金标快速法筛查献血者丙型肝炎抗体的应用评价

目的:对丙型肝炎抗体(抗HCV抗体)金标快速法试剂盒进行应用评价.方法:采用ELISA法和金标快速法平行检测200份献血者、50例已确诊的丙型肝炎患者和50例健康体检者血清中的抗HCV抗体并比较结果.结果:ELISA法和金标快速法检测200份献血者血清抗HCV抗体的阳性结果分别是22例和20例,有2例ELISA法阳性而金标法阴性;检测50例已确诊的丙肝患者血清抗HCV抗体的阳性检出率分别为100%和96%,两法对50例健康体检者的结果均为阴性.以ELISA法的结果为真值,金标快速法的敏感性为947%、特异性为100%、准确性为987%.结论:金标快速法适用于抗HCV抗体的流行病学调查、单份标本和急诊检验,但其敏感度低于ELISA法,如时间允许,最好选择ELISA法进行复检.     

提高丙型肝炎诊断准确性的检测方法

目的 探讨避免丙型肝炎病毒感染的漏诊及提高诊断效率的检测方法. 方法 采用RT-PCR和ELISA法,检测186例疑似HCV感染患者血浆中的HCV-RNA及血清中的抗-HCV抗体. 结果 186份标本中RT-PCR检测HCV-RNA阳性标本104份,阳性率为55.91％;HCV抗体检测阳性标本116份,阳性率为62.37％,2者符合率89.66％.2种检测方法均为阳性的标本92份,阳性率49.46％. 结论 同时开展HCV-RNA与抗-HCV抗体检测可以避免HCV感染的漏诊,提高丙型肝炎诊断的准确性.     

酶联免疫(ELISA)法和胶体金法检测抗-HCV特异性抗体的效果

目的比较酶联免疫(ELISA)法和胶体金法对抗-丙型肝炎病毒(HCV)特异性抗体的检验效果。方法选取医院2017年3月至2018年3月收治的80例丙型肝炎患者,按照电脑随机分配原则进行分组,各40例,对照组使用ELISA法检测抗-HCV特异性抗体,试验组使用胶体金法检测,比较两组检验效率。结果对照组检测阳性率为92.5%,试验组为90.0%,差异无统计学意义(P>0.05);对照组检测时间为(102.31±5.61)min,检测成本为(16.45±2.05)元,试验组检测时间为(25.87±4.87)min,检测成本为(6.35±1.20)元,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ELISE和胶体金法检测抗-HCV特异性抗体均有较高的检出率,但胶体金法的检验时间及检验成本均较低,且操作简便。     

2种登革热抗体检测试剂应用评价

[目的]探讨酶联免疫吸咐试验(EIJSA)、快速免疫层析法(ICT)检测试剂检测登革病毒(DV)抗体的敏感性、特异性及优缺点。[方法]用ELISA及ICT试剂同时检测来自登革热疫区入境人员血清标本的DV-IgM、IgG抗体,比较检测结果。[结果]用ELISA检测91份来自登革热疫区但无登革热体征的入境人员血清DV-IgG抗体,阳性59份,阳性率64．8％；对59份DV-IgG抗体阳性标本采用ICT法检测DV-IgM、IgG抗体,结果检出4份DV-IgM阳性,未检出DV-IgG阳性。ICT法检测181份血清标本DV-IgM、IgG抗体,检出12份DV-IgG阳性,阳性率6．63％；2份DV-IgM阳性,阳性率1．10％；其中44份血清标本采用ICT试剂不同批号检测DV-IgM、IgG抗体,批号为10014c- 12405的检出DV-IgM阳性7份,未检出DV—103阳性；批号为10014c一24505的检出4份DV-IgG阳性,1份DV-IgM阳性。[结论]2种试剂的敏感性和特异性及不同批次之间的稳定性有待进一步论证。     

输血前患者检测丙肝病毒核心抗原临床意义探索

[目的]应用酶联免疫法(ELISA法)进行丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab)检测,研究输血前患者丙肝病毒核心抗原检测的临床意义.[方法]运用酶联免疫法(ELISA)HCV核心抗原(HCV-cAg)试剂盒,有选择地对442例输血前临床患者血清标本(其中394例丙肝抗体检测阴性、48例丙肝抗体检测阳性)进行HCV-cAg检测.并对HCV-cAg阳性标本进一步作HCV-RNA检测.[结果]442例血清标本,检测出HCV核心抗原(HCV-cAg)阳性15例,阳性率3.39%,其中394例HCV-Ab阴性标本中HCV-cAg阳性2例,阳性率0.51%;48例HCV-Ab阳性的样本检出HCV-cAg阳性13例,阳性率为27.08%.[结论]丙型肝炎病毒核心抗原对丙型肝炎病毒感染的检出时间早于抗体,缩短了检测"窗口期",利于早期检测出丙肝病毒感染,避免或减少"输血后感染丙肝"等医疗纠纷.同时证实,患者感染丙肝病毒后的病程中随着抗体的出现,血液中的HCV核心抗原(HCV-cAg)大多减少或消失,因此HCV-cAg检测可作为HCV抗体检测的联合筛检方法,尤其对输血前、术前HCV筛查的患者联合应用更具有临床意义,其检测成本较PCR低廉,适合于丙型肝炎的常规临床筛查应用,对保障临床输血和手术安全起到积极作用.     

丙型肝炎病毒核心抗原在丙型肝炎早期诊断中价值

目的 评估丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原测定方法,用于丙型肝炎(以下简称丙肝)早期诊断的特异性、敏感性以及在缩短HCV窗口期诊断时间上的可行性及临床价值;为该方法用于临床提供科学实验依据.方法 特异性评估:对1 948份未感染HCV阴性血样(1 500份供血者的血样、400份健康检查的血样及48份非丙肝患者血样)进行HCV血清学及分子生物学检测;首先用2种酶联免疫吸附试验(ELISA)对HCV抗体进行测定,所有标本全部阴性;然后将上述标本全部进行HCV核心抗原测定,凡初次阳性的标本复查1次;并用HCV荧光定量聚合酶链反应(HCV荧光定量PCR)进行确证.敏感性及丙肝早期诊断应用价值评估:对55例丙肝患者及9套HCV血清panel进行HCV核心抗原测定;阴性结果复查,并用HCV荧光定量PCR确证.方法内及方法间精密度评估:对2份HCV RNA阴性、HCV抗体阴性的标本进行HCV核心抗原重复测定,并计算均数及CV值.结果 非HCV感染标本测定结果表明,1 500份血库标本中有8份在初次HCV核心抗原测定时出现阳性(0.53％),400份健康检查血样HCV核心抗原测定结果全阴,48例住院非丙肝患者HCV核心抗原检测结果只有1例阳性(2.08％).上述抗原阳性血样的HCV荧光定量PCR均为阴性,特异性为99.54％;96份HCV感染的血样(55例来自丙肝患者;41份来自9套HCV血清panel)进行HCV核心抗原测定及HCV荧光定量RNA测定,结果表明有92份HCV核心抗原测定阳性,敏感性为95.83％;对9套HCV血清panel测定结果表明,与HCV抗体方法相比,HCV抗原测定及HCV荧光定量PCR都能显著地将HCV感染窗口期平均缩短至36 d;方法内及方法间精密度的CV值均小于10％.结论 HCV核心抗原ELISA测定法具有与传统HCV荧光定量PCR相同的高度敏感性及特异性,可以明显缩短HCV早期感染窗口期,有效阻止HCV的传播.     

两种丙型肝炎抗体检测方法的结果比较

丙型肝炎是流行广泛、危害严重的传染性疾病,我国人群感染率为3．1％。丙型肝炎抗体（抗HCV抗体）检测是目前诊断丙型肝炎的常有指标。为了寻找一种能用于流行病学调查和高危人群、献血员、孕妇等体检的操作简便,成本较低的抗HCV抗体检测方法,笔者对70例丙型肝炎患者分别采用酶联免疫法（ELISA）和胶体金免疫层析法（GICA）进行了抗HCV抗体检测比较,现报道如下。     

电化学发光免疫分析法及酶联免疫吸附试验检测丙型肝炎抗体的效果

目的探讨电化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)及酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)用于丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)抗体检测的效果。方法收集2014年1月—2015年12月采用CLIA法和ELISA法检测HCV抗体结果可疑的血清标本,最终以重组免疫印迹法(recombinant immunoblot assay,RIBA)确诊丙型肝炎(丙肝)感染血清63例,比较CLIA法和ELISA法检测HCV抗体阳性的符合率,分析CLIA法中低值组(1S/CO8)和高值组(S/CO≥8)的检测阳性率。结果 ELISA法检测抗HCV抗体的阳性符合率为90.48%(57/63),CLIA检测HCV抗体阳性符合率为96.83%(61/63),阳性符合率比较差异无统计学意义(χ~2=2.136,P0.05)。经RIBA试验及CLIA法检测同时确诊的61例HCV抗体阳性标本中,低值组检测HCV抗体阳性率为24.59%(15/61),明显低于高值组的90.16%(55/61),差异有统计学意义(χ~2=53.626,P0.05)。结论 CLIA法和ELISA法均可用于HCV抗体的检测,CLIA法阳性符合率相对较高,可作为HCV一种常规检测方法,但应对S/CO值较低者进一步使用RIBA检查确认,以降低漏检率。     

汉坦病毒核蛋白及其单抗标记物在建立ELISA试剂中的应用

[目的]利用重组汉坦病毒核蛋白及其单克隆抗体的酶标记物建立IgM捕获ELISA诊断试剂。[方法]制备、纯化重组核蛋白抗原和抗核蛋白单抗并进行辣根过氧化物酶标记，在抗人μ链包被板中结合四甲基联苯胺-过氧化氢（TMB／H2O2）酶底物系统，从血清中检测肾综合征出廊热早期特异性IgM抗体，并与免疫荧光抗体法（IFA）进行比较。[结论]检测42份可疑HFRS病人血清，ELISA法和IFA法均阳性的20份，均阴性的19份；ELISA法阴性、IFA法阳性的1份，ELISA法阳性、IFA法阴性的2份，2种方法的差异无统计学意义（配对x^2=0．08，P〉0．05）。[结论]用重组汉坦病毒核蛋白及其单克隆抗体的酶标记物建立IgM捕获ELISA诊断试剂可用于HFRS的早期IgM抗体检测。     

同时检测4种传染病病原体的蛋白质微阵列研究

[目的]建立1种用蛋白质微阵列法可同时检测血清中艾滋病病毒（HIV）抗体、丙型肝炎病毒（HCV）抗体、梅毒螺旋体（TP）抗体和乙型肝炎病毒表面抗原的方法。[方法]将基因工程HIV、HCV、TP重组抗原和乙肝病毒单克隆抗体共价结合于固相载体玻片上，制成蛋白质微阵列。血清样本经稀释、加样、孵育、洗涤后，加上Cy3荧光标记物，用激光芯片扫描系统对蛋白质微阵列进行扫描成像。将获得的图像用Imagene专用分析软件进行分析，所获数据根据cutoff值自动生成判断结果。用此蛋白微阵列系统检测了100份4个项目皆阴性的血清标本，确定了其cutoff值。检测了经酶联免疫吸附试验（EUSA）筛选出4个项目皆阴性的标本40例；艾滋病病毒抗体阳性标本30例；乙肝表面抗原、丙肝抗体、梅毒特异性抗体阳性血清各100份。[结果]蛋白质微阵列法检测艾滋病病毒抗体、丙肝抗体和乙型肝炎表面抗原的阳性和阴性标本的符合率皆为100％，梅毒特异性抗体阳性符合率为97％，阴性符合率为100％。[结论]蛋白质微阵列法检测HIV、HCV、TP和HBsAg与EUSA法检测结果具有高度的符合率。该法具有高通量、快速、特异性强、操作简便等特点，适用于大规模样本的分析，在卫生检疫传染病检测方面具有应用和推广价值。