慢性心力衰竭患者的血清可溶性Fas配体和可溶性Fas受体

目的 分析血清可溶性Fas配体(sFasL)和可溶性Fas受体(sEas)与慢性心力衰竭(CHF)的相关性。方法采用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测33例CHF患者(CHF组,心功能Ⅱ-Ⅳ级,NYHA)血清sFasL和sFas浓度,并与18例心功能Ⅰ级(NYHA)组比较。结果 CHF与心功能Ⅰ级间sFasL浓度无显著统计学差异[231.50±84.50(心功能Ⅱ级216.50±96.00,Ⅲ级226.80±85.70,Ⅳ级244.00±73.00)vs217.50±89.00pg/mL,P>0.05]。而CHF组血清sFas浓度显著高于心功能Ⅰ级组[1353.30±507.71(心功能Ⅱ级1154.85±371.20,Ⅲ级1412.88±493.62,Ⅳ级1875.67±806.10)vs983.11±461.26pg/mL,P<0.05]。结论 血清sFasL与CHF无相关性。而血清sFas与CHF存在显著相关性。且sFas浓度增高的程度与CHF的严重程度相平行,sFas浓度增高可能在CHF发病机制中起重要作用。     

可溶性Fas,可溶性Fas配体与细胞因子在1型糖尿病发病中的意义

目的　研究可溶性Fas(sFas)和可溶性Fas配体(sFasL)与细胞因子在1型糖尿病发病中的作用。方法　32名1型糖尿病患者和20名正常人的血清,采用夹心BAS-ELISA法分别检测sFas,sFasL,γ干扰素(IFN-γ)及白细胞介素-1(IL-1)含量。结果　1型糖尿病血清中sFas,IFN-γ及IL-1含量分别为(1　　546±685,1　　074±451与1　　406±721)ng/L,显著高于正常组;sFasL为(211±73)mg/L,低于正常组但差异无显著性。在1型糖尿病患者中高浓度sFas伴高IFN-γ者共12例,低浓度sFas伴低IFN-γ者共9例。结论　1型糖尿病患者血清中的sFas,IFN-γ及IL-1高于正常人,sFas与IFN-γ浓度呈正相关(r=0.79,P＜0.05)。对1型糖尿病患者血清进行sFas,IFN-γ及IL-1等检测可作为反映胰岛细胞病变的辅助指标,有助于对疾病的诊断与治疗。     

血清sFas、sFasL水平与特发性血小板减少性紫癜的关系

采用酶联免疫夹心法(ELISA)检测了25例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血清中sFas、sFasL的水平.结果显示ITP患者血清sFas含量为16.51±6.86μg/L,sFasL含量为0.48±0.33μg/L,均显著高于正常对照(分别为P<0.001和P<0.01);18例ITP患者血清sFas水平升高,其中有9例同时有sFasL水平升高,但是血清sFas水平升高组的血小板计数与sFas正常组无显著差异.提示sFas和sFasL的异常参与了ITP的免疫病理过程.     

狼疮肾炎患者血清sFas和sFasL的变化

目的　研究狼疮肾炎患者血清sFas和sFasL的变化及意义。方法　采用双抗体夹心酶联免疫吸附法 (ELISA)检测正常对照 18例和狼疮肾炎患者 45例血清sFas和sFasL水平。结果　狼疮肾炎患者sFas和sFasL水平分别为 (14± 7) μg/L和 (0 0 7± 0 0 4) μg/L ,与正常对照组 (2 9±1 2 ) μg/L和 (0 0 5± 0 0 1) μg/L相比 ,差异有高度显著性意义 (P <0 0 1)。活动期sFas水平较缓解期明显增高 ,分别是 (17± 7) μg/L和 (9± 4) μg/L ,P <0 0 1;但sFasL活动期与缓解期差异无显著意义。狼疮肾炎血清sFas水平在白细胞减少、贫血、大量蛋白尿、肾功能减退、补体降低、ANA和抗RNP Ab阳性时升高 ;而sFasL仅在肾功能异常时减低 ,与其他指标没有明显相关性。结论　sFas及sFasL参与了狼疮肾炎的发生 ,sFas可作为狼疮肾炎的活动性实验室指标。     

心力衰竭患者血浆凋亡相关因子水平的变化及其临床意义

目的 :探讨作为凋亡抑制因子Fas (sFas)和凋亡诱导因子Fas配体 (sFasL)在心力衰竭患者血浆中的水平及其临床意义。方法 :采用酶联免疫吸附法测定 6 7例心力衰竭患者 (心力衰竭组 )和 2 0例健康人 (正常对照组 )血浆中的sFas、sFasL、肿瘤坏死因子α、白细胞介素 6水平。结果 :心力衰竭不同心功能状态患者血浆sFas、肿瘤坏死因子α水平均高于正常对照组 ,心功能Ⅲ级、Ⅳ级患者中sFas水平 ,心功能Ⅲ级患者白细胞介素 6水平亦高于正常对照组 (P <0 0 5～ 0 0 1) ,并随心功能下降而上升 ,与心功能状态呈负相关 ,其水平与原发病无关。sFas和肿瘤坏死因子α水平在心功能Ⅱ级和Ⅳ级患者间比较有显著差异 (P <0 0 5 )。结论 :心力衰竭患者血浆中的sFas和sFasL的水平显著升高 ,提示sFas和sFasL水平升高乃至整个Fas/FasL系统可能在心力衰竭的发病中起着重要作用     

尿毒症病人循环单核细胞Fas的表达及血浆FasL水平

目的：慢性肾功能衰竭（肾衰）病人单核细胞功能低下与其凋亡加速有关,兹拟进一步探讨尿毒症病人单核细胞凋亡加速的机制。方法：对7例尿毒症未透析病人和18例液透析（血透）病人进行观察,以15例正常人为对照。采用流式细胞仪检测单核细胞Fas和Fas配基（Fas ligand,FasL）的表达;以ELISA法测定血浆中可溶性FasL（sFasL)的水平。在体外将单核细胞与重组人FasL共同孵育,抽提DNA后用碘化丙啶染色、流式细胞仪检测单核细胞凋亡率,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察单核细胞存活率。结果：尿毒症未透析病人和血透病人单核细胞Fas的表达较正常人明显上调（P＜0.05）;血透病人的Fas表达水平高于非透析病人（P＜0.05）。正常人和尿毒症病人的单核细胞表面均未检测出FasL表达。正常人血浆中未能检测出sFasL,但尿毒症病人血浆中存在有sFasL;sFasL的水平在尿毒症未透析病人和血透病人之间、血透病人透前与透后之间、以及采用聚砜膜和纤维素膜透析器进行透析的两者之间差异均无显著性（P＞0.05）。单核细胞与重组人FasL在体外共同培养2h后,血透病人单核细胞的凋亡率较正常人明显增高,而其存活率则较正常人明显低下。结论：尿毒症病人单核细胞表面功能Fas表达上调,血浆中存在sFasL,这可能是慢性肾衰病人单核细胞凋亡的原因之一。     

慢性乙型肝炎患者肝组织Fas表达与血清可溶性Fas水平的关系

目的探讨患者肝组织中Fas的表达与血清可溶性Fas水平的关系。方法用免疫组化方法检测60例慢性乙型肝炎患者肝组织Fas的表达,同时用酶联免疫吸附试验检测血清可溶性Fas。结果重度慢性乙型肝炎患者血清中sFas水平>中度>轻度,各组间差异有显著意义(P<0.01);慢性乙型肝炎患者肝组织Fas表达的程度和血清sFas水平与肝组织病变的活动性一致。结论 1.肝组织炎症程度与肝组织Fas抗原的表达有关;2.Fas介导的肝细胞凋亡在慢性乙型肝炎的发病机制中起重要作用,抑制肝细胞Fas表达有助于减轻肝细胞损伤程度。     

老年肺癌患者血清可溶性Fas水平表达及其意义

目的探讨可溶性Fas(sFas)在老年肺癌及良性病变患者中的表达及其临床意义.方法用双抗体夹心ELISA法检测51例老年肺癌,15例结核和10例炎性假瘤患者血清中的sFas表达水平,并比较20例肺癌患者术前,术后;15例化疗前,化疗后sFas的变化.结果老年肺癌患者血清sFas水平(17.32±3.46)ng*ml-1明显高于良性病变及正常人(P＜0.01),随着临床分级的上升,sFas水平升高明显;sFas与年龄,性别,肿瘤大小及组织学分型无明显相关(P＞0.05).肺癌患者术后血清sFas水平较术前明显下降(P＜0.05);化疗后sFas水平较化疗前明显下降(P＜0.05)结论sFas可作为一种新的肿瘤检测指标,与肺癌的发生、发展及其预后密切相关.     

Fas/Fas配体系统及其下游信号转导通路的激活促进酒精性肝炎及酒精性肝纤维化的进展

目的 探明Fas/Fas配体(FasL)系统及其主导信号转导通路在酒精性肝炎和肝纤维化发生、发展中的作用及其机制. 方法 C57BL/6J小鼠以含4％(V/V)乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料喂养4周,自第5周起联合微量CCl4腹腔注射至第8周,分别建立酒精性肝炎和肝纤维化模型.脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测肝细胞凋亡.分别采用逆转录-聚合酶链反应、westem blot及免疫组织化学染色检测肝组织Fas、FasL、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase3)及细胞色素P450 2E1(CYP 2E1)的mRNA及蛋白质表达.多组样本均数间差异比较用单因素方差分析或Kruskal-Wallis H检验,组间比较用LSD-t检验或Mann-Whitney U检验. 结果 应用含4％(V/V)乙醇的Lieber-DeCarli液体饲料联合微量CCl4腹腔注射可快速建立小鼠酒精性肝炎和肝纤维化模型.肝细胞凋亡数随肝脏炎症及纤维化的加重而增高,并伴有凋亡相关基因表达增强.对照组、酒精性肝炎组、酒精性肝纤维化组小鼠细胞凋亡相关基因表达水平依次升高:Fas mRNA的相对表达量分别为0.50±0.05、0.61±0.10、0.76±0.03(H=12.137 P＜0.05),Fas蛋白的相对表达量分别为0.52±0.14、0.86±0.10、0.99±0.09(F=12.758P＜0.01);FasL mRNA相对表达量分别为0.31±0.03、0.53±0.02、1.02±0.04(F=153.260 P＜0.01);caspase3mRNA对表达量分别为0.86±0.11、0.85±0.05、1.33±0.16(F=8.740,P＜0.01),caspase 3蛋白相对表达量分别为0.40±0.03、0.69±0.06、1.02±0.10(F=90.785,P＜0.01);CYP 2E1 mRNA相对表达量分别为0.72±0.14、1.00±0.15、1.30±0.20(H=4.713,P＜ 0.01);各组间比较,P值均＜0.05.免疫组织化学染色结果显示,FasL及CYP 2E1的蛋白与mRNA的表达趋势一致. 结论 Fas/FasL系统及其下游信号转导通路的激活可能是酒精性肝病中诱导肝细胞凋亡的主导因素,可进一步促进酒精性肝炎和肝纤维化的发生与进展.     

38例急性乙型病毒性肝炎肝组织中Fas抗原和Fas配体的表达研究

目的:探讨Fas-FasL系统在急性病毒性肝炎发病中的作用.方法:采用免疫组织化学技术.结果:38例急性乙型肝炎肝组织中的Fas和FasL表达的检出率分别为55.3%和66.5%;Fas和FasL的表达强度与患者的年龄、性别和血清A、A/G和PTA无关,而与血清ALT和TBIL水平有关.较重型(伴桥样坏死)的急性乙型肝炎其Fas和FasL表达比轻型急性乙型肝炎要强.结论:由CTL-Fas-FasL系统介导的肝细胞凋亡在急性乙型肝炎的发病中起了较重要的作用.     

胃癌患者血清可溶性FasL的变化及意义

应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测45例胃癌患者血清中可溶性FasL(sFasL)水平,并取30例健康献血员为对照。结果显示,胃癌患者术前血清sFasL为(15.24±1.25)μg/L,30例健康献血员sFasL病理为(4.21±1.13)μg/L。两组比较P<0.01。胃癌患者术前血清sFasL含量[(15.24±1.25)μg/L]显著高于术后(5.36±1.19)μg/L],P <0.01,且分期越高、分化程度越低、有淋巴结转移、肿瘤直径>3cm者,术前血清sFasL越高。提示胃癌患者血清中含有sFasL,且sFasL在胃癌免疫逃逸、反击机制中起重要作用;术前胃癌血清中sFasL水平可作为术后随访和判断预后的一个重要指标。     

可溶性ST2对慢性心力衰竭患者的诊断价值探讨

目的 观察心力衰竭患者血清可溶性ST2（sST2）水平变化,分析其与射血分数、N末端脑钠肽前体（NT-proBNP）等的相关性,探讨sST2在心力衰竭诊断及危险分层中的应用价值.方法 入选2009年11月至2010年3月心力衰竭住院患者129例,按纽约心功能分级标准分为心功能Ⅱ级组66例、心功能Ⅲ级组32例、心功能Ⅳ级组31例,并收集患心脏神经症或阵发性室上性心动过速而胸部X线片、心脏彩超和心功能正常的35例作为对照组.采集入选者的临床资料,入院后行心脏彩色超声检查,测定血浆NT-proBNP水平,采用酶联免疫法测定血清sST2浓度.结果 血清sST2水平在心功能Ⅲ～Ⅳ组[1.84（0.93 ～3.19） ng/ml]显著高于心功能Ⅱ级组[0.94 （0.83 ～ 1.30） ng/ml,P＜0.001]及对照组[0.77（0.69～1.92） ng/ml,P＜0.001].sST2浓度与NT-proBNP（r=0.352）、心功能分级（r =0.456）、左心室舒张末容积（r=0.287）呈正相关（均为P＜0.001）,与左心室射血分数呈负相关（r=-0.288,P=0.016）.血清sST2诊断心力衰竭的ROC曲线下面积为0.775,NT-proBNP的ROC曲线下面积为0.889,两者联合诊断的ROC曲线下面积为0.926.结论 心力衰竭患者血清sST2水平明显升高,升高水平与心力衰竭程度显著相关.sST2有可能作为判断心力衰竭的新生化指标,联合NT-proBNP可能会提高对心力衰竭的诊断价值.sST2或可作为NT-proBNP和超声心动图外的补充手段,对心力衰竭的诊断与鉴别有一定意义.     

狼疮肾炎患者循环单核细胞表达Fas和血浆可溶性Fas Ligand水平的研究

目的 探讨狼疮肾炎（LN）病人单核细胞凋亡加速的机制。方法 对17例LN病人进行观察,以15名正常人为对照。采用流式细胞仪检测单核细胞Fas和FasLigand(FasL)的表达;酶联免疫吸附法（ELISA）测定血浆中可溶性FasLigand(sFasL）的水平;单核细胞与重组人FasL共孵育,磺化丙啶染色、流式细胞仪检测单核细胞凋亡,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察单核细胞体外存活率。结果 LN病人单核细胞Fas的表达较正常人明显上调（P＜0．05）;处于狼疮活动期的LN病人与狼疮静止期的LN病人之间单核细胞Fas的表达差异无显著性（P＞0．05）;处于狼疮活动期的LN病人与狼疮静止期的LN病人之间单核细胞Fas的表达差异无显著性（P＞0．05）。正常人和LN病人的单核细胞表面均未检测出FasL的表达。正常人血浆中未能检测出sFasL,但LN病人血浆存在有sFasL;sFasL的水平在狼疮活动期和静止期的LN病人之间差异无显著性（P＞0．05）;单核细胞与重组人FasL在体外共同培养2h后,LN病人单核细胞的凋亡较正常人明显增高（P＜0．05）,单核细胞与重组人FasL在体外共同培养6h后,LN病人单核细胞的存活率较正常人明显低下（P＜0．05）。结论 LN病人单核细胞表面功能在Fas表达上调,血浆中存在sFasL,这可能是LN病人单核细胞凋亡加速的原因之一。     

心力衰竭的基因治疗

心力衰竭的治疗面临新方法的严峻挑战。当前随着载体技术、心脏基因转运技术的发展、完善 ,更为重要的是随着心力衰竭发病分子机制认识的日趋深入 ,使得基因介入治疗心力衰竭成为可能。本文综述了动物模型中有关心脏基因转运技术的最新研究进展 ,并分析了基因介入治疗心力衰竭的作用靶点 ,如 Ca2 +调控 ,β肾上腺素能信号和凋亡等 ,其中 Ca2 +调控增加肌浆网的 Ca2 +转运在动物心力衰竭模型和活体病理心肌细胞中的研究展示了良好的应用前景。然而 ,在以上基础研究和临床实际应用之间架起桥梁还是一项十分艰巨的任务。随着心力衰竭发病机制的进一步阐明 ,人们对心力衰竭基因治疗的前景仍需持谨慎乐观态度。     

肝细胞生长因子治疗心肌梗死后心力衰竭的实验研究

目的研究经冠状动脉转染携带人肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)的腺病毒(adenovirus,Ad5)对猪心肌梗死后心力衰竭的改善作用。方法12只苏中幼猪,随机分成转染Ad5-HGF组(治疗组)和转染未携带肝细胞生长因子的腺病毒载体(null-Ad5)组(对照组),每组6只。结扎前降支制成心肌梗死模型,手术后第4周及第7周时行冠状动脉造影和门控心肌灌注显像,评价侧支循环形成程度(Rentorp法)、心肌灌注及心功能的变化;用ELISA法检测肝细胞生长因子蛋白表达;以免疫组织化学法检测基因导入后平滑肌肌动蛋白抗体阳性(SMA )有灌注功能血管生成情况。结果经冠状动脉转染Ad5-HGF后心肌高度表达人HGF蛋白;治疗组心肌血流灌注及左心室射血分数(LVEF)较对照组明显改善;治疗组侧支循环形成明显增多,每平方毫米功能血管的数量明显高于对照组。结论经冠状动脉转染Ad5-HGF能使心肌高度表达HGF蛋白。HGF对梗死心肌的侧支循环形成、心肌灌注及心功能均有改善作用,能促进功能血管数增多。     

Effects of darbepoetin-alpha on plasma pro-inflammatory cytokines, anti-inflammatory cytokine interleukin-10 and soluble Fas/Fas ligand system in anemic patients with chronic heart failure

Pro-inflammatory cytokine over-expression may be implicated to the pathogenesis of anemia in chronic heart failure (CHF) through the suppression of bone marrow erythropoiesis. Erythropoietin administration has anti-inflammatory and anti-apoptotic properties in experimental CHF models and improves exercise capacity in anemic CHF patients. The present study investigates the effects of recombinant human erythropoietin analogue darbepoetin-α on circulating pro-inflammatory cytokines and soluble Fas/soluble Fas ligand system in patients with CHF and anemia. Forty-one CHF patients (NYHA class: II–III; left ventricular (LV) ejection fraction (EF) <40%; hemoglobin <12.5 g/dl; serum creatinine <2.5 mg/dl) were randomized to receive either 3-month darbepoietin-α at 1.5 μg/kg every 20 days plus iron orally (n = 21) or placebo plus iron orally (n = 20). LV systolic function, plasma B-type natriuretic peptide (BNP), inflammatory markers (TNF-α, IL-6, CRP), anti-inflammatory cytokine IL-10, endothelial adhesion molecules (soluble ICAM-1 and VCAM-1) and soluble apoptosis mediators (soluble Fas, soluble Fas ligand), and 6-min walking distance were assessed at baseline and 3 months post-treatment. In darbepoetin-α treated patients, plasma BNP (451 (62-2770) from 802 (476-4440) pg/ml, p = 0.002), IL-6 (6.5 ± 4.7 from 10.5 ± 7.8 pg/ml, p = 0.013) and soluble Fas ligand (53.2 ± 16.6 from 59.2 ± 17.9 pg/ml, p = 0.023) decreased significantly, while LVEF (32 ± 6 from 26 ± 6%, p < 0.001), hemoglobin (12.8 ± 1.4 from 10.9 ± 1.0 g/dl, p < 0.001) and 6-min walked distance (274 ± 97 from 201 ± 113 m, p < 0.01) increased significantly. No significant changes were observed in the placebo arm, except for a worsening in 6-min walked distance (p = 0.044). In conclusion, darbepoetin-α reduces circulating pro-inflammatory cytokine IL-6 and apoptotic mediator soluble Fas ligand in CHF patients with anemia, with a parallel improvement of cardiac performance and exercise capacity.     

Left-right asymmetric ventricular expression of CARP in the piglet heart: regional response to experimental heart failure

BACKGROUND AND AIM: Cardiac ankyrin repeat protein (CARP), whose expression is down-regulated in response to doxorubicin (Dox) in vitro, has been proposed to be a marker of experimentally-induced cardiac hypertrophy in rodent models. In piglets, the rapid hypertrophy rate of the left ventricle (LV) as compared to that of the right ventricle (RV) represents a natural model of asymmetric ventricular enlargement. We tested whether CARP expression correlates with postnatal ventricular hypertrophy and to what extent CARP can be sensitive to Dox treatment in vivo. METHODS: CARP mRNA and protein levels were quantified (by Northern blot hybridization, semi-quantitative RT-PCR and Western blot) in the piglet heart, both during early postnatal development and upon Dox-induced cardiomyopathy (Dox-CM). RESULTS: The study revealed: (1) significantly augmented CARP mRNA and protein levels in the LV compared to the RV resulting in left vs. right asymmetry in ventricular CARP expression throughout early postnatal development; (2) dose- and chamber-dependent CARP mRNA and protein enrichment in ventricular myocardium in response to Dox; and (3) abolishment of asymmetric patterns of ventricular CARP expression at heart failure resulting from Dox-CM. CONCLUSIONS: (1) CARP is differentially regulated in the LV and RV during both postnatal development and disease; and (2) monitoring of ventricular CARP expression patterns can be used for further analysis of transition from compensated to overt heart failure.