肤康片防治尿道吻合术后瘢痕狭窄的实验研究

目的:研究肤康片防治尿道吻合术后尿道瘢痕狭窄的作用.方法:新西兰兔20只,制成尿道断裂模型后行尿道吻合.实验组10只,灌胃给予肤康片;对照组10只,灌胃给予生理盐水.三周后取尿道吻合口组织,组织切片用Masson染色,输入全自动图像分析系统,观察胶原纤维的面积.结果:对照组尿道吻合口瘢痕组织中胶原纤维含量多、密集、排列紊乱,而实验组胶原纤维含量少、稀疏、排列较规则;每三个高倍视野胶原纤维的面积,实验组为117.11±10.17 μm2,对照组为136.43±15.85 μm2,有显著性差异(P《0.05).结论:肤康片在(兔)尿道平滑肌的创伤愈合过程中有明显的抑制成纤维细胞增殖、减少胶原纤维形成的作用.     

黑布药膏对兔耳瘢痕疙瘩模型瘢痕增生指数及成纤维细胞数密度和胶原纤维面密度的影响

目的:探讨黑布药膏对兔耳瘢痕疙瘩模型的瘢痕增生指数及成纤维细胞数密度和胶原纤维面密度的影响。方法:采用光镜观测瘢痕疙瘩模型兔耳瘢痕组织的增生指数、成纤维细胞数密度及胶原纤维面积密度。结果:与模型组比较,黑布药膏组及积雪苷组瘢痕增生指数、成纤维细胞数密度及胶原纤维面积密度均变小。结论:黑布药膏可以明显减小兔耳瘢痕增生指数、成纤维细胞数密度及胶原纤维面积密度,故证实黑布药膏可以有效抑制皮肤瘢痕。     

中药制剂对兔耳增生性瘢痕组织的影响

目的:观察中药制剂对兔耳增生性瘢痕组织的影响。方法:建立兔耳增生性瘢痕动物模型,2月后将瘢痕随机分为治疗组和对照组并外用中药制剂或生理盐水治疗,治疗1月后观察中药制剂对瘢痕形态及瘢痕增生指数的影响。结果:中药治疗组和对照组之间瘢痕增生指数差异有显著性意义(P<0.05);光镜下见明显抑制成纤维细胞增殖及降低胶原纤维的含量。结论:中药制剂可抑制兔耳增生性瘢痕组织增生。     

中药制剂对兔耳增生性瘢痕组织的影响

目的：观察中药制剂对兔耳增生性瘢痕组织的影响。方法：建立兔耳增生性瘢痕动物模型，2月后将瘢痕随机分为治疗组和对照组并外用中药制剂或生理盐水治疗，治疗1月后观察中药制剂对瘢痕形态及瘢痕增生指数的影响。结果：中药治疗组和对照组之间瘢痕增生指数差异有显著性意义（P〈0．05）；光镜下见明显抑制成纤维细胞增殖及降低胶原纤维的含量。结论：中药制剂可抑制兔耳增生性瘢痕组织增生。     

青光安有效组分对兔青光眼术后滤过道瘢痕组织中胶原纤维、成纤维细胞特异性蛋白-1、结缔组织生长因子及转化生长因子-β1表达的影响

目的观察青光安4种有效组分对兔青光眼术后滤过道瘢痕组织中胶原纤维、成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1)、结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,对比青光安4种有效组分及青光安混悬液抗滤过道瘢痕化的效果。方法采用青光眼滤过手术制作动物模型。实验兔按体质量随机分为空白组(A组)、模型组(手术对照组,B组)、丝裂霉素C组(C组)、有效组分1组(D组)、有效组分2组(E组)、有效组分3组(F组)、有效组分4组(G组)和青光安混悬液组(H组)。各给药组给予相应药物。观察各组兔滤过道瘢痕组织中胶原纤维、FSP-1、CTGF、TGF-β1水平。结果术后C、E、H组兔眼压回升缓慢,眼压值较术前和A组差异均有统计学意义(P0.05);胶原纤维面积比值除B、D、G组外,其他各组间比较差异均有统计学意义(P0.05);FSP-1表达除B、G组外,其他各组间比较差异均有统计学意义(P0.05);CTGF表达除B、D、G组外,其他各组间比较差异均有统计学意义(P0.05);TGF-β1表达除B、G组外,其他各组间比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论青光安有效组分2、丝裂霉素C及青光安混悬液通过抑制胶原纤维、FSP-1、CTGF、TGF-β1的表达,降低肌成纤维细胞和成纤维细胞的增殖,从而减少滤过道瘢痕组织的增生,有明显抗青光眼术后滤过道瘢痕化的作用,青光安有效组分2和青光安混悬液抑制滤过道瘢痕化效果基本相当。     

鲜地龙液外敷对兔耳增生性瘢痕组织形态学及创面上皮化时间的影响

目的:观察鲜地龙液外敷对兔耳增生性瘢痕组织以及兔耳创面上皮化时间的影响。方法:选用成年日本大耳白兔,建立兔耳增生性瘢痕动物模型,造模术后随机分为模型组和鲜地龙高、中、低剂量治疗组和积雪草甙治疗组。各组行相应处理7周后,观察各组瘢痕组织形态的变化以及计算兔耳创面上皮化时间。结果:鲜地龙各剂量治疗组与模型组比较,兔耳创面上皮化时间明显缩短,有显著性差异(P<0.05或P<0.01);光镜显示,鲜地龙各剂量治疗组明显抑制成纤维细胞增殖以及降低胶原纤维的含量。结论:鲜地龙液外敷可以对兔耳增生性瘢痕组织增生有抑制作用以及缩短兔耳创面上皮化时间。     

白藜芦醇通过抑制TGF-β_1、COL-Ⅰ过表达治疗骨骼肌损伤的实验研究

目的观测骨骼肌急性钝挫伤修复过程中转移生长因子(TGF-β_1)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)的表达规律,探讨白藜芦醇(Res)促进受损骨骼肌结构与功能恢复之作用机制。方法 33只新西兰兔随机分为3组:正常组(3只)、自然恢复组(15只)、Res组(15只)。除正常组外均制造骨骼肌钝挫伤模型,损伤后自然恢复组不予处理,Res组每天给予Res 15 mg/kg灌胃治疗。分别于伤后1、3、7、14、21天处死动物,采用免疫组织化学(IHC)、免疫印记法(Western Blot)检测骨骼肌中TGF-β_1、COL-Ⅰ蛋白表达。结果一般结果:损伤组损伤区肿胀,12 h至肿胀峰值,72 h后肿胀消退至实验前状态。HE显示:正常组兔肌纤维多边形、形态规则、排列紧密,肌核均匀分布于肌膜下,无增生与固缩,肌膜完整;各损伤组第1天见血细胞渗出,第3天炎症细胞开始浸润至7天达峰值,伤后第21天肌纤维形态基本恢复正常,Res组在炎症细胞浸润,修复时间上整体优于自然恢复组。Masson染色显示:正常肌细胞中胶原纤维含量极少,损伤后随着瘢痕组织形成,胶原纤维逐渐增加,并于14天达高峰,Res组胶原纤维含量低于自然恢复组。IHC显示:TGF-β_1、COL-Ⅰ主要为胞浆表达,其蛋白含量在损伤后呈现先升后降趋势,自然恢复组和Res组均于7 d达高峰,自然恢复组高于Res组,(P0.05)。Western Blot显示:TGF-β_1、COL-Ⅰ蛋白表达结果与IHC结果相似。结论 TGF-β_1和COL-Ⅰ蛋白在骨骼肌修复过程中呈现先升高后降低的变化规律,与骨骼肌修复一般规律相类;TGF-β_1和COL-Ⅰ蛋白表达量变化与瘢痕组织出现有联系,出现明显瘢痕组织时TGF-β_1和COL-Ⅰ蛋白含量也达最大值;Res能抑制TGF-β_1和COL-Ⅰ蛋白表达,促进骨骼肌损伤修复,但并不改变骨骼肌损伤修复过程中蛋白表达量的整体变化规律。     

夏天无对坐骨神经损伤小鼠损伤区微环境的影响

目的研究夏天无Corydalis decumbens(Thunb.)Pers.对坐骨神经损伤小鼠损伤区微环境的影响。方法 30只小鼠随机均分为模型组、夏天无组、假手术组,Masson染色检测损伤区胶原纤维、炎性细胞、神经纤维分布,免疫荧光染色检测层黏连蛋白(LN)、施万细胞标记物S-100、小G蛋白Rac1表达及轴突再生情况,HE染色检测神经功能恢复情况。结果与模型组比较,夏天无组胶原纤维、炎性细胞减少,神经纤维有序,LN、Rac1、S-100表达,再生轴突数量,腓肠肌纤维横截面积和腓肠肌质量显著增加(P0.05)。结论夏天无可通过减少胶原纤维生成和炎症细胞浸润,增加LN、Rac1、S-100表达,改善坐骨神经损伤小鼠损伤区微环境来促进轴突再生和神经功能恢复。     

ANIT诱发大鼠肝内胆汁淤积的动态病理变化观察

目的:观察ANIT诱发大鼠胆汁淤积模型肝组织病理动态变化特点。方法:一次性给予100 mg.kg-1ANIT复制大鼠肝内胆汁淤积模型;于造模后24,48,72,96 h分4批杀鼠取材,观测大鼠肝组织病理学变化。结果:与赋形剂组比较,24 h模型组大鼠肝组织汇管区、小叶周边可见新生小胆管样上皮细胞,少量炎性细胞浸润及脂肪变,有少量胶原纤维沉积;48 h时胆管上皮细胞增生明显,呈花环状,可见少量肝细胞的坏死灶,炎性细胞浸润增多,汇管区扩大,增生胆管周围胶原沉积增加;72h时胆管上皮细胞增生范围增大,细胞扁平形,管腔宽大,外周基底膜及胶原纤维层增厚;96 h脂肪变减少,胶原纤维增生减少,增生的小胆管样上皮细胞范围开始缩小。结论:一次性给予ANIT诱发的肝内胆汁淤积大鼠模型病变表现为急性肝内胆汁淤积、肝细胞损伤及胶原纤维沉积,随着时间的延长其病理变化呈现先加重后逐渐恢复的趋势。     

不同经典方剂对肝外胆汁淤积大鼠病理组织学的影响

目的：观察3首治疗黄疸的经典方剂对胆总管结扎（BDL）诱发实验性肝外胆汁淤积大鼠肝组织病理学变化的影响。方法：行胆总管三段结扎术复制大鼠肝外胆汁淤积模型。造模1周后各药物干预组每天分别经口灌胃给予lmL／100g体重菌陈蒿汤、菌陈五苓散和大柴胡汤;模型组和假手术组给予等体积生理盐水。至造模3周时处死取材。结果：与假手术组比较,胆总管结扎3周后,模型组肝细胞减少,增生的小胆管样上皮细胞形成小结节样结构,或演变形成小胆管,同时胶原纤维增生,小胆管和伴随出现的纤维母细胞、胶原纤维和毛细血管形成膜样间隔,并与邻近增生的间隔互相连接、包绕、分割,将肝实质分割成细胞团块,形成假小叶;少量炎性细胞浸润。新增生的小胆管样上皮细胞多数位于向小叶内延伸的边缘。与模型组相比,3组药物干预组胆管样上皮细胞或小胆管明显减少,肝细胞相对增多,胶原纤维增生减少,肝组织纤维化程度减轻,尤以菌陈蒿汤组疗效明显。结论：菌陈蒿汤、菌陈五苓散和大柴胡汤均能有效改善BDL所诱发的肝外胆汁淤积大鼠模型病理组织学改变,菌陈蒿汤疗效更优。     

不同经典方剂对肝内胆汁淤积大鼠病理组织学的影响

目的:比较3首治疗黄疸的经典方剂对奈异硫氰酸脂(ANIT)诱发实验性肝内胆汁淤积大鼠肝组织病理学变化的影响。方法:一次性给予100 mg.kg-1ANIT复制大鼠肝内胆汁淤积模型;于造模后次日开始,各药物干预组分别ig 10mL.kg-1茵陈蒿汤、茵陈五苓散和大柴胡汤;模型组和赋形剂组给予等体积生理盐水,连续3d。至造模72 h时处死取材。结果:与赋形剂组比较,模型组肝细胞减少,汇管区有明显的胆管增生,细胞扁平形,管腔宽大,其外周基底膜及胶原纤维层增厚,少量炎性细胞浸润,新增生的小胆管样上皮细胞多数位于向小叶内延伸的边缘。与模型组相比,3个方剂干预组胆管上皮细胞或小胆管明显减少,肝细胞相对变多,胶原纤维增生减少,肝组织纤维化程度减轻,尤以茵陈蒿汤组改善明显。结论:茵陈蒿汤、茵陈五苓散和大柴胡汤均能有效改善ANIT所诱发肝内胆汁淤积大鼠模型病理组织学改变,茵陈蒿汤疗效较优。     

慢性酒精中毒与中枢神经系统炎症反应

近几年,日益增多的证据表明慢性酒精中毒影响胶质细胞与中枢神经系统(CNS)炎症反应有密切关系,它可以分别通过抑制脑星形胶质细胞胶原纤维酸性蛋白和S100蛋白的表达,影响脑星形胶质细胞热休克蛋白70表达和细胞超微结构引起和加重炎症反应。     

山豆根醇提取物干预TGF-β1/Smad通路抑制兔耳增生性瘢痕的机制

目的:研究山豆根醇提取物对兔耳部增生性瘢痕组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad3表达的影响,探讨山豆根醇提取物改善增生性瘢痕的作用与机制。方法:通过损伤新西兰大耳白兔耳内侧皮肤建立兔耳增生性瘢痕模型。49只大耳白兔随机分为空白组、模型组,山豆根醇提取物高、中、低剂量组(2.0,1.0,0.4 g·kg-1),积雪苷软膏组(5 mg·kg-1)以及复方肝素钠尿囊素凝胶组(20 mg·kg-1),7只/组。除空白组外,其余各组在模型建立后分别采用相应的药物涂抹于兔耳增生性瘢痕处,1次/日,连续给药42 d。实验结束后取耳部瘢痕组织,采用苏木素-伊红(HE)染色观察兔耳瘢痕组织病理改变并测定瘢痕增生指数;分别采用免疫组化,蛋白免疫印迹法(Western blot)以及逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测瘢痕组织中TGF-β1和Smad3蛋白及mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组动物耳瘢痕组织病理显示增生明显,增生指数显著增加(P0.01);同时瘢痕组织中TGF-β1和Smad3表达也显著升高(P0.01);与模型组比较,山豆根醇提取物中、高剂量组耳部瘢痕组织病理结构明显改善,瘢痕组织TGF-β1和Smad3表达及增生指数明显下降(P0.05,P0.01),山豆根醇提取物各剂量组TGF-β1和Smad3蛋白与mRNA表达明显下降(P0.05,P0.01)。结论:山豆根醇提取物可能通过降低瘢痕组织中TGF-β1和Smad3表达,抑制TGF-β1/Smads信号转导通路发挥抑制增生性瘢痕的疗效,这为山豆根治疗增生性瘢痕的临床应用提供了实验基础。     

胶原纤维吸附剂对银杏叶中鞣质的选择性去除作用

目的 研究胶原纤维吸附材料对银杏叶中鞣质的选择性去除作用.方法 以皮胶原纤维为原料,通过戊二醛交联反应制备吸附材料.将此吸附材料用于选择性地去除银杏叶提取物中的鞣质,并用HPLC和明胶法对吸附实验结果 进行检测.结果 HPLC图谱和明胶法检测结果 说明,所制备的胶原纤维吸附材料具有较好的吸附选择性,可以完全除去银杏叶提取物中的鞣质,而有效成分基本不损失.结论 胶原纤维吸附材料可用于中药提取物或制剂中鞣质的高选择性脱除.     

三七皂苷R1水凝胶对兔耳皮肤增生性瘢痕的修复作用及对bFGF、TGF-β_1表达的影响

目的考察三七皂苷R1水凝胶对兔耳皮肤瘢痕的修复作用及对重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)表达的影响。方法取健康新西兰大耳白兔24只,制备兔耳皮肤瘢痕模型后随机分为4组,每组6只。模型组瘢痕处外涂空白水凝胶基质,0.5 g/L三七皂苷R1组和1 g/L三七皂苷R1组分别涂抹含浓度为0.5 g/L、1 g/L三七皂苷R1溶液制备的水凝胶制剂,积雪苷组外涂积雪苷霜软膏,均每日2次,连续外涂5周。记录各组瘢痕修复情况,HE染色和Masson染色观察瘢痕组织微观变化,计算瘢痕增生指数、成纤维细胞数量和胶原纤维面密度,Western blot和RT-PCR法分别检测瘢痕组织中bFGF、TGF-β_1蛋白和mRNA表达水平。结果与模型组比较,各给药组兔耳瘢痕颜色显著变淡,瘢痕面较平坦且软,组织真皮层厚度明显变薄,胶原疏松有序排列,瘢痕增生指数、成纤维细胞数量和胶原纤维面密度明显降低,瘢痕组织中bFGF蛋白和mRNA表达升高,TGF-β_1蛋白和mRNA表达降低,且1 g/L三七皂苷R1组和积雪苷组各指标改善情况明显优于0.5 g/L三七皂苷R1组,差异均有统计学意义(P均0.05);1 g/L三七皂苷R1组和积雪苷组各指标比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论三七皂苷R1水凝胶对兔耳皮肤增生性瘢痕具有一定的抑制和修复作用。     

泪道探通联合药物灌注治疗婴幼儿泪囊炎

婴幼儿泪囊炎系新生儿鼻泪管下端留有膜状物阻塞,泪液潴留在泪囊内引起泪囊继发感染,形成慢性病灶,出现粘液脓性分泌物.长期反复的慢性炎症刺激,瘢痕组织增生,导致其临床治疗困难.我院于2002年6月开始采用泪道探通联合药物灌注治疗60例(69只眼)婴幼儿泪囊炎患者,效果满意,报告如下.     

腰痛灵栓对大鼠炎性神经根的修复与再生机理研究

目的:观察腰痛灵栓直肠给药后神经根炎模型大鼠的痛阈、步态的恢复情况以及炎细胞、髓鞘、胶原纤维数量的变化,研究用药后神经根组织形态学改变及症状改善相关性,探讨其作用机理。方法:将60只SD大鼠,随机选取10只作为正常对照组,其余50只建立化学神经根炎模型,再随机分为模型,大、中、小剂量,阳性对照5组。使用腰痛灵栓20天后,观察痛阈、步态的恢复情况以及炎细胞、髓鞘、胶原纤维数量的变化并进行比较。结果:腰痛灵栓1.0g生药/kg使模型大鼠的痛阈与对照组比较差异有显著意义(P<0.05),并对步态有一定改善。腰痛灵栓大、中、小剂量(1.0、0.5、0.25g生药/kg)都不同程度地使模型大鼠神经根局部炎细胞、髓鞘、胶原纤维数量观测结果与模型组、正常组比较差异均有显著意义(P<0.05);结论:腰痛灵栓1.0g生药/kg能显著恢复模型大鼠的痛阈,改善其步态。腰痛灵栓剂使大鼠神经根炎的局部炎细胞及胶原纤维数量明显减少,神经髓鞘数量有明显的增加;腰痛灵栓对大鼠化学神经根炎性损伤有明显减轻或者消除炎症的作用以及对损伤神经髓鞘的修复与再生作用,大鼠炎性刺激症状的改善与炎细胞、胶原纤维及神经髓鞘的数量有相关性。     

艾灸促进皮肤外伤愈合及对局部组织的修复作用

目的:探讨艾灸促进创面愈合疗效及其对创伤不同阶段局部组织形态的修复作用。方法:28只成年雄性SD大鼠随机分为模型组和艾灸组,每组14只。采用直径8mm的取皮器从大鼠背部正中线肩胛下角2cm处钻取全层皮肤制备大鼠外伤模型。造模后即刻予艾灸干预,每日1次,每次25min,持续6d。观察并拍照记录创面的愈合情况,造模后第2天和第7天采用HE和Masson染色观察各组大鼠创伤局部组织形态学变化和胶原纤维生长情况。结果:与模型组比较,艾灸组干预2次后大鼠创口面积就显著减小(P0.01,P0.05),随着干预次数增加艾灸组愈合面积显著增加(P0.01),艾灸组大鼠创伤局部组织中炎性细胞数量显著增多(P0.01),新生胶原纤维显著增多(P0.05);艾灸6次后,艾灸组较模型组创伤局部组织成纤维细胞数量和胶原纤维量明显增加,细胞和胶原纤维排列更加紧密,新生血管数量较多,受损部位的皮肤结痂较厚。结论:艾灸可以明显促进创伤局部胶原纤维生长和细胞增殖,促进外伤模型大鼠皮肤创面愈合。     

利湿化瘀法对湿瘀型慢性盆腔炎大鼠子宫组织Ⅰ型胶原纤维及IkKβ影响的研究

目的:通过观察利湿化瘀法对湿瘀型慢性盆腔炎大鼠子宫组织Ⅰ型胶原纤维及IκKβ蛋白表达的影响,进一步阐明利湿化瘀法的作用机制。方法:大鼠随机分为正常组和造模组;造模组沿子宫分叉处分别向双侧卵巢方向注入25%苯酚胶浆0. 04 mL,再随机分成模型组,中药高、低剂量组和妇乐组。正常组和模型组给予生理盐水灌胃,其余组分别给以相应剂量的利湿化瘀中药和妇乐颗粒混悬液灌胃。21 d后,腹腔麻醉下取子宫组织,采用Masson法检测Ⅰ型胶原纤维; Western Blot法检测IκKβ(IKβ激酶)蛋白表达。结果:模型组大鼠子宫组织可见大量Ⅰ型胶原纤维,中药低剂量组胶原纤维量表达少于模型组,但高于中药高剂量组和妇乐组,中药高剂量组和妇乐组胶原纤维量表达接近正常组,无明显区别。与模型组比较,中药高剂量组、低剂量组、妇乐组均能降低IκKβ蛋白的表达,差异有统计学意义(P 0. 05);中药高剂量组和妇乐组比较,差异不显著(P 0. 05)。结论:利湿化瘀法通过干预大鼠子宫组织Ⅰ型胶原纤维及IκKβ蛋白的表达,促进细胞凋亡、抑制组织粘连及纤维化的形成,从而对湿瘀型慢性盆腔炎具有良好临床疗效。     

从生化角度简介中西医结合的进展(续)

(二)对物质代谢的影响题目主要是来自临床。例如活血化瘀方药对瘢痕疙瘩、硬皮病等结缔组织增生异常的疾病显示较好疗效,提示人们去研究它对结缔组织代谢的影响;气滞、血瘀型的病人血清三酸甘油酯普遍升高,而活血化瘀的冠Ⅱ号方有效,促使人们去研究它对酯类代谢的影响等等。1.对结缔组织代谢的影响结缔组织由细胞、纤维和基质三部分组成,其主要成分是胶原纤维。胶原纤维的合成有两个必备条