白细胞介素-1β对人眼小梁细胞基质金属蛋白酶-3表达的影响

目的观察自细胞介素-1β（IL-1β）对体外培养的人眼小梁细胞基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinases 3，MMP-3）表达的影响。方法采用组织块培养法对人眼小梁细胞（human trabecular ceils，HTCs）进行体外原代及传代培养，取传3代小梁细胞分别加入含有IL-1β终浓度为0ng／ml（对照组）、5、10、25、50ng／ml的无血清培养液，24h后采用RT-PCR法及ELISA法检测MMP-3量的变化。结果RT-PCR法检测IL-1β终浓度为5、10、25、50ng／ml实验组MMP-3／GAPDH的相对灰度比值分别为0．3437±0．0764、0．8588±0．0443、1．0079±0．0347、1．3466±0．0309，均高于对照组的相对灰度比值0．1037±0．0494，且各实验组与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）；ELISA法检测IL-1β终浓度为5、10、25、50ng／ml实验组的MMP-33浓度值分别为（2．0325±0．2456）ng／ml、（2．4607±0．350）ng／ml、（2．8532±0．1392）ng／ml、（3．5858±0．1141）ng／ml，均高于对照组的浓度值（1．2437±0．3910）ng／ml，且各实验组与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论IL-1β在一定范围内促进MMP-3的表达，并且呈现一定的剂量依赖性，推测IL-1β可以通过促进MMP-3的表达来减少小梁网组织细胞外基质（ECM）的堆积，使房水引流通畅，降低眼内压。     

NF-κB活性对TNF-α调节小梁细胞表达MMP-3和MMP-9的影响

目的探讨核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）是否参与肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）调节人眼小梁细胞（human trabecular cells，HTCs）表达基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinases-3，MMP-3）和基质 金属蛋白酶-9（matrixmetalloproteinases-9，MMP-9）的过程。方法采用RT-PCR法和酶谱分析法（zymography）检测体外培养的人眼小梁细胞经0ng／ml（对照组）、lng／ml、10ng／ml、25ng/ml TNF-α处理24h后，细胞表达MMP-3、MMP-9的量；运用NF-κB的特异抑制剂二硫氨基甲酸吡啶（pyrrolidine dithocarba-mate，PDTC）抑制NF-κB的活化，观察TNF-α对体外培养的HTCsMMP-3，MMP-9表达影响的改变。结果运用RT-PCR法和酶谱分析法研究均发现经浓度为1ng／ml、10ng／ml、25ng／ml的TNF-α处理的细胞在mRNA和上清液中活性蛋白水平均能增加MMP-3、MMP-9的表达，各组mRNA／β-actin吸光度比值和条带酶解量与对照组相比差异均有显著性（P〈0．05）。提前30min加入PDTC，MMP-3、MMP-9的表达量分别较未加入PDTC组表达量明显减少．差异有显著性（P〈0．05）。结论TNF-α可上调MMP-3及MMP-9的表达。PDTC能够下调TNF-α对小梁细胞MMP-3及MMP-9的表达，因此推测NF-κB可能参与MMP-3和MMP-9转录的启动．     

白细胞介素-1α对猪小梁细胞基质金属蛋白酶／基质金属蛋白酶抑制剂表达的影响

背景房水外流通路的阻塞或小梁网细胞外基质（ECM）的异常堆积导致房水流畅系数降低是引起眼压升高的原因之一,基质金属蛋白酶（MMPs）和组织金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）的平衡对ECM的代谢至关重要,白细胞介素-1α（IL-1α）可以通过调节MMPs的表达而调节房水的外流。目的研究猪重组IL-1α对体外培养的猪眼小梁细胞MMP-2、MMP-3及TIMP-1表达的影响。方法从猪眼取出带有小梁组织的巩膜,用组织块培养法培养小梁细胞并进行传代,第3代的猪小梁细胞应用纤维连接蛋白（FN）和层黏连蛋白（LM）进行鉴定。第3代小梁细胞血清饥饿培养24h后分为2组,对照组加入无血清培养基,IL组加入10m／L IL-1α,分别培养30min。采用细胞免疫化学法分析IL组MMP-2、MMP-3及TIMP-1蛋白在培养小梁细胞中的表达;采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测小梁细胞中MMP-2mRNA、MMP-3mRNA及TIMP-1 mRNA的表达,并与对照组的检测结果进行比较。结果传3代的细胞对FN和LM呈现阳性反应。与对照组比较,IL组小梁细胞中MMP-3和TIMP-1蛋白的表达量（A值）明显升高,差异均有统计学意义（t=-7．694、t=-5．199,P〈0．05）,但2组间小梁细胞中MMP-2表达的差异无统计学意义（t=-2．365,P〉0．05）。IL组小梁细胞中MMP-3mRNA和TIMP-1mRNA的表达量（A值）明显高于对照组,差异均有统计学意义（t=-3．025、t=-1．921,P〈0．05）,而2组间小梁细胞中MMP-2mRNA的表达差异无统计学意义（t=-1．173,P〉0．05）。结论外源性IL-1α能增加猪眼小梁细胞中MMP-3、TIMP-1的表达,引起MMP-3／TIMP-1平衡改变,促进小梁网ECM的分解,增加房水外流,而对MMP-2的表达无影响。     

TNF-α对体外培养人眼小梁细胞CD44s表达的影响及意义

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对体外培养人眼小梁细胞CD44s表达的影响及意义。方法采用体外培养的第3代人眼小梁细胞经浓度为0.0 ng/ml(对照组)、5 ng/ml、10ng/ml、20 ng/ml的TNF-α处理24 h后,分别应用流式细胞术定量和RT-PCR半定量检测CD44s的表达量。结果浓度为5 ng/ml、10 ng/ml、20 ng/ ml的TNF-α处理组流式细胞术结果平均荧光强度分别为(7.79±9.00)、(8989±14.64)、(96.15±14.96),与对照组的(73.93±12.39)比较,有显著性差异;RT-PCR法CD44/G3PDH像素值比值分别为(0.63±0.09)、(0.79±0.12)、(0.91±0.13),与对照组比值(0.58±0.10)比较有显著性差异。结论TNF-α能够上调小梁细胞膜蛋白CD44s的表达,通过调节CD44s蛋白的表达可能会抑制原发性开角型青光眼(POAG)患者小梁细胞的丢失。     

羊膜移植对实验性HSK中基质金属蛋白酶表达的影响

目的研究羊膜移植（AMT）对单纯疱疹性角膜炎（HSK）中基质金属蛋白酶（MMP-2，-9）表达的影响。方法40只BALB／c小鼠角膜感染Ⅰ型单纯疱疹病毒（HSV-1），实验组角膜行AMT。术后第0、2、7、14d取出角膜。常规病理切片、免疫组化染色和计算机图像分析检测角膜中MMP-2及-9的表达及平均光度值的变化。结果对照组20只鼠眼中17只发生HSK；AMT组仅有9只眼发生，差异有显著统计学意义（P〈0．01）。AMT组角膜上皮、基质病变程度及新生血管发生率明显低于对照组（P〈0．05）。免疫组化及图像分析显示对照组角膜细胞和浸润炎性细胞中表达的MMP-2及-9在第2d增加，14d时达高峰。AMT组各时间点MMP-2及-9表达低于对照组，差异有显著统计学意义（P〈0．05）。结论羊膜移植可能通过抑制角膜细胞及浸润的炎症细胞产生MMPs，从而抑制HSK的发生和发展。     

视屏终端工作者泪液中基质金属蛋白酶-9、组织金属蛋白酶抑制剂-1活性研究

目的 观察视屏终端工作者泪液中基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）、组织金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitors of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1）活性变化。设计 横断面研究。研究对象 视屏终端工作者45例（45眼）。方法 按照视频终端工作日平均时间将受试者分为三组：分别为<4小时者17例（17眼）、4~8小时者13例（13眼）、>8小时者15例（15眼）。采用眼表疾病指数问卷（OSDI）对眼部症状问卷调查。泪膜破裂时间（BUT）、基础泪液分泌试验（Schirmer I）、角膜荧光素染色检查。使用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测受试者泪液细胞因子MMP-9、TIMP-1的浓度。主要指标 干眼症状评分、BUT、Schirmer I、角膜染色、泪液中MMP-9、TIMP-1的浓度。结果 45例视屏终端工作者中干眼患病率为13.3%,日平均使用时间<4小时组、4~8小时组、>8小时组OSDI得分分别为（16.47±3.28）、（18.77±4.38）、（21.16±3.76）（F=6.11,P=0.005）,>8小时组OSDI得分较<4小时组高（P=0.003）,而4~8小时组与>8小时组和<4小时组OSDI得分无显著差异（P=0.311,0.319）; BUT、Schirmer I、角膜荧光染色得分三组均无显著性差异（P=0.687、0.122、0.714）。泪液中MMP-9、TIMP-1浓度在>8小时组中分别为（9.579±0.48） ng/ml和（3.174±0.29） ng/ml,明显较<4小时组[分别为（2.111±0.17） ng/ml和（0.391±0.06） ng/ml]和4~8小时组高[分别为（7.403±0.06） ng/ml和（2.286±0.28） ng/ml]（P值均=0.000）。<4小时组和4~8小时组泪液中MMP-9（P=0.72、0.13）、TIMP-1（P=0.21、0.37）工作前后浓度无显著差异。>8小时组中,工作后MMP-9、TIMP-1浓度均高于工作前水平（P=0.04、0.01）。结论 视屏终端工作者中干眼发生普遍。视屏终端工作日平均使用时间越长,泪液中MMP-9、TIMP-1浓度越高,提示泪液中MMP-9、TIMP-1浓度升高与干眼发病有关。     

层粘连蛋白对人视网膜母细胞瘤株基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9的影响

目的研究层粘连蛋白(laminin,LN)对人视网膜母细胞瘤株(Hxo-Rb44)基质金属蛋白酶-2(matrix metallopro-teinase,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase,MMP-9)及其mRNA表达的影响。方法在体外培养的人视网膜母细胞瘤细胞株(Hxo-Rb44)内分别加入含0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/mlLN的无血清RPMI-1640培养基,培养24h后,分别利用免疫组化SP染色法和PT-PCR检测每个实验组Hxo-Rb44表达MMP-2,MMP-9及其mRNA的含量,统计学方法比较不同实验组Hxo-Rb44表达MMP-2,MMP-9及其mRNA的差异。结果视网膜母细胞瘤细胞经LN刺激后,细胞内MMP-2和MMP-9及其mRNA表达均增加,免疫组化结果显示5μg/ml、10μg/ml、20μg/mlLN处理组MMP-2和MMP-9的染色灰度值分别是178.1±11.7和167.0±15.7、147.9±13.4和140.3±12.0、114.4±13.6和104.0±10.6,和对照组相比,差异有显著性(P<0.05),且LN浓度越高,其表达越强。5μ/ml、10!g/ml、20!g/mlLN处理组的MMP-2/β-actin、MMP-9/β-actin灰度值比值分别是0.181±0.016和0.254±0.023、0.201±0.021和0.287±0.020、0.243±0.019和0.320±0.022,与对照组相比,差异均有显著性(P<0.05),且随着LN浓度增高而增高,呈明显的量效关系。结论LN可诱导视网膜母细胞瘤细胞中表达的MMP-2和MMP-9及其mRNA增加,并呈剂量依赖型。提示LN对视网膜母细胞瘤的侵袭和转移可能具有促进作用。     

NF-κB活性对TNF-α调节小梁细胞表达MMP-3和MMP-9的影响

目的 探讨核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是否参与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)调节人眼小粱细胞(human trabecular cells,HTCs)表达基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinases-3,MMP-3)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)的过程.方法 采用RT-PCR法和酶谱分析法(zymography)检测体外培养的人眼小梁细胞经0 ng/ml(对照组)、1 ng/ml、10 ng/ml、25 ng/ml TINF-α处理24 h后,细胞表达MMP-3、MMP-9的量;运用NF-κB的特异抑制剂二硫氨基甲酸吡啶(pyrrolidine dithocarba-mate,PDTC)抑制NF-κB的活化,观察TNF-α对体外培养的HTCs MMP-3,MMP-9表达影响的改变.结果 运用RT-PCR法和酶谱分析法研究均发现经浓度为1ng/ml、10 ng/ml、25 ng/ml的TNF-α处理的细胞在mRNA和上清液中活性蛋白水平均能增加MMP-3、MMP-9的表达,各组mRNA/β-actin吸光度比值和条带酶解量与对照组相比差异均有显著性(P＜0.05).提前30 min加入PDTC,MMP-3、MMP-9的表达量分别较未加入PDTC组表达量明显减少,差异有显著性(P＜0.05).结论 TNF-α可上调MMP-3及MMP-9的表达,PDTC能够下调TNF-α对小梁细胞MMP-3及MMP-9的表达,因此推测NF-κB可能参与MMP3和MMP-9转录的启动.     

前部视网膜冷凝术对新生血管性青光眼患者房水中血管内皮生长因子含量的影响

目的 探讨前部视网膜冷凝术对新生血管性青光眼患者房水中血管内皮生长因子（VEGF）含量的影响以及VEGF含量的变化与虹膜新生血管之间的关系。方法对28例确诊为新生血管性青光眼患者行虹膜血管造影,确定新生血管的范围和数量后,行前部视网膜冷凝术,7～14d后经虹膜血管造影确定虹膜新生血管大部分消退后,再行小梁切除术。分别于前部视网膜冷凝术前和小梁切除术前抽取房水标本,另取30例老年性白内障患者房水标本。采用酶联免疫吸附法分别测定全部房水标本中的VEGF含量。结果小梁切除术前房水中VEGF的含量[（2．096±0．512）ng／ml]明显低于前视网膜冷凝术前房水中VEGF含量[（0．478±0．312）ng／ml],两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。小梁切除术前房水中VEGF含量明显高于老年性白内障患者房水中VEGF的含量[（0．198±0．045）ng／ml],两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论VEGF在虹膜新生血管的形成中可能发挥一定的作用;阻断促使虹膜产生新生血管的VEGF来源,可抑制新生血管性青光眼的发生.（中华眼科杂志．2007．43：622-625）     

肿瘤坏死因子对体外培养牛眼小梁细胞整合素表达的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)对体外培养小梁细胞整合素(integrin)表达的影响及意义.方法 体外培养的牛眼小梁细胞分别以TNF-α浓度0.0mg/ml、20ng/ml、40ng/ml、60ng/ml孵育36h,免疫组化法行整合素-β1染色后用倒置显微镜观测,RT-PCR半定量检测整合素α-5表达量,利用凝胶图像分析系统对实验结果图像分析.结果 实验组阳性反应图像积分光密度值高于对照组,且随TNF-α浓度增高旱线性递增关系.RT-PCR法integrin α-5/β-actin光密度比值与对照组筹异具有统计学意义.结论 在体外培养条件下TNF-α可引起牛眼小梁细胞整合素合成增加,整合素或许在选择性激光小梁成形术降低眼压方面发挥了一定作用.     

准分子激光原位角膜磨镶术前后泪液中神经生长因子水平与泪膜稳定性的相关性分析

目的探讨内源性神经生长因子（nerve growth factor，NGF）在准分子激光原位角膜磨镶术（laser in situ keratom-ileusis。LASIK）后干眼中的作用机制。方法LASIK术前及术后1天、2天、10天及30天在17例患者（34眼）下睑结膜囊内抽取泪液标本，采用双抗体夹心酶联免疫吸附分析法检测泪液中NGF含量，同时行泪膜稳定性的检查，并对两者行相关性分析。结果NGF含量在术前平均值为（21．96±8．22）μg／ml，术后1天、2天、10天含量分别为（12．76±3．55）μg／ml、（11．01±4．66）μg／ml、（13．55±4．93）μg／ml，与术前比较差异有统计学意义（P〈0．05）；术后30天含量（19．16±8．79）μg／ml，与术前比较差异无统计学意义（P〉0．05）。术前泪膜破裂时间（breaking-up time，BUT）均值为（12．62±1．99）s，术后1天、2天、10天和30天分别为（4．68±1．77）s、（4．84±1．92）s、（7．36±1．53）s和（8．82±3．08）s，与术前比较差异有统计学意义（P〈0．05）；术后1天与2天比较差异无统计学意义（P〉0．05），术后1天（2天）、10天、30天比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。泪液中NGF含量与泪膜稳定性具有正相关（r=0．484，P〈0．01）。结论LASIK术后泪液NGF的含量存在一个由降低到正常的动态变化过程，NGF含量变化是泪膜稳定性下降的相关因素之一。     

人高度近视眼房水中基质金属蛋白酶-2的表达

目的比较高度近视及正视的白内障患者房水基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达情况,探讨房水中MMP-2与高度近视的相关性。设计实验研究。研究对象30例年龄相关性白内障患者的房水。方法白内障手术中收集合并高度近视患者房水15例（实验组）及正视眼患者房水15例（对照组）。将房水标本通过蛋白质印迹法检测MMP-2酶原和活化MMP-2的表达。主要指标房水MMP．2的表达灰度值。结果实验组中MMP-2酶原表达量（430．4±57．3）大于活化MMP-2（294．5±35．2）（t=10．400,P=0.000）;对照组中MMP。2酶原表达量（402．8±57．7）大于活化MMP-2（280．3±49．7）（t=8．400,P=0．000）。实验组和对照组间比较,MMP．2酶原（t=1．320,P=0．200）及活化MMP-2（t=0．900,P=0．375）表达量差异均无统计学意义。结论在本样本有限的研究中,未检测到高度近视眼患者房水中MMP-2表达量的异常,房水中MMP-2有少量以活化形式存在,大部分以酶原形式存在,具有应激活化的潜能。（眼科,2009,18：260-264）     

NF-κB对人眼小梁细胞MMP-3及TIMP-1 mRNA表达的影响

目的研究NF-κB对人眼小梁细胞基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3，MMP-3）及组织金属蛋白酶抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteihase-1，TIMP-1）mRNA表达的影响。方法采用原代培养的人眼小梁细胞，通过脂质体转染的方法，将P65表达质粒转染小梁细胞，24h后通过RT-PCR方法检测MMP-3及TIMP—1 mRNA的表达。结果P65转染后MMP-3 mRNA的表达明显增高，与正常对照组相比差异有显著性（P〈0．05），TIMP—1 mRNA的表达与正常对照组相比无明显改变（P〉0．05）。结论NF—κB的活化可激活MMP-3的表达，提示NF-κB信号通路参与了小梁网外引流通道的调控。     

糖尿病性白内障患者外周血基质金属蛋白酶-9及肿瘤坏死因子-α水平的改变及意义

目的检测糖尿病性白内障患者外周血基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并分析其意义,以期为临床诊疗提供参考。方法分析2016年7月至2017年1月在我院接受诊疗的糖尿病性白内障患者的临床资料,并列为观察组。纳入同期收治的年龄相关性白内障患者作为对照组。检测并对比两组外周血MMP-9及TNF-α水平,并分析观察组患者空腹血糖水平与MMP-9及TNF-α水平的相关性。结果共纳入观察组92例,对照组93例。观察组患者空腹血糖水平显著高于对照组患者,具有统计学意义(7.6±1.5 mmol/L vs4.5±1.3 mmol/L;t=9.979,P<0.01)。观察组患者外周血TNF-α(18.9±4.3 ng/L vs 12.5±2.9 ng/L;t=7.862,P<0.01)水平与MMP-9(58.9±9.6 pg/mg vs 31.7±7.3 pg/mg;t=14.390,P<0.01)水平均显著高于对照组,相比较差异具有统计学意义。相关性分析显示,观察组患者外周血TNF-α水平与MMP-9呈现显著正相关关系,具有统计学意义(r=0.659,P<0.01)。观察组患者空腹血糖水平与外周血TNF-α(r=0.703,P<0.01)与MMP-9(r=0.571,P<0.01)水平均呈现显著正相关关系。结论与年龄相关性白内障相比,糖尿病性白内障患者外周血MMP-9及TNF-α水平显著升高,且与患者血糖水平正相关,提示两者发病机制可能存在差异。     

转化生长因子β1对培养人眼小梁细胞分泌Ⅳ型胶原的影响

目的观察转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对培养人眼小梁细胞分泌Ⅳ型胶原的影响.方法在成功地培养人眼小粱细胞的基础上,应用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay ELISA)及免疫组织化学技术,分别观察1ng/ml TGF-β1作用于小梁细胞后培养上清液中及细胞铺片上Ⅳ型胶原的含量.结果ELISA法TGF-β1作用第一个4天,实验组Ⅳ型胶原的含量为187.50±29.01pg/ml(x±s),对照组为93.75±20.56pg/ml,两者间的差异有统计学意义.TGF-β1作用第二个4天,实验组为128.75±52.02 pg/ml,对照组为91.25±21.36pg/ml,差异无统计学意义.Ⅳ型胶原的含量在对照组之间及实验组之间也无统计学差异.免疫组化法TGF-β1作用12天,实验组铺片与对照组相比Ⅳ型胶原的阳性着色增强.结论TGF-β1可以促进培养的人眼小梁细胞分泌Ⅳ型胶原,它可能是原发性开角型青光眼患者小梁细胞外基质堆积的原因之一.眼科学报2000;16217～219.     

纤维连接蛋白对原发性开角型青光眼小梁网细胞增殖、黏附和迁移的影响

目的通过研究纤维连接蛋白（FN）对体外培养的原发性开角型青光眼（POAG）患者小梁网细胞增殖、黏附、迁移的影响,探讨FN与POAG发病机制的关系。方法取临床确诊的POAG患者小梁网切除术中的深层巩膜组织块,进行小梁网细胞体外原代和传代培养．并对其进行免疫细胞化学和电镜鉴定。取第3代小梁网细胞,实验组分别加入浓度为5、10、20、40、100μg／ml的FN（含无血清DMEM／F12培养液）培养,对照组不加FN。培养24h后,采用CCK-8比色法和Transwell试剂盒检测各组光密度值,分析FN对POAG小梁网细胞增殖、黏附、迁移的影响。采用SPSS17．0统计软件,组间比较采用One-Way ANOVA分析,两两比较采用SNK检验。结果经过免疫细胞化学和电镜鉴定后,确定培养的细胞为POAG小梁网细胞。不同浓度FN对小梁网细胞均有影响。FN对POAG小梁网细胞有促增殖作用,在FN为5～10μg／ml浓度范围,小梁网细胞增殖相对缓慢,10μg／ml以后呈现上调趋势,在40μg／ml时达到增殖高峰,100μg／ml仍促进增殖,但是相对缓慢。各实验组光密度值分别与阴性对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）;各实验组不同浓度组间比较,差异有统计学意义（F=81．778,P〈0．05）。FN浓度为5、10、20、40、100μg／ml时．小梁网细胞的增殖率分别为18．6％、54．7％、67．9％、98．7％和121．5％。同样,FN对POAG小梁网细胞有明显的促黏附、迁移作用。小梁网细胞的黏附、迁移能力随FN浓度的增加而增强,基本呈现曲线上升趋势,与阴性对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论FN能促进POAG患者小梁网细胞增殖、黏附和迁移,其在POAG发病机制中的作用可能为通过影响POAG小梁网细胞的增殖、黏附、迁移功能参与房水流出的调节过程。     

肿瘤坏死因子-а对人眼小梁细胞增殖及NO合成的影响

目的研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对体外培养人眼小梁细胞增殖及一氧化氮(NO)合成的影响.方法体外培养人眼小梁细胞,采用细胞计数法及MTT法比较不同浓度TNF-α对细胞增殖能力的影响.采用硝酸还原酶法检测不同浓度TNF-α对细胞合成NO的影响. 结果 TNF-α浓度在10×103 IU·L-1以上可以抑制人眼小梁细胞增殖,呈浓度依赖性,并可以增加人眼小梁细胞NO合成,在浓度100×103 IU·L- 1达到最大促进程度. 结论 TNF-α可以抑制人眼小梁细胞增殖,增加NO生成,可能在青光眼发病过程中发挥重要作用.     

白细胞介素-1α对培养的人眼小梁细胞吞噬功能的影响

目的观察白细胞介素-1α（IL-1α）对体外培养的人眼小梁细胞（HTM）吞噬功能的影响。方法取人眼小梁组织进行小梁细胞体外培养,取传3～5代的人眼小梁细胞,加入不同浓度的IL-1α的DMEM-F12培养液,用倒置相差显微镜、光镜、电镜观察细胞吞噬功能的变化。结果小梁细胞吞噬乳胶微球数与IL-1α浓度（F=3．603,P=0．046）和作用时间（F=15．846,P=0．005）均有相关性（F=18．069,P=0．000）。结论IL-1α可以直接损害体外培养的人眼小梁细胞吞噬功能,其吞噬程度与IL-1α作用时间和浓度相关。     

质粒介导RNA干扰抑制视网膜母细胞瘤细胞的血管内皮生长因子表达

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）短发夹RNA（shRNA）表达质粒稳定转染对视网膜母细胞瘤（RB）细胞中VEGF表达的作用。方法构建VEGF shRNA表达质粒p4．1CMV—VEGF shRNA,以脂质体介导其转染两种RB细胞系SO—RB50和HXO—RB44,新霉素筛选结合梯度稀释法获得p4．1CMV—VEGF shRNA阳性RB细胞单克隆,继续培养扩增建立p4．1CMV—VEGF shRNA阳性RB细胞,用荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测RB细胞中VEGF基因的表达,并用酶联免疫吸附（ELISA）法检测RB细胞上清中VEGF蛋白的表达;以与哺乳动物基因组无同源性的shRNA表达质粒p4．1CMV—Neg shRNA作为阴性对照,同时以未做任何处理组作为空白对照。结果成功构建p4．1CMV—VEGF shRNA并获得其表达阳性的RB细胞克隆。阴性对照组和空白对照组SO-RB50细胞的VEGF基因表达量分别为实验组的5．02倍和6．32倍;阴性对照组和空白对照组HXO—RB44细胞分别为实验组的5．70倍和4．86倍。实验组SO—RB50细胞上清中,VEGF蛋白浓度为（187．69±83．89）μg/L,显著低于阴性对照组（822．98±187．98）μg/L和空白对照组（865．76±170．33）μg／L,差异有统计学意义（均P〈0．01）;实验组HXO—RB44细胞上清中,VEGF蛋白浓度为（162．20±66．33）μg／L,与阴性对照组（764．33±164．79）μg／L和空白对照组（828．22±145．94）μg／L比较,差异也有统计学意义（均P〈0．01）。结论VEGF shRNA表达质粒稳定转染可高效抑制RB细胞中VEGF的表达,靶向VEGF的RNA干扰可作为拮抗VEGF并治疗RB的有效手段。（中华服科杂志,2007,43：493-498）     

非球面人工晶状体与球面人工晶状体临床应用的对比研究

目的比较前表面光学改良的非球面人工晶状体与传统球面人工晶状体对超声乳化白内障吸除人工晶状体植入眼球差和视觉功能的影响。方法将169例（169只眼）拟行超声乳化白内障吸除人工晶状体植入术的老年性白内障患者随机分为2组,分别植入非球面人工晶状体（试验组）和传统球面人工晶状体（对照组）。术后检测人工晶状体眼的球差、矫正远视力、矫正远视力后的近视力、对比敏感度、眩光敏感度和表观调节力;随访时间为3个月。结果术后3个月,瞳孔直径5mm情况下人工晶状体眼的总球差试验组为（0．024±0．076）μm,对照组为（0．217±0．137）μm,差异有统计学意义（P〈0．05）,而两组角膜球差的差异无统计学意义（P〉0．05）。4．0°和2．5°视角的对比敏感度试验组分别为39．18±11．94和28．30±12．07,对照组分别为33．28±11．84和24．50±8．20,差异有统计学意义（P〈0．05）;6．3°、4．0°、2．5°和1．6° 视角的眩光敏感度试验组分别为30．90±9．21、27．09±8．45、19．20±8．71和12．08±4．44,对照组分别为27．08±8．24、23．30±6．24、15．53±4．37和10．04±4．20,差异有统计学意义（P〈0．05）;两组的矫正远视力、矫正远视力后近视力、表观调节力比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论与传统球面人工晶状体比较,非球面人工品状体可以减少人工晶状体眼的球差,提高视觉对比度,改善白内障患者术后的视觉质母。