肝肺综合征大鼠肺组织内皮素-1及其受体基因的表达

目的探讨内皮素-1及其受体在大鼠肝肺综合征(HPS)发病机制中的作用。方法分别采用RT-PCR和原位杂交方法检测HPS大鼠肺组织内皮素前体原(ppET-1)mRNA水平及两种亚型内皮素-1(ET-1)受体ETRA和ETRB在HPS大鼠肺组织的分布和表达。结果HPS大鼠肺组织ppET-1mRNA表达显著升高(0.48±0.06),为假手术(Sham)组表达量(0.21±0.04)的2.3倍(t=2.4114,P<0.05)。HPS大鼠肺血管ETRA的分布及染色强度与Sham组比较无明显变化,染色面积和平均积分光密度值与Sham组比较差异无统计学意义(P>0.05),而ETRB在远端肺小动脉和小静脉内膜上表达明显增强,尤以静脉明显。ETRB染色面积和平均积分光密度值明显高于Sham组(P<0.001)。结论HPS大鼠肺组织ET-1基因表达水平升高。ET-1在HPS大鼠肺血管的总体反应可能由于ETRB表达的增高而表现为扩张。     

内皮素-1在大鼠肝肺综合征发病机制中的作用

目的 探讨内皮素-1(ET-1)在大鼠肝肺综合征(HPS)发病机制中的作用.方法 应用放免法检测HPS大鼠血浆和肝、肺组织匀浆中ET-1的水平.结果 ①HPS大鼠血浆和肝组织、肺组织匀浆中ET-1水平动态升高.②各阶段血浆和肝、肺组织匀浆中ET-1水平与谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)呈正相关.结论 在HPS形成过程中,血浆和肝、肺组织匀浆中ET-1水平持续升高,与肝功能损害有关,提示ET-1可能参与HPS的发生.肺组织匀浆中升高的ET-1可能更多地通过与在肺血管表达增强的内皮素受体B(ETRB)结合从而扩张肺血管.     

高压氧治疗肝肺综合征大鼠的实验研究

目的 研究高压氧治疗对大鼠肝肺综合征(HPS)的作用.方法 采用胆总管结扎术(CBDL)制备HIS动物模型.44只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术对照组(Sham组)8只、单纯造模组(CBDL5w组)12只、治疗1周组(HBOT1w组)12只、治疗2周组(HBOT2w组)12只.两治疗组在造模成功后送入高压氧舱治疗,分别治疗1周和2周.Sham组和CBDL5w组大鼠在术后5周,HBOT1w组和HBOT2w组在治疗结束后,进行血气分析、肝功能以及血清一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)浓度检测,肝、肺病理检查,并使用激光多普勒血流仪检测肝、肺微循环.结果 CBDL5w组大鼠肝功能检测中ALB降低,ALT、AST、ALP、γ-GT、TBIL及TBA均升高,血气分析中PaO2降低,PA-aO2增大,与Sham组相比均有显著差异(P＜0.01),且病理检查CBDL5w组大鼠的肝脏组织可见胆汁性肝纤维化表现,肺组织可见肺毛细血管扩张、充血,证实HPS大鼠模型制成;同时与Sham组相比,CBDL5w组大鼠血清NO及ET-1浓度均升高(P＜0.01),肝脏毛细血管血流量降低(P＜0.01),肺脏毛细血管血流量增大(P＜0.01).经高压氧治疗后,HBOT1w组大鼠与CBDL5w组相比,以上指标均好转(P＜0.01).HBOT2w组大鼠与CBDL5w组相比,除血清NO水平和肺脏毛细血管血流量无统计学差异(P＞0.05)外,其余指标的差异有显著性意义(P＜0.01).结论 高压氧治疗大鼠HPS可通过降低血清NO、ET-1浓度,提高组织氧含量及改善肝、肺微循环等,有效改善肝、肺功能及病理,且治疗前期效果更好.     

肝肺综合征大鼠肾上腺髓质素及其受体的表达

目的 探讨肾上腺髓质素(ADM)在肝肺综合征(HPS)发病机制中的作用。方法 采用Wistar大鼠行胆总管结扎术(CBDL)制备HPS动物模型，进行血气分析，使用放射免疫方法检测血浆和肺组织匀浆中ADM水平；采用RT-PCR方法检测肺组织中ADM mRNA及其特异性受体Ll mRNA的表达。结果(1)从术后第3周至第5周，CBDL组大鼠血浆和肺组织中ADM水平动态升高；(2)CBDL 5周组大鼠肺组织中ADM mRNA的表达较对照组升高，差异有显著性(P＜0．05)，而两组间Ll mRNA的表达差异无显著性(P＞0．05)；(3)相关分析表明，各阶段血浆和肺组织ADM水平均与天冬氨酸转氨酶(AST)、门静脉压力、肺泡-动脉氧分压差(A-aDO2)呈正相关，出现腹水者血浆和肺组织ADM水平高于未出现腹水者。结论 在HPS形成过程中，血浆和肺组织中扩血管物质ADM水平持续升高，与肝功能受损状态、门脉压力升高程度、腹水形成及PaO2降低有关，提示ADM增多可能参与HPS时肺内血管扩张(IPVD)的发生。     

血管活性物质在大鼠肝肺综合征发病机制中的作用

目的:探讨内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、一氧化氮(nitric oxide,NO)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在大鼠肝肺综合征(hepatopulmonary syndrome,HPS) 发病机制中的作用.方法:健康Wistar大鼠32只随机平均分为假手术组、CBDL术后3 wk组、4 wk组、5 wk组.采用胆总管结扎(common bile duct ligation, CBDL)术制备大鼠HPS模型成功后,行肝功能及肝肺病理检查.放射免疫分析法检测大鼠血浆和肝组织、肺组织匀浆中ET-1和CGRP的水平,利用硝酸还原酶法检测大鼠血清和肝、肺组织匀浆中NO的水平.结果:在大鼠HPS形成过程中,肝细胞变性、坏死,大量纤维组织增生,形成假小叶.肺泡毛细血管增生、扩张.伴肺泡间隔增宽、容量减小.术后3-5 wk,CBDL组大鼠血浆和肝、肺组织匀浆中ET-1、NO、CGRP水平显著升高,且与ALT水平呈正相关(血浆,ET-1:r=0.9889,P=0.0111:NO:r-=0.9935,P=0.0065;CGRP:r=0.9714.P=0.0286;肝组织:r=0.9969,P=0.0035;r=0.9993,P=0.0070;r=0.9507,P=0.0493;肺组织:r=0.9939,P=0.0061;r=0.9991,P=0.0009;r=0.9557,P=0.0443).结论:在大鼠HPS形成过程中,血浆和肝、肺组织匀浆中ET-1,NO和CGRP水平持续升高,提示血管活性物质ET-1,NO和CGRP在其发病机制中可能起着一定作用.     

实验性肝肺综合征大鼠肺组织血红素氧合酶-1的表达

目的探讨血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)在肝肺综合征(hepatopulmonary syndrome,HPS)大鼠肺组织中的动态表达。方法采用Sprague-Dawley大鼠胆总管结扎术(common bile duct ligation,CBDL)方法制备HPS动物模型,随机分为假手术组(sham operation,sham)、2周组和5周组,每组6只。采用HE及Masson染色观察肝硬化形成情况,采用HE染色观察肺血管扩张,血气分析检测动脉血氧分压。应用免疫组化方法及Western-blot观察HO-1蛋白在肺组织的表达和分布特点,采用RT-PCR方法检测肺组织中HO-1 mRNA的表达。结果通过CBDL成功复制了HPS模型。免疫组化光镜下显示5周组肺组织血管壁及内皮细胞HO-1表达增高,而2周组和sham组表达不明显;Western blot显示5周组HO-1蛋白相对表达(1.22±0.18)明显高于2周组(0.12±0.03,P=0.00)和sham组(0.07±0.02,P=0.00),而2周组与sham组无显著性差异(P=0.58);RT-PCR显示5周组HO-1mRNA相对表达(1.84±0.17)明显高于2周组(0.77±0.22,P=0.00)和sham组(0.12±0.05,P=0.00),2周组明显高于sham组(P=0.03)。结论 HO-1随HPS的形成表达增加可能是HPS的发病机制之一。     

奥美沙坦对心肌梗死后心力衰竭大鼠内皮素1和肾上腺髓质素水平的影响

目的探讨奥美沙坦对心肌梗死后心力衰竭大鼠血浆内皮素1(endothelin-1,ET-1)、肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)水平的影响。方法 Wistar大鼠38只,随机分为对照组10只、假手术组10只、模型组9只、奥美沙坦组9只。采用结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法制作心肌梗死后心力衰竭模型,灌胃法给药8周。超声心动图检测用药前后大鼠心功能,放射免疫法测定血浆ET-1、ADM水平。结果用药前,对照组与假手术组大鼠LVEF、ET-1、ADM水平差异无统计学意义(P>0.05);与假手术组比较,模型组和奥美沙坦组大鼠LVEF明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。用药后,与假手术组比较,模型组大鼠ET 1、ADM水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,奥美沙坦组大鼠LVEF明显改善,ET-1、ADM水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论应用奥美沙坦治疗可以改善心肌梗死后心力衰竭大鼠心功能,降低心力衰竭时升高的血浆ET-1、ADM水平,抑制慢性心力衰竭时肾素-血管紧张素系统以外的神经内分泌系统激活,对慢性心力衰竭心脏起到保护作用。     

罗格列酮对糖尿病合并高血压大鼠血压的影响及其机制

目的探索罗格列酮对糖尿病合并高血压大鼠血压的影响及其可能的机制。方法选择自发性高血压大鼠24只,采用链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病合并高血压模型,造模后,随机分为对照组12只,治疗组12只(罗格列酮灌胃),治疗4周,观察血压变化,检测血清NO和一氧化氮合成酶(NOS)含量,用免疫组织化学染色检测血管内皮素受体A(ETRA)和内皮素受体B(ETRB)表达变化。结果与对照组比较,治疗组大鼠血压明显降低(P<0.05);血清NO和NOS含量均明显增高[(29.98±4.86)μmol/L vs(38.68±4.57)μmol/L,P<0.01;(15.53±1.19)U/ml vs(17.51±1.48)U/ml,P<0.01];心肌ETRA水平无明显变化(P>0.05),而ETRB表达水平显著升高(P<0.01)。结论罗格列酮能明显降低糖尿病合并高血压大鼠的血压,产生降压现象的机制可能是通过选择性的上调ETRB表达,提高NOS活性,进而增加NO合成,促进血管舒张实现的。     

肾上腺髓质素和内皮素在糖尿病大鼠肾组织的表达

目的 探讨肾上腺髓质素(ADM)、内皮素-1(ET-1)及其受体在糖尿病肾病(DN)发病过程中的动态变化.方法 单侧肾切除大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱发实验性糖尿病模型,大鼠随机分为对照组(A组)和糖尿病组(B组),分别在注射STZ后第2、4和6周取材.采用免疫组化检测ADM、ET-1及其受体的表达,Western印迹检测肾上腺髓质素受体(ADMR)和内皮素受体A(EDNR-A)蛋白的表达,RT-PCR检测ADM和ET-1 mRNA的表达.结果 B组较A组ADM的表达先升高后降低,ADMR、ET-1和EDNR-A表达增强.结论 ADM和ET-1及其受体等血管活性物质在DN发病过程发挥着重要的作用.     

红景天对缺血心肌肾上腺髓质素表达的靶向作用

目的:探讨红景天对大鼠心肌梗死后血管新生过程中肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)表达的调控作用。方法:将8周龄雄性Wistar大鼠分为4组,正常对照组、假手术组、心肌梗死造模后生理盐水对照组(生理盐水组)及心肌梗死造模后红景天干预组(红景天组)。饲养1周后处死动物,摘取心脏制作石蜡切片,采用CD31免疫组化染色进行微血管标记染色;处死动物前留取血浆,采用ELISA法测定血浆ADM浓度;Western blot检测不同组心肌组织ADM的蛋白表达水平。结果:与正常对照组、假手术组及生理盐水组相比,红景天组大鼠心肌梗死边缘区微血管密度明显升高;红景天组(1.06±0.01)及生理盐水组(0.52±0.09)的缺血心肌组织ADM蛋白表达水平较正常对照组及假手术组均明显升高(P0.05),红景天组较生理盐水组ADM蛋白表达水平进一步升高(P0.05);红景天组[(32.28±5.13)ng/L]和生理盐水组[(28.55±3.49)ng/L]血浆ADM水平较正常对照组及假手术组均明显升高(P0.05),但红景天组和生理盐水组之间无明显差异。结论:心肌梗死后大鼠血浆ADM水平变化与心肌内不同步,红景天对ADM表达的上调作用主要在缺血心肌,具有一定的靶向性。     

麝香保心丸对心力衰竭大鼠内皮素1和肾上腺髓质素水平的影响

目的探讨麝香保心丸对心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠血浆内皮素1(ET-1)和肾上腺髓质素(ADM)水平的影响。方法 80只Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组,10只)、假手术组(B组,10只)、其余60只制作心力衰竭模型,将制模成功35只大鼠又分对照组(C组,9只)、麝香保心丸小剂量组(D组,9只)、麝香保心丸大剂量组(E组,9只)和阳性药物对照组(F组,8只),采用灌胃法给药。超声心动图检测用药前后大鼠心脏功能,放射免疫法检测ET-1、ADM水平。结果 A组与B组用药前LVEF、左心室舒张末内径(LVEDD)、左心室收缩末内径(LVESD)无显著差异。与B组用药前比较,C组、D组、E组、F组大鼠LVEF明显降低,LVEDD、LVESD明显增加(P0.01);与C组用药后比较,E组大鼠LVEF明显升高,LVEDD、LVESD明显减小(P0.05),D组、F组LVESD明显减小(P0.05);与B组比较,C组大鼠ET-1、ADM水平明显升高(P0.05,P0.01);与C组比较,D组、E组、F组大鼠ET-1水平明显降低(P0.05,P0.01),E组ADM水平明显降低(P0.01)。结论麝香保心丸可能通过改善心肌血供,进而抑制慢性心力衰竭时神经内分泌系统的激活,并起到了有效治疗作用。     

缺血性脑血管病患者血浆肾上腺髓质素与内皮素的测定及其临床意义

目的　监测缺血性脑血管病患者血浆肾上腺髓质素 (ADM)含量变化及其与血浆内皮素 (ET- 1)的关系 ,探讨其在缺血性脑血管病发生发展中的作用及其临床意义。方法　应用放射免疫法测定 88例缺血性脑血管病患者 (包括 4 0例脑梗死和 4 8例腔隙性脑梗死 )和 4 5例正常对照者的血浆 ADM和 ET- 1含量。结果　缺血性脑血管病组患者血浆 ADM含量及 ET- 1含量均高于正常对照组含量 (P<0 .0 5 ) ;脑梗死组血浆 ADM水平高于腔隙性脑梗死组的水平 (P<0 .0 5 ) ;缺血性脑血管病组血浆 ADM水平与血浆 ET- 1呈显著正相关 (r=0 .5 85 ,P<0 .0 5 )。结论　肾上腺髓质素参与了缺血性脑血管病的发生发展过程 ,可能对缺血性脑组织有保护作用。血浆ADM可作为脑梗死患者血管内皮损伤程度的指标之一     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织肾上腺髓质素的表达

目的 探讨肾上腺髓质素（adrenomedullin，ADM）在不同月龄大鼠脑缺血再灌注（I／R）脑组织的表达情况。方法 采用栓线法制成大鼠大脑中动脉I／R模型，阻断血流2h后再灌注4h。应用免疫组织化学染色法检测不同月龄段大鼠局灶性脑I／R后血浆ADM。结果 正常大鼠脑内即有ADM表达，假手术后ADM表达略有增加，但与正常对照组相比无明显差异（P〉0．05）；大鼠脑I／R后ADM免疫阳性细胞增多，与正常对照组及假手术组相比差异显著（均P〈0．05）；大鼠脑I/R后缺血侧及缺血对侧ADM免疫阳性细胞均增多，但以缺血侧区域增多最为明显（P〈0．05）。老龄大鼠脑I／R后ADM免疫阳性细胞数明显高于青年大鼠（P〈0．05）。结论 脑I／R后ADM表达增强，ADM表达增强与血管硬化相关。     

两种冠状动脉旁路移植术对老年患者血浆肾上腺髓质素和内皮素-1的影响

目的 探讨体外循环和非体外循环下冠状动脉旁路移植术式对老年患者手术后血浆肾上腺髓质素(ADM)及内皮素-1(ET-1)的影响.方法 选择体外循环和非体外循环冠状动脉旁路移植术老年患者各20例,于术前、术后即刻、术后6 h、24 h和术后3 d抽取静脉血,采用放射免疫法测定血浆ADM及ET-1的浓度.结果 体外组和非体外组患者术后即刻ET-1及ADM浓度均明显升高,ET-1分别为(67.59±10.18)ng/L和(58.73±9.64)ng/L,ADM分别为(284.90±36.24)ng/L和(243.25±25.70)ng/L,且体外组升高更明显(P＜0.05);体外组和非体外组术后6 h ET-1及ADM浓度开始下降,并延续至24 h后,术后3 d非体外组基本恢复至术前水平,体外组尚处于较高水平.结论 体外循环和非体外循环冠状动脉旁路移植术均可引起血管内皮功能紊乱,导致血浆ET-1及ADM水平升高,但非体外循环冠状动脉旁路移植术对其影响较小.     

愈疡散对胃溃疡大鼠血一氧化氮和内皮素的影响

[目的]探讨愈疡散对胃溃疡大鼠血一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)的影响.[方法]采用大鼠冰醋酸胃溃疡模型,设空白对照组(A组)、假手术组(B组)、西药对照组(C组)、愈疡散大、小剂量组(D、E组)、胃溃疡模型组(F组).A、B、F组均灌服0.85%氯化钠溶液;D、E组分别灌服愈疡散5.0g/kg体重、2.5g/kg体重;C组灌服雷尼替丁0.03g/kg体重.于治疗前后分别检测血NO及ET-1.实验结束后,用苏木精-伊红染色对大鼠再生胃黏膜厚度、上皮细胞/腺腔数比值进行观察.[结果]造模7 d,C、D、E、F组血清NO显著降低,血浆ET-1明显升高,与A、B组比较差异有统计学意义(P＜0.05).治疗28 d,D组血清NO显著升高,而血浆ET-1明显降低,与F、E组比较均P＜0.05.再生胃黏膜厚度:D、E、C组明显高于F组(P＜0.05),D、E组与A、B组比较均P＜0.05.上皮细胞/腺腔数比值:A、B组与C、F组,D组与C、F组之间均P＜0.05.[结论]愈疡散促进溃疡愈合,增加胃黏膜的防御能力,提高再生黏膜功能成熟度,可能与其诱导、促进NO合成,反馈性地抑制ET-1释放,维持NO和ET-1的动态平衡有关.     

原发性高血压不同危险度分层中血管活性物质的水平及药物治疗的影响

目的:观察原发性高血压患者不同危险度分层的血浆肾上腺髓质素（ADM）、内皮素-1（ET-1）、假性血友病因子（VWF）及心房钠尿肽（ANP）的水平及临床意义。方法:随机选取不同危险度分层的原发性高血压患者100例。30例正常人对照。测定血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）治疗前后血浆ADM、ET-1、VWF、ANP浓度的变化。ADM、ET-1、ANP采用放免分析法,VWF采用酶联免疫法。结果:治疗前各组与对照组比较,ADM、ET-1、VWF、ANP显著升高（P<0.05或P<0.01）。治疗后各组ADM、VWF、ET-1、ANP显著降低（P<0.01）。结论:ADM、ET-1、VWF、ANP与原发性高血压危险度分层相关。通过治疗可降低ADM、ET-1、VWF、ANP的水平,改善内皮功能。