应用聚合酶链反应检测宫颈分泌物人乳头瘤病毒

聚合酶链反应(PCR)检测人乳头瘤病毒(HPV),研究比较多。本实验主要检测宫颈分泌物人乳头瘤病毒6、11、16、18、33型,因其各型所致疾病互有交叉,故挑选一段针对HPV,各型共同的DNA序列,用PCR技术检出该核酸片段。在宫颈炎、阴道炎、尖锐湿疣病人中阳性率达31.25％(20/64)。说明人乳头瘤病毒对已婚育妇女普遍易感。检测HPV对宫颈炎、阴道炎、尖锐湿疣等妇科疾病的诊断治疗及宫颈癌的防治具有重要意义。     

应用聚合酶链反应方法检测宫颈癌患者的人乳头瘤病毒

目的探讨人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）在宫颈癌的发生中的作用。方法采用聚合酶链反应（PCR）-核酸内切酶分型检测宫颈癌活检组织中HPV-DNA,对来源于子宫颈癌患者的石蜡包埋组织标本进行四种常见生殖道人乳头瘤病毒（HPV）（HPV6、11、16、18）的检测和分型。结果在宫颈癌活检组织中HPV-16,18型39.1%,与正常妇女宫颈组织阳性率均为2.2%比较,差异均具有统计学意义。尖锐湿疣主要是HPV-Ⅰ（6,11型）感染,阳性率为69.2%,HPV-Ⅱ仅占4.2%。结论宫颈癌主要与HPV16及18型感染有关。     

聚合酶链反应及微板杂交法对人乳头瘤病毒分型检测

目的：为适应临床人乳头瘤病毒分型检测,建立了通用引物扩增（ＧＰ－ＰＣＲ）及微孔板杂交－ＥＬＩＳＡ检测法。方法：先进行ＧＰ－ＰＣＲ,其中一条引物５’端标记有地高辛,探针标记有生物素,通过包被在微孔板上的亲和素预先固定;将扩增产物加入预先包被有ＨＰＶ型特异寡核 酸探针和ＨＰＶ基因组混合探针的聚苯乙烯微孔板中,４２℃杂交仅需２０～３０ｍｉｎ;最后,用酶底物与所标记的酶进行显色择应,通过测定吸光度来判断结     

实时荧光聚合酶链反应检测宫颈人乳头瘤病毒在宫颈癌筛查中的应用

人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染已被证明是宫颈癌的直接病因[1],Woodman等[2]研究发现其归因危险性达到90%以上.有研究证明,高危型HPV检测筛查宫颈病变的敏感性为90%～95%[3-9],因此,宫颈HPV检测已成为宫颈癌筛查及治疗后随访的重要内容.本研究评估了实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法用于筛查宫颈病变的临床应用价值,以期为今后的临床应用提供参考.     

聚合酶链反应检测人乳头瘤病毒应用的探讨

人乳头瘤病毒(Human papillomavirus HPV)是一种小的双链DNA病毒，可感染人的皮肤和粘膜上皮细胞，产生乳头瘤样变。人类生殖道HPV感染较为常见，研究表明，HPV的某些类型与某些癌基因与宫颈癌的发生有较密切的关系，而且HPV感染所致的生殖道尖锐湿疣是常见的性传播疾病，近年来发病率有增长的趋势。现就我们应用聚合酶链反应初检．HPV感染的结果报告如下。     

第二代杂交捕获法和聚合酶链反应检测人乳头瘤病毒的比较

目的:比较两种常用的人乳头瘤病毒(HPV)的检测方法。方法:第二代杂交捕获法(HCⅡ)和聚合酶链反应(PCR)检测妇女宫颈分泌物中的高危型HPV。结果:103例宫颈病变患者中,PCR和HCⅡ检测HPV的阳性率分别为41.7％和39.9％。两种检验方法具有相关性(P<0.05)。结论:PCR和HCⅡ具有较好的一致性。     

聚合酶链反应检测卵巢癌中人乳头瘤病毒DNA的研究

用聚合酶链反应检测了１５例卵巢癌新鲜标本，结果发现人乳头瘤病毒ＤＮＡ阴性，该结果可能与下列因素有关：①与卵巢的解剖、生理特性有关，卵巢不象子宫颈及子宫内膜直接受到ＨＰＶ的侵犯，上生殖道感染ＨＰＶ的机会较下生殖道少；②与人乳头瘤病毒的增殖条件有关，ＨＰＶ主要侵犯复层拄状上皮与鳞状上皮交界处，病毒仅在一定分化程度的上皮角蛋白细胞内增殖，卵巢上皮为单层立方上皮，是否不适宜ＨＰＶ的增殖，尚需做更深入的研究。     

聚合酶链反应-微孔板杂交技术检测人乳头瘤病毒

目的　建立HPV诊断及分型技术。方法　用HPV通用型引物和型特异性探针作PCR 微孔板杂交检测法(PCR ELISA)。结果　特异性探针只与HPV阳性标本显色 ,A值为 0 32 7± 0 0 2 9;阴性标本均不显色 ,A值为 0 0 0 3± 0 0 0 1,与性传播性疾病相关的病原微生物 (淋球菌、解脲支原体、沙眼衣原体、人巨细胞病毒、单纯疱疹病毒 )均不显色。该法能检出 3 6个HeLa细胞含HPV 18型 144个拷贝 ,A值 0 2 37～ 0 2 0 6 ;空白对照A值为 0 0 0 5～ 0 0 15。结论　PCR ELISA方法快速、敏感、特异且可用自动化酶标仪多量标本检测 ,适合临床实验使用。     

用聚合酶链反应（PCR）技术检测人乳头瘤病毒DNA的临床应用

目前认为，人乳头瘤病毒感染可引起皮肤或粘膜上皮组织的异常增生。从而与一些恶性肿瘤和良性增生疣的发生密切相关，其中尖锐湿疣的发病主要与HPV6或HPV11感染相关[1]。我们应用聚合酶链反应（PCR）技术，对门诊84例尖锐湿疣和418例阴道炎患者进行检测，协助临床鉴别诊断。1资料和方法1．1资料来源本组资料来源于1995年4月～11月我院妇科门诊经临床确诊的女性生殖道尖锐湿疣患者84例，临床诊断阴道炎症的患者418例，共计502例，年龄最小20岁，最大49岁。1．2标本处理用无菌棉签采取阴道分泌物，将棉签置于Zml生理盐水中，并震荡使分泌…     

人乳头瘤病毒DNA的PCR检测

本文应用聚合酶链反应检测了70例尖锐湿疣，乳头瘤石蜡包理组织中的人乳头瘤病毒DNA，结果表明：HPV-DNA的检出率为70.0%(49/70)，多重感染占阳性例数的53.1%。HPV6和（或）HPV11为本地区尖锐湿疣、乳头瘤组织中HPV感染的主要型别。     

PCR方法检测生殖道人乳头瘤病毒

探讨生殖道人乳头瘤病毒对宫颈糜烂的影响及摸索最佳的ＰＣＲ反应条件。方法应用通用引物介导聚合酶链反应法检测宫颈脱落细胞中ＨＰＶ。结果：健康人５０例,宫颈糜烂,患者３４例,ＨＰＶ阳性检出率为分别为２２．０％和４７．２％,两者差异显著。     

应用荧光定量聚合酶链反应检测人乳头瘤病毒DNA

笔者采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ- PCR)对人乳头瘤病毒 (HPV) HPV6、HPV11DNA的含量进行检测 ,现将结果报告如下。1　资料与方法1.1　病例选择 :选择我院 1999年 9月至 2 0 0 0年 5月妇科、皮肤科及泌尿外科门诊病人 5 4例。将症状、体征典型 ,病理诊断为尖锐湿疣 (CA)的患者 16例作为 CA组 ,其中男 8例 ,女 8例 ,年龄最小 18岁 ,最大 4 7岁 ,平均 (2 9± 6 .3)岁 ;将症状体征不典型 ,拟诊为 CA的患者 38例作为 CA可疑组 ,其中男 17例 ,女 2 1例 ,年龄最小 2 1岁 ,最大 5 3岁 ,平均 (32± 7.0 )岁 ;将 34例健康体检者作为对照组…     

双温聚合酶链反应检测喉乳头瘤中HPV—DNA

应用双温聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测喉乳头瘤石蜡包埋组织中的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ》结果与常规ＰＣＲ（三温循环）相同；３０例喉乳头瘤中ＨＰＶ总检出率为４６．７％（１４／３０），ＨＰＶ－６／１１／１６的检出率分别为４０％（１２／３０）、１６．７％（５／３０）和６．７％（２／３０）１６．７％（５／３０）和６．７％（２／３０），ＨＰＶ－６的检出率极显著高于ＨＰＶ－１１／６（ｘ＾２＝１０．６，Ｐ〈）．     

人乳头瘤病毒16,18型核酸检测质控物的研制及应用

目的研制得到能模拟真实临床标本的人乳头瘤病毒（HPV）高危型16,18核酸检测质控物,并探讨其用于临床实验室室间质量评价的有效性。方法采用分子克隆方法得到含HPV．16靶基因的重组质粒载体,转染已含HPV-18的宫颈癌上皮细胞系（HeLa）,获得含HPV-16,18核酸的上皮细胞原液,经适当灭活后甲醇固定。将该细胞原液适当稀释后,组成含阴阳性共12份标本的样本盘,发至全国各开展临床HPV一16,18检测的实验室,对回报结果进行分析。结果细胞原液经1：10,1：50,1：100,1：500稀释,实时荧光PCR检测,HPV-16Ct值分别为29．10,31．19,32．15和32．73,HPV-18Ct值分别为30．32,32．13,32．22和35．55。质控物在4℃可稳定40d以上,盲邮至新疆乌鲁木齐、内蒙古呼和浩特和厦门的样本,返回后检测无明显变化。44个临床实验室对高浓度样本的检测符合率平均为95．1％,对低浓度样本的检测符合率为57．4％。对阴性样本符合率为98．3％。结论获得可模拟临床标本的HPV-16,18核酸检测质控物,质评结果表明可有效地用于临床实验室室间质评。     

食管癌组织中人乳头瘤病毒的PCR检测

应用ＰＣＲ对汕头地区６０例食管癌石蜡包埋标本进行人乳砂瘤病毒ＤＮＡ序列检测。结果：ＨＰＶ－ＤＮＡ总检出率为６３．３％，ＨＰＶ－６、１１、１６、１８型的检出率分别为３０．０％，４０．０％，３０．０％和１０．０％，其中多重感染占阳性例数的６０．５％。初步结果表明，汕头地区食管癌组织中有较高的ＨＰＶ感染率，此与食管癌的发生可能有密切关系。     

实时荧光聚合酶链反应技术与第2代杂交捕获法检测高危亚型人乳头瘤病毒的比较

目的 比较实时荧光聚合酶链反应技术(实时PCR)检测人乳头瘤病毒(HPV)16、18型与第二代杂交捕获法(HC-Ⅱ)检测13种HPV高危亚型.方法 采用实时PCR与HC-Ⅱ分别检测宫颈脱落细胞标本中的HPV16、18型和13种HPV高危亚型,并进行测序分析.结果 HPV16、18型实时PCR总的检出率为24%,13种HPV高危亚型HC-Ⅱ总的检出率为46.6%;高度鳞状上皮细胞内病变(HSIL)组实时PCR和HC-Ⅱ的检出率均较低度鳞状上皮细胞内病变(LSIL)组要高,分别为54%与21%、84.3%与65.6%.HPV16、18型在HPV高危亚型中的总检出率为51%.有2例宫颈炎组标本HC-Ⅱ检测阴性而实时PCR检测阳性,测序结果与实时PCR一致.结论 实时PCR法检测HPV16、18较HC-Ⅱ灵敏度高,但检测的HPV亚型少,相比之下HC-Ⅱ更适合于临床上HPV高危亚型的筛查检测.     

食管癌组织中人乳头瘤病毒的检测

用人乳头瘤病毒保守基因的通信引物和１６、１８型特异性引物，通过聚合酶链反应，检测２０例正常新鲜活检食管粘膜，４０例新鲜食管癌组织昨５１例石蜡包埋的食管癌组织标本的ＨＰＶＤＮＡ，在２０例正常人食管粘膜组织中ＨＰＶＤＮＡ检出率９．１％，癌组织中为３６．２％，磷癌和腺癌分别为３４．７％、４７．１％，鳞癌以１６型感染为主，腺癌以１８型为主，但肿瘤分化程度与ＨＰＶ感染无关，结果提示：ＨＰＶ感染与食砭 癌的发     

双温聚合酶链反应检测喉乳头瘤中HPV－DNA

应用双温聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测喉乳头瘤石蜡包埋组织中的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ。结果与常规ＰＣＲ（三温循环）相同：３０例喉乳头瘤中ＨＰＶ总检出率为４６．７％（１４／３０），ＨＰＶ－６／１１／１６的检出率分别为４０％（１２／３０）、１６．７％（５／３０）和６．７％（２／３０），ＨＰＶ－６的检出率极显著高于ＨＰＶ－１１／６（ｘ２＝１０．６，Ｐ＜０．０１）。初步结果表明，本地区喉乳头瘤主要与ＨＰＶ－６的感染密切相关。该法具有缩短检测时间、节省一个恒温水浴箱等优点。     

聚合酶链反应检测口腔鳞癌及癌旁组织中人类乳头瘤病毒DNA

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测２６例口腔鳞癌及１５例癌旁组织中人类乳头瘤病毒（Ｈｕｍａｎ ＰａｐｉｌｌｏｍａＶｉｎｕｓ，ＨＰＶ）ＤＮＡ。口腔鳞癌组织阳性率７６．９％（２０／２６），比癌旁组织阳性率２０．０％（３／１５）明显增高（Ｐ〈０．０５），说明ＨＰＶ感染与口爱鳞癌的发生发展有关。     

检测人乳头瘤病毒DNA的技术方法─—原位PCR技术

人乳头瘤病毒（humanpapillomavirus,HPV）是一种嗜鳞状上皮的环状链DNA病毒,至今已经发现超过60种以上的亚型[1],而与人类上皮肿瘤发生关系最大的是HPV16．18型,随着致癌基因研究的深入,人们发现HPV16、HPV18型的E6、E7蛋白在致癌过程中起关键的作用,一般认为HPVE6蛋白能与P53肿瘤抑制基因结合形成复合物加速P53蛋白的降解过程,使其抑制肿瘤细胞的发生、发展的功能失效。同样,外肿瘤抑制基因产物与HPV18E7蛋白通过一个结构互补的部位形成一个复合物,使灿蛋白不能与特定的内源蛋白（EZF）结合,磷酸化过程受阻,导致细…