ＴＲＡＩＬ联合蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２诱导肺癌Ａ５４９细胞凋亡的实验研究

目的　观察ＴＲＡＩＬ对肺癌Ａ５４９细胞的体外生长抑制及诱导凋亡作用,并探讨ＴＲＡＩＬ与蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２联合用药诱导细胞凋亡的作用及其机制。方法　采用ＭＴＴ法检测不同浓度ＴＲＡＩＬ对肺癌Ａ５４９细胞增殖的影响;应用流式细胞仪技术检测ＴＲＡＩＬ、蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２及其两药联合干预２４ｈ对肺癌Ａ５４９细胞凋亡率的影响;采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ检测药物干预前后细胞凋亡相关蛋白Ｃａｓｐａｓｅ-８、Ｃａｓｐａｓｅ-９以及核转录因子ＮＦ-κＢ的表达情况。结果　ＭＴＴ结果显示不同浓度ＴＲＡＩＬ对肺癌Ａ５４９细胞的体外抑制作用与剂量效应正相关,２４ｈＩＣ５０为９６.３２２μｇ／ｍｌ,４８ｈＩＣ５０为４３.５９μｇ／ｍｌ;流式细胞术显示ＴＲＡＩＬ与ＭＧ１３２联合用药后肺癌Ａ５４９细胞凋亡率明显增高（平均６７.６５％）,与ＴＲＡＩＬ（平均２３.５５％）、ＭＧ１３２（平均２５.９１％）单药组比较,有显著性差异（Ｐ＝０.０１６）;Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ结果显示,与ＴＲＡＩＬ单药组比较,两药联合后细胞凋亡相关蛋白Ｃａｓｐａｓｅ-８、Ｃａｓｐａｓｅ-９表达明显增强（Ｐ＝０.００６）,抑制细胞凋亡因子ＮＦ-κＢ表达则明显减弱（Ｐ＝０.０４）。结论　ＴＲＡＩＬ可抑制Ａ５４９细胞的增殖,呈浓度依赖关系;ＴＲＡＩＬ与蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２联合应用可以明显提高细胞凋亡率,可能与蛋白酶抑制剂ＭＧ１３２降低ＮＦ-κＢ的活性,增强细胞对ＴＲＡＩＬ诱导凋亡的敏感性,促进凋亡相关蛋白Ｃａｓｐａｓｅ-８及Ｃａｓｐａｓｅ-９的表达有关。     

急性白血病患者血清可溶性Fas受体水平及其意义

Ｆａｓ(Ａｐｏ 1 ＣＤ95 )是细胞表面蛋白 ,它属于肿瘤坏死因子及神经生长因子 (ＴＮＦ ＮＧＦ)受体超级家族 ,参与细胞凋亡的调节。除膜型Ｆａｓ(ｍＦａｓ)受体外 ,还存在可溶性Ｆａｓ(ｓＦａｓ) ,同样发挥着调控细胞凋亡的作用[1 ] 。我们检测了 34例急性白血病 (ＡＬ)患者血清可溶性Ｆａｓ受体水平。材料和方法一　研究对象　 34例ＡＬ患者来自白求恩医科大学第二临床医学院血液科 2 4例 ,长春第一汽车制造厂职工医院血液科 1 0例 ,所有病例均经ＦＡＢ分型确诊。其中急性髓系白血病 (ＡＭＬ) 2 2例 (Ｍ1 2例 ,Ｍ2 4例 ,Ｍ38例 ,Ｍ44例 ,…     

TNFα影响LAK细胞、化疗药物抗胃癌细胞作用的实验研究

观察ＴＮＦα对ＬＡＫ细胞、化疗药物抗胃癌作用的影响。方法以不同浓度ＴＮＦα与ＩＬ┐２配伍培养ＬＡＫ细胞，并使ＴＮＦα单抗阻断试验；以ＴＮＦα预处理胃癌细胞，观察ＴＮＦα影响ＬＡＫ抗瘤活性的特性及胃癌细胞对ＰＢＭＣ及ＬＡＫ的敏感性变化；以ＴＮＦα联用５┐ＦＵ，ＡＤＭ或ＭＭＣ观察体外、ＴＮＦ联用ＭＭＣ观察荷胃癌裸鼠体内的抗胃癌效应。结果ＴＮＦα在低浓度ＩＬ┐２下增加ＬＡＫ活性，使ＩＬ┐２诱导同等ＬＡＫ活性的浓度下降约１０倍；ＴＮＦα预处理胃癌细胞使ＰＢＭＣ、ＬＡＫ对其的抗瘤活性提高约１０％、９％。ＴＮＦα与５┐ＦＵ、ＡＤＭ或ＭＭＣ联合组体外、ＴＮＦ与ＭＭＣ联用组体内抑制胃癌细胞生长效应明显优于单用组，差异显著。结论ＴＮＦα在低浓度ＩＬ┐２下增加ＬＡＫ抗胃癌活性，ＴＮＦα预处理使胃癌细胞对ＰＢＭＣ及ＬＡＫ的敏感性增加；ＴＮＦα联合化疗药物５┐ＦＵ、ＡＤＭ或ＭＭＣ可使抗胃癌效应提高     

血清可溶性白细胞介素2受体,肿瘤坏死因子在小儿急性白血病中的意义

目的：了解急性白血病（ＡＬ）患儿血清中可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）和肿瘤霈死因子α（ＴＮＦα）水平及其临床意义。方法：采用ＥＬＩＳＡ及ＲＩＡ测定２７例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和３１便急性淋巴细胞细胞白血病（ＡＮＬＬ）及２０例２蝗血清ＳＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦα水平。结果：ＡＬ患儿血清ＳＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦα发病期明显高于正常儿童,后二者差异无统计意义。发病期经化疗完全缓解后降至正常水平,化疗     

胰腺癌中Fas和FasL基因的表达

为探讨Ｆａｓ和ＦａｓＬ在胰腺癌组织发生细胞凋亡过程中的表达情况 ,利用胰腺癌标本和培养人胰腺癌细胞系进行了Ｆａｓ和ＦａｓＬ基因表达特征的研究以及Ｆａｓ ＦａｓＬ系统对诱导细胞凋亡的潜在作用研究。选择 14例正常胰腺标本和 16例胰腺癌标本 ,4种人胰腺癌细胞系选择ＡＳＰＣ 1、ＣＡＰＡＮ 1、ＭＩＡ ＰａＣａ 2和ＣＯＬＯ 357。采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ、免疫组化法测定Ｆａｓ、ＦａｓＬ基因及其蛋白产物在标本中的表达。培养细胞和组织切片上单个凋亡细胞的识别采用ＡｐｏｐＴａｇ原位细胞凋亡测定药盒完成。测定培养胰腺癌…     

凝集素依赖的LAK细胞介导的肿瘤细胞凋亡

作者采用ＤＮＡ电泳及荧光染色流式细胞仪（ＦＡＣＳ）分析方法，检测了凝集素依赖的ＬＡＫ细胞介导的肿瘤细胞死亡机制。在体外以白血病和实体瘤细胞系为靶细胞，在１μ／ｍｌ的凝集素美洲商陆（ＰＷＭ）存在下，人ＬＡＫ细胞在４小时之内就可诱导这些肿瘤细胞（Ｕ９３７细胞、Ｒａｊｉ细胞，ＳＷ１１１６细胞和Ｈｅｐ２细胞），出现以ＤＮＡ断裂成不连续的片断为特征的细胞调亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）现象。用ＲＮＡ及蛋白合成抑制剂预处理靶细胞并不能阻断其ＤＮＡ断裂。ＦＡＣＳ分析显示在ＰＷＭ存在下ＬＡＫ细胞诱导靶细胞凋亡的程度高于ＬＡＫ细胞单独使用时。而且实验提示ＬＡＫ细胞在与靶细胞相互作用的同时，也会部分地发生细胞死亡。以上结果表明诱导靶细胞凋亡是ＬＡＫ细胞在凝集素存在下杀伤肿瘤细胞的有效手段之一，由此为提高ＬＡＫ细胞疗效提供了新的实验依据。     

TRAIL与TRAIL受体

ＴＲＡＩＬ／ＴＲＡＩＬ－Ｒ是ＴＮＦ超家族的一个新亚群，ＴＲＡＩＬ可引起肿瘤细胞的凋亡，但不引起正常细胞凋亡。目前ＴＲＡＩＬ已发现五种受体：ＤＲ４、ＤＲ５、ＤｃＲ１、ＤｃＲ２、ＯＰＧ，各具有不同的生物活性。本文就ＴＲＡＩＬ及其受体的结构、功能和其机制作一综述。     

TNF诱导HL—60细胞凋亡的初步观察

目的为了研究肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的抗肿瘤机制,观察了ＴＮＦ诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的作用。方法用流式细胞分析及ＤＮＡ电泳分析检测ＨＬ－６０细胞发生凋亡的情况。结果ＴＮＦ（４０μｇ／Ｌ）处理细胞后,流式细胞仪分别在６０ｈ,８４ｈ出现凋亡特有的ＡＰ峰（分别占６３．５％、８５．６％）;琼脂糖凝胶电泳显现出特征性的ＤＮＡ“梯状”带。结论ＴＮＦ（４０μｇ／Ｌ）具有诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的作用。推测ＴＮＦ的抗肿瘤作用可能与诱导细胞凋亡有关     

喉癌患者血清可溶性白细胞介素2受体和肿瘤坏死因子的检测及意义

采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ方法，对正常人、声带息肉病人及喉鳞状细胞癌病人的血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ—２Ｒ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）水平进行检测。结果表明，喉癌患者血清ＳＩＬ－２Ｒ水平和ＴＮＦ活性均明显高于正常人及声带息肉病人，差异非常显著（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１）。且血清ｓＩＬ－２Ｒ水平与喉癌的病理分化程度、临床分型、分期及手术前后具有明显的相关趋势，ＴＮＦ则不明显。提示：动态观察血清ｓＩＬ－２Ｒ及ＴＮＦ的变化，可作为分析体内抗肿瘤效应、评价疗效及监测预后的参考指标。     

全反式维甲酸对阿糖胞苷诱导HL—60细胞凋亡的影响

目的：探讨ＨＬ－６０细胞经全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）作用后对化疗药物阿糖胞苷（ＡＲＡ－ｃ）诱导凋亡敏感性的变化。方法：应用光镜检查凋亡细胞形态,ＤＮＡ电泳检查梯状条带及流式细胞周期分布、凋亡细胞率和ｂｃｌ－２蛋白表达的阳性细胞率和相对荧光强度（ＭＦＩ）。结果：ＡＴＲＡ０．３ｍｇ／Ｌ作用ＨＬ－６０细胞７２ｈ后,Ｓ期细胞显著减少至３２．９％（Ｐ〈０．０５）,Ｇ０／Ｇ１期细胞明显增加到５８．５％（Ｐ〈０．０５）,ｂｃｌ－２阳性细胞率和ＭＦＩ分别下降至１８％和０．６３（Ｐ〈０．０５）;Ａｒａ－Ｃ１．５ｍｇ／Ｌ作用ＨＬ－６０细胞４ｈ,凋亡细胞率为５５．１％,ＤＮＡ电泳风明显的梯状条带。当ＨＬ－６０细胞经ＡＴＲＡ０．３ｍｇ／Ｌ作用７２ｈ手中Ａｒａ－Ｃ１．５ｍｇ／Ｌ继续培养４ｈ,细胞凋亡率明显减少至３４．４％（Ｐ〈０．０５）,     

原发性肝细胞癌中TRADD蛋白表达与细胞凋亡的关系

肿瘤发生过程中细胞增多的原因除了细胞过度增殖外 ,还与细胞死亡相对不足有关。近年来 ,ｃａｓｐａｓｅ家族在细胞凋亡中的作用越来越受到重视 ,ＴＮＦ浕与细胞表面的受体结合后 ,受体的胞浆内部分形成三聚体 ,通过其死亡域与ＴＲＡＤＤ结合 ,由后者再与ＦＡＤＤ蛋白结合并进一步激活启动性ｃａｓｐａｓｅ导致细胞凋亡。因此 ,我们检测了ＨＣＣ中ＴＲＡＤＤ的表达并探讨其与细胞凋亡的关系。1　材料与方法1 1　标本选用我院 1 996年～ 1 997年外科手术切除肝细胞癌标本 39例及癌旁非癌肝组织 8例 ,其中男性 34例 ,女性 5例 ;年龄 2 4～ 71…     

白血病患者外周血IL－2、mIL－2R和TNF－α的检测及意义

４５例白血病患者，采用固相放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定其血清白细胞介素２（ＩＬ－２）的水平，以流式细胞仪（ＦＣＭ）检测其外周血单个核细胞（ＰＭＮＣ）上膜白细胞介素２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）的表达，用双抗体夹心ＣＥＬＩＳＡ法测定其血清肿瘤坏死固子α（ＴＮＦ－α）的含量。发现急性白血病（ＡＬ）及慢性位细胞白血病原始细胞危象（ＣＭＬ－ＢＣ）患者血清ＩＬ－２和ＴＮＦ－α的水平明显高于正常，ＣＭＬ－ＢＣ尤其急淋变者的ＰＭＮＣ上ｍＩＬ－２Ｒ阳性率较高，并与血清ＴＮＦ－α有关，而与血清ＩＬ－２无关，ｍＩＬ－２Ｒ阳性常提示白血病患者疗效差，预后不良。     

Fas(Apo-1/CD95)及其配体与肿瘤诱导凋亡的研究现状

以凋亡方式进行的程序性细胞死亡 ,在很多生理过程中发挥着重要作用 ,其失调可导致许多疾病的发生 ,包括自身免疫、癌肿、肿瘤耐药性的获得、中风、某些退行性变和ＡＩＤＳ。凋亡是由很多膜受体及胞浆蛋白参加的一系列分子事件导致的一种细胞主动自杀过程。Ｆａｓ系统是目前研究最清楚的介导细胞凋亡的信号转导系统 ,其主要由Ｆａｓ配体 (ＦａｓＬｉｇａｎｄ ,ＦａｓＬ)及其相应受体 (ＦａｓＲ)构成[1] 。近年来 ,有关从诱导细胞凋亡的机制出发研究新的抗癌方法的报导日益增多 ,本文就Ｆａｓ及其配体与肿瘤诱导凋亡的研究现状综述如下 :一、…     

多发性骨髓瘤患者血清IL—6和TNF—α水平的测定及其意义

目的 探讨多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者血清白细胞介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）的变化及其意义。方法 采用ＥＬＩＳＡ法测定３６例ＭＭ患者血清中ＩＬ－６和ＴＮＦ－α的水平。结果 进展期ＭＭ患者血清ＩＬ－６和ＴＮＦ－α水平较正常对照组明显增高（Ｐ〈０．０１）;缓解期ＭＭ患者血清ＩＬ－６和ＴＮＦ－α水平明显下降,与正常对照组相比无显著性差异（Ｐ〉０．０５）。进展期ＭＭ患者ＩＬ－６和ＴＮＦ－α水     

阻断急性髓性白血病细胞Bc1—2表达并诱导其凋亡的研究

目的 探讨特异Ｂc１－２反义脱氧寡核苷酸（ＡＳＡＯＮ）在诱导急性髓性白血病（ＡＭ Ｌ）细胞凋亡中的作用。方法 ３７例ＡＭＬ细胞及６例正常骨髓细胞分别与特异ＡＳＯＮ并定量检测凋亡细胞百分数。结果 ＡＭＬ细胞Ｂcl－３表达量高于正常骨髓细胞。特异ＡＳＯＮ能下调ＡＭＬ细胞Ｂel－２m;ＲＮＡ,并诱导其凋亡,而对正常骨髓细胞影响不大。结论 Ｂcl－２ＡＳＯＮ在治疗ＡＭＬ中有着一定的应用前景。     

全反式维甲酸联合细胞因了对NB4细胞增殖分化作用的体外研究

目的：探讨新的药物协同ＡＴＲＡ诱导早幼粒白血病细胞分化作用,降低临床ＡＴＲＡ剂量提高ＡＴＲＡ疗效。方法：ＮＢ４细胞株为实验模型,采用细胞生物学研究方法,体外研究ＩＦＮγ、ＴＮＦ和Ｇ－ＣＳＦ各结合ＡＴＲＡ对ＮＢ４分化的作用。结果：在诱导分化和抑制白血病克隆增中,ＩＦＮγ和ＴＮＦ具协同作用,以ＩＦＮγ作用最明显,在ＡＴＲＡ浓度为１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ时,比较各细胞因子联合ＡＴＡ对ＮＢ４细胞作用后ＮＢＴ的     

血管生成抑制素Endostatin研究新进展

目的：探讨抗ＰＭＬ－ＲＡＲα反义核酸对早幼粒白血病细胞生长、细胞周期、细胞凋亡的作用。方法：以ＮＢ４细胞株为研究对象;细胞计数采用台盼兰排除、计数板计数法;白血病细胞集落采用甲基纤维素半固体培养;流式细胞仪（ＦＣＭ）用于检测细胞凋亡和细胞周期。结果：以６０μｇ／ｍｌ的终浓度处理细胞,抗 ＰＭＬ－ＲＡＲα融合部位反义核酸（ＦＵＡＳ）能明显抑制ＮＢ４细胞增殖及白血病细胞集落（ＡＭＬ－ＣＦＵ）形成,最大抑制率分别为４６．８％,５１．６％;ＧＭ－ＣＳＦ能减弱ＦＵＡＳ的作用,ＦＵＡＳ作用时间越短,ＧＭ－ＣＳＦ促ＡＭＬ－ＣＦＵ增加越明显;ＦＵＡＳ处理第７,９天,出现明显的凋亡细胞群,凋亡细胞百分比分别为４１．０％,３４．２％;ＦＵＡＳ处理第５天Ｓ期下降,Ｇ２／Ｍ期升高,第７天Ｃ０／Ｇ１期明显升高,Ｓ期回升。结论：抗ＰＭＬ－ＲＡＲα反义核酸具有抑制早幼粒白血病细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用。     

全反式维甲酸诱导大肠癌细胞株LoVo凋亡的初步研究

为了探讨全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）治疗大肠癌的机制，以大肠癌细胞株ＬｏＶｏ为研究对象，用ＭＴＴ、ＦＣＭ、ＴＤＴ、电泳和电镜等手段，观察ＡＴＲＡ对ＬｏＶｏ细胞的作用，结果显示细胞增殖受到抑制，高浓度组ＦＣＭ出现凋亡峰，电镜下有大量凋亡细胞，细胞凋亡比例增高。可以认为ＡＴＲＡ能诱导ＬｏＶｏ细胞凋亡，实验结果具有临床指导意义     

rhTNF－α对AML原代白血病细胞c－myc原癌基因表达的影响

采用细胞总ＲＮＡ斑点杂交技术，以￣３２Ｐ标记的ｃ－ｍｙｃＤＮＡ片段为探针，研究了８例急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）原代白血病细胞ｃ－ｍｙｃ原癌基因的表达及其径小剂量重组人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ－α）处理后ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ水平的变化。结果发现：全部８例病人的骨髓细胞均呈Ｃ－ｍｙｃ高表达，其中６例经５０ｕ／ｍｌＴＮＦ诱导处理１２小时后，其ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ水平发生显著降低，另２例的抑制程度较轻。结果证明ＴＮＦ对ＡＭＬ原代白血病细胞ｃ－ｍｙｃ表达具有明显的抑制作用，从而预示ＴＮＦ在ＡＭＬ诱导分化治疗应用的潜在有效性。     

慢性粒细胞白血病患者脑脊液可溶性白细胞介素2受体水平测定

用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测１５例慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）患者脑脊液（ＣＳＦ）可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平。结果显示：ＣＭＬ急变期患者脑脊液ｓＩＬ－２Ｒ水平显著高于正常对照，ＣＭＬ慢性期及加速期与正常对照组间均无显著差异。合并中枢神经系统白血病（ＣＮＳ－Ｌ）患者ＣＳＦ中ｓＩＬ－２Ｒ明显高于ＬＣＮＳ－Ｌ者，治疗达缓解后渐降至正常范围。合并ＣＮＳ－Ｌ者ｓＩＬ－２Ｒ水平升高与ＣＳＦ中白血病细胞浸润呈正相关。我们认为ｓＩＬ－２Ｒ可作为ＣＮＳ－Ｌ诊断的参考指标之一，并可用于监测病情，观察疗效。