腹腔镜胃癌根治术后腹腔冲洗液CEA mRNA的变化和意义

目的探讨腹腔镜胃癌根治术对腹腔脱落癌细胞的影响。方法收集44例行腹腔镜胃癌根治术患者胃癌切除前后腹腔冲洗液,并以RT-PCR方法检测腹腔冲洗液CEA mRNA表达情况。结果腹腔镜胃癌根治术患者CEA mRNA表达胃癌未切除时阳性率为27.3%(12/44),切除后阳性率为36.4%(16/44),两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔镜胃癌根治术不增加腹腔胃癌细胞的脱落。     

胃癌术中腹腔游离癌细胞检测方法的对比研究

目的探讨检测腹腔游离癌细胞的方法及临床意义。方法应用细胞学检查(PLC)、流式细胞术(FCM)、实时荧光定量RT-PCR分别检测50例胃癌患者术中腹腔冲洗液(腹水)中游离癌细胞、CK20蛋白和CK20mRNA表达阳性率,比较三种方法对腹腔游离癌细胞检测的敏感度。结果 50例胃癌患者腹腔冲洗液(腹水)中,PLC检测腹腔游离癌细胞阳性率为20.0%(10/50),FCM检测CK20蛋白表达阳性率为36.0%(18/50),实时荧光定量RT-PCR检测CK20mRNA表达阳性率为58.0%(29/50);实时荧光定量RT-PCR检测腹腔冲洗液(腹水)中CK20mRNA表达阳性率高于FCM检测CK20蛋白表达阳性率及PLC检测腹腔游离癌细胞阳性率(P0.05或P0.001);FCM检测腹腔冲洗液(腹水)中CK20蛋白表达阳性率与PLC检测游离癌细胞阳性率相比较,差异无统计学意义(P0.05)。腹腔冲洗液(腹水)中检测CK20mRNA表达阳性率与肿瘤浸润深度、分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关(P0.05)。结论实时荧光定量RT-PCR检测CK20mRNA表达是检测腹腔游离癌细胞的有效方法。     

腹腔镜胃癌手术对胃癌细胞腹腔种植转移影响的临床研究

目的探讨腹腔镜胃癌手术和开腹胃癌手术对胃癌细胞种植转移的影响。方法收集2006年4月至2006年11月间腹腔镜胃癌手术中的45例和开腹胃癌手术中的41例患者术前、术后腹腔冲洗液各100ml,进行腹腔脱落肿瘤细胞学检查。腹腔镜组,气腹后通过套管针侧孔引出CO2气体,经过100ml生理盐水的滤过后,收集过滤液进行肿瘤细胞学检查。腹腔镜组术后用100ml生理盐水冲洗腹腔镜手术器械,进行腹腔镜器械冲洗液肿瘤细胞学检查。所有液体离心取沉淀,涂片固定HE染色,光镜下观察肿瘤细胞。结果腹腔镜气腹CO2气体滤过液中未观察到肿瘤细胞;腹腔镜器械冲洗液发现3例阳性(6.7%);两组术前腹腔冲洗液中肿瘤细胞的阳性率分别为60.0%和60.9%,术后肿瘤细胞阳性率分别为53.3%和56.1%,两种手术方式术前、术后腹腔冲洗液肿瘤细胞无明显差异。腹腔冲洗液与胃癌TNM分期有关,两组肿瘤细胞Ⅲ期阳性率均显著高于Ⅱ期,具有非常显著统计学差异(P0.01),即两组中胃癌细胞阳性检出率在肿瘤的病理分期越晚,阳性率越高。结论 CO2气腹不会引起肿瘤细胞的播散。腹腔镜术中器械污染是引起切口转移的主要原因之一。腹腔镜手术不增加肿瘤细胞播散种植的机会。     

腹腔镜胃癌根治术后腹腔冲洗液CEA mRNA的变化和意义

目的探讨腹腔镜胃癌根治术对腹腔脱落癌细胞的影响。方法收集44例行腹腔镜胃癌根治术患者胃癌切除前后腹腔冲洗液，并以RT—PCR方法检测腹腔冲洗液CEAmRNA表达情况。结果腹腔镜胃癌根治术患者CEAmRNA表达胃癌未切除时阳性率为27．3％（12／44），切除后阳性率为36．4％（16／44），两组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论腹腔镜胃癌根治术不增加腹腔胃癌细胞的脱落。     

腹腔冲洗液检测CEA预测胃癌腹膜种植转移的临床意义

目的 探讨检测胃癌腹膜转移诊断的方法.方法 收集50例胃癌患者(胃癌组)及10例胃良性病变患者的腹腔冲洗液,并以胃癌原发灶组织标本作为对照.采用流式细胞术检测标本中肿瘤标志物CEA,采用HE染色进行腹腔冲洗液细胞学(PLC)检查,同时分析上述资料的临床意义.结果 胃癌组腹腔冲洗液中CEA阳性表达率为54.0%(27例),明显高于PLC所检测的24.0%(12例)的阳性率(P＜0.05).阳性检出率随着肿瘤浸润深度,TNM分期,胃壁受侵程度的增加而增加.胃癌组原发灶中CEA的阳性表达率为86.0%(43例),对照组腹腔冲洗液中CEA无阳性表达.结论 流式细胞术检测腹腔冲洗液中CEA可作为预测胃癌腹膜种植转移的手段.     

直肠癌切除前后腹腔冲洗液脱落细胞学对比研究

目的研究直肠癌术中腹腔多次冲洗，对于降低患者腹腔内脱落癌细胞阳性率的临床意义。方法对63例直肠癌患者术中腹腔冲洗分6次进行，肿瘤切除前3次，切除后3次；将6次腹腔冲洗液行常规病理学涂片细胞学检查结果进行对比。结果肿瘤切除前，全组患者腹腔冲洗液脱落癌细胞均呈阳性表达。肿瘤切除后第1次腹腔冲洗液脱落癌细胞阳性40例，第2次阳性33例，第3次阳性13例。肿瘤切除后第1次冲洗液的脱落癌细胞阳性结果与切除后第2次冲洗液阳性结果比较，P〉0.05，差异无统计学意义；但第3次冲洗液的脱落癌细胞阳性结果与第2次比较，P〈0.01，差异有统计学意义。结论对直肠癌患者进行术中多次腹腔冲洗可降低腹腔内脱落癌细胞的阳性率。     

浆膜浸润胃癌中肝细胞生长因子、转录因子SP1、血管内皮生长因子和CD34表达与胃癌细胞脱落及预后关系

目的 观察肝细胞生长因子(HGF)、转录因子SP1、血管内皮生长因子(VEGF)及CD34在浆膜浸润胃癌(T3)中表达及其与病理生物学行为关系,同时探讨胃癌细胞腹腔脱落的分子基础及其对预后的影响.方法 采用大剂量生理盐水(1000 ml)腹腔灌洗方法,选择性收集2007年4月至12月80例浆膜浸润胃癌(T3)手术患者腹腔冲洗液,进行细胞学检测和细胞角蛋白18(CK18)免疫化学检测寻找癌细胞;运用免疫组织化学方法,对石蜡包埋的浆膜浸润胃癌(T3)癌组织中HGF、SP1、VEGF和CD34[以微血管密度(MVD)值表示]进行检测;同时进行严密随访.结果 患者腹腔冲洗液细胞学检测阳性率为63.8%(51/80),CK18免疫化学检测阳性率为75.0%(60/80).腹腔冲洗液细胞学检测阳性病例CK18检测均为阳性,腹腔冲洗液细胞学检测阴性患者有9例CK18检测为阳性,其中6例经病理科医师会诊确定为游离癌细胞阳性,本组病例脱落细胞阳性率为71.3%(57/80).胃癌组织中HGF、SP1和VEGF阳性率分别为57.5%、52.5%和55.0%,与MVD值的相关性具有统计学意义(P<0.05).HGF、SP1、VEGF和MVD值与脱落细胞阳性率等临床特征相关(P<0.05).经单因素分析发现HGF、SP1、VEGF和MVD值与预后相关(P<0.05),Logistic回归分析显示HGF、SP1和VEGF是预后的独立影响因素(P<0.05).结论 浆膜浸润胃癌(T3)中HGF、SP1、VEGF及MVD表达与胃癌生物学行为关系密切,检测几种因子对预测胃癌细胞腹腔脱落和术后复发具有一定的参考价值.     

胃癌腹腔微转移的研究及其临床意义

目的运用细胞学及RT-PCR方法检测胃癌患者术中腹腔冲洗液和腹膜组织,以探讨这些方法对预测胃癌腹腔微转移的意义.方法收集3 8例胃癌和5例胃良性病变患者的术中腹腔冲洗液,并同时切除少量大网膜、腹膜作为对照.用RT-PCR方法测定冲洗液中游离细胞的CEAmRNA表达,同时作冲洗液细胞学检查（PLC）.结果腹腔冲洗液和腹膜组织中的CEA mRNA的阳性率分别为36.8%（14/38）和39.5%（15/38）,皆高于腹腔冲洗液PLC的26.3%（10/38）.CEA mRNA的阳性率与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、浆膜侵犯深度有关.结论CEART-PCR方法对于检测腹腔微量游离癌细胞较PLC有更高的灵敏度和特异性,是一种检测胃癌腹腔微转移的有效方法.     

术中实时 RT-PCR检测胃癌患者腹腔冲洗液癌胚抗原 mRNA的初步研究

目的探讨术中实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)定量检测胃癌腹腔冲洗液癌胚抗原信使核糖核酸(CEAmRNA)诊断腹腔游离癌细胞的可行性、可靠性及其临床意义。方法采用实时RT-PCR技术检测98例胃癌患者手术前后腹腔冲洗液CEAmRNA水平,并与常规RT-PCR、细胞学检查结果进行比较分析。结果全组腹腔冲洗液细胞学检查(PLC)阳性率为38.8%(38/98),常规RT-PCRCEAmRNA检测阳性率为52.0%(51/98),两者差异有显著性意义(P<0.01)。腹腔冲洗液CEAmRNA浓度术前为犤172.11±63.07(范围0～5.623×106)犦拷贝(copies)/ml,术后为犤606.32±76.21(范围2.564×102～4.677×107)犦copies/ml,术后显著高于术前(P<0.01)。肿瘤侵犯浆膜,病期Ⅲ、Ⅳ期,细胞学检查及RT-PCRCEAmRNA阳性者腹腔冲洗液CEAmRNA水平显著升高(均P<0.01),而淋巴结转移与否及肿瘤细胞分化程度不同组之间的腹腔冲洗液CEAmRNA水平比较,差异无显著性意义(均P>0.05)。PLC(-)PCR(-)组、PLC(-)PCR( )组和PLC( )PCR( )组3组间腹腔冲洗液CEAmRNA浓度比较,差异有显著性意义(均P<0.05)。本研究将判断腹腔游离癌细胞的CEAmRNA界值初步定为21.73copies/ml。结论实时RT-PCR定量检测胃癌患者腹腔冲洗液CEAmRNA,是诊断腹腔游离癌细胞快速、敏感、可行的方法,有望成为术中腹腔化疗个     

腹腔冲洗细胞学检查对判断胃癌预后的价值

目的探讨胃癌患者腹腔游离癌细胞形成的相关因素及其与胃癌根治术后预后的关系。方法对61例胃癌手术患者施行术中腹腔冲洗液细胞学检测,分析其临床病理特征与腹腔游离癌细胞形成的相关性,通过多元回归分析和累积生存曲线分析预后及相关因素。结果61例胃癌患者腹腔冲洗液细胞学阳性率为36%,Ⅲ、Ⅳ期胃癌、浆膜受累、淋巴结受侵及血管癌栓、术后腹膜转移者阳性率分别为50%、47%、45%、65%、88%,明显高于Ⅰ、Ⅱ期胃癌(19%)、浆膜未侵(22%)、无淋巴结受侵(12%)、无血管瘤栓(18%)及其他转移者(33%)。腹腔游离癌细胞是胃癌预后的独立危险因素(RR=3·614,P=0·02),腹腔冲洗液细胞学阳性组的生存时间明显缩短(P<0·01)。结论腹腔游离癌细胞形成微转移灶是胃癌根治术后腹腔复发转移及预后的危险因素,术中腹腔冲洗液细胞学检测有助于判断预后。     

腹腔镜胃癌根治术后腹腔游离癌细胞的变化及意义

目的 对比研究腹腔镜与开腹胃癌根治术后腹腔游离癌细胞的变化,探讨腹腔镜胃癌根治术的安全性及可行性.方法 收集2006年4月至2008年6月间63例腹腔镜、61例开腹胃癌根治术患者术前、术后腹腔灌洗液,分别运用细胞学和荧光定量PCR方法 检测腹腔游离癌细胞的阳性率和癌胚抗原(CEA)mRNA的表达变化,观察胃浆膜受侵面积与腹腔游离癌细胞阳性率的关系.结果 腹腔镜组术后腹腔灌洗液游离癌细胞的阳性率为25.4%,与开腹组(29.5%)比较差异无统计学意义(P＞0.05);腹腔镜组术后腹腔灌洗液CEA mRNA阳性率为41.3%,与开腹组(40.3%)比较差异亦无统计学意义(P＞0.05).腹腔镜组术前、术后腹腔游离癌细胞均为阳性的病例,其浆膜平均受侵面积为(16.2±2.2)cm2,而术前、术后游离癌细胞均为阴性的病例,其浆膜平均受侵面积为(5.3±0.8)cm2,腹腔游离癌细胞的阳性率与浆膜受侵面积呈正相关(R2=0.874,P=0.000).结论 腹腔镜胃癌根治术并不增加腹腔游离癌细胞的阳性检出率.     

腹腔镜下进展期胃癌根治术中腹腔游离癌细胞检测的意义

目的探讨腹腔镜下进展期胃癌根治术对腹腔脱落肿瘤细胞检测的影响,并探讨提高腹腔游离癌细胞检出率的方法。方法选取华中科技大学同济医学院附属协和医院胃肠外科35例初治的进展期胃癌病人,行腹腔镜下胃癌根治术。所有病人分别在术中探查前及关腹前各行一次腹腔冲洗,并收集灌洗液。比较两组灌洗液中肿瘤脱落细胞阳性检出率及肿瘤标志物上皮膜抗原(epithelial membrane antigen,EMA)、癌抗原(carbohydrate antigen,CA)125、CA19-9和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)的表达情况。结果35例进展期胃癌病人探查前腹水或腹腔灌洗液中涂片细胞学检查中检出阳性率为5.7%(2/35),关腹前为5.7%(2/35),两者统计比较差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学法检测探查前与关腹前腹水或腹腔灌洗液中EMA的表达(4/35,3/35)比较,差异无统计学意义(P>0.05);两个时间点CA125的表达(1/35,3/35)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。探查前腹水或腹腔灌洗液中,腹腔灌洗液脱落细胞学法游离癌细胞检出阳性率为5.7%(2/35),而免疫组织化学法检测EMA的阳性率为11.4%(4/35),两者比较差异有统计学意义(P=0.010);免疫组织化学法检测CA125的阳性率为8.6%(3/35),与腹腔灌洗液脱落细胞学法(2/35)比较,差异有统计学意义(P=0.005);免疫组织化学法联合检测EMA及CA125的阳性率为11.4%(4/35),与腹腔灌洗液脱落细胞学法(2/35)比较,差异有统计学意义(P=0.010)。结论腹腔镜下进展期胃癌根治术并不会增加癌细胞脱落风险,且肿瘤脱落细胞发生率低。但腹腔镜下胃癌根治术后腹腔游离癌细胞的诊断,需要更为有效的检测方法。     

检测腹腔灌洗液中细胞内端粒酶活性对结直肠癌患者的诊断价值

目的探讨测定腹腔灌洗液中细胞内端粒酶活性对检测腹腔中游离癌细胞的敏感性。方法采用原位分子杂交(ISH)技术测定28例结直肠癌患者术始、术毕腹腔灌洗液中细胞内端粒酶活性,同时与常规细胞学检查结果进行比较。结果28例结直肠癌患者术始、术毕腹腔灌洗液中细胞内端粒酶阳性率分别为42.9%(12/28)和21.4%(6/28),P>0.05;差异无显著性意义。常规细胞学检查游离癌细胞阳性率术始、术毕分别为14.3%(4/28)和3.6%(1/28);两者差异也无显著性意义(P>0.05)。术始,腹腔灌洗液中细胞内端粒酶阳性率为42.9%,细胞学检查阳性率为14.3%,两者差异有显著性意义(P<0.05);术毕,腹腔灌洗液中细胞内端粒酶阳性率为21.4%,细胞学检查阳性率为3.6%,两者差异有显著性意义(P<0.05)。原发癌肿已侵出浆膜层者和原发癌肿侵及和未侵及浆膜层者,术始腹腔灌洗液中细胞内端粒酶阳性率分别为73.3%和7.7%,两者差异有非常显著性意义(P<0.01);腹腔灌洗液中细胞内端粒酶阳性与临床原发癌肿侵出浆膜层呈正相关,但与原发癌肿大体类型、组织学类型及有无淋巴结转移均无关(均P>0.05)。结论用ISH技术测定腹腔灌洗液中细胞内端粒酶活性对检测腹腔中游离癌细胞的敏感性明显高于常规细胞学检查。     

腹腔镜检查结合RT-PCR在胃癌诊疗中的临床意义

目的：探讨进展期胃癌术前腹腔镜检查与RT—PCR检测腹腔灌洗液中游离癌细胞CEAmRNA的表达水平,在胃癌患者术后微转移及预后的临床意义。方法：对22例进展期胃癌患者术前行腹腔镜探查,灭菌生理盐水冲洗腹腔4～5次,收集脱落细胞．进行细胞学检查和RT—PCR检测CEAmRNA表达水平。结果：22例胃癌患者中,细胞形态学捡测31．8％（7／22）阳性,RT—PCR捡测54．5％（12／22）CEAmRNA阳性表达,二者阳性率有显著性差异（P〈0．05）。结论：诊断性腹腔镜检查、RT—PCR与PLC有效结合,可提高腹腔转移复发诊断的灵敏性和特异性,有助于对胃癌分期、淋巴转移和预后的综合判断,对胃癌的辅助治疗提供依据。     

腹腔冲洗细胞学检查对胃癌预后的临床评估及意义

目的 评估腹腔冲洗细胞学检查(PLC)对胃癌预后判断的价值.方法 收集胃癌及对照组患者的腹腔冲洗液标本,采用不同方法检测其中的游离癌细胞,并评价其与临床病理参数的关系.结果 PLC检测阳性率为31.8%,经相关分析,胃癌患者PLC阳性率与下列4种参数均成正相关:肿瘤分化程度(P＜0.05),浸润深度(P＜0.01),淋巴结转移(P＜0.01),TNM分期(P＜0.05).而与肿瘤的大小无关;肿瘤大小分组间差异无统计学意义(P＞0.05).检测阳性组与阴性组术后1年复发率和生存率比较,差异均有统计学意义.结论 PLC检测可作为判断胃癌侵袭转移、术后复发情况及患者预后的参考指标之一.     

Prognostic value of peritoneal lavage cytology in gastric cancer

The microscopic detection of free peritoneal tumour cells in peritoneal lavage fluid in gastric cancer patients is a useful predictor of peritoneal recurrence and poor prognosis. The aim of this study was to verify the prognostic significance of intraoperative peritoneal lavage cytology and its value as a predictor of peritoneal recurrence. We evaluated the presence of free peritoneal tumour cells with extemporary cytological examination in a series of 170 peritoneal washing samples from patients undergoing gastrectomy for gastric cancer over the period from January 1992 to June 2001. Twenty-eight patients (16%) had positive extemporary lavage cytology and there were no false-negatives as compared with the final examination. All patients with positive cytology presented serosal infiltration (T3/T4). Positive peritoneal lavage cytology was a predictor of poor prognosis and peritoneal recurrence: the 24 month survival rate was 17% for positive and 60% for negative cases (P = 0.003); in positive cases 71% of recurrences were located in the peritoneum. Intraoperative cytological examination of peritoneal washings can detect the presence of free malignant cells in the peritoneal cavity and can be used to select patients who may benefit from intraperitoneal chemotherapy.     

腹腔镜结肠癌根治术中腹腔脱落肿瘤细胞的临床研究

目的:对比腹腔镜手术和传统开腹结肠癌根治术中腹腔內肿瘤细胞脱落的差异,探讨腹腔镜结肠癌根治术对腹腔脱落肿瘤细胞的影响.方法:将2010年4月至2011年2月60例结肠癌患者分为腹腔镜组和开腹组,每组30例.进腹后和关腹前分别注入500 ml生理盐水灌洗腹腔.对比分析两种术式腹腔灌洗液标本肿瘤细胞的阳性检出率及腹腔灌洗液...     

肠内营养用于术前肠道准备对结直肠癌患者腹腔和肠腔脱落癌细胞及复发转移的影响

目的探讨术前肠内营养代替肠道准备对结直肠癌患者腹腔和肠腔脱落癌细胞及转移复发的影响。方法2007年3月至2011年12月问前瞻性人组120例结直肠癌者,按随机数字表法随机分为试验组和对照组,每组60例。试验组于术前3d起每日口服30ml／kg肠内营养液,不进行灌肠,不口服泻药和抗生素;对照组采用传统肠道准备,包括术前禁食、口服抗生素和清洁灌肠。两组患者均于开腹后用400ml生理盐水冲洗肿瘤所在局部腹腔,抽取腹腔冲洗液200ml,迅速送检;并于肿瘤切除后肠吻合前,用1000ml生理盐水灌洗远端结直肠腔,收集肠腔冲洗液500ml,迅速送检。比较两组患者腹腔和肠腔内脱落的癌细胞阳性率及术后并发症发生率和复发转移率。结果试验组患者腹腔和肠腔内脱落癌细胞阳性率分别为8．3％（5／60）和15．0％（9／60）．明显低于对照组患者的12．5％（13／60）和31．7％（19／60）（P=0．041和P=O．031）。试验组和对照组分别有55例和57例患者完成随访,随访时间16—46个月;两组局部复发率[5．5％（3／55）比7．0％（4／57）,P=O．733]、远处转移率[10．9％（6／55）比10．5％（6／57）,P=O．984]和3年总体生存率（80％比78％,P=O．312）的差异均无统计学意义。结论术前肠内营养可减少结直肠癌患者腹腔和肠腔脱落癌细胞的阳性率,但并不影响术后局部复发率和远处转移率。     

腹腔镜与开腹胃癌D2根治术影响IL-6和IL-10表达的前瞻性研究

目的 探讨腹腔镜与开腹胃癌D2根治术对患者IL-6和IL-10表达的影响及意义。方法 前瞻性分析2010年11月至2011年10月第三军医大学西南医院收治的146例胃癌患者的临床资料,采用密闭信封法将患者随机分为腹腔镜组（75例）及开腹组（71例）。按照第14版日本胃癌处理规约要求行胃癌D2根治术,术前及术后分别采集腹腔冲洗液。采用酶联免疫吸附法测量腹腔冲洗液中IL-6、IL-10浓度。计量资料采用t检验,计数资料采用X2检验。结果 腹腔镜组和开腹组患者术前腹腔冲洗液中IL-6的浓度分别为（34±13）μg/L和（35±12）μg /L,两者比较,差异无统计学意义（t=-5.110,P〉0.05）;两组术后腹腔冲洗液中IL-6浓度分别为（4015±1592）μg /L和（6724±2112）μg /L,腹腔镜组术后腹腔冲洗液中IL-6〖JP〗的浓度显著低于开腹组（t=8.367,P〈0.05）,且同种手术方式术后腹腔冲洗液中IL-6的浓度均较术前显著增高（t=-59.065,-87.123,P〈0.05）。腹腔镜组和开腹组患者术前腹腔冲洗液中IL-10的浓度分别为（43±9）μg /L和（42±10）μg /L,两者比较,差异无统计学意义（t=1.190,P〉0.05）;两组术后腹腔冲洗液中IL-10的浓度分别为（92±32）μg /L和（62±23）μg /L,腹腔镜组术后腹腔冲洗液中IL-10的浓度显著高于开腹组（t=6.408, P〈0.05）,且同种手术方式术后腹腔冲洗液中IL-10的浓度均较术前显著增高（t=-12.680,-6.802,P〈0.05）。结论 腹腔镜胃癌D2根治术后患者腹腔局部炎症反应较开腹胃癌D2根治术轻,对于防止IL-6介导的胃癌腹腔转移可能有一定作用。