去卵巢骨质疏松大鼠骨组织OPG/RANKLmRNA动态表达研究

目的:建立去卵巢大鼠骨质疏松症动物模型,检测造模成功后不同时期大鼠胫骨OPG/RANKLmRNA表达量及血清雌二醇水平,分析OPG/RANKLmRNA表达变化规律。方法:选取3月龄雌性SD大鼠60只随机分为2组即去卵巢组与对照组,每组30只。去卵巢组去除双侧卵巢,对照组仅去除腹腔少许脂肪。分别在造模12周后0个月、6个月、12个月每组随机处死10只,检测不同时期大鼠胫骨OPG/RANKLmRNA表达量及血清雌二醇水平。采用SPSS 17.0软件进行统计,分析数据,得出结论。结果:与对照组相比,去卵巢组胫骨OPGmRNA表达量、血清雌二醇浓度在各时间点上均显著降低(P<0.05),RANKLmRNA表达量则显著增高(P<0.05);去卵巢组0个月与6个月、6个月与12个月比较,胫骨OPGmRNA表达量及血清雌二醇浓度下降,差异具有统计学意义(P<0.05),RANKLmRNA表达量增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:造模成功后12个月内,去卵巢大鼠胫骨骨组织OPGmRNA表达量持续减少,血清雌二醇浓度均持续降低,RANKLmRNA持续高表达,OPG/RANKL比值缩小。     

内热针疗法对兔膝骨性关节炎软骨下骨中骨保护素及核因子κB受体活化因子表达的影响

目的:观察内热针疗法对兔膝骨性关节炎(KOA)软骨下骨中骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、核因子κB受体活化因子(RANK)表达的影响,探讨内热针治疗KOA的作用机制.方法:将30只新西兰兔随机分为空白组、模型组和治疗组,每组10只.采用Hulth法建立兔KOA模型.治疗组给予兔内热针治疗,...     

盘龙七片调节骨保护素/核因子κB受体活化因子配体信号通路对去卵巢骨质疏松大鼠的影响

目的:探讨盘龙七片对去卵巢骨质疏松大鼠骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路的影响.方法:75只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药物对照组(17β-雌二醇,1 mg/kg)、盘龙七片低剂量组(0.26 g/kg)、盘龙七片高剂量组(1.29 g/kg),每组15只,除假手术组外,...     

五味子对去卵巢致骨质疏松大鼠胫骨护骨素、核因子-кB受体活化因子配体蛋白表达的影响

目的 探讨五味子对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理.方法 将59只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组及五味子组,其中五味子组11只,其余每组12只.摘除大鼠双侧卵巢1个月后,五味子组灌服五味子水煎剂(lg/ml),阳性对照组予己烯雌酚(0.008mg/ml)灌胃3个月(5.6m1/kg).对不脱钙骨切片进行形态计量并检测胫骨成骨细胞(OB)和骨髓基质细胞(MSC)中护骨素(OPG)、核因子-кB受体活化因子配体(RANKL)蛋白表达.结果 五味子组大鼠胫骨骨小梁体积百分比较模型组显著增高,除骨皮质类骨质平均宽度外,骨小梁吸收表面百分比、骨小梁形成表面百分比、骨小梁矿化率术较模型组均显著降低,OB及MSC中OPG蛋白表达明显增高(P＜0.05或P＜0.01),OB中RANKL蛋白表达明显降低(P＜0.05).结论 五味子对卵巢切除大鼠骨质疏松症治疗作用机理之一是通过促进OB和MSC中OPG的分泌,使之与RANKL的结合增多,进而抑制破骨细胞的活性.     

姜黄素对佐剂性关节炎大鼠血清骨保护素和核因子κB受体活化因子配体蛋白表达及骨密度的影响

目的观察姜黄素对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠血清骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)表达以及骨密度的影响,探讨姜黄素防止类风湿关节炎(rhuematoid arthritis,RA)骨破坏的作用机制。方法取SD大鼠30只,随机分为模型组、姜黄素组及正常组,第28天腹主动脉取血,采用ELISA法来检测血清中RANKL、OPG蛋白的表达,取血后处死大鼠,剥离大鼠右侧胫骨,行骨密度检查。结果 (1)与正常组比较,造模组即模型组与姜黄素组大鼠血清RANKL均显著升高(P0.01),血清OPG显著降低(P0.01),RANKL/OPG比值显著升高(P0.01);(2)与模型组比较,治疗组即姜黄素组血清RANKL显著降低(P0.01),血清OPG均显著升高(P0.01),RANKL/OPG比值均显著降低(P0.01);(3)3组大鼠胫骨整体骨密度无显著性差异(P0.05),姜黄素组大鼠兴趣区骨密度值显著高于模型组(P0.01)。结论姜黄素对AA大鼠具有良好的治疗作用,能够通过调节血清RANKL及OPG的表达,来调节OPG/RANKL通路,从而提高AA大鼠骨密度,抑制其骨丢失。     

通络生骨胶囊对大鼠应力缺失性骨质疏松的防治作用

目的:探讨通络生骨胶囊对大鼠应力缺失性骨质疏松模型的改善作用。方法:40只大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,通络生骨胶囊低(0.6 g·kg-1)、高剂量(1.2 g·kg-1)组,除正常对照组外,利用鼠尾悬吊模型制备大鼠应力缺失性骨质疏松模型,药物组在造模同时给与通络生骨胶囊。造模21 d,采血,测定血清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶,钙含量;处死动物,取其胫骨及股骨,切片,观察骨形态变化。结果:空白对照组,模型对照组,通络出骨胶囊低、高剂量组碱性磷酸酶含量分别为:430.6,355.4,485.6,417.3 U·L-1;酸性磷酸酶含量分别为13.63,8.96,7.02,8.60 U·L-1,血钙含量分别为1.357,1.142,1.186,1.149 mmol·L-1;血清总钙含量分别为2.455,2.162,2.362,2.286 mmol·L-1;骨小梁面积分别为0.0049,0.0033,0.0035 mm2,成骨细胞个数分别为11.8,7,12.5,9.2个;骨小梁个数分别为6.1,4.2,4.6,5.3个。与正常对照组比较,模型组碱性磷酸酶含量,血清离子钙,血清总钙浓度均显著下降,模型组骨小梁面积百分比、成骨细胞个数、骨小梁厚度及骨小梁个数均显著降低,骨小梁间距显著升高;与模型组比较,通络生骨胶囊低、高剂量组显著升高血清碱性磷酸酶含量,骨小梁面积,成骨细胞个数以及骨小梁个数,增加了骨小梁厚度,高剂量组作用更为显著。结论:通络生骨胶囊可用于应力缺失性骨质疏松防治。     

仙灵骨葆胶囊对去卵巢骨折大鼠骨折端骨微结构的影响及OPG/RANKL信号调控机制

目的 研究仙灵骨葆胶囊对去卵巢大鼠骨折端骨微结构的影响及骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配基(RANKL)信号调控机制.方法 从48只Sprague-Dawley雌鼠中随机挑出40只切除双侧卵巢,恢复性饲养6周后建立股骨骨折内固定模型,建模大鼠随机分为模型组,阳性对照组及仙灵骨葆胶囊高、中、低剂量组,余下8只...     

益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

目的：观察益骨胶囊治疗用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织Ⅰ型胶原mRNA表达的影响，以探讨益骨胶囊治疗骨质疏松症的可能机理。方法：36只10月龄SD雌性大鼠随机抽取12只为假手术组，剩余24只待手术造馍后随机分为2组：模型组、益骨胶囊组；以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型：采用RT—FQ—PCR方法检测骨组织Ⅰ型胶原mRNA的表达。结果：益骨胶囊组骨组织Ⅰ型胶原mRNA表达明显高于模型组（P〈0．05），与假手术组相近（P〉0．05）。结论：益骨胶囊能促进骨组织Ⅰ型胶原mRNA基因表达。     

基于核因子-κB受体活化因子受体/骨保护素探讨复方雷公藤外敷剂改善Ⅱ型胶原诱导型关节炎模型大鼠骨破坏

目的:观察复方雷公藤外敷剂对Ⅱ型胶原诱导型关节炎模型大鼠的骨形态学影响,探讨其可能的作用机制。方法:将50只雌性SD大鼠随机分为正常组(NOR组)、模型组(CIA组)、复方雷公藤外敷剂组(TWE组)、雷公藤多苷组(TWG组)、扶他林乳胶剂组(VOT组),每组10只。除NOR组外,对其余大鼠进行尾根部皮下注射Ⅱ型胶原诱导,7 d后加强免疫造模。TWE组以0.60 g/(kg·d)外用、TWG组6.25 mg/(kg·d)灌胃、VOT组乳胶剂0.016 mL/(kg·d)外用,NOR组与CIA组以生理盐水涂抹膝踝关节,连续给药28 d。观察大鼠一般状态、双下肢肿胀程度;观察各组膝、踝关节病理形态,借助微型计算机断层扫描(micro-CT)观察骨质改变,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定、蛋白免疫印迹法(Western Blot)观察外周血及组织骨破坏与骨保护相关因子与蛋白表达。结果:与NOR组比较,CIA组一般状态不佳,关节炎评分与足趾容积均显著增高,micro-CT显示踝关节、跖趾关节破坏严重,血清MMP1、MMP13、RANKL显著增高,滑膜组织中RANKL/OPG显著升高。与CIA...     

巴戟天寡糖对绝经后骨质疏松大鼠血清骨转化指标和骨组织结构的影响及其机制研究

目的 探究巴戟天寡糖对绝经后骨质疏松模型大鼠血清骨转化指标和骨组织结构的影响及可能机制。方法 50只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药物对照组(阿仑膦酸钠,7 mg/kg)、巴戟天寡糖低剂量组(25 mg/kg)、巴戟天寡糖高剂量组(75 mg/kg),每组10只,除假手术组外,其余各组大鼠构建绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis, PMOP)大鼠模型并给予不同药物干预处理后,测定各组大鼠中血清骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase, BALP)、I型前胶原氨基端延长肽(procollagen type 1 N-terminal propeptide, P1NP)、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(tartrate resistant acid phosphatase-5b, TRACP-5b)、Ⅰ型胶原C-末端肽交联(C-terminal telopeptide of type 1 collagen, CTX-1)水平,通过双能X线骨密度分析仪对大鼠腰椎骨密度进行检测,采用微计算机断层扫描技术对股骨远端骨微结构进行分析,三...     

生骨胶囊对大鼠骨折模型的影响研究

目的:研究生骨胶囊对骨折的治疗作用,并对其作用机理作初步探讨。方法:在大鼠股骨中下段1/3交界处造成其骨折,连续给药,分别于给药后10、20及30天测定骨折处矿物密度,病理组织学分析骨折部位修复组织软骨化及骨化的程度,同时研究其血小板、血浆黏度等血液流变学指标。结果:连续给予生骨胶囊10、20及30天后,生骨胶囊组的骨密度增加,与模型组比较有显著性差异;病理组织学结果显示,损伤后骨组织于10、20及30天给药组的组织学形态都有所增生修复,并且骨化程度较好;给药后生骨胶囊可以抑制血小板的聚集性,对全血黏度及血浆黏度无影响。结论生骨胶囊可以加快骨矿沉积速率,提高骨密度,促进大鼠骨损伤的愈合。     

强骨饮对骨质疏松症老年女性患者血清炎症细胞因子、骨保护素、核因子κB受体活化因子配体及骨密度的影响

目的:观察口服中药强骨饮对骨质疏松症老年女性患者血清炎症细胞因子、骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)及骨密度(BMD)的影响.方法:将符合要求的60例老年女性骨质疏松症患者随机分为观察组和对照组,对照组予以口服阿仑膦酸钠维D3片治疗,观察组予以口服中药强骨饮治疗,两组同时给予相同剂量阿法骨化醇...     

补肾通络方对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨组织RANKL/OPG基因表达的影响

目的:研究补肾通络方对去卵巢骨质疏松模型大鼠细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)基因表达的影响,探讨补肾通络方治疗原发性骨质疏松症的分子机制.方法:通过卵巢去势的方法造成大鼠骨质疏松模型,造模后随机分为6组:假手术组、模型组、仙灵骨葆组(5.0 g·kg-1)、补肾基础组(5.4 g·kg-1)、通络组(0.9 g·kg-1)、补肾通络组(6.3 g·kg-1).ig给药,1次/d,共10周.治疗10周后,在无菌条件下取出大鼠L3椎体,剔除软组织及骨膜,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测骨组织RANKL/OPG基因mRNA的表达.结果:与模型组相比,补肾通络组、补肾基础组、通络组RANKL mRNA表达明显下降,RANKL/OPG明显下降(P＜0.01),3组间比较,补肾通络组的干预作用明显优于补肾基础组与通络组(P＜0.05).结论:补肾通络方治疗原发性骨质疏松症的作用机制可能与调控RANKL mRNA表达,改善RANKL/OPG,从而抑制破骨细胞活性,降低骨吸收有关.     

肾骨胶囊对维甲酸所致大鼠骨质疏松的影响

目的：观察肾骨胶囊对维甲酸所致大鼠骨质疏松的影响。方法：采用连续ig维甲酸14d造成大鼠骨质疏松模型，观察肾骨胶囊对大鼠体重，股骨重量、长度、直径以及骨密度的影响；对大鼠血清钙、磷、碱性磷酸酶含量的影响以及对股骨组织形态学的影响。结果：肾骨胶囊高、中剂量均能对抗维甲酸所致的骨质疏松模型大鼠的体重下降；高剂量有增加大鼠股骨重量、长度、直径的趋势；高、中、低剂量均明显升高血钙，高剂量且明显升高血磷；高、中剂量组大鼠的股骨组织形态基本为正常骨骺组织，个别动物骨小梁减少，排列疏散。结论：肾骨胶囊具有一定的抗骨质疏松作用。     

密固达对骨质疏松大鼠骨保护素表达的影响

目的：观察骨质疏松形成过程中骨保护素（0steoprotegerin,OPG）的表达,探讨密固达对该过程OPG表达的影响。方法：6月龄雌性大鼠40只,制备骨质疏松模型后,随机分为密固达治疗组、生理盐水对照组,并分别于术后第1个月、2个月、3个月、4个月取腰椎骨痂,通过RT—PCR检测各组骨痴OPG表达。结果：去势雌鼠在骨质疏松形成的不同时间点,其OPG表达渐减弱,密固迭能增加OPG表达（P〈0．05）。结论：雌鼠去势后在发生骨质疏松过程中成骨细胞活性降低,OPG表达减少,密固达能促进骨质疏松大鼠OPG表达。     

加味四君子汤对阿霉素肾病大鼠骨代谢的影响

目的 探讨加味四君子汤对泼尼松干预的阿霉素肾病大鼠骨代谢的影响。方法 制作大鼠阿霉素肾病模型, 将50只SD大鼠随机分为5组,即模型组、激素组、中药组、中药加激素组及正常组。各组于造模后7、21、35天收集24 h尿标本,以双缩脲比色法测定大鼠24 h尿蛋白,以ELISA法测定各组血清骨保护素（osteoprotegerin,OPG）、核因子κB受体活化因子配体（receptor activator for NF-κB ligand,RANKL）、骨钙素（osteocalcin,BGP）以及抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase,TRACP）水平,采用实时定量PCR和Western blot检测胫骨组织中OPG、RANKL的表达。结果（1）与正常组比较,模型组第7、21、35天24 h尿蛋白均有不同程度增高（P<0.05, P<0.01）;与模型组同期比较,激素组及中药加激素组24 h尿蛋白均有不同程度下降,差异有统计学意义（P<0.05, P<0.01）;并随着治疗时间的延长,降低更明显（P<0.05, P<0.01）;中药组治疗35天,与模型组比较,差异亦有统计学意义（P<0.05）。（2）与本组21天比较,激素组TRACP、RANKL均明显升高（P<0.05, P<0.01）;与模型组比较,第21、35天,激素组TRACP、RANKL均升高（P<0.05, P<0.01）, OPG、BGP均降低（P<0.05, P<0.01）;与中药组同期比较, 激素组、中药加激素组OPG均降低, RANKL均升高（P<0.05, P<0.01）;且激素组TRACP升高,BGP降低（P<0.05, P<0.01）;与激素组同期比较,中药加激素组OPG、BGP升高（P<0.05, P<0.01）,RANKL降低（P<0.01）;第35天,TRACP降低（P<0.01）。（3）与正常组比较,模型组第21天OPG、RANKL mRNA升高（P<0.05, P<0.01）,第35天OPG、RANKL mRNA降低（P<0.01）。与中药组同期比较,激素组OPG mRNA降低（P<0.01）,RANKL mRNA升高（P<0.05）;中药加激素组OPG mRNA降低（P<0.05）。（4）与本组21天比较,激素组OPG降低（P<0.05）,RANKL升高（P<0.05）,中药加激素组RANKL降低（P<0.05）。 与模型组同期比较,激素组OPG降低（P<0.01）,RANKL升高（P<0.01）。 与中药组同期比较,激素组、中药加激素组OPG均降低（P<0.01）,RANKL均升高（P<0.01）;与激素组同期比较, 中药加激素组OPG均升高（P<0.01）,RANKL均降低（P<0.01）。结论 泼尼松能通过OPG/RANKL/RANK通路诱导骨质疏松。加味四君子汤在降蛋白尿的同时,可通过上述通路促进成骨细胞分化,抑制破骨细胞生成,从而减缓泼尼松诱导的骨质疏松的形成。     

护骨胶囊对骨质疏松大鼠五脏和胸腺的影响

目的:建立去势雌性大鼠骨质疏松模型,探讨护骨胶囊对骨质疏松大鼠主要脏器的影响。方法:将50只雌性大鼠随机分为5组:假手术组(Sham组)、卵巢切除组(OVX组)和护骨胶囊低剂量组(HG-L组)、护骨胶囊中剂量组(HG-M组)、护骨胶囊高剂量组(HG-H组)。卵巢切除手术后2天开始给药,每天1次,共计3个月,取大鼠主要脏器称重及组织学观察分析。结果:与Sham组相比,OVX组大鼠脾脏重量明显增加,胸腺重量明显下降;与OVX组相比,HG-M组脾脏和HG-L组胸腺重量明显增加;与Sham组相比,OVX组心、肝、脾、肾脏和胸腺的组织形态无明显变化,而肺脏有轻度变化;与OVX组相比,各药物组脾、肝、肺、肾脏和胸腺未见明显病理改变,心脏有轻微改变。结论:护骨胶囊治疗3个月后,卵巢切除大鼠主要脏器的组织形态未发生明显病理改变,提示护骨胶囊的临床用药安全性。     

生脉成骨胶囊防治维甲酸所致骨质疏松的实验研究

以维甲酸诱导制作成SD纯种大鼠骨质疏松模型,灌服生脉成骨胶囊,以观察生脉成骨胶囊对维甲酸所致骨质疏松作用的防治效果。结果显示模型组灌服维甲酸8周后,与对照组相比骨丢失有显著差异（P＜0．001）,生脉成骨胶囊组骨丢失较模型组明显减轻（P＜0．05或P＜0．01）,模型组的血清磷与对照组相比,有显著减低（P＜0．001）,生脉成骨胶囊组的血清磷与模型组相比有显著增高（P＜0．001）,表明生脉成骨胶囊对维甲酸所致骨质疏松症有明显防治效果。     

多发性骨髓瘤患者骨髓骨硬化蛋白和核因子-κB受体活化因子表达及临床意义

目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓上清液中骨硬化蛋白(Sclerostin)和核因子-κB受体活化因子(RANKL)表达水平及其临床意义。方法:收集2018年1月至2020年6月就诊的60例多发性骨髓瘤患者作为研究对象,基于国际分期系统(ISS)分期将多发性骨髓瘤患者分为ISSⅠ期、Ⅱ期和Ⅲ期,其中ISSⅠ期患者18例,ISSⅡ期患者23例,ISSⅢ期患者19例。同时将同期通过骨髓穿刺证明其骨髓功能正常且无血液系统病症的58例健康人群作为对照组。收集整理多发性骨髓瘤患者的年龄、性别、体重指数、校正血钙、骨损伤、C反应蛋白和乳酸脱氢酶等临床病理资料,检测并对比多发性骨髓瘤组和对照组骨髓骨硬化蛋白及RANKL表达水平。分析不同ISS分期的多发性骨髓瘤患者骨髓骨硬化蛋白和RANKL表达水平;采用Pearson等级相关分析多发性骨髓瘤患者骨髓骨硬化蛋白和RANKL表达水平相关性;采用Kaplan-Meier法分析骨髓骨硬化蛋白和RANKL表达水平与多发性骨髓瘤患者3年生存率的关系。结果:与对照组相比,多发性骨髓瘤组骨髓骨硬化蛋白和RANKL表达水平均显著升高(P<0.05)。多发性骨...