制作用

目的观察姜黄素对5种非白念珠菌菌丝及生物膜形成的抑制作用。方法测定姜黄素对热带念珠菌Candidatropicalis、光滑念珠菌C.glabrata、近平滑念珠菌C.parapsilokis、克柔念珠菌C.Krusei、季也蒙念珠菌C.guilliermondii的最小抑菌浓度(MIC)以及抑制50%生物膜浓度(SMIC50),利用光学显微镜观察姜黄素对非白念珠菌菌落形态的影响,利用倒置显微镜与扫描电镜分别观察姜黄素对非白念珠菌菌丝形成以及生物膜形成的影响。结果姜黄素对热带念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌的MIC分别为64、128、256、256、128μg/m L;SMIC50分别为512、512、512、512、512μg/m L;倒置显微镜与扫描电镜观察发现姜黄素对5种非白念珠菌菌丝以及生物膜的形成均有抑制作用。光学显微镜观察发现姜黄素能抑制这5种非白念株菌在固体培养基上菌落周边菌丝的形成。结论姜黄素对5种非白念珠菌菌丝及生物膜的形成具有抑制作用。     

桂皮醛对免疫抑制BALB/c小鼠肺白念珠菌细胞壁(1,3)-β-D葡聚糖的影响

目的 侵袭性肺念珠菌感染发病率高、治疗棘手、预后差、死亡率高,研究桂皮醛对白念珠菌细胞壁(1, 3)-β-D-glucans的影响,为研发新型靶向抗真菌药物提供依据。方法 对免疫抑制BALB/c小鼠经鼻腔灌注1x107 cfu/ml 50ul白念珠菌菌悬液,口服桂皮醛240mg.kg-1. d-1,连续14d后,取肺组织标本进行 (1, 3)-β-D-glucans测定及透射电镜观察,以氟康唑为对照。结果 肺组织 (1, 3)-β-D-glucans（1160.62±89.65 pg/ml）,氟康唑对照组（4285.87±215.62 pg/ml）,两组之间对比较P＜0.01有统计学差异。肺组织电镜显示, 白念珠菌细胞壁外2-3层（1,3）-β-D葡聚糖层,胞壁溶解脱落,导致胞壁严重缺损,但细胞膜清晰、完整。结论 桂皮醛对肺白念珠菌细胞壁（1, 3）- β-D-glucans具有显著影响,但细胞膜不受影响。说明,桂皮醛有独特的抗白念珠菌细胞壁(1, 3)-β-D -glucans效应。     

抗霉菌性阴道病三种中药复方体外对白色念珠菌生物膜形成的影响

目的 观察3种中药复方体外对白色念珠菌生物膜形成的影响.方法 采用结晶紫染色法和MTT 法评价白色念珠菌生物膜的体外生长动力学, 微量稀释法检测3种中药复方对白色念珠菌悬浮菌及其生物膜的抑制作用以及药物包被对白色念珠菌生物膜形成作用.结果 生物膜内白色念珠菌数量随培养时间延长而增加.3种中药复方对白色念珠菌悬浮菌的最低抑菌浓度50%(MIC50)分别为3.255,3.565,3.875 mg/ml,对生物膜的SMIC50与SMIC80分别是3.255,6.51,3.565,7.12 mg/ml,3.875,7.623 mg/ml.3种中药复方包被浓度分别在7.882,3.808,6.357 mg/ml以上时对其生物膜形成的抑制作用有显著性.结论 3种中药复方对体外白色念珠菌生物膜具有明显的抑制作用.     

藿香蓟的抗炎和镇痛作用

藿香蓟(Ageratum conyzoides)为巴西的民间药,其70％乙醇提取物中水溶性部分(WSF)经研究具有止痛和抗炎作用。 取干燥藿香蓟叶1OOg,用乙醇-水(70:30,v/v)1500ml在60℃时提取1小时,将混合物过滤,滤液室温下蒸发,得沉淀混悬于100ml水中,离心,弃去不溶物,调整上清液pH值至7.4,保存于6℃左右备用。 采用角叉菜胶引起的炎症模型和组胺引起的通透性试验检验了藿香蓟的抗炎、镇痛作用。结果表明WSF(20～50mg/kg,ip)能     

身痛逐瘀胶囊对LPS诱导RAW264.7细胞释放NO抑制作用的研究

目的:观察身痛逐瘀胶囊对LPS诱导RAW264.7细胞释放NO的抑制作用。方法:以脂多糖诱导RAW264.7细胞,观察不同浓度的身痛逐瘀胶囊(1、5、10、20 mg/ml)处理RAW264.7细胞,MTT法检测细胞活性;同时检测LPS诱导RAW264.7细胞释放NO量以及身痛逐瘀胶囊和12味单味中药水提物干预后RAW264.7细胞释放NO量。结果:身痛逐瘀胶囊作用RAW264.7细胞的安全范围<20mg/ml,与LPS组相比,身痛逐瘀胶囊(1、5、10mg/ml)能有效抑制NO释放,12味单味中药水提物无效。结论:身痛逐瘀胶囊对LPS诱导RAW264.7细胞产生的炎症具有保护作用,其保护机制与抑制NO的释放有关。     

健脑补肾胶囊的质量标准研究

目的 测定健脑补肾胶囊中桂皮醛的含量,制定健脑补肾胶囊的质量标准.方法 采用高效液相色谱(HPLC)法测定健脑补肾胶囊中桂皮醛的含量.结果 桂皮醛在7.70～38.5 μg/ml浓度范围内线性关系良好、精密度高、稳定性好、重复性符合要求,经加样回收率实验,桂皮醛平均回收率为99.00%,RSD为1.56%,表明该方法的准确度高.结论 所研究的方法能较好地测出健脑补肾胶囊中桂皮醛的含量,并可用以有效控制健脑补肾胶囊的质量.     

肉桂油微乳中桂皮醛含量的高效液相色谱法测定

目的建立高效液相色谱法测定肉桂油微乳中桂皮醛含量的方法。方法色谱柱为C18,柱温25℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(33∶67),检测波长285 nm,流速1.0 ml.min-1。结果桂皮醛在28.8~100.8μg/ml(R2=0.999 9)浓度范围内线性关系良好。平均回收率为101.29%,RSD为1.45%。结论HPLC测定桂皮醛方法便捷、准确、重复性好,可用于肉桂油微乳含量的测定。     

GC法测定椒目仁油中油酸、亚油酸及α-亚麻酸

目的 建立测定椒目仁油中油酸、亚油酸及α-亚麻酸的方法.方法 采用十四酸作为内标物,使用氢氧化钾甲醇溶液将椒目仁油中不饱和脂肪酸甲酯化,再用气相色谱法测定椒目仁油中油酸、亚油酸及α-亚麻酸.结果 油酸、亚油酸及α-亚麻酸浓度分别在0.92 ～13.60 mg/mL(r =0.999 9)、1.15 ～16.96 mg/mL(r =0.999 9)、2.02～29.94 mg/mL(r =0.999 9)mg/mL范围内呈良好的线性关系;油酸、亚油酸及α-亚麻酸平均加样回收率及RSD值分别为98.34％与0.26％、98.43％与0.56％、98.35％与0.43％(n=6);3批椒目仁油中油酸、亚油酸及α-亚麻酸的平均质量分数分别为19.25％、27.22％、33.26％.结论 本方法简便易行,准确稳定可靠、重复性好,因此,可以作为椒目仁油的质量控制方法.     

5种中药体外抗白色念珠菌的实验研究

[目的]探索黄连、黄芩、黄柏、知母、甘草等5种中草药单独或两两配伍情况下对白色念珠菌的体外抑菌作用。[方法]采用水提醇沉法提取5种单味药及两两配伍药物的提取液,按倍比稀释法将药物提取液进行稀释,体外测定黄连等5种中草药单独及等比例两两配伍情况下对白色念珠菌的最低抑菌浓度(MIC)。[结果]黄连、黄柏和黄芩单药提取液对白色念珠菌有较强的抑菌效果,其MIC分别为6.25 mg/ml、50 mg/ml和100 mg/ml。在配伍药物组中,黄连配伍其它药物的药物组均显示出了一定的抑菌效果。其中以黄连+知母(MIC为6.25 mg/ml)和黄连+黄柏(MIC为12.5 mg/ml)两个药物组抑菌效果最强。[结论]黄连、黄芩和黄柏三种中草药具有直接的抗白色念珠菌作用,其中尤以黄连的抑菌作用最为显著;而知母和甘草对白色念珠菌不具备明显的抑制作用。在两两配伍的中药提取液中以黄连配知母的药效最好。     

蒮香蓟中精油的抗炎、止痛和解热作用

研究藿香蓟(Ageratum conyzoides)精油对大鼠、小鼠的抗炎、止痛和解热作用,经口给予3～4ml/kg藿香蓟精油对棉球肉芽肿具有抑制作用,其抗炎作用与保泰松(100mg/kg)作用相当。在解热试验中,3ml/kg的藿香蓟精油对注射酵母引起的发热有解热作用,其作用与乙酰水杨酸赖氨酸(100mg/kg)相当。在甩尾和扭体镇痛试验中,2、3、4ml/kg的藿香蓟精油有明显的止痛作用。试验还表明连续口服该药物?天,对胃无毒副作用。     

黄芩苷对白色念珠菌酶活性的影响

目的运用分光光度法检测黄芩苷作用白色念珠菌后,其琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素C氧化酶(CCO)、Ca2 -Mg2 -ATPase活性的改变,以探讨黄芩苷抗白色念珠菌作用靶位,为探索中药活性成分抗真菌作用机理提供依据。方法收集经黄芩苷作用了相应时间的白色念珠菌,制备菌悬液,反复冻融研磨,差速离心法提取白色念珠菌线粒体;Lowry法检测线粒体蛋白质含量;分光光度法检测SDH酶、CCO酶、Ca2 -Mg2 -ATPase活力。结果①0.25,0.5,1mg/ml黄芩苷浓度组白色念珠菌SDH活力明显低于0mg/ml黄芩苷浓度组(P<0.05),且出现黄芩苷浓度越高SDH活力越低的趋势。不同作用时间组间白色念珠菌SDH活力差异无统计学意义(P>0.05)。②白色念珠菌经不同浓度黄芩苷作用不同时间后,其CCO酶活力均无明显差异(P>0.05)。③0.25,0.5,1mg/ml黄芩苷浓度组与0mg/ml黄芩苷浓度组比较,Ca2 -Mg2 -ATPase活力差异显著,黄芩苷浓度越高,Ca2 -Mg2 -ATPase活力越低,作用时间对Ca2 -Mg2 -AT-Pase活力没有明显影响(P>0.05)。结论①黄芩苷具有明显的抗白色念珠菌作用;②黄芩苷可降低白色念珠菌SDH酶活力;③黄芩苷对白色念珠菌CCO酶活力未见明显影响;④黄芩苷可降低白色念珠菌Ca2 -Mg2 -ATPase活力。     

叶黄素制品在大鼠体内药代动力学和生物利用度

目的:研究叶黄素微胶囊和叶黄素油悬浮液两种叶黄素制品在大鼠体内的药代动力学和相对生物利用度。方法:建立大鼠血浆中叶黄素的LC-MS/MS测定方法。考察大鼠分别灌胃给予100 mg/kg叶黄素微胶囊或叶黄素油悬浮液后血药浓度变化,应用DAS 2.0软件计算药动学参数,根据叶黄素微胶囊和叶黄素油悬浮液药-时曲线下面积AUC(0-t)计算相对生物利用度。结果:叶黄素浓度5 ng/ml²00 ng/ml的浓度范围内线性关系良好(r=0.997);定量下限为为5 ng/ml;10 ng/ml、50 ng/ml和160 ng/ml三个浓度剂量组的方法回收率分别为69.7%、94.9%和98.1%;提取回收率分别为75.3%、70.9%和73.4%。大鼠单剂量给予叶黄素微胶囊和叶黄素油悬浮液的主要药动学参数Cmax分别为(65.8±38.9)mg/L和(48.3±17.3)mg/L,Tmax分别为(4.7±3.0)h和(3.7±0.8)h,AUC(0-32)分别为(566.6±203.6)mg/L·h和(385.2±107.3)mg/L·h,叶黄素微胶囊的相对生物利用度为147.1%。结论:所建立LC-MS/MS方法简单、快速,可用于大鼠叶黄素血药浓度的测定和药动学研究。以叶黄素油悬浮液为参比制剂,叶黄素微胶囊在大鼠体内的生物利用度明显提高。     

皂荚皂苷的提取及其抑菌作用的研究

目的优选水浸提皂荚皂苷的最佳提取工艺以及皂荚皂苷对5种细菌和4种真菌生长的抑制作用。方法水浸提后异丙醇萃取纯化法提纯皂荚皂苷,利用正交设计法确定料水比、提取时间、提取温度的最佳提取工艺条件;采用双倍营养法研究皂荚皂苷的抑菌作用。结果水浸提皂荚皂苷的最佳工艺条件为:温度80℃,时间2 h,料水比1∶10,浸提次数3次,最大提取率31%;皂荚皂苷水溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、阴沟肠杆菌、沙门肠杆菌及白色念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌均有抑菌作用,对细菌的抑制效果较好。50 mg/ml的皂荚皂苷溶液能完全抑制5种细菌的生长,对4种真菌的抑制率也均在50%以上。结论水提皂苷是一种方便经济的方法;皂荚皂苷可用于抑菌药物的开发。     

桂枝茯苓胶囊及其主要成分组合物抗子宫肌瘤细胞作用及其机制研究

目的:研究桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物(15个成分)对子宫肌瘤细胞抑制作用及其机制。方法:对子宫肌瘤细胞进行原代、传代培养及细胞鉴定。CCK-8法分析桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物对人子宫肌瘤细胞抑制作用;检测细胞凋亡、线粒体膜电位、caspase-3活性,采用Western Blot法检测Bcl-2蛋白表达情况。结果:桂枝茯苓胶囊(212μg/ml)及活性成分组合物(48、24μg/ml)对子宫肌瘤细胞增殖有抑制作用。桂枝茯苓胶囊及组合物可诱导人子宫肌瘤细胞凋亡、引起人子宫肌瘤细胞线粒体膜电位的下降、子宫肌瘤细胞中Caspase-3活性明显升高,诱导人子宫肌瘤细胞中Bcl-2下调、Bax上调,Bcl-2/Bax比例下降。结论:桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物对子宫肌瘤细胞有明显的抑制作用,其作用机制与诱导人子宫肌瘤细胞凋亡有关,该凋亡诱导作用与线粒体信号通路(膜电位下降、Bcl-2/Bax比率降低、Caspase-3活性增强)有关。     

壮药白花九里明提取物中咖啡酸含量测定及对子宫平滑肌作用

目的:测定壮药白花九里明提取物(下称提取物A)咖啡酸的含量,并考察其对小鼠离体子宫平滑肌收缩的影响。方法:采用高效液相色谱法测定提取物A咖啡酸含量;选用健康未孕雌性成年小鼠,随机分15组,每组10只,即生理盐水组、缩宫素组、8种不同浓度九里明提取物A组、0.32 mg/ml提取物A联合用缩宫素、阿托品、心得安、乙酰胆碱组。结果:九里明提取物A中含有咖啡酸,咖啡酸在1.2μg/ml～1.95μg/ml范围内与峰面积呈良好线性关系,回归方程Y=12269X+150.99,R~2=0.9996。加样平均回收率99.75%,RSD为0.4%,提取物A测量得咖啡酸含量平均值为112.3μg/g。与生理盐水组比较,浓度在0.16 mg/ml～0.64 mg/ml九里明提取物A收缩活力、收缩频率和平均张力有明显变化,呈兴奋作用。提取物A随着浓度增大收缩活力明显增强,M受体阻断剂阿托品与0.32 mg/ml提取物A联用收缩活力和频率均明显小于单独0.32 mg/ml提取物A。β1和β2肾上腺素受体阻滞剂心得安与0.32 mg/ml提取物A联用收缩活力和频率均远小于单独0.32 mg/ml提取物A。M、N受体兴奋药乙酰胆碱与0.32 mg/ml提取物A联用收缩活力和频率均远大于单独0.32 mg/ml提取物A。结论:九里明提取物A中含具有止血作用的咖啡酸,含量平均值为112.3μg/g。提取物A能兴奋子宫平滑肌,可能是通过影响M受体或N受体,与非选择性的β受体而实现的。