MODS技术快速检测结核分枝杆菌左氧氟沙星耐药性研究

目的探讨MODS技术快速检测左氧氟沙星耐药性的效果。方法用24孔细胞培养板进行结核分枝杆菌（MTB）液体药敏检测，并对最佳检测条件进行探讨；将建立的MODS技术用于测定60株MTB临床分离株左氧氟沙星耐药性，并与传统罗氏绝对浓度法药敏结果进行比较。结果本法与罗氏绝对浓度法药敏结果相符58株，不符2株；符合率为96．7％；如以罗氏绝对浓度法药敏结果为判断标准，MODS检测左氧氟沙星耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、准确性分别为100％、96．0％、83．3％、100％、96．7％。结论MODS技术检测左氧氟沙星耐药性具有快速、操作简便、价廉等优点，可作为结核分枝杆菌左氧氟沙星耐药性的检测新方法之一。     

显微镜观察药敏法检测结核分枝杆菌耐药性

目的评价显微镜观察药敏法(microscopic observation drug susceptibility,MODS)检测结核分枝杆菌临床分离株异烟肼(INH)和利福平(RFP)耐药性的可行性。方法使用MODS技术对本医院的共201株结核菌临床分离株分别进行INH、RFP的耐药性检测,并与罗氏比例法作比较。结果 MODS法检测平均时间为8d,以罗氏比例法为金标准,INH的灵敏度和特异性分别为98.5%和100.0%,RFP的灵敏度和特异性分别为99.3%和100%。结论 MODS法检测结核分枝杆菌对异烟肼和利福平的耐药性具有成本低、快捷、操作简便、准确等优点,为结核耐药检测提供了一种较好的方法 。     

培养管变色硅胶显色法快速检测结核菌耐药性

目的评价一种快速检测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,简称MTB)耐药性的可视化变色硅胶培养管的性能,并进行方法学建立。方法以BACTEC MGIT960药敏结果作为标准,应用变色硅胶培养管检测50株MTB临床分离株对利福平(Rifampicin,简称RFP)、异烟肼(Isoniazid,简称INH)两种一线抗结核药物的耐药性,并对最佳检测条件进行探索;其次对100份结核病患者涂阳痰标本用变色硅胶培养管进行培养及药敏检测,结果与MGIT960药敏结果作比较,判断灵敏度、特异度、准确度。结果培养管变色硅胶显色法检测50株MTB临床分离株对RFP、INH药敏结果与BACTEC MGIT960符合率均达到100%,最佳检测时间为7-10d;培养管变色硅胶显色法检测100份涂阳痰标本对RFP药敏结果的灵敏度、特异度、准确度分别为87.5%、98.6%、95.8%;对INH药敏结果的灵敏度、特异度、准确度分别为86.6%、96.9%、93.8%,变色硅胶显色法检测2种抗结核药物结果与MGIT960法比较无差异(RFPχ~2=0.50,P0.05;INHχ~2=0.75,P0.05)。最佳检测时间为15-20d。结论培养管变色硅胶显色法检测MTB的耐药性具有成本低、快捷、操作简便、便于观察判断等优点,为检测MTB耐药提供了一种较好的方法,适合推广使用。     

噬菌体生物扩增法检测痰标本结核分枝杆菌及耐药性测定

目前常规结核分枝杆菌（MTB）细菌学检查和药敏检测尚无法充分满足临床需要。以噬菌体为基础的结核分枝杆菌裂解试验,利用噬菌体生长快、特异性高的特性,快速准确地检测MTB,并进行药敏检测,近年来在结核病研究中备受关注^[1-2]。本研究采用噬菌体裂解法快速检测肺结核患者痰标本中的MTB,同时检测对异烟肼（H）、利福平（R）、链霉素（S）、乙胺丁醇（E）的敏感性,并与改良罗氏培养法分离细菌及比例法药敏结果进行比较,现报告如下。     

显微镜观察药物敏感性检测在分枝杆菌分离培养和药物敏感性测定中的应用研究

目的评价显微镜观察药物敏感性检测(MODS,microscopic observation drug suscepti-bility assay)方法用于分枝杆菌分离培养和直接药物敏感性测定的应用前景。方法应用MODS方法对113例涂片镜检阳性患者痰标本进行分离培养,同时进行异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇4个药物的直接药物敏感性测定,以罗氏法分离培养和间接绝对浓度法作为对照,对分离培养和药敏结果进行对比分析,并通过DNA序列分析对不一致药敏结果进一步验证。结果 MODS与罗氏法分离培养的阳性率均为83.2%,污染率分别为0%和2.7%,两方面差异无统计学意义,两者的符合率为93.6%(kappa值:0.75),培养的敏感性、特异性分别为95.7%、81.3%。MODS的分离培养中位数时间为10 d(第95百分位数为21.5 d),罗氏分离培养的中位数时间为25 d(第95百分位数为39.3d)。MODS与间接绝对浓度法的耐药株检出率分别为49.5%、47.8%,符合率为95.5%(kappa值:0.91)差异无统计学意义,MODS检测的敏感性、特异性分别为97.7%、93.3%。MODS对结核分枝杆菌检测的敏感性、特异性、符合率分别为异烟肼(100%、84.5%、89.8%);利福平(100%、100%、100%);链霉素(94.6%、98.0%、96.6%);乙胺丁醇(100%、73.8%、75.0%)。对于利福平、链霉素的药物敏感性检测两种方法有相当高的一致性,而对异烟肼、乙胺丁醇的检测一致性较低。结论 MODS方法是一种操作简单、成本低廉、快速、敏感的诊断和药物敏感性检测方法。适合发展中国家和经济欠发达地区,在我国结核病防控工作中,具有广泛的应用前景。     

利用噬菌体生物扩增法快速检测痰标本中结核分支杆菌

目的探讨噬菌体生物扩增（PhaB）法在快速检测痰标本结核分支杆菌（MTB）中的临床应用价值。方法应用PhaB法检测103例痰标本MTB,并与改良罗氏培养法检测结果进行比较。结果103例痰标本PhaB法与培养法检测MTB均阳性67例,均阴性25例,两法不相符11例。如以培养法结果为判断标准,则PhaB法检测痰标本MTB的敏感性、特异性、阳性预测值（PPV）、阳性预测值（NPV）及准确性分别为94.9%（67/71）、73.5%（25/34）、90.5%（67/74）、86.2%（25/29）、89.3%（92/103）。PhaB法对涂阳标本检出率为88.6/%（62/70）,对涂阳培阳标本检出率为93.9%（62/66）,对涂阴培阳标本检出率为100%（5/5）。33例涂阴痰标本PhaB法检测MTB阳性率（36.4%）高于培养法（15.2%）,差异显著（χ^2=5.14,P〈0.05）。结论PhaB法检测测痰标本MTB具有较高的敏感性和特异性,只需要2天时间,简便快速,不需要特殊仪器设备,费用低廉,可作为MTB检测快速筛选方法。     

显微镜观察药物敏感度检测技术在肺外结核诊断中的应用

目的 探讨显微镜观察药物敏感度检测技术(MODS)对肺外结核的诊断价值.方法 采用24孔细胞培养板液体培养方法建立MODS.收集74份结核性胸膜炎患者的胸腔积液、63份结核性脑膜炎患者的脑脊液和18份非结核病患者胸腔积液和脑脊液标本,分别采用抗酸染色法、改良罗氏培养法和MODS进行结核分枝杆菌检测,对改良罗氏培养法和MODS培养获得的分枝杆菌采用免疫层析法鉴定,数据比较采用x2检验.结果 MODS、改良罗氏培养法和抗酸染色法 检测结核性胸膜炎的阳性率分别为58.1％(43/74)、18.9％(14/74)和6.8％(5/74);检测结核性脑膜炎的阳性率分别为54.0％(34/63)、20.6％(13/63)和4.8％(3/63).MODS检测结核性胸膜炎和结核性脑膜炎的阳性率均高于改良罗氏培养法,差异有统计学意义(x2=24.00,P＜0.01;x2=14.97,P＜0.01).所有改良罗氏培养法和MODS检测获得的分枝杆菌均为结核分枝杆菌.三种方法检测18份非结核病患者胸腔积液和脑脊液结果均为阴性.MODS检测脑脊液和胸腔积液标本的阳性检出中位时间分别为9d和14d,明显短于改良罗氏培养法所需的31d.结论 MODS与传统 病原学检测方法相比,具有敏感性好、检出时间短的优势,适用于肺外结核病的临床快速诊断.     

基因芯片与线性探针技术检测涂阳肺结核患者痰标本MTB耐药性的价值

目的 评价基因芯片技术与线性探针技术(GenoType MTBDRplus)快速检测MTB耐药性的临床应用价值。方法 选取西安市胸科医院2017年4月至2018年8月住院治疗的493例涂阳肺结核患者作为研究对象,收集其痰标本,痰标本量均不少于2ml。每例患者用同一份痰标本分别进行基因芯片检测、线性探针检测和BACTEC MGIT 960液体培养(简称“MGIT 960液体培养”),同时对培养阳性且鉴定为MTB的临床分离株进行MGIT 960液体药物敏感性试验(简称“药敏试验”)。以MGIT 960液体药敏试验结果为参照标准,分析基因芯片技术及线性探针技术检测涂阳肺结核患者痰标本MTB利福平和异烟肼耐药性的效能。结果 454例研究对象同时具有3种药敏试验检测结果。以MGIT 960液体药敏试验结果为参照标准,基因芯片法和线性探针法检测涂阳肺结核患者痰标本MTB利福平耐药性的敏感度、特异度、Kappa值分别为89.0%(65/73)、96.1%(366/381)、0.82和90.4%(66/73)、96.1%(366/381)、0.83;检测涂阳肺结核患者痰标本MTB异烟肼耐药性的敏感度、特异度、Kappa值分别为80.2%(93/116)、96.7%(327/338)、0.80和81.9%(95/116)、97.0%(328/338)、0.82。454例涂阳肺结核患者痰标本中,453例应用2种分子生物学检测方法检测MTB利福平耐药性结果相同,符合率为99.8%;445例应用2种分子生物学方法检测MTB异烟肼耐药性结果相同,符合率为98.0%。结论 基因芯片技术和线性探针技术(GenoType MTBDRplus)检测涂阳肺结核患者痰标本MTB利福平和异烟肼耐药性与MGIT 960液体药敏试验具有较高的一致性,二者均可为临床提供快速、特异的耐药检测结果。     

基因芯片技术快速检测结核分枝杆菌异烟肼、利福平耐药性

目的研究基因芯片法快速检测结核分枝杆菌（MTB）异烟肼（INH）、利福平（RFP）耐药性的可能性及其临床应用价值。方法应用基因芯片技术同时检测62株MTB临床分离株对INH、RFP的耐药性，并与比例法结果进行比较。结果以比例法药敏结果为判断标准，基因芯片法测定INH耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）及准确性分别为75％（12／16）、78．3％（36／46）、54．5％（12／22）、90％（36／40）、77．4％（48／62）；测定RFP耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）及准确性分别：83．3％（15／18）、86．4％（38／44）、71．4％（15／21）、92．7％（38／41）、85．5％（53／62）。结论基因芯片法测定MTB对INH、RFP耐药性和比例法结果有较高的相符率，可作为MTB耐药性的快速筛选方法，是传统药敏方法的补充。     

荧光PCR探针熔解曲线技术检测痰标本结核分枝杆菌利福平耐药性的研究

目的:评价荧光PCR探针熔解曲线(fluorescent polymerase chain reaction probe melting curve, MeltPro)技术检测肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌耐药性的临床应用价值。方法:收集2021年5月至2022年5月北京市疾病预防控制中心结核病门诊收治的GeneXpert MTB/RIF检测阳性的初治肺结核患者的痰标本,对每份标本同时进行涂片镜检、分枝杆菌分离培养、MeltPro技术利福平耐药性检测。分析痰标本荷菌量对MeltPro技术耐药性检测结果的影响;培养阳性菌株行利福平比例法药物敏感性试验(简称“药敏试验”),比较比例法药敏试验、GeneXpert MTB/RIF和MeltPro技术检测利福平耐药率的差异;并以培养阳性菌株利福平比例法药敏试验结果为参考标准,评价MeltPro技术耐药性检测的效能。结果:研究共收集结核分枝杆菌阳性合格痰标本158份(例),经分枝杆菌分离培养获得阳性菌株130株。MeltPro技术检测痰标本结核分枝杆菌利福平耐药的成功率为79.1%(125/158),且随着痰涂片结果等级的升高,检测成功率由“阴性...     

应用免疫磁珠分离-改良罗氏培养技术检测痰结核分枝杆菌的研究

目的通过免疫磁珠分离技术(immunomagnetic beads separation techniques,IMBS)富集痰液中的结核分枝杆菌,提高痰液培养的阳性率,以期用于结核病的快速诊断。方法制备兔抗结核杆菌IgG抗体,并将其结合于免疫磁珠表面。采集71例确诊结核病患者的痰液标本,通过免疫磁珠分离技术捕获、富集吸附结核分枝杆菌后用改良罗氏培养基培养,并与传统改良罗氏(L-J)培养法和痰涂片抗酸染色法作比较。结果 71例结核病患者痰涂片抗酸染色检查阳性26例,阳性率36.6%;传统改良L-J培养阳性34例,阳性率47.9%;免疫磁珠分离技术捕获、富集结核分枝杆菌后进行改良L-J培养阳性48例,阳性率67.6%。三者阳性率差异有统计学意义(P<0.05),改良L-J培养和痰涂片检查阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用免疫磁珠分离技术捕获、富集痰液中的结核分枝杆菌后进行培养,可显著提高痰培养的阳性率,该方法可用于结核病的快速诊断。     

基因芯片法对苏州市结核临床分离株RFP耐药性快速检测价值的研究

目的 通过基因芯片法检测结核分离株RFP的耐药性,为在临床诊断中利用该法快速鉴别苏州市结核RFP耐药菌株的可靠性奠定基础.方法 收集痰液标本45例,利用罗氏固体培养法（金标准）对结核分枝杆菌进行传统药敏试验;利用晶芯结核分枝杆菌耐药检测试剂盒及相关仪器通过核酸提取、PCR扩增、芯片杂交和芯片扫描,对结核分枝杆菌RFP耐药相关基因rpoB的rpoB-RRDR 511,513,516,526,531和533位点进行检测,将基因芯片检测获得的RFP药敏判读结果与金标准法获得的结果进行比较分析;将17例经基因芯片检测过的菌株用PCR法扩增包含rpoB-RRDR的基因片段,经纯化后进行DNA直接测序,将基因芯片对rpoB-RRDR 526,531位点的检测结果与DNA测序获得的结果进行比较分析.结果 与金标准法相比,基因芯片法对菌株RFP药敏检测的准确率为93.3%（42/45）;与DNA测序法相比,基因芯片法对rpoB-RRDR 526,531位点突变型检测的准确率为82.4%（14/17）.结论 rpoB-RRDR 526,531位点突变是导致苏州市结核病RFP耐药的主要因素,通过基因芯片法对rpoB基因相关位点的检测可为临床对RFP耐药结核鉴定提供一种快速、准确和批量性的检测手段,具有极大的应用价值.     

上海市某结核病定点医院结核病房空气样本中分枝杆菌的检测

目的 了解上海市某结核病定点医院结核病房空气中的分枝杆菌污染情况及潜在传染性。 方法 采用液体撞击式微生物气溶胶采样器（FA-1型撞击式空气微生物采样器）采集该医院22间结核病房中空气样本134份,均在痰涂片抗酸杆菌阳性（＋~＋＋＋＋）患者床边采集。每间病房均有4张床位,每间病房的空间布局相同,但患者组成情况不完全相同。经氢氧化钠-N-乙酰-L-半胱氨酸(NALC-NaOH)前处理,分别采用罗氏培养、BacT/ALERT 3D全自动快速培养进行分枝杆菌分离培养,并对培养阳性样本采用DNA序列分析的方法进行菌型鉴定。两种分离培养方法对医院空气样本中分枝杆菌分离率的比较采用配对卡方检验,以P<0.05为差异有统计学意义。 结果 134份结核病房涂阳患者床边采集到的空气样本中有3份分枝杆菌分离培养阳性,经DNA序列分析证实分别为结核分枝杆菌、胞内分枝杆菌和戈登分枝杆菌。BacT/ALERT 3D培养阳性3份,经DNA序列分析证实分别为结核分枝杆菌、胞内分枝杆菌和戈登分枝杆菌,污染2份,阳性检出率为2.3%（3/132）。罗氏培养阳性2份,经DNA序列分析证实分别为胞内分枝杆菌和戈登分枝杆菌,污染1份,阳性检出率为1.5%(2/133)。经配对卡方检验,两种分离培养方法对医院空气样本中分枝杆菌分离率差异无统计学意义（χ²=0.00,P>0.05）。 结论 该医院结核病房痰涂片抗酸杆菌阳性患者床边所采集的空气样本中可分离到分枝杆菌,虽然目前尚无法判断这些菌株是否由于就诊患者传播所致,但是定期监测医院内空气质量是预防与控制医院内感染的一项重要措施。     

发光二极管荧光显微镜检测结核分枝杆菌在基层实验室的应用评价

目的 评价发光二极管（light-emitting diodes,LED）荧光显微镜在基层实验室痰涂片中检测结核分枝杆菌的应用效果。 方法 收集2011年7月至2011年9月在青海省西宁市7个县（区）级结核病防治机构（简称“结防机构”）就诊的所有肺结核可疑症状者592例（1738份痰标本）。对每份痰标本涂片2张,分别进行萋-尼（Ziehl-Neelsen, Z-N）抗酸染色和金胺O（auramine O）荧光染色,然后以盲法用传统光学显微镜和LED荧光显微镜进行检测,以简单法固体罗氏培养（L-J）结果为金标准,比较两种显微镜阳性检出率的差异、诊断的准确性及检出时间的差异。 结果 LED荧光显微镜痰涂片阳性检出率为14.90%（259/1738）,比传统光学显微镜13.75%（239/1738）提高1.15%,差异有统计学意义（Z=5.88,P〈0.05）。以简单法固体罗氏培养结果为金标准,传统光学显微镜的敏感度为79.60%（199/250;95%CI=74.60％～84.60%）,特异度为97.31%（1446/1486;95%CI=96.49％～98.13%）;ROC曲线下面积为0.8878（95%CI=0.8623～0.9133）。LED荧光显微镜的敏感度为84.80%（212/250;95%CI=80.30%～89.25%）,特异度为96.84%（1439/1486;95%CI=95.95%～97.73%）,ROC曲线下面积为0.9118（95%CI=0.8890～0.9347）。传统光学显微镜的平均读片时间为（185.600±79.271）s,LED荧光显微镜的平均读片时间为（144.19±62.173）s,时间差异有统计学意义（t=15.32, P〈0.01）。 结论 应用LED荧光显微镜可明显提高痰涂片中结核分枝杆菌的阳性检出率,较传统光学显微镜有更高的敏感度,但特异度相当,诊断肺结核患者的价值更高,且能明显缩短读片时间。     

实时荧光核酸恒温扩增检测技术在结核病诊断中的临床应用

目的 评估实时荧光核酸恒温扩增检测技术（simultaneous amplification and testing,SAT）在结核病患者的痰液、体液及病灶组织等标本中检测结核分枝杆菌的价值.方法 收集在广州市胸科医院就诊的疑似结核病患者的痰液734份、体液标本94份（包括68份胸腔积液、21份脑脊液、5份关节积液,以下统称“体液”）及病灶组织标本76份,共计904份标本.同时采用SAT法、改良罗氏培养法进行检测,培养阳性者进行基因芯片菌种鉴定.SAT法与改良罗氏培养法结果不相符的标本,用结核分枝杆菌聚合酶链（polymerase chain reaction technology for Mycobacterium tuberculosis,PCR-TB）荧光诊断试剂盒进行检测.采用x2检验比较SAT法与改良罗氏培养法对结核病患者的阳性检出率.结果 以改良罗氏培养结果为金标准,则SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的敏感度、特异度、符合率分别为90.20％（230/255）、92.48％（443/479）、91.69％（673/734）;94.74％（18/19）、81.33％（61/75）、84.04％（79/94）;100.00％（14/14）、77.42％（48/62）、81.58％（62/76）.以扩大金标准（培养＋PCR法）比对,则SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的敏感度、特异度、符合率分别为96.30％（260/270）、99.35％（461/464）、98.23％（721/734）;96.97％（32/33）、100.00％（61/61）、98.94％（93/94）;100.00％（27/27）、97.96％（48/49）、98.68％（75/76）.改良罗氏培养法和SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的阳性检出率分别为34.74％（255/734）和36.24％（266/734）、20.21％（19/94）和34.04％（32/94）、18.42％（14/76）和36.84％（28/76）;痰标本两者的阳性率比较,差异没有统计学意义（x2=0.36,P＞0.05）.体液与病灶组织标本中,SAT法较改良罗氏培养法的阳性率高出13.83％和18.42％,差异有统计学意义（x2值分别为4.55、6.44,P值均＜0.05）.结论 SAT法检测痰液、体液及病灶组织标本中的结核分枝杆菌,具有快速、敏感度和特异度较高的优点,可提高结核分枝杆菌的检出率.     

Microscopic-observation drug susceptibility assay provides rapid and reliable identification of MDR-TB.

BACKGROUND: Liquid culture systems are more rapid and sensitive for both the detection and drug susceptibility testing (DST) of Mycobacterium tuberculosis. SETTING: St Peter's TB Specialised Hospital and public health laboratory, Addis Ababa. OBJECTIVE: To compare the microscopic-observation drug susceptibility (MODS) assay with the BACTEC-MGIT 960 system for isoniazid and rifampicin DST (i.e., multidrug-resistant tuberculosis [MDR-TB] identification) of M. tuberculosis. DESIGN: The evaluation was based on 58 smear- and culture-positive sputum samples from patients diagnosed in Addis Ababa, Ethiopia. BACTEC-MGIT was used as the reference standard. RESULTS: For the detection of MDR-TB, MODS has a sensitivity, specificity and accuracy rate of respectively 95%, 100% and 98.3% (kappa 0.981, concordance 98.3%). Concurrent culture detection and DST results are obtained in a median of 9 days with MODS, while indirect DST results with BACTEC-MGIT are obtained in a median of 8 days (this does not include time to primary isolate). CONCLUSION: MODS is an accurate, rapid and relatively inexpensive method for the identification of MDR-TB.     

巢式实时荧光定量聚合酶链反应检测结核分枝杆菌DNA的临床应用

目的探讨巢式实时荧光定量PCR（QNRT-PCR）检测结核分枝杆菌（MTB）DNA的临床价值。方法应用SYBR Green I建立检测结核分枝杆菌MTP64基因的QNRT—PCR方法,分别检测24份肺结核患者痰液,27份结核性胸膜炎患者胸水,以及对照组75份痰液和胸水的MTBDNA含量。结果以培养为金标准,QNRT—PCR敏感性、特异性、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）分别为95．83％、61．54％、69．70％和94．12％,结核性胸膜炎的阳性率为70．37％。三种PCR方法阳性率比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）,QNRT—PCR与实时荧光定量PCR拷贝数配对检验差异没有统计学意义（P〉0．05）,QNRT—PCR与实时荧光定量PCR的Cr值配对检验差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论QNRT—PCR方法可检测痰液和胸水MTB DNA,对含微量MTB DNA样本的高敏感性在结核病的早期诊断中有重要参考价值。     

利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术的诊断效果对比研究

目的 评价利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术（GeneXpert Mtb/RIF）检测临床标本诊断结核病和耐利福平结核病的效能.方法 2011年1-5月从解放军第三○九医院、广州市胸科医院和河南省疾病预防控制中心3家单位,连续收集门诊就诊的1971例疑似结核病患者的痰标本,进行涂片、金标准培养和金标准比例法传统药敏试验和GeneXpert Mtb/RIF检测.应用SPSS 11.5统计软件对GeneXpert Mtb/RIF与不同检测方法进行敏感度和特异度分析,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 与涂片及培养比较,GeneXpert Mtb/RIF检测1968例（1971例中有3例污染排除）痰标本诊断结核病的敏感度和特异度分别为93.27％（748/802）、91.93％（797/867）和91.60％（1068/1166）、95.55％（1052/1101）;与临床诊断比较,GeneXpert Mtb/RIF检测1945例（1971例中有26例无法定诊）痰标本诊断结核病的敏感度和特异度分别为78.66％（822/1045）、98.67％（888/900）;与金标准传统药敏试验比较,GeneXpert Mtb/RIF检测797例标本诊断耐利福平结核病的敏感度和特异度分别为97.92％（188/192）、100.00％（595/595）.结论 GeneXpert Mtb/RIF是一种检测痰标本诊断结核病及耐利福平结核病的快速简便、自动化、敏感度和特异度较高的分子生物学方法,适用于结核病和耐利福平结核病的临床诊断.     

结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术诊断艾滋病患者肺结核的临床应用评价

目的:探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测(Xpert MTB/RIF)技术诊断艾滋病患者肺结核的应用价值。方法:回顾性分析2017年7月至2019年11月上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心收治的226例疑似肺结核的艾滋病患者的临床资料。分别进行痰涂片荧光染色显微镜下检查、BACTEC MGIT 960液体培养(或罗氏固体培养)和Xpert MTB/RIF检测,并分析在艾滋病患者中Xpert MTB/RIF技术诊断MTB感染和利福平耐药的灵敏度和特异度。结果:226例疑似肺结核患者中,痰培养阳性94例(41.6%),其中MTB阳性51例(54.3%),非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacteria,NTM)阳性43例(45.7%)。以痰分枝杆菌培养阳性且结核分枝杆菌分泌蛋白64抗原阳性为金标准,Xpert MTB/RIF技术诊断MTB的灵敏度为72.6%[95%可信区间(confidence interval,CI)66.7%~78.4%],特异度为97.1%(95%CI 95.0%~99.3%)。Xpert MTB/RIF技术诊断痰涂片阳性患者MTB的灵敏度为76.7%(95%CI 67.7%~85.8%),特异度为90.0%(95%CI 83.6%~96.5%)。Xpert MTB/RIF技术诊断痰涂片阴性患者MTB的灵敏度为50.0%(95%CI 41.8%~58.2%),特异度为99.3%(95%CI 97.9%~100.0%)。18例患者同时检测利福平表型和基因型耐药,以表型耐药为金标准,Xpert MTB/RIF技术检测利福平基因型耐药的灵敏度为75.0%,特异度为100.0%。结论:艾滋病患者中Xpert MTB/RIF技术诊断肺结核的灵敏度和特异度均较高,且能快速区分MTB和NTM,具有较好的应用价值。