临床分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌同源性及耐药基因携带研究

摘要 目的 研究临床分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)同源性及其耐药基因携带率,为有效防控CRKP感染提供理论依据。方法 采用基因分析(PCR)技术,对某医院临床分离的CRKP菌株进行耐药基因检测与分析。结果 共分析临床分离的CRKP 47株,对该医院临床常用20种抗菌药中的16种耐药率达到90%以上。该医院分离的CRKP主要来源于患者痰液,占分离总菌株数的68%,患者主要来自重症监护病房。47株CRKP中,有41株检出blaKPC-2,33株检出blaCTX-M-1-like,6株检出blaCTX-M-9-like,3株菌检出blaNDM-1。47株CRKP同源性分析显示,A型6株、B型11株及C型19株。结论 该医院临床分离的47株CRKP携带多种耐药基因,以blaKPC-2和blaCTX-M-1-like为主,共分布在3种同源菌型,必须加强CRKP监测和抗菌药物管理。     

阴沟肠杆菌对氟喹诺酮类药物防耐药变异浓度的测定

目的了解阴沟肠肝菌对3种氟喹诺酮类药物的防耐药突变能力，以指导临床合理用药。方法采用标准琼脂二倍稀释法测定加替沙星、环丙沙星、氧氟沙星对阴沟肠杆菌的最低抑菌浓度（MIC），计算MIC50和MIC90。采用涂布法将总量为1．2×10^10CFU的细菌接种于含不同浓度药物的琼脂平皿上，48h后无菌落生长的最低药物浓度即为该药的防耐药突变浓度（mutant prevention concentration，MPC），计算MPC50和MPC90值，并比较MPC90／MIC90。结果加替沙星（GTF）、环丙沙星（CIP）、氧氟沙星（OFL）的MPC90和MPC90／MIC90分别为6，4，24μg／ml和8，10．5，6。结论3种氟喹诺酮类药物最大血药浓度几乎都位于MIC和MPC之间，提示单药治疗易导致耐药突变菌株的富集生长，应联合用药以限制细菌耐药的发生。     

多重耐药鲍曼不动杆菌对氯己定醇手消毒剂的抗性研究

摘要 目的 研究多重耐药鲍曼不动杆菌对氯己定醇手消毒剂的抗性变化,为科学实施医院消毒提供依据。方法 采用最小抑菌浓度测试方法,检测2种氯己定醇消毒剂对临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌最小抑菌浓度(MIC),分析其抗性变化。结果 A、B 2种消毒剂含醋酸氯己定分别为1 750.00 mg/L和5 000.00 mg/L,含乙醇均为体积分数67.3%。以醋酸氯己定标示MIC值,消毒剂A对临床分离鲍曼不动杆菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌标准株的MIC值依次为43.75 mg/L、17.50 mg/L和29.20 mg/L;消毒剂B对上述3种细菌的MIC值依次为125.00 mg/L、50.00 mg/L和83.30 mg/L。结论 临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌对氯己定醇手消毒剂的耐受浓度明显高于大肠杆菌和铜绿假单胞菌标准菌株,提示其抗力有增强趋势。     

土槿皮乙酸与氟康唑联合应用于体外抗白念珠菌活性研究

目的探讨土槿皮乙酸(PAB)联合氟康唑对白念珠菌的抑菌效果,为临床抗真菌治疗提供依据。方法收集氟康唑耐药及敏感白念珠菌临床分离株33株,分别采用微量稀释法及棋盘式微量稀释法测定PAB单独及与氟康唑联用时的最小抑菌浓度(MIC),以部分抑菌浓度指数(FICI)评估联用时药物体外相互作用的方式,采用时间-杀菌曲线试验动态监测2种药物体外联用的效果。结果 PAB单独作用时,对氟康唑耐药及敏感白念珠菌有类似的抑菌效果,MIC为4～32μg/mL。PAB与氟康唑联用可增加耐药白念珠菌对药物的敏感性(氟康唑MIC由≥128μg/mL降至≤16μg/mL,PAB MIC降至≤2μg/mL)。对氟康唑耐药的12株白念珠菌均表现出协同抑菌的效果(FICI为0.035～0.188);对氟康唑敏感的21株菌株中,10株(47.62%)有协同抑菌效果(FICI范围为0.188～0.375),11株无相互作用(FICI0.5)。结论 PAB可抑制白念珠菌的生长,与氟康唑联用还有较好的协同抑菌效果,尤其对耐氟康唑白念珠菌,抑菌效果更好。     

社区获得感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性与消毒剂抗性关系研究

摘要 目的 研究医院门诊患者社区获得感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（CA-MRSA）耐药性和消毒剂抗性分布情况，为医院进行有效消毒提供参考。方法 采用药敏试验和最小抑菌浓度（MIC）检测方法，对医院门诊患者送检病原学标本分离的CA-MRSA进行检测。结果 医院门诊患者送检标本分离的21株CA-MRSA对常用抗菌药物普遍耐药，并呈现多重耐药现象。CA-MRSA菌株对含氯消毒剂、葡萄糖氯己定醇和聚维酮碘的抗性率分别为47.62%、47.62%和33.33%。CA-MRSA菌株耐药性与消毒剂抗性的相关系数rp=0.28，无统计学意义。结论 门诊分离的CA-MRSA菌株呈现多重耐药，对消毒剂抗性有所增加，耐药性与消毒剂抗性无明显相关性。     

尿道多重耐药菌定植与老年前列腺增生症术后尿路感染关联性分析

摘要 目的 验证老年良性前列腺增生症患者尿道多重耐药菌定植与术后尿路感染的关联性。方法 采用巢式病例对照研究,对2014年2月-2018年1月某医院前列腺增生症老年患者的术后尿路感染发生情况进行调查,比较病例组与对照组间尿道多重耐药菌(MDROS)定植率差异;分析前列腺增生症术后尿路感染主要危险因素及其与MDROs的相关性。结果 共调查术后尿路感染病例278例,与556例对照组相比,其尿道MDROS定植率明显增高,总住院时间和术后住院时间均较长;尿道MDROs定植与术后尿路感染风险呈正相关(OR=1.599,95％CI:1.004～2.546)。结论 存在尿道MDROs定植的老年良性前列腺增生症患者术后尿路感染发生风险较大,需重视抗菌药物的选择。     

某医院临床分离耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药特点及耐药基因分析

摘要 目的 了解医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的菌株分布、耐药特点及主要耐药基因。方法 通过病原菌分离鉴定和基因检测方法，对某医院临床分离的CRE菌株进行病原菌鉴定和药敏试验及基因检测。结果 共分析该医院临床分离的CRE菌株152株，其中肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分别占50.66%和25.00%。CRE菌株主要分离自重症监护病房和急诊科，分别占30.92%和21.71%。临床分离的CRE菌株对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林、头孢唑啉、头孢曲松、头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦等药物耐药率均超过75%。152株CRE细菌中，blaKPC基因阳性菌株占39.47%，基因blaNDM-1和blaIMP阳性菌株分别占24.34%和21.71%。结论 该医院临床分离CRE菌株多为肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌多重耐药菌株，blaKPC、blaNDM-1和blaIMP为主要耐药基因。     

某医院烧伤科患者感染肺炎克雷伯菌的特点及耐药性调查

摘要 目的 了解某医院烧伤科患者感染肺炎克雷伯菌的分布及其耐药情况,为临床合理选用抗菌药物提供科学依据。方法 采用细菌培养鉴定技术和药敏试验方法,对某医院烧伤科患者送检标本检测与分析。结果 从该医院烧伤科住院患者送检的病原学标本中共检出肺炎克雷伯菌153株,检出率呈上升趋势;其中耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)菌株占37.91%。CRKP在不同烧伤面积、不同年龄、有混合感染检出率差异有统计学意义(P<0.05)。肺炎克雷伯菌对亚胺培南、头孢他啶、头孢吡肟、呋喃妥因、头孢呋辛、头孢哌酮/舒巴坦和头孢噻肟的耐药率均呈逐年上升的趋势(P<0.05)。结论 该医院烧伤科患者感染肺炎克雷伯菌对多数常用抗菌药物的耐药率呈上升趋势,尤其对碳青霉烯类抗菌药物,临床需要根据药物敏感试验合理选用抗菌药物,防止多重耐药菌的流行与传播。     

广泛药物耐药铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌对多粘菌素B的MIC值分布调查

目的通过检测多粘菌素B体外对广泛药物耐药(extensive drug-resistant,XDR)的铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC)的分布上,来评价其对此类细菌的抗菌活性,为临床治疗、控制感染提供依据。方法用纸片扩散法检测临床分离的288株细菌(铜绿假单胞菌130株,鲍曼不动杆菌158株)对临床常见的25种抗菌药物的敏感性以确定其中广泛药物耐药菌;用E-试验检测多粘菌素B及临床常用11种抗菌药物MIC值,分析菌株的MIC值分布情况。结果 288株细菌经K-B法确认均为XDR菌株,对临床常用的11种抗菌药物的敏感性均低于15%;对多粘菌素B的MIC值均≤2μg/ml;130株铜绿假单胞菌的MIC值分布情况为0.125μg/ml1株、0.19μg/ml2株、0.25μg/ml9株、0.38μg/ml37株、0.5μg/ml48株、0.75μg/ml19株、1.0μg/ml11株、1.5μg/ml4株,MIC50为0.5μg/ml,MIC90为1.0μg/ml;158株鲍曼不动杆菌的MIC值分布情况为0.125μg/ml1株、0.19μg/ml3株、0.25μg/ml12株、0.38μg/ml45株、0.5μg/ml56株、0.75μg/ml21株、1.0μg/ml13株、1.5μg/ml7株、2.0μg/ml1株,MIC50为0.5μg/ml,MIC90为1.0μg/ml。结论多粘菌素B体外对广泛药物耐药铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌均敏感,本地区临床未发现有多粘菌素B耐药株;但存在敏感区域内的高MIC值菌株,应引起临床重视。     

一种过氧化氢银离子复方消毒液消毒相关性能研究

摘要 目的 观察一种以银离子和过氧化氢为主要成分的消毒液的消毒效果及其安全性。方法 采用悬液定量杀菌方法和动物试验法,对某过氧化氢银离子复方消毒液杀灭微生物效果及其安全性进行评价。结果 该复方消毒液含银离子100 μg/g与过氧化氢35 g/kg。用该复方消毒液原液作用0.5 min,对悬液内白色念珠菌的杀灭对数值＞4.00,对大肠杆菌和铜绿假单胞杆菌的杀灭对数值均＞5.00|作用1.0 min对金黄色葡萄球菌的杀灭对数值＞5.00。该复方消毒液原液作用1.0 h,对流感病毒、副流感病毒和新城疫病毒均可有效灭活。该复方消毒液对小鼠急性口服LD50值＞5 000 mg/(kg·bw),对新西兰兔最高皮肤刺激指数为0,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验结果为阴性。结论 该过氧化氢银离子复方消毒液对细菌和病毒均具有良好的消毒效果,属无毒级物质,对动物完整皮肤无刺激性。     

万古霉素联合利福平对降低金黄色葡萄球菌耐药的影响研究

目的研究万古霉素联合利福平对降低金黄色葡萄球菌耐药的影响。方法培养金黄色葡萄球菌ATCC25923,检测耐药指标最低抑菌浓度(MIC)、防细菌耐药突变体选择浓度(MPC)、突变选择窗(MSW);建立组织笼感染模型,给药后测定药代动力学指标。结果万古霉素和利福平联用的MIC、MIC99、MPC及发生耐药例数明显低于单独用药;药物浓度高于MPC所占的时间比率(T>MPC)、24 h曲线下面积(AUC24)/MIC、药物浓度在MSW内所占的时间比率(TMSW)均明显高于单独用药。结论万古霉素和利福平联合应用能够降低金黄色葡萄球菌的耐药程度、改善浓度效应和时间效应。     

骨科医院感染耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药性及危险因素分析

摘要 目的 探讨骨科医院感染耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性及其导致医院感染的危险因素。方法 回顾性研究2015年1月-2018年12月某院收治的146例肺炎克雷伯菌培养阳性患者的临床资料,根据药敏结果将患者分为CRKP组和CSKP组,比较两组患者对常用抗菌药物的耐药情况,CRKP菌株医院感染的危险因素。结果 146例患者中CRKP菌株42例和CSKP菌株104例。CRKP对大部分常用抗菌药物的耐药率高于CSKP(P<0.05)。近3个月使用多因素Logistic分析结果显示,多发伤、入住ICU、留置至少一种插管、近3个月使用碳青霉烯类、近3个月使用三代或四代头孢菌素、住院时间>30 d是CRKP感染的独立危险因素。结论 骨科患者CRKP耐药情况严重,应采取有效的防控措施,降低CRKP菌株感染的风险。     

一种外科手消毒凝胶的消毒相关性能观察

摘要 目的 评估外科手消毒凝胶消毒相关性能,为实际应用提供依据。方法 采用载体定量杀菌试验和动物实验方法,对一种有效成分为10 g/L葡萄糖酸氯己定和70%乙醇的外科手消毒凝胶的消毒效果和毒性进行观察。结果 该外科手消凝胶以其原液浸泡载体作用0.5 min,对载体上金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌杀灭对数值均＞5.0,对载体上白色念珠菌杀灭对数值均＞4.0。该手消凝胶原液经口毒性半数致死剂量（LD50）＞5 000 mg/（kg·bw）,对家兔完整皮肤无刺激性。结论 该手消凝胶对细菌繁殖体和真菌均具有良好的杀灭作用,属实际无毒物质,并且对皮肤无刺激。     

离子色谱法对饮用水中部分消毒副产物含量测定

摘要 目的 建立饮用水中消毒副产物浓度测定方法,为饮用水水质监测提供参考。方法 采用离子色谱法,对市场供水中消毒副产物二氯乙酸、三氯乙酸含量进行测定,以验证该方法的准确性。结果 采用本研究建立的离子色谱法条件测定结果表明,对水样中二氯乙酸、三氯乙酸均能得到良好结果,标准曲线范围为2.5 μg/L～500.0 μg/L,检出限为1.0 μg/L。结论 本研究建立的离子色谱方法操作简单,检测结果可靠,线性范围宽,具有良好的准确度及精密度。     

硝羟喹啉联合美罗培南对碳青霉烯类耐药菌体外及小鼠体内药效学研究

目的 探究硝羟喹啉在体外和小鼠体内提高碳青霉烯类耐药菌对美罗培南敏感性的方法。方法 通过肉汤微量稀释法，测定硝羟喹啉对不同类型碳青霉烯类耐药菌(大肠埃希菌3株、肺炎克雷伯菌1株、鲍曼不动杆菌1株)和大肠埃希菌标准菌株ATCC 25922的最低抑菌浓度(MIC)；利用扫描电镜，观察硝羟喹啉作用后细菌形态学改变。通过肉汤微量稀释棋盘法，计算硝羟喹啉和美罗培南的部分抑菌浓度指数(FICI)；建立小鼠尿路感染模型，探索硝羟喹啉和美罗培南联合治疗对碳青霉烯类耐药菌感染的体内药效。结果 硝羟喹啉单药在体外对标准菌株和临床耐药菌株均有一定抗菌活性，MIC范围1～4 mg/L；硝羟喹啉作用后，细菌表面出现不同程度的损伤，且与药物浓度呈正相关；回补Ca²⁺或Zn²⁺均使硝羟喹啉MIC值增加；硝羟喹啉与美罗培南联用，对产NDM-1耐药大肠埃希菌的FICI为0.1875，对产KPC-2型肺炎克雷伯菌和产OXA-23型鲍曼不动杆菌的FICI为2。在小鼠尿路感染治疗中，联合用药组小鼠尿液中细菌含量降低3.076 log10CFU/mL，抗菌药效显著优于对照组和单药治疗...     

氟喹诺酮类药物对临床分离肺炎链球菌的防突变浓度

目的检测氟喹诺酮类药物对肺炎链球菌临床分离株的防突变浓度(MPC),并探讨其与药动学参数的关系,为临床合理用药提供依据。方法采用琼脂二倍稀释法检测4种抗菌药物对25株肺炎链球菌临床分离株的MIC值,计算MIC50和MIC90值;采用新鲜制备的1010CFU/mL菌液测定MPC值,计算MPC50、MPC90和MPC/MIC比值,并探讨MPC值与药动学参数的关系。结果2种氟喹诺酮类药物中,莫西沙星的MPC值较低,MPC范围在0.5～2mg/L,MPC50和MPC90值分别为1mg/L和2mg/L,以400mg每日1次的药动学参数计算莫西沙星的Cmax/MPC90、AUC/MPC90分别为2.2和19.7;左氧氟沙星的MPC范围在2～4mg/L,MPC50和MPC90值分别为2mg/L和4mg/L,在左氧氟沙星3个剂量组中500mg组Cmax/MPC90、AUC/MPC90明显高于200mg与300mg组,分别为1.9和9.6。结论莫西沙星400mg每日1次、左氧氟沙星500mg每日1次的给药方案有望防止肺炎链球菌突变的发生。     

中老年肺结核患者耐药结核分枝杆菌分布及相关危险因素分析

摘要 目的 了解中老年肺结核患者耐药结核分枝杆菌分布及其危险因素,为有效控制耐药菌提供参考。 方法 采用回顾性分析方法,对医院住院中老年肺结核患者送检标本中耐药结核分枝杆菌检测结果进行分析。 结果 从80例患者送检标本中确诊耐结核分枝杆菌感染患者21例,耐药结核分枝杆菌感染率占肺结核总数的26.25%。在检出的耐药结核分枝杆菌中,有47.62%只对单一抗结核药物耐药,其余均同时对2种及以上种类抗结核药物耐药,有9.52%菌株同时对4种抗结核药物耐药;用药依从性、吸烟和糖尿病史是中老年肺结核住院患者出现耐药性的危险因素。 结论 中老年肺结核患者耐药菌感染率较高,危险因素多为可控性,必须加强对耐抗结核药物菌株的监测。     

我国非伤寒沙门菌对多粘菌素的耐药现况及mcr-1基因携带概况

目的 初步探究我国非伤寒沙门菌对多粘菌素的耐药情况。方法 利用微量肉汤稀释法,测定不同来源404株非伤寒沙门菌对多粘菌素B及多粘菌素E的最小抑菌浓度（MIC）,计算耐药率,推测野生沙门菌株的耐药阈值。同时利用聚合酶链式反应（PCR）方法检测菌株携带mcr-1基因的情况。结果 404株沙门菌对多粘菌素B及E的MIC范围为0.125 g/ml至16 g/ml,对多粘菌素B的MIC50、MIC90分别为1 g/ml和8 g/ml;对多粘菌素E的MIC50、MIC90分别为2 g/ml和8 g/ml。优势血清型鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌及德尔卑沙门菌对多粘菌素B及E的MIC值分布不同。以8 g/ml为耐药阈值判定折点,实验菌株对多粘菌素B及E的耐药率分别为10.89%和15.84%;其中食源性沙门菌、人源性沙门菌及动物源性沙门菌对多粘菌素B的耐药率分别为12.50%、17.16%和0.00%（P0.01）;对多粘菌素E的耐药率分别为8.30%、27.94%和0.78%（P0.01）。发现7株同时耐多粘菌素及三代头孢的菌株。发现1株人源鼠伤寒沙门菌携带可转移的mcr-1基因,且该菌株产ESBLs。结论 发现我国人源产ESBLs的沙门菌携带mcr-1基因。根据体外药敏结果,非伤寒沙门菌对多粘菌素B及E的耐药折点设为8 g/ml较宜。沙门菌对多粘菌素的耐药率尚处于低水平,应加强不同来源沙门菌对多粘菌素的耐药监测。     

临床分离泛耐药肺炎克雷伯菌对抗菌药物及消毒剂抗性的相关研究

摘要 目的 研究医院临床分离的肺炎克雷伯菌抗菌药物耐药性与消毒剂抗性水平的关系。方法 采用药敏试验筛选泛耐药和敏感肺炎克雷伯菌,经MLST分子分型,测定最低抑菌浓度、最小杀菌浓度,分析其对消毒剂抗性水平的影响。结果 经药敏试验筛选30株对常用抗菌药物几乎全部耐药的泛耐药菌和5株敏感菌,MLST分型显示〖JP2〗泛耐药菌分为6个型,76.67%为优势型ST11,5株敏感菌ST型各异。泛耐药菌中21株对碘伏MIC值为400 mg/L,〖JP〗26株对含氯消毒剂MIC值为300 mg/L,与大肠杆菌(8099)相同,其余均略低于标准菌株,5株敏感株对碘伏和含氯消毒剂MIC值均与标准菌株相同。结论 与抗菌药物敏感菌株相比,临床分离泛耐药肺炎克雷伯菌对含氯消毒剂和碘伏消毒剂的抗性没有显著差异。     

替加环素对肺炎克雷伯菌的防耐药突变浓度研究

目的考察替加环素对肺炎克雷伯菌的潜在耐药性。方法测定替加环素对于药敏背景不同的肺炎克雷伯菌防突变浓度(MPC)和最低抑菌浓度(MIC)。比较MIC与MPC之间的相关性,考察是否能用MIC推测MPC值。结合MPC和防耐药突变窗(MSW)与替加环素药动学参数评估替加环素单药治疗对于肺炎克雷伯菌的潜在耐药性。结果碳青霉烯类耐药、喹诺酮类耐药组肺炎克雷伯菌对替加环素的MPC较碳青霉烯类敏感、喹诺酮类敏感组高出8倍。替加环素对于肺炎克雷伯菌的MPC范围在4~512 mg/L,MPC90为64 mg/L,远高于替加环素血药浓度。结论替加环素长期单药治疗对于肺炎克雷伯菌的潜在耐药率较高,不宜单独使用,提示临床应加强监测替加环素菌株敏感性及替加环素疗效。