热敏灸对慢性萎缩性胃炎模型大鼠c-myc、survivin、Cyclin D1的影响

目的观察热敏灸"中脘"穴对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠胃黏膜原癌基因(c-myc)、存活素(survivin)及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达的影响。方法 66只SD大鼠按随机数字表法随机分为空白组、造模组。空白组正常饲养,造模组采用复合病因造模法连续造模12周后,随机分为模型组、维酶素组、艾灸组。艾灸组艾灸"中脘"穴40min,艾灸后按2ml/(kg·d)灌服0.9%NaCl,根据艾灸过程中大鼠尾温变化分为热敏灸组和非热敏灸组,维酶素组灌服等量维酶素,1次/d,共28d。实验结束后光镜观察胃黏膜组织学变化,Real time-PCR法检测胃黏膜c-myc、survivin mRNA表达;免疫组化法检测Cyclin D1蛋白的表达,IPP6.0软件对免疫组化照片进行平均光密度分析。结果①与空白组相比,模型组胃黏膜c-myc、survivin mRNA表达均明显升高(均P0.01);与模型组相比,非热敏灸组、热敏灸组、维酶素组均能降低c-myc、survivin mRNA表达(均P0.01),且热敏灸组及维酶素组均优于非热敏灸组(P0.05,P0.01);在降低c-myc mRNA方面维酶素组优于热敏灸组(P0.05),在降低survivin mRNA方面热敏灸组与维酶素组疗效相当。②空白组cyclin D1呈阴性表达,模型组呈强阳性表达,维酶素组、热敏灸组和非热敏灸组较模型组表达均下降,维酶素与热敏灸组阳性表达近似,但均明显低于非热敏灸组。与空白组相比,模型组、非热敏灸组Cyclin D1平均光密度表达升高(均P﹤0.01);与模型组相比,非热敏灸组、热敏灸组及维酶素组Cyclin D1表达均下降(P﹤0.05,P﹤0.01);与非热敏灸组相比,热敏灸组、维酶素组Cyclin D1表达降低(均P﹤0.05),但热敏灸组与维酶素组间无差异。结论①热敏灸能明显改善CAG大鼠体质量及胃黏膜组织病理形态。②热敏灸可能通过调控胃黏膜c-myc、survivin mRNA、Cyclin D1表达,恢复胃黏膜细胞增殖与凋亡平衡而达到治疗CAG的目的。     

热敏灸干预膝骨性关节炎兔模型效应机制的研究

目的:观察热敏灸对膝骨性关节炎(KOA)兔模型一氧化氮(NO)、含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMTS-4)、Ⅱ型胶原、蛋白多糖(PG)的影响,探讨热敏灸治疗KOA的作用机制。方法:42只雄性日本长耳兔按随机数字表随机分为空白组(6只)、模型组(6只)、艾灸组(24只)、假手术组(6只)。空白组正常饲养,模型组与艾灸组采用木瓜蛋白酶注射膝关节腔建立KOA模型,每日强迫活动30 min,造模15 d。假手术组腔内注射0.9%Na Cl溶液。造模结束后,艾灸组艾灸"犊鼻"穴,每日1次,每次40 min,共14 d,根据兔艾灸过程中温度变化分为热敏灸组和非热敏灸组,两组各随机抽取6只;空白组、模型组、假手术组正常饲养,不予任何刺激。观察各组兔体质量、行为学变化;干预结束后,采用硝酸还原法检测血清NO含量,Real-time PCR法检测软骨ADAMTS-4、Ⅱ型胶原、PG含量。结果:(1)造模后,与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组兔体质量均下降,Lequesne MG评分升高(P0.05,P0.01)。干预后,与空白组相比,模型组、假手术组兔体质量仍下降,Lequesne MG评分升高(P0.05,P0.01);与模型组相比,热敏灸组、非热敏灸组、假手术组干预后兔体质量升高,Lequesne MG评分降低(P0.05,P0.01);与非热敏灸组相比,热敏灸组兔体质量明显升高(P0.05),但Lequesne MG评分比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)干预后,与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组NO、ADAMTS-4表达均升高,Ⅱ型胶原、PG表达均下降(P0.05,P0.01);与模型组相比,热敏灸组、非热敏灸组、假手术组干预后NO、ADAMTS-4表达均明显降低,Ⅱ型胶原、PG均明显升高(P0.05,P0.01);与非热敏灸组相比,热敏灸组干预后NO、ADAMTS-4表达明显降低,Ⅱ型胶原、PG表达均明显升高(均P0.05)。结论:热敏灸可能通过抑制NO和ADAMTS-4表达,减少炎性反应、保护关节软骨从而达到治疗KOA的目的。     

针刺与智能通络治疗仪联合应用对慢性萎缩性胃炎大鼠胃电节律及胃黏膜组织前列腺素E_2、前列腺素F_(2α)的影响

目的:观察针刺配合智能通络治疗仪对慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)大鼠胃电节律和胃黏膜组织前列腺素(prostaglandin,PG)的影响,探讨针刺治疗CAG的可能机制。方法:SD大鼠随机分为空白组10只和造模组40只,造模组采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍溶液、水杨酸钠、热盐水灌胃同时配合饥饱失常法复制CAG大鼠模型,造模成功后按照随机数字表法将造模组分为模型组10只、西药组10只、联合治疗组10只。联合治疗组选取大鼠"足三里""中脘""天枢""脾俞"穴进行电针刺激,然后再在"天枢""脾俞"穴处加以智能通络治疗仪配合治疗。西药组采用自制维酶素混悬液灌胃。两组均每日治疗1次,共治疗2个月。采用EGEG-8D型八导智能胃肠电图仪检测胃电节律,放射免疫法检测各组大鼠胃黏膜组织前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)水平。结果:与空白组比较,模型组胃电波形平均频率和波形平均幅值明显降低(P0.01),异常节律指数和频率变异系数明显升高(P0.01);与模型组比较,西药组和联合治疗组波形平均频率和波形平均幅值明显升高(P0.01),异常节律指数和频率变异系数明显降低(P0.01)。与空白组比较,模型组PGE2、PGF2α水平明显降低(P0.01);与模型组比较,西药组和联合治疗组PGE2、PGF2α水平均明显升高(P0.01)。结论:针刺与智能通络治疗仪联合运用能够明显改善CAG大鼠胃电节律紊乱的状况,同时可以提高胃黏膜组织PGE2、PGF2α水平,从而对慢性萎缩性胃炎具有较好的治疗作用。     

中药萎胃康对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜GLi蛋白表达的影响

目的探讨萎胃康治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)的机制。方法 60只SD大鼠随机分为空白组和造模组。造模组造模成功后,随机分为模型组、萎胃康高、中、低剂量组和维酶素组,萎胃康高、中、低剂量组按3 g/(kg·d)、1. 5 g(kg·d)、0. 75 g/(kg·d)灌胃,维酶素组按0. 3 g/(kg·d)灌胃。30 d后,H-E法观察大鼠胃黏膜,免疫组化法检测胃黏膜Gli1、Gli2、Gli3表达。结果治疗组大鼠胃黏膜病变明显好转。模型组Gli1、Gli2、Gli3表达量与空白组比显著增加(P 0. 05);治疗组Gli1、Gli2、Gli3表达量与模型组比显著降低(P 0. 05),以萎胃康高剂量组降低最明显(P 0. 05)。结论通过减少Gli异常表达是萎胃康治疗CAG的可能机制。     

热敏灸对肠易激综合征模型大鼠CRH、ACTH及CORT的影响

目的:观察热敏灸对肠易激综合征(IBS)模型大鼠CRH、ACTH与CORT的影响。方法:64只SD雄性大鼠随机分为空白组(8只)、模型组(8只)、艾灸组(32只)、假手术组(8只)、NMDA组(8只),空白组不予干预,其余各组通过慢性不可预见性刺激法复制IBS模型。造模完成,艾灸组以悬灸命门穴出现尾温变化为依据,分为热敏灸组和非热敏灸组。实验第21、28、35天,NMDA组套管植入海马微量注射5μg/μL NMDA 1μL,假手术组、艾灸组注射生理盐水。观察各组大鼠行为学变化。应用Real-time PCR检测下丘脑CRH mRNA表达,放射免疫法检测血清ACTH、CORT水平。结果:(1)与空白组相比,各组大鼠下丘脑CRH mRNA表达均升高(P0.01,P0.05)。与模型组相比,假手术组CRH mRNA表达无明显差异,NMDA组CRH mRNA表达升高(P0.01),热敏灸组、非热敏灸组CRH mRNA表达均明显降低(均P0.01)。与非热敏灸组相比,热敏灸组CRH mRNA表达降低,差异有统计学意义(P0.05);(2)与空白组相比,各组大鼠血清ACTH含量均升高(均P0.01)。与模型组相比,假手术组ACTH含量无明显差异,NMDA组ACTH含量升高(P0.01),热敏灸组、非热敏灸组ACTH含量均明显降低(P0.01,P0.05)。与非热敏灸组相比,热敏灸组ACTH含量降低(P0.05);(3)与空白组相比,各组大鼠血清CORT含量均升高(P0.01,P0.05)。与模型组相比,假手术组、NMDA组CORT含量无明显差异;热敏灸组、非热敏灸组CORT含量均明显降低(均P0.01)。与非热敏灸组相比,热敏灸组CORT含量降低(P0.05)。结论:热敏灸可有效改善IBS模型大鼠相关症状,可能是通过调节NR的表达,降低下丘脑CRHmRNA表达及血清ACTH、CORT含量,恢复HPAA负反馈调节功能实现的。     

热敏灸对肠易激综合征模型大鼠iGR、CORT的影响

目的:观察热敏灸对肠易激综合征(IBS)模型大鼠海马iGR及CORT的影响,探讨热敏灸治疗IBS的可能作用机制。方法:64只SD雄性大鼠按随机数字表随机分为空白组(8只)、模型组(8只)、艾灸组(32只)、假手术组(8只)、NMDA组(8只),空白组正常饲养,模型组、艾灸组、假手术组、NMDA组采用慢性不可预见性刺激法建立IBS模型。假手术组、艾灸组和NMDA组大鼠于造模第15天进行脑立体定位,海马处植入套管。造模结束后,艾灸组灸"命门"穴,根据大鼠尾温变化分为热敏灸组和非热敏灸组。造模完成当天、第8、15天,NMDA组海马微量注射NMDA,假手术组、艾灸组注射等量生理盐水。观察各组大鼠行为学变化。治疗结束后采用PCR方法检测海马iGR mRNA表达,放免法检测血清CORT含量。结果:(1)与空白组比较,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组、NMDA组iGR mRNA表达降低(P0.01),与模型组比较,热敏灸组、非热敏灸组iGR mRNA表达增加(均P0.01)。与非热敏灸组相比,热敏灸组在改善iGR mRNA表达方面优于非热敏灸组(均P0.05)。(2)与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组、NMDA组CORT含量均升高(均P0.01)。与假手术组比较,热敏灸组、非热敏灸组CORT含量均明显降低(均P0.01)。与非热敏灸组相比,热敏灸组CORT含量降低(均P0.05)。结论:热敏灸能改善iGR mRNA表达,降低CORT含量,改善HPAA负反馈调节,这可能是热敏灸通过HPAA途径治疗IBS的可能机制。     

基于PGE2/PKC/TRPV1信号通路研究热敏灸对膝骨性关节炎兔镇痛效应机制

目的 观察热敏灸对膝骨性关节炎(KOA)兔血清PGE2、背根神经节PKC、穴区皮肤TRPV1的影响，探讨其治疗KOA的作用机制。方法 36只雄性普通级新西兰兔随机分为空白组(6只)、假手术组(6只)、造模组(24只)。采用木瓜蛋白酶溶液注射膝关节腔法造模15d,假手术组关节腔内注射等量的0.9%NaCl溶液。造模成功后，造模组随机分成模型组(6只),艾灸组(18只),艾灸组艾灸“犊鼻”穴，每日1次，每次40 min,共7 d,根据兔艾灸过程中温度变化分为热敏灸组(10只)和非热敏灸组(7只),空白组、假手术组、模型组不予干预措施。干预结束后，肉眼、光镜下观察膝关节滑膜形态学变化；ELISA法检测血清PGE2表达；Real-time PCR法检测各组兔背根神经节PKC mRNA、穴区皮肤TRPV1 mRNA的含量。结果 (1)干预后模型组兔膝关节腔内有大量积液，滑膜增生肥厚，伴有血管增生及大量炎症细胞成团聚集；热敏灸及非热敏灸组关节腔内积液减少，滑膜异常增生改善。(2)与空白组比较，模型组血清PGE2含量明显上升(P<0.01);与模型组比较，热敏灸组、非热敏灸组血清PGE2含量下...     

益气化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎伴异型增生大鼠DNA甲基化酶3b基因的影响

目的观察益气化瘀解毒法对慢性萎缩性胃炎伴异型增生模型大鼠DNA甲基化酶3b(DNMT3b)基因的影响。方法将60只SPF级健康雄性Wistar大鼠随机分为造模组50只、空白组10只。造模成功后将造模组剩余的33只大鼠随机分为模型组、维酶素组、消痞颗粒组,每组11只。模型组予0.9%氯化钠注射液,维酶素组予维酶素悬浊液,消痞颗粒组予消痞颗粒中药制备药液,各组均每日灌胃1次,连续治疗12周后检测各组大鼠DNMT3b蛋白表达量。结果维酶素组、模型组DNMT3b蛋白表达量较空白组均明显升高(P0.01);消痞颗粒组与空白组比较差异无统计学意义(P0.05)。维酶素组、消痞颗粒组DNMT3b蛋白表达量较模型组降低(P0.01);消痞颗粒组低于维酶素组(P0.01)。结论中医益气化瘀解毒法可以逆转胃黏膜异型增生,其作用机制可能是通过下调DNMT3b而实现的。     

艾灸对应激性溃疡模型大鼠血清和下丘脑中GAS、SS表达的影响

目的观察艾灸对应激性溃疡(SU)大鼠血清、下丘脑胃泌素(GAS)、生长抑素(SS)的影响,探讨艾灸治疗SU的作用机制。方法 SD大鼠随机分为空白组、模型组、艾灸组、药物组,每组7只。采用束缚-浸水(RWIS)法制备SU大鼠模型。艾灸组选穴:足三里、中脘,每穴3壮,每日1次,共5 d。药物组予质量浓度为0.02 mg/mL的奥美拉唑肠溶液2 mL灌胃,每日1次,共5 d。用Guth法计算胃黏膜损伤指数,苏木精-伊红染色(HE)观察大鼠胃黏膜组织形态学改变,酶联免疫法测大鼠血清及下丘脑中GAS、SS含量。结果与空白组相比,模型组大鼠胃黏膜损伤指数明显升高(P 0.01);胃黏膜上皮缺损,腺体紊乱,黏膜充血,有大量红细胞渗出;血清及下丘脑中GAS含量显著升高(P 0.01),SS含量明显降低(P 0.05)。与模型组相比,艾灸组和药物组大鼠胃黏膜损伤指数明显降低(P 0.05或P 0.05);胃黏膜结构基本完整,红细胞渗出较少;血清及下丘脑中GAS含量明显降低(均为P 0.01),SS含量显著升高(均为P 0.01)。艾灸组与药物组比较差异无统计学意义(P 0.05)。结论艾灸足三里、中脘可能通过下调GAS水平,上调SS水平,维持脑肠轴稳态,修复胃黏膜损伤,发挥疗效。     

艾灸预处理对急性胃黏膜损伤大鼠胃组织中TGF-α、PCNA含量的影响

目的:观察艾灸预处理对无水乙醇灌胃所致急性胃黏膜损伤大鼠胃组织中转化生长因子-α(TGF-α)、增殖细胞核抗原(PCNA)含量的影响。方法:将48只SD大鼠随机分成4组(空白组、模型组、艾灸穴位组、艾灸对照点组),艾灸穴位组选取足三里穴、中脘穴,艾灸对照点组则选取足三里穴、中脘穴旁开1cm处的对照点,预处理8d后,空白组予0.9%氯化钠注射液灌胃,其余3组予无水乙醇灌胃,1h后取材,光镜下观察各组胃黏膜组织形态学变化,免疫组化法检测胃黏膜TGF-α及PCNA的含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜中TGF-α、PCNA的含量明显增高(P0.01或P0.05);与模型组比较,艾灸穴位组大鼠胃黏膜中TGF-α、PCNA的含量较高(P0.01或P0.05);与艾灸穴位组比较,艾灸对照点组大鼠胃黏膜TGF-α、PCNA的含量较低(P0.01或P0.05)。结论:艾灸预处理通过增强急性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜中TGF-α、PCNA的表达,促进胃黏膜的增殖修复,且这一过程具有一定的穴位特异性。     

胃炎Ⅰ号对CAG大鼠胃黏膜MMP1与TIMP1 mRNA表达的影响

目的 研究胃炎I号对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃黏膜MMP1和TIMP1 mRNA表达的影响,探讨胃炎Ⅰ号对CAG大鼠胃黏膜损伤的疗效作用机制。方法 将SD大鼠随机分为正常对照组和造模组,参照文献制造CAG模型;造模成功后采用胃炎Ⅰ号煎剂高中低剂量（2.16,1.08,0.54 9·kg-1）及维酶素(0.86g·kg-1)治疗CAG模型大鼠,实时荧光定量PCR技术检测MMP1及TIMP1 mRNA表达。结果 与正常对照组比较,CAG组大鼠胃黏膜MMP1 mRNA表达降低(P＜0.05),TIMP1 mRNA表达无明显变化(P＞0.05);各治疗组与模型组比较,中剂量胃炎Ⅰ号组对CAG大鼠胃黏膜病变疗效最佳,可提高MMP1 mRNA表达(P＜0.05)。结论 CAG大鼠胃黏膜MMP1 mRNA表达水平下降,TIMP1 mRNA的表达未见明显异常,可能是慢性萎缩性胃炎的病理机制之一：胃炎I号可提高胃黏膜组织的MMP1 mRNA表达,有助于胃黏膜组织的修复,则是其治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制之一。     

热敏灸对骨质疏松大鼠血生化表达的影响

目的 研究热敏灸对骨质疏松大鼠血钙、血磷离子表达的影响,探讨热敏灸治疗骨质疏松的作用机理.方法 空白对照组(正常组)、单纯造模组(对照组)及热敏灸造模组(治疗组)各20只,其中对照组及治疗组用自制大鼠固定架固定,正常组与对照组不做艾灸治疗,治疗组进行命门、肾俞、足三里等敏感部位热灸治疗.用全自动生化分析仪进行血钙、血磷...     

热敏灸对肠易激综合征模型大鼠HPA轴调节机制的研究

目的:观察热敏灸对肠易激综合征(IBS)大鼠促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)的影响,探讨热敏灸治疗IBS的可能作用机制。方法:56只SD雄性大鼠按随机数字表随机分为空白组(8只)、模型组(8只)、艾灸组(32只)和米非司酮组(RU-486组,8只)。空白组正常饲养,模型组、RU-486组与艾灸组采用慢性不可预见性刺激法建立IBS模型,造模21 d。造模结束后,艾灸组灸"命门"穴,每日1次,每次40 min,共14 d,每隔5 min检测大鼠尾温并记录,根据大鼠尾温变化分热敏灸组和非热敏灸组,两组各随机抽取8只;RU-486组予RU-486灌胃处理,空白组、模型组与艾灸组灌服同等换算体积0.9%Na Cl溶液14 d。观察各组大鼠一般状况、体质量、行为学、小肠推进率、内脏敏感性变化,ELISA法检测大鼠血清CRH、ACTH、CORT含量,光学显微镜观察结肠形态学变化。结果:(1)造模后,大鼠表现为静卧少动、神态怠倦、毛发枯槁、耳郭色泽变暗淡、粪便时干时稀等;体质量增长缓慢;大鼠穿格数、站立数明显减少;内脏敏感性增高、小肠推进率下降;结肠组织显微镜下未见明显炎性细胞浸润。(2)干预后,与空白组相比,RU-486组体质量、内脏敏感性差异无统计学意义(均P0.05),但小肠推进率明显下降(P0.01);干预后,热敏灸组与非热敏灸组体质量低于空白组(均P0.01),但内脏敏感性、小肠推进率与空白组比较差异无统计学意义(均P0.05)。与模型组相比,RU-486组干预后体质量升高、内脏敏感性改善(P0.05,P0.01),但小肠进率方面差异无统计学意义(P0.05);热敏灸组与非热敏灸组干预后体质量、内脏敏感性、小肠推动率均明显优于模型组(P0.05,P0.01),且热敏灸组在体质量、小肠推动率方面优于非热敏灸组(均P0.05)。(3)与空白组相比,模型组血清CRH、ACTH、CORT均升高(P0.05,P0.01);与模型组相比,热敏灸组干预后血清CRH、ACTH、CORT含量均降低(P0.05,P0.01),非热敏灸组血清CRH、ACTH含量均降低(P0.05,P0.01),RU-486组血清CRH含量降低,而ACTH、CORT含量明显升高(P0.05,P0.01)。与非热敏灸组相比,热敏灸组干预后CRH含量降低(P0.05),ACTH、CORT含量比较差异无统计学意义(均P0.05)。结论:热敏灸可能通过调节下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴),降低血清CRH、ACTH、CORT含量,改善胃肠运动功能,从而达到治疗IBS的目的。     

香砂六君子汤对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜相关因子水平的影响

目的观察香砂六君子汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃黏膜诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)表达及下游一氧化氮(NO)、P选择素(SELP)、白细胞内皮细胞黏附分子-1(LECAM-1)、内皮素-1(ET-1)含量的影响,探讨其治疗CAG的分子机制。方法将SPF级健康Wistar大鼠120只随机分为空白组和造模组,造模组大鼠采用综合法(MNNG+雷尼替丁+饥饱失常法)复制CAG模型,成模后按随机数字表法将其分为模型组、维酶素组和香砂六君子汤高、中、低剂量组。模型组和空白组每日给予2 mL蒸馏水灌胃,香砂六君子汤高、中、低剂量组分别给予24、12、6 g/(kg·d)香砂六君子汤药液灌胃,维酶素组给予0.3g/(kg·d)维酶素连续灌胃,连续120d。观察大鼠一般生存状况和胃黏膜病理学变化,采用RT-qPCR、Western blot分别检测CAG大鼠胃黏膜组织i NOS、e NOS基因和蛋白的表达,采用ELISA检测大鼠胃黏膜组织NO、SELP、LECAM-1、ET-1含量。结果与空白组比较,模型组大鼠一般生存状况相对较差,胃黏膜变薄,固有层腺体减少,腺体疏松、排列不规则,散在大量炎性细胞浸润,i NOS基因和蛋白表达显著升高,e NOS基因和蛋白表达显著降低,胃黏膜组织NO、SELP、LECAM-1、ET-1含量显著升高,差异均有统计学意义(P0.05);与模型组比较,香砂六君子汤高、中、低剂量组和维酶素组大鼠一般生存状况不同程度改善,胃黏膜仍较薄,固有层腺体增多,炎性细胞浸润减轻,胃黏膜组织e NOS基因和蛋白表达显著升高,i NOS基因和蛋白表达显著降低,NO、SELP、LECAM-1、ET-1含量显著降低,其中香砂六君子汤高剂量组差异有统计学意义(P0.05)。结论香砂六君子汤可能通过下调CAG大鼠胃黏膜组织iNOS表达、上调eNOS表达,达到抑制下游因子NO、SELP、LECAM-1、ET-1分泌,进而调节CAG大鼠胃黏膜炎性微环境的稳态,发挥保护胃黏膜作用。     

基于NF-κB信号通路探讨热敏灸治疗膝骨性关节炎兔模型的效应机制

目的:观察热敏灸对KOA兔模型核因子κB亚基p65/p50(Nuclear factor κB-p65/p50,NF-κB p65/p50)、白介素-1β(lniierleukin-1β,IL-1β)、Ⅱ型胶原的影响,探讨热敏灸治疗KOA的作用机制。方法:42只雄性日本长耳兔按随机数字表随机分为空白组(6只)、模型组(6只)、艾灸组(24只)、假手术组(6只)。空白组正常饲养,模型组与艾灸组采用木瓜蛋白酶注射膝关节建立KOA模型,假手术组采用腔内注射生理盐水造模,每日强迫活动30min,造模15天。造模结束后,艾灸组艾灸犊鼻穴,每日1次,每次40min,共14天,根据家兔艾灸过程中温度变化分为热敏灸组和非热敏灸组,两组各随机抽取6只;空白组、模型组、假手术组正常饲养,不予任何干刺激。治疗结束后,采用放射免疫法检测IL-1β含量,Real-time PCR检测法检测软骨NF-κB p65/p50、Ⅱ型胶原。结果:(1)与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组血清、关节炎IL-1β表达均升高,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);与模型组相比,热敏灸组、非热敏灸组、假手术组表达均明显偏低(P0.05,P0.01);与非热敏灸组相比,热敏灸组表达明显偏低(均P0.05)。(2)与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组NF-κB p65/p50表达均升高,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);与模型组相比,热敏灸组、非热敏灸组、假手术组表达均明显降低(P0.01);与非热敏灸组相比,热敏灸组表达明显降低(均P0.05)。(3)与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组Ⅱ型胶原表达均下降,差异有统计学意义(均P0.01);与模型组相比,热敏灸组、非热敏灸组、假手术组表达均明显升高(均P0.01);与非热敏灸组相比,热敏灸组表达明显升高(P0.05)。结论:热敏灸可能通过抑制NF-κB信号通路,减少炎症反应、保护关节软骨从而达到治疗KOA的目的。     

热敏灸对肠易激综合征大鼠内脏敏感性、小肠推进率及血清CGRP、ET的影响

目的:观察热敏灸对肠易激综合征(IBS)大鼠内脏敏感性、小肠推进率及血清降钙素基因相关肽(CGRP)、内皮素(ET)的影响,探讨热敏灸治疗IBS的可能作用机制。方法:48只SD雄性大鼠按随机数字表随机分为空白组(8只、A组)、模型组(8只,B组)、艾灸组(32只),A正常饲养,B组与艾灸组采用慢性不可预见性刺激法建立IBS模型,造模21d。造模结束后,艾灸组灸命门穴,每日1次,每次40min,每隔10min检测大鼠尾温并记录,根据大鼠尾温变化分热敏灸组(C组)和非热敏灸组(D组),两组各随机抽取8只。共14d,A、B组正常饲养。治疗前后检测大鼠内脏敏感性。治疗结束后,行小肠推进率实验并腹主动脉取血。结果:与A组相比,B组内脏敏感性、小肠推进率差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);与B组相比,C、D组小肠推进率、内脏敏感性均有统计学意义(P0.05,P0.01)。与A组相比,B组血清CGRP、ET水平均下降明显(P0.01);与B组相比,C、D组血清CGRP水平偏高,C组血清ET升高明显,差异明显(P0.01);与D组相比,C组血清ET水平较高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:与传统艾灸相比,热敏灸治疗IBS疗效更佳。热敏灸可调节IBS大鼠血清CGRP、ET表达,改善大鼠胃肠动力、内脏敏感性。     

艾炷灸对衰老小鼠学习记忆力及胰岛素水平的影响

目的:观察艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆及血清、脑组织胰岛素(INS)水平的影响。方法:将75只小鼠随机分为对照组、造模组、艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组,每组15只。艾灸1组艾炷灸足三里穴+悬钟穴,艾灸2组艾炷灸百会穴+关元穴,艾灸3组艾炷灸腕背关节上1mm与膝髌正中上沿上2mm。用Morris水迷宫测试学习记忆力,用酶联免疫法检测血清及脑组织INS水平。结果:治疗前各组小鼠水迷宫各项指标及学习记忆能力比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗后,造模组与对照组、艾灸1组、艾灸2组比较,各项指标差异均有统计学意义(P0.01或P0.05);对照组、艾灸1组、艾灸2组与艾灸3组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。造模组血清和脑组织INS水平较对照组、艾灸1组和艾灸2组升高或降低,差异均有统计学意义(P0.01或P0.05);对照组、艾灸1组、艾灸2组与艾灸3组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:艾炷灸足三里穴+悬钟穴、关元穴+百会穴均能显著提高D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力,与降低外周循环胰岛素水平、提高脑组织的胰岛素浓度有关,具有延缓脑衰老作用。     

热敏灸对骨质疏松大鼠ALP表达的影响

目的 研究热敏灸对骨质疏松大鼠ALP表达的影响,探讨敏感有效穴位治疗骨质硫松的作用机理,发展热敏灸的治疗范围,为热敏灸治疗骨质疏松症提供可靠的实验依据.方法 空白对照组(正常组)、单纯造模组(对照组)及热敏灸造模组(治疗组)各20只,其中对照组及治疗组用自制大鼠固定架固定,正常组与对照组不做艾灸治疗,治疗组进行命门、肾俞、足三里等敏感部位热灸治疗.结果 6个疗程后,对照组及治疗组碱性磷酸酶(ALP)表达均上升,但对照组与正常组差异无统计学意义(P>0.05),治疗组与正常组比较有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 热敏灸能够提高骨质疏松大鼠ALP的活性,对成骨细胞活动性及骨重建活跃性有重要作用.     

隔物灸调控缺氧诱导因子-1α表达抑制慢性萎缩性胃炎大鼠糖酵解的机制研究

目的：观察慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃黏膜组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及糖酵解关键酶表达变化,探究隔物灸对CAG的作用及可能机制。方法：将雄性Wistar大鼠随机分为正常组和造模组,自由饮用170 mg/L浓度MNNG联合法进行CAG大鼠造模。鉴定模型成功后,造模组大鼠随机分为模型组、隔药饼灸组、隔姜灸组和西药组,每组6只。隔药饼灸组、隔姜灸组均取中脘、气海穴进行隔物灸干预,西药组给予叶酸悬浊液灌胃。采用HE染色法观察胃窦组织病理学变化,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测胃黏膜组织信号转导及转录激活因子3(STAT3)、丙酮酸激酶M2(PKM2)和HIF-1α的mRNA表达水平,免疫组织化学法检测胃黏膜组织STAT3、HIF-1α蛋白表达,比色法和ELISA法测定胃黏膜组织LDH、PKM2活性。结果：与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜组织固有腺体结构紊乱,腺体减少,出现萎缩、肠化、假幽门腺化生和(或)异型增生。模型组大鼠胃黏膜组织HIF-1α、STAT3、PKM2 mRNA表达上调(P<0.05),STAT3、HIF-1α蛋白表达增加(P<0.05),LDH...     

热敏灸对肠易激综合征模型大鼠下丘脑CRH、CRF及肾上腺GR的影响

目的:观察热敏灸对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)大鼠下丘脑促肾上腺皮质释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)、促肾上腺皮质激素释放因子(corticotropin releasing factor,CRF)和肾上腺糖皮质激素受体(glucocorticoid reccptor,GR)的影响,探讨热敏灸治疗IBS的可能作用机制。方法:50只SD雄性大鼠按随机数字表随机分为空白组(6只)、模型组(6只)、艾灸组(32只),米非司酮(Mifepristone,RU-486)组(6只),空白组正常饲养,模型组、RU-486组与艾灸组采用慢性不可预见性刺激法建立IBS模型,造模21 d。造模结束后,艾灸组灸命门穴,每日1次,每次40 min,共14天,每隔10 min检测大鼠尾温并记录,根据大鼠尾温变化分热敏灸组和非热敏灸组,两组各随机抽取6只;RU-486组RU-486灌胃处理,空白组与艾灸组灌服同等换算体积生理盐水14 d。观察各组大鼠行为学变化。治疗结束后取下丘脑、肾上腺,-80℃保存待检。结果:(1)与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、RU-486组CRF、CRH表达差异均明显升高(P0.05,P0.01);与模型组相比,热敏灸组、非热敏灸组表达均明显偏低(P0.05,P0.01),RU-486组表达升高(P0.05,P0.01);与热敏灸组相比,非热敏灸组、RU-486组表达明显均升高(P0.05,P0.01)。(2)与空白组相比,模型组、非热敏灸组、RU-486组GR表达均下降,差异均有统计学意义(均P0.01),热敏灸组表达无明显差异;与模型组相比,热敏灸组表达偏高,差异有统计学意义(P0.05),RU-486组表达偏低(P0.01),非热敏灸组无明显差异;与热敏灸组相比,非热敏灸组、RU-486组表达均偏低(P0.05,P0.01)。结论:热敏灸可能通过改善GR表达,恢复对HPA轴的负反馈作用,从而达到治疗IBS的目的。