大剂量氨溴索对机械通气大鼠肺组织激活蛋白-1、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的影响

目的 通过观察不同剂量氨溴索对机械通气大鼠肺组织激活蛋白-1(AP-1)和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的影响,探讨大剂量氨溴索对呼吸机所致肺损伤(VILI)的干预作用.方法 32只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、机械通气(MV)组、常规剂量氨溴索(CDAMB)组和大剂量氨溴索(HDAMB)组,分别采用原位分子杂交技术和免疫组织化学染色法检测肺组织AP-1和γ-GCS Mrna及其蛋白表达水平.结果 MV组和CDAMB组大鼠肺组织AP-1 Mrna及其蛋白表达水平明显高于对照组,而γ-GCS Mrna及其蛋白表达水平则明显低于对照组(P<0.01).HDAMB组AP-1 Mrna及其蛋白表达水平明显低于MV组和CDAMB组,而γ-GCS Mrna及其蛋白表达水平高于MV组和CDAMB组(P<0.01).MV组和CDAMB组各项指标比较差异无统计学意义.结论 氧化/抗氧化失衡参与了VILI的发病过程.大剂量氨溴索可通过抑制机械通气大鼠肺组织AP-1的表达和上调γ-GCS的表达而发挥抗氧化作用,对VILI有一定保护作用.     

不同潮气量机械通气对大鼠肺组织Clara细胞分泌蛋白及分泌型磷脂酶A2的影响

目的 通过观察不同潮气量机械通气大鼠肺组织Clara细胞分泌蛋白(CC16)及分泌型磷脂酶A2(sPLA2)的表达,探讨CC16和sPLA2在呼吸机所致肺损伤(VILI)发生中的作用.方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、小潮气量组和大潮气量组,测定各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)总蛋白含量及中性粒细胞计数,采用免疫组织化学染色法检测肺组织Clara细胞计数和CC16蛋白表达,采用逆转录聚合酶链反应法检测肺组织sPLA2 mRNA的表达.结果 大潮气量组大鼠BALF总蛋白含量、中性粒细胞的计数和肺组织sPLA2 mRNA表达水平均明显高于对照组和小潮气量组(P值均＜0.01),而肺组织Clara细胞计数和CC16蛋白表达水平则明显低于对照组和小潮气量组(P值均＜0.01);小潮气量组各项指标与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 大潮气量机械通气通过诱导肺组织sPLA2 mRNA高表达,使Clara细胞合成及分泌CC16减少,导致肺组织炎症反应扩大,可能是VILI发生的重要因素之一.     

卡托普利对大潮气量机械通气大鼠肺组织小窝蛋白-1表达的影响

目的通过观察血管紧张素转换酶抑制剂-卡托普利干预后大鼠肺组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及小窝蛋白-1（Cav-1）表达量的变化,探讨卡托普利对大潮气量机械通气致大鼠急性肺损伤的防治作用。方法24只健康雄性sD大鼠,随机分为对照组、大潮气量通气组（H—VT）和卡托普利干预组（CAP）,每组8只。光镜下观察各组大鼠肺组织的病理改变,测定肺组织湿干重比值（W／D）和支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白含量（TP）。采用ELISA法检测肺组织AngU含量,免疫组织化学法（SABC）测定大鼠肺组织Cav-1的表达水平。结果H—VT组大鼠肺组织病理损伤程度,肺组织W／D比值、BALF中TP含量和肺组织AngⅡ含量均明显高于对照组和CAP组（均P〈0．01）,CAP组和对照组相比较,除AngⅡ含量差异无统计学意义外（P〉0．05）,其余指标均增高（均P〈0．01）;H—VT组大鼠肺组织Cav-1表达水平明显低于对照组和CAP组（均P〈0．01）,且CAP组该指标明显低于对照组（P〈0．01）;各组大鼠肺组织Cav-1与AngⅡ含量之间呈负相关（r=-0．821,P〈0．01）。结论大潮气量机械通气通过诱导大鼠肺组织AngⅡ高表达导致Cav-1表达水平降低,可能是呼吸机所致肺损伤（VILI）发病的重要因素之-。卡托普利可通过抑制肺组织AngⅡ生成,上调Car-1表达水平,对VILI起一定保护作用。     

不同潮气量机械通气对大鼠肺组织激活蛋白-1、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的影响

目的通过观察不同潮气量机械通气对大鼠肺组织激活蛋白-1（AP-1）和1-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ—GCS）表达的影响,探讨氧化-抗氧化系统失衡在呼吸机所致肺损伤（VILI）发生中的作用。方法24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、小潮气量（L—VT）组和大潮气量（H—VT）组,每组8只。光镜下观察各组大鼠肺组织病理损伤程度;采用硫代巴比妥酸比色法测定大鼠血浆及肺组织中丙二醛（MDA）含量,原位分子杂交技术和免疫组织化学染色法检测肺组织AP-1和γ-GCSmRNA及其蛋白表达水平。结果H—VT组大鼠肺组织和血浆中MDA含量明显高于对照组和L—VT组（均P〈0．01）,肺组织病理损伤程度较对照组和L—VT组明显加重;L—VT组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。H—VT组肺组织γ-GCSmRNA及其蛋白表达水平明显低于对照组和L—VT组（均P〈0．01）,而AP-1mRNA及其蛋白表达水平明显高于对照组和L—VT组（均P〈0．01）,L—VT组与对照组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论大潮气量机械通气通过上调肺组织AP-1mRNA及其蛋白表达,抑制γ-GCS活性,导致肺组织局部谷胱甘肽合成减少和氧化-抗氧化系统失衡,可能是VILI发生的重要因素之-。     

脑肠肽 Ghrelin 对呼吸机相关性肺损伤大鼠的保护作用机制研究

目的：研究脑肠肽 Ghrelin 预处理对呼吸机相关性肺损伤大鼠的保护作用及机制。方法36只雄性 Sprague-Dawley 大鼠,体质量(300±20)g,随机分为3组(n =12);对照组;呼吸机相关性肺损伤组(VILI)组;Ghrelin 预处理组。其中对照组给予常规机械通气(通气设置：潮气量10 ml/kg,频率40次/分,吸入氧浓度21%),VILI 组和 Ghrelin 预处理组给予高潮气量机械通气(通气设置：潮气量30 ml/kg,频率40次/分,吸入氧浓度21%)。Ghrelin 预处理组在行机械通气前30 min 皮下注射50 ng/kg Ghrelin,对照组和 VILI 组于机械通气前30 min 皮下注射等体积生理盐水;所有动物在机械通气4 h 后处死,取肺组织,光镜检查病理改变,计算肺湿干比重及检测组织髓化过氧化物酶(MPO)水平,收集 BALF,检测总蛋白总量和炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和 IL-6的水平,取血液标本行血气分析并计算氧合指数(PaO 2/FiO 2)。结果光镜下可见：同对照组相比, VILI 组肺组织病理损伤严重,BALF 中蛋白总量及炎性因子 TNF-α和 IL-6水平明显升高(P 值均<0.05),肺组织湿干比及 MPO 水平明显升高(P <0.05),氧合指数明显降低(P <0.05)。而经Ghrelin 处理后的 VILI 大鼠肺组织病理学改变明显减轻,BALF 中蛋白总量及细胞计数均较 VILI 组明显降低,氧合指数明显改善(P <0.05)。结论皮下注射脑肠肽 Ghrelin 可降低呼吸机相关性肺损伤,其主要作用机制是通过抗炎而发挥保护作用的。     

卡托普利对大潮气量机械通气大鼠肺组织细胞凋亡的影响

目的 通过观察大潮气量机械通气大鼠肺组织细胞凋亡水平和肺内血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量的变化,探讨血管紧张素转换酶抑制剂——卡托普利对呼吸机所致肺损伤(VILI)的防治作用.方法 雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、大潮气量机械通气组(H-VT)和卡托普利干预组(CAP).观察各组大鼠肺组织病理学改变,测定其急性肺损伤(ALI)评分、支气管肺泡灌洗液(BALF)总蛋白含量和肺湿/干重比值(W/D).采用DNA断端末端标记法(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡指数,采用ELISA法检测肺组织AngⅡ含量.结果 H-VT组大鼠肺组织ALI评分、W/D,BALF总蛋白含量、肺组织AngⅡ含量及细胞凋亡指数均明显高于对照组(P值均＜0.01),且出现明显肺组织病理学改变.CAP组大鼠肺组织上述指标均较H-VT组明显降低(.P值均＜0.01),同时肺组织病理学改变也较H-Vr组明显减轻.结论 肺组织细胞凋亡在VILI发病中具有重要作用,卡托普利可通过降低大潮气量机械通气大鼠肺组织细胞凋亡水平,对V1LI起一定保护作用.     

清胰汤对急性胰腺炎肺损伤治疗作用的实验研究

[目的]探讨清胰汤在重症急性胰腺炎（SAP）急性肺损伤（ALI）时对肺表面活性蛋白A（SP-A）表达及病情转归的影响。[方法]将SD大鼠随机分为3组，各10只。假手术（对照）组仅行剖腹术，模型组采用胆胰管内逆行注入1．5％去氧胆酸钠建立大鼠SAP时ALI模型，清胰汤治疗（治疗）组在建立SAP模型后30min、12h清胰汤（10ml／kg）灌胃。各组术后24h测动脉血pH、动脉氧分压（PaO2）、动脉二氧化碳分压（PaCO2）、血淀粉酶（AMY）、肺湿／干重（W／D）比值。应用RT-PCR检测肺sP-A mRNA的表达强度，并观察胰、肺病理变化。[结果]模型组AMY、W／D及PaCO2显著高于对照组和治疗组（均P〈0．01）。而模型组pH、PaO2显著低于其他2组（P〈0．05，〈0．01）。治疗组肺sP-A mRNA表达显著高于模型组（P〈0．01），其表达与肺损伤的程度呈负相关。治疗组胰、肺病理改变较模型组减轻。[结论]清胰汤能保护肺泡Ⅱ型上皮细胞功能，恢复SP-A mRNA正常表达，维持肺泡功能，从而对肺组织起保护作用。     

巨噬细胞炎症蛋白-1α在机械通气致大鼠急性肺损伤中的作用

目的 观察巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)在不同潮气量机械通气致大鼠急性肺损伤发病中的作用.方法 24只雄性健康Wistar大鼠随机分为对照组、小潮气量组和大潮气量组.分别检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞计数、BALF和血浆髓过氧化物酶(MPO)活性和MIP-1α含量以及肺组织MIP-1α蛋白表达水平.结果 大潮气量组大鼠BALF中性粒细胞计数、MPO活性及MIP-1α含量均明显高于对照组和小潮气量组(P值均<0.01).大潮气量组大鼠肺泡上皮和细支气管上皮细胞MIP-1α蛋白表达水平明显高于对照组和小潮气量组(P值均<0.01).对照组与小潮气量组各项指标比较差异无统计学意义.相关分析结果表明,各组大鼠BALF中MIP-1α含量与中性粒细胞计数及MPO活性均呈正相关(r=0.803,r=0.791,P值均<0.05).结论 趋化性细胞因子MIP-1α促使中性粒细胞在肺内募集、活化是导致呼吸机所致肺损伤发病的重要因素之一;呼吸机所致肺损伤病变部位不仅仅局限于肺泡,对细支气管也有一定损伤作用.     

川芎嗪对百草枯中毒大鼠急性肺损伤的治疗作用

目的探讨川芎嗪对急性百草枯（PQ）中毒大鼠所致肺损伤的治疗作用。方法采用腹腔注射20％PQ溶液制作大鼠急性PQ中毒模型,将大鼠随机分成空白组、阴性对照组、阳性对照组、川芎嗪低剂量组和川芎嗪高剂量组,观察大体标本、组织病理以及肺湿／干质量比、肺泡灌洗液（BALF）中性粒细胞比和蛋白含量。同时测定血清和BALF中MDA含量、SOD和GSH-Px活力以及肺组织核因子-κB（NF—κB）和iNOS活性。结果与阴性对照组相比,川芎嗪低剂量组肺组织淤血、水肿明显减轻,血浆和BALF中MDA含量明显下降（P均〈0．01）;GSH-Px和SOD活力明显升高（P〈0．01）。NF-κB和iNOS降低（P〈0．05,或〈0．01）。结论川芎嗪可使急性PQ中毒引起的脂质过氧化损害得到改善,且能降低NF-κB及iNOS水平,减轻PQ中毒大鼠肺组织损伤。     

肺泡表面活性物质相关蛋白A在慢性心源性肺水肿大鼠肺组织中的表达

目的观察慢性心源性肺水肿大鼠肺组织病理形态学改变,研究其肺泡表面活性物质相关蛋白A及肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的表达,阐述它们在慢性心源性肺水肿发病机制中的作用。方法 14只自发性高血压大鼠高脂饮食饲养1年,建立慢性心源性肺水肿模型,14只血压正常大鼠以正常饮食饲养1年,为正常对照组,分别以免疫组织化学染色检测各组大鼠肺组织中SP-A的表达。RT-PCR法检测各组大鼠肺组织SP-A mRNA的表达,ELISA法检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的水平。结果试验组肺组织中SP-A mRNA的表达较对照组明显上调(P<0.05),肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。SP-A mRNA表达与支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的水平呈显著正相关(r=0.612、r=0.702、r=0.824,P<0.05)。结论慢性心源性肺水肿大鼠的肺组织中SP-A mRNA的表达较对照组明显上调,且与支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的水平呈显著正相关。SP-A及TNF-α、IL-1、IL-6均与慢性心源性肺水肿的发生发展过程密切相关,但因果关系不明。     

cav-1和TNF-α在机械通气联合高氧致大鼠ALI中的表达研究

目的 观察机械通气联合高氧对大鼠肺组织小窝蛋白1(cav-1)、核转录因子κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响,探讨机械通气联合高氧致大鼠ALI的发生机制及其相互作用.方法 24只雄性SD大鼠随机分为对照组、机械通气组和机械通气联合高氧组.观察各组大鼠肺组织的病理学改变,计算肺组织湿/干重比值;采用BCA法测定BALF中蛋白含量;采用免疫组化染色法和Western blot法测定肺组织中cav-1蛋白表达;采用RT-qPCR法测定肺组织中NF-κB和TNF-αmRNA表达.结果 与对照组比较,机械通气组和机械通气联合高氧组大鼠肺组织湿/干重比值、BALF中总蛋白含量以及肺组织中cav-1蛋白、NF-κB mRNA和TNF-αmRNA表达水平均显著升高(P值均<0.001),同时肺组织呈明显损伤性改变;机械通气组和机械通气联合高氧组之间上述指标比较差异也均有统计学意义(P值均<0.001),但机械通气组肺组织病理损伤程度较机械通气联合高氧组轻.相关性分析结果显示,各组大鼠肺组织cav-1蛋白表达量与NF-κB mRNA表达量之间呈正相关(r=0.827,P<0.001);NF-κB mRNA表达量与TNF-αmRNA表达量之间呈正相关(r=0.903,P<0.001).结论 高氧可上调肺组织cav-1的表达,使NF-κB信号通路发生活化,后者通过介导TNF-α等炎症细胞因子释放,从而加重机械通气大鼠肺组织炎症性损伤.     

高吸气峰压诱发呼吸机所致肺损伤及呼气末气道正压的保护作用

目的:探讨呼气末气道正压(PEEP)对高吸气峰压(PIP)所致肺损伤的保护作用。方法:20只成年SD大鼠随机分成四组,每组5只,对照组手术完毕后处死,其余三组给予机械通气:1 P10组,设置吸气峰压值为(PIP,cm H2O)/频率(f,次/分)/吸呼比(I:E)/呼气末正压(PEEP,cm H2O)为10/40/1∶1/0;2 P50组,设置PIP/f/I∶E/PEEP为50/20/1∶1/0;3 PEEP组,设置PIP/f/I:E/PEEP为50/40/1;1/10,20分钟后处死。观察呼吸机潮气量(VT)、呼吸系统阻力(Rrs)和动态肺顺应性(Cdyn),测定动脉血氧分压(Pa O2)。实验结束后测定肺组织含气容积密度(VV)、肺髓过氧化物酶(MPO)和白细胞介素-8(IL-8)含量。结果:与P10组比较,P50组VT、Rrs、MPO和IL-8均显著增加(P0.05或P0.01),而Pa O2、Cdyn和VV显著降低(均P0.05);PEEP组上述各指标均显著优于P50组(P0.05或P0.01)。P10和对照组间上述指标均相近。结论:高气道压MV诱发明显VILI,加用PEEP可以保护肺结构和功能,减轻肺损伤。     

瘦素预处理对机械通气肺损伤大鼠NLRC4炎症小体表达的影响

目的:探讨瘦素预处理对机械通气肺损伤(VILI)大鼠NLRC4炎症小体表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠36只,体质量200～250 g,6～8周龄,采用随机数字表法分为3组：对照组、VILI模型组和瘦素组,每组12只。对照组麻醉后气管插管并保留自主呼吸;VILI模型组连接小动物呼吸机行机械通气,潮气量40 ml/kg...     

盐酸氨溴索对肺间质纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液头孢噻肟浓度的影响

目的 探讨盐酸氨溴索对肺间质纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）头孢噻肟浓度的影响.方法 将54只Wister雄性大鼠随机分成3组,每组18只,正常对照组（A组）、模型组（B组）、盐酸氨溴索组（C组）,B、C组采用气管内注入博来霉素（5 mg/kg）的方法制作肺间质纤维化动物模型,A组气管内灌注生理盐水.C组每天腹腔内注入盐酸氨溴索35 mg/kg.分别于给药后第7、14、28天,各组每次取6只大鼠,鼠尾静脉注射头孢噻肟（600 mg/kg）后行支气管肺泡灌洗,灌洗液采用液相色谱—质谱联用法测定头孢噻肟的浓度,并取肺组织做病理观察.结果 第7天C组BALF头孢噻肟浓度低于B组,差异无统计学意义（P =0.164）,第14天C组BALF头孢噻肟浓度上升,C组与B组的差异有统计学意义（P =0.000）.第28天C组锐降,低于B组,差异无统计学意义（P =0.126）.结论 盐酸氨溴索可提高肺纤维化初期BALF中头孢噻肟的浓度.