四君子汤总多糖对免疫抑制小鼠肠道sIgA的影响及其机制研究

目的初步探讨四君子汤总多糖对小鼠肠道黏膜体液免疫功能的影响。方法取NIH小鼠随机分为正常对照组、模型组、四君子汤总多糖(SJZPS)组和四君子汤去蛋白多糖(SJZFP)组,采用ELISA法检测小鼠小肠sIgA浓度,流式细胞(FCM)技术检测Peyer's结细胞表型,免疫组化法检测小鼠肠道TLR4的表达。结果模型组sIgA浓度小于正常对照组、SJZPS和SJZFP组,差异具有显著性(P0.01);模型组CD19+细胞比例下降,与正常对照组比较,具有非常显著性差异(P0.01),SJZPS和SJZFP组CD19+细胞比例上升,与模型组比较,具有非常显著性差异(P0.01);模型组肠黏膜TLR4蛋白表达明显低于正常对照组,SJZPS和SJZFP组,具有非常显著性差异(P0.01)。结论SJZPS和SJZFP可提高环磷酰胺抑制的体液免疫功能,具有肠道黏膜免疫调节作用。     

四君子汤复方总多糖对肠黏膜Peyer's结细胞凋亡的影响

目的 探讨四君子汤复方总多糖对小鼠肠黏膜Peyer's结细胞凋亡的影响.方法 取NIH小鼠随机分为正常组、模型组、四君子汤复方总多糖(SJZPS)组和四君子汤去蛋白多糖(SJZFP)组,肉眼计数Peyer's结细胞个数和面积,流式细胞(FCM)定量分析法(Annexin V 联合PI)测定Peyer's结细胞的凋亡率,免疫组化法测定Peyer's结细胞BCL-2蛋白的表达.结果 模型组Peyer's结个数和面积均小于正常组,与模型组比较,SJZPS组和SJZFP组Peyer's结个数和面积,均具有非常显著性差异(P＜0.01);模型组Peyer's结细胞凋亡率大于正常组,与模型组比较,SJZPS组和SJZFP组Peyer's结细胞凋亡率具有非常显著性差异(P＜0.01);模型组Peyer's结BCL-2蛋白表达低于正常组,与模型组比较,SJZPS组和SJZFP组Peyer's结BCL-2蛋白表达具有非常显著性差异(P＜0.01).结论 SJZPS和SJZFP均可抵抗肠黏膜Peyer's结细胞的凋亡,具有肠道黏膜免疫调节作用.     

无花果多糖对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：研究无花果多糖（FCPS）对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：采用荷瘤的方法建立免疫抑制小鼠动物模型,利用巨噬细胞吞噬中性红、MTT方法及淋巴细胞转化实验,迟发型超敏反应,检测无花果多糖对荷瘤小鼠反应的影响。结果：无花果多糖可提高荷瘤小鼠吞噬细胞的功能,增加抗体形成细胞数,促进淋巴细胞的转化。结论：无花果多糖具有免疫增强功能。     

四君子汤合用干扰素对荷瘤小鼠抑瘤率和免疫调节作用的影响

目的:观察四君子汤合用干扰素(LFN-γ)对荷瘤小鼠抑瘤率和免疫调节作用的影响。方法:建立小鼠HepA和S180肉瘤动物模型,随机分为对照组、环磷酰胺(CTX)组、四君子汤组、IFN-γ组、四君子汤合用WN-γ组,另设正常对照组。连续用药10天,计算抑瘤率,取脾脏测定免疫功能。结果:四君子汤与IFN-γ合用、四君子汤、IFN-γ均可以提高荷瘤小鼠抑瘤率,提高T淋巴细胞的转化率,增加IFN活性和IL-2、NK细胞活性。结论:四君子汤与IFN-γ合用对免疫调节作用有着明显影响,并可提高抑瘤率。     

针灸对CTX化疗荷瘤小鼠脾脏指数影响的研究

目的:观察针灸对CTX化疗荷瘤小鼠脾脏指数的影响,揭示针灸改善荷瘤小鼠化疗所致免疫功能损伤的机制之一。方法:成功植瘤后,按照荷瘤小鼠体重及白细胞数随机分为荷瘤模型组、荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组,1次性腹腔注射150 mg/kg CTX溶液,制备CTX荷瘤小鼠模型;荷瘤空白组腹腔注射同等剂量的生理盐水。模型成功后,分别对荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组进行针刺、艾灸治疗,荷瘤空白组、荷瘤模型组每日陪同抓取固定,不治疗。治疗3 d、5 d后的第2天取出脾脏,称重。结果:治疗3 d、5 d后,除荷瘤空白组外,其余各组荷瘤小鼠脾脏指数均降低,有显著性差异(P<0.05),与荷瘤模型组比,荷瘤针刺组、荷瘤艾灸组脾脏指数较高,有显著性差异(P<0.05)。结论:CTX化疗导致小鼠免疫功能损伤,脾脏指数降低,针刺和艾灸可以提高CTX化疗荷瘤小鼠的脾脏指数,对小鼠脾脏起到修复和保护作用,进而改善因CTX化疗后引起的免疫功能损伤。     

四君子汤复方总多糖对小鼠肠上皮间淋巴细胞的免疫调节作用

目的 初步探讨四君子汤复方总多糖对小鼠肠上皮间淋巴细胞(intestinal intraepithelial lymphocyte,ilEL)免疫功能的影响.方法 取NIH小鼠,按体重随机分为正常组、模型组、四君子汤复方总多糖(Polysaccharides of Si-Jun-Zi Decoction,SJZPS)组和四君子汤去蛋白多糖(Free protein of SJZPS,SJZFP)组,非连续密度梯度离心法提取iIEL,流式细胞(Flow Cytometry,FCM)技术检测iIEL中CD3+和CD69+细胞比例,ELISA法检测iIEL上清液的IFN-γ和IL-2浓度.结果 ilEL中CD3+细胞比例为88.46%;环磷酰胺可使iIEL中CD69+细胞比例下降,iIEL上清液中IFN-γ和IL-2浓度降低,与正常组比较,具有非常显著性差异(P<0.01);SJZPS和SJZFP组中iIEL的CD69+细胞比例以及IFN-γ和IL-2分泌水平明显升高,与模型组比较,具有显著性差异(P<0.05或P<0.01).结论 SJZPS和SJZFP均可提高环磷酰胺抑制的小鼠肠上皮间淋巴细胞的免疫功能,具有肠道黏膜免疫调节作用.     

无花果多糖预防性给药对荷瘤小鼠的影响

目的：观察无花果多糖对荷瘤小鼠的影响。方法：以荷S180实体瘤及艾氏腹水癌（EAC）实体瘤和腹水瘤小鼠为模型,在小鼠右肢腋部皮下或腹腔内接种活瘤细胞,荷瘤前10d连续灌胃给药,观察其抑瘤率、动物存活时间及免疫器官重量的变化。结果：无花果多糖能显著抑制肿瘤的生长,对荷瘤造成的脾和胸腺指数的降低有一定恢复作用。结论：无花果多糖预防性给药对实体瘤有明显的抑制作用。     

四君子汤对荷瘤小鼠抑瘤和诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的 :探讨四君子汤对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用 ,阐明该方抑瘤作用的可能机制。方法 :建立荷瘤小鼠(SRS- 82瘤株 )动物模型 ,用四君子汤煎剂灌胃。连续处理 15 d后 ,剥离瘤块称重并计算抑瘤率 ,在电镜下观察肿瘤细胞形态 ,并提取肿瘤细胞 DNA做琼脂糖凝胶电泳。结果 :四君子汤组与空白对照组比较 ,瘤重显著减轻 (P<0 .0 1)。电镜观察 ,四君子汤组的肿瘤切片大部分呈现坏死细胞的改变 ,未见有大量细胞发生凋亡特征性改变。琼脂糖凝胶电泳 ,四君子汤组电泳带未见到细胞发生凋亡的特征性 DNA梯状条带。结论 :四君子汤可以显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长 ,证明有明显的抑瘤作用。该方在体内没有诱导肿瘤细胞凋亡的作用 ,可能通过间接作用而发挥治疗肿瘤的效果     

四君子汤与环磷酰胺合用对荷瘤小鼠免疫功能的影响及抑瘤作用

用缸细胞c抽花环和免疫台物花环形成试验观察了四君于汤与环磷酰胺台用对sm荷瘤小鼠红细胞免疫功能的影响及抑瘤作用。结果显示：四君于两能增强小鼠虹细胞Cn花环形成率和血清中红细胞免疫粘附促进因子水平，降低免疫复合特花环形成率以荻免疫粘附抑帝制因子的水平，并能拮抗环辟酰胺的免疫抑制作用，增强环磷酰胺的抑瘤效应。     

四君子汤复方多糖肠道免疫调节作用及其机制研究进展

四君子汤复方多糖是四君子汤中含量最多的成分,具有肠道免疫调节作用。研究证实其在小肠派式结、肠系膜淋巴结、小肠上皮细胞及肠上皮内淋巴细胞等部位均能产生免疫应答,但作用机制不明。目前主要认为四君子汤复方多糖可以通过调节肠道菌群和多胺信号通路等发挥肠道免疫作用。总结近年四君子汤复方多糖对肠道免疫调节作用及其机制的相关研究进展,为深入探究四君子汤复方多糖的免疫作用机制及其临床的合理应用提供参考。     

四君子汤对衰老小鼠肝和大脑皮质影响的透射电镜观察

应用透射电镜观察了四君子汤对衰老小鼠的肝和大脑皮质超微结构的影响，结果表明四君子汤能明显改善衰老小鼠的肝和大脑皮质的超微结构，提示四君子汤通过补脾益气，使脏器不断得到气血滋养，纠正脏腑虚衰，促使机体健康长寿。     

四君子汤对小鼠膀胱癌化疗的减毒增效作用

目的 探讨中药四君子汤对小鼠膀胱癌化疗的减毒增效作用。方法 采用小鼠膀胱癌细胞接种于T739小鼠皮下,动物随机分为8组：对照组,丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)常规剂量组,MMC小剂量组,四君子汤大剂量组,四君子汤中剂量组,四君子汤小剂量组,联合用药(四君子汤大剂量+MMC常规剂量)A组,联合用药(四君子汤大剂量+MMC小剂量)B组;每组于接种癌细胞24h后分别给药;用药14天后分别检测各组小鼠的抑瘤率、腹腔巨噬细胞活性,观察小鼠荷瘤生存时间及治疗7天后血白细胞数的变化。结果 四君子汤大剂量组的荷瘤小鼠生存时间与对照组比较差异有显著性(P<0．05),而四君子汤中、小剂量组与对照组比较差异无显著性(P>0．05);MMC常规组的抑瘤率最高,但荷瘤生存时间与对照组比较差异无显著性(P>0．05);联合用药B组的小鼠荷瘤生存时间最长,达到(32．7±1．3)天,与其他各组比较差异均有显著性(P<0．05);联合用药B组除抑瘤率低于MMC常规组及联合用药A组,血白细胞数及巨噬细胞活性均优于MMC各剂量组及联合用药A组,差异均有显著性(P<0．05)。结论 四君子汤联合小剂量MMC化疗可以有效抑制小鼠膀胱肿瘤生长,具有增效减毒之作用。     

瘢痕灸对荷瘤及化疗小鼠肠道淋巴结及固有层淋巴细胞亚群的影响

目的观察瘢痕灸对肿瘤化疗肠道黏膜损伤的治疗作用及其对黏膜免疫中肠道集合淋巴结（PP结）及固有层中淋巴细胞（LPL）亚群的影响。方法运用给小鼠原位接种C-26结肠癌并重复灌胃环磷酰胺,建立肿瘤化疗肠道黏膜损伤的模型,瘢痕灸处理17d,观察瘢痕灸对瘤重、抑瘤率及PP结面积的影响,分离肠PP结内的淋巴细胞,用免疫荧光染色及流式细胞仪分析黏膜免疫各部位T淋巴细胞亚群的变化。结果环磷酰胺组瘤重显著降低,抑瘤率约为37．59％;环磷酰胺加灸组瘤重与环磷酰胺组比较无统计学意义。荷瘤及环磷酰胺都可显著降低PP结面积,明显增加PP结内CD3^＋和CD8^＋细胞百分比,降低LPL中CD4^＋细胞百分比。而瘢痕灸可明显减轻环磷酰胺对PP结面积的影响（P〈0．01）。瘢痕灸还能使荷瘤和环磷酰胺作用下显著减少LPL中的CD。’细胞百分比显著增加（P〈0．05）,但对LPL中的CD^8＋细胞百分比及PP结中的CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T细胞亚群无明显影响。结论荷瘤及环磷酰胺可明显抑制肠道黏膜免疫功能,而瘢痕灸能减轻荷瘤及环磷酰胺对PP结及LPL中某些T细胞亚群的影响,改善黏膜免疫抑制状态。     

比较四君子汤、四物汤和八珍汤对小鼠免疫功能的影响

四君子汤、四物汤和八珍汤均能对抗HC对体外淋巴细胞增殖的抑制作用,以四君子汤作用为好。四君子汤尚能对抗CY对DNCB所致DCH反应及溶血素生成的抑制作用。3方皆能提高CY所抑制的碳粒廓清速率和骨髓细胞数,仍以四君子汤为优。     

四君子汤对脾气虚证模型大鼠股四头肌线粒体自噬和细胞凋亡水平的影响＊

目的 通过观察不同浓度四君子汤治疗脾气虚证模型大鼠股四头肌线粒体自噬及细胞凋亡水平的变化，研究四君子汤治疗“脾气虚四肢不用”的机制。方法 50只雄性SPF级大鼠随机分为对照组（n = 10）和脾气虚证模型组（模型组，n = 40），饮食失节+劳倦法复制脾气虚证模型，造模成功后符合模型评价标准者纳入脾气虚证模型，将其分为盐水组（n = 10），四君子汤治疗低剂量组（低剂量组，n = 10），四君子汤治疗中剂量组（中剂量组，n = 10）和四君子汤治疗高剂量组（高剂量组，n = 10），连续给药15天。治疗结束后测定其抓力并取股四头肌，比色法检测三磷酸腺苷（Adenosine triphosphate，ATP）、线粒体膜电位（Mitochondrial membrane potential，MMP）和过氧化氢（Hydrogen peroxide，H₂O₂）水平；免疫印迹法（Western blot）法检测微管相关蛋白1轻链3-B（LC3 B）、选择性自噬接头蛋白（p62）、Bcl-2、Bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase3）、细胞色素c（Cyt-c）、聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶（PARP）蛋白表达。结果 与对照组比较，盐水组大鼠抓力、体质量、股四头肌ATP和MMP水平下降（P < 0.05或P < 0.01或P < 0.001），H₂O₂水平升高（P < 0.05）；LC3B-II、Bax、Cyt-c，cleaved-Caspase3、PARP蛋白表达上调（P < 0.05或P < 0.01或P < 0.001），p62、Bcl-2表达下调（均P < 0.001）。与盐水组比较，中/高剂量组大鼠抓力升高（均P < 0.01），体质量未见差异（均P > 0.05）；ATP、MMP水平升高（P < 0.01或P < 0.001）、H₂O₂下降（P < 0.05或P < 0.01）；LC3B-II、Bax、Cyt-c，cleaved-Caspase3、cleaved-PARP表达下调（P < 0.05或P < 0.01或P < 0.001），p62、Bcl-2表达上调（P < 0.05或P < 0.01），低剂量组各指标未见差异（均P > 0.05）。与中剂量组比较，高剂量组H₂O₂水平下降（P < 0.05），Bax表达下调（P < 0.01），其余指标未见差异（均P > 0.05）。结论 四君子汤可能通过抑制过度线粒体自噬，维持适度自噬改善线粒体应激，降低细胞凋亡水平治疗脾气虚四肢不用。     

红芪建中汤、四君子汤对大黄合剂复制小鼠“脾虚”模型的影响

用大黄合剂(大黄、芒硝)可复制出“脾虚”模型,表现为粪便稀薄、行动迟缓、被毛蓬松、消瘦弓背、体重减轻、体温下降、摄食减少、血液微循环障碍。部分免疫指标变化不大。红芪建中汤、四君子汤可促进“脾虚”小鼠复健,并加速其微循环的改善。     

加味四君子汤对脾虚泄泻大鼠肠道菌群及sIgA的影响

目的观察加味四君子汤对脾虚泄泻大鼠肠道菌群及sIgA的影响。方法利福平加大黄灌胃建立大鼠肠道菌群失调及免疫功能紊乱的脾虚模型。SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、思密达组、四君子汤组、加味四君子汤低剂量组（8g/kg）和高剂量组（16g/kg）,每组10只,给予相应干预措施。干预15天后分别进行十二指肠形态学分析、肠道菌群检测、回肠和盲肠内容物中sIgA的测定。结果与正常对照组比较,模型组大鼠十二指肠细胞黏膜受损,肠绒毛长度、宽度和隐窝深度都显著减少（P〈0．05）;盲肠和回肠sIgA降低（P〈0．05）,并伴有菌群失调（P〈0．05）;与模型组比较,各治疗组大鼠上述指标均得以明显改善,差异有统计学意义（P〈0．05）;加味四君子汤高剂量组各指标优于四君子汤组和思密达组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论加味四君子汤可能通过保护肠黏膜,调整肠菌群,提高sIgA的含量,发挥对机体整体的调节效应。     

四君子汤调节2型糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱的活性部位筛选研究

目的筛选四君子汤调节2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠糖脂代谢紊乱的活性部位。方法采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射小剂量(40 mg·kg^-1)链脲佐菌素(STZ)诱导建立T2DM小鼠胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)模型。将雄性ICR小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组(盐酸二甲双胍,0.03 g·kg^-1)、SJZT组(四君子汤水提液,8.48 g·kg^-1)、SJZT-U组(四君子汤水提醇沉液,8.48 g·kg^-1)及SJZT-D组(四君子汤水提醇沉物,8.48 g·kg^-1),每组10只。灌胃给药,每天1次,连续28 d。每周测定小鼠体质量;采用血糖仪检测小鼠空腹血糖(FBG);采用ELISA试剂盒测定血清空腹胰岛素(FINS)水平及肝脏中肝糖原(LG)含量;计算IR指数(HOMA-IR);灌胃葡萄糖溶液(1 g·kg^-1)进行口服葡萄糖耐量(OGTT)检测,计算血糖-时间曲线下面积(AUC);采用生化试剂盒检测血清中总胆固醇(T-CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及甘油三酯(TG)含量。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、AUC、HOMA-IR及FBG、FINS、T-CHO、TG含量均明显升高(P<0.01),HDL-C、LG含量明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠的AUC、FINS含量明显降低(P<0.05,P<0.01);SJZT及SJZT-D组小鼠的FBG、HOMA-IR明显降低(P<0.01),LG含量明显升高(P<0.01);SJZT及SJZT-U组小鼠的T-CHO含量明显降低(P<0.05);SJZT组小鼠的TG含量明显降低(P<0.05)。结论四君子汤及其不同提取部位能调节T2DM小鼠的糖脂代谢紊乱,其降糖有效部位为水煎液及水提醇沉物,调脂有效部位为水煎液及水提醇沉液。