猪急性心肌梗死后钾通道Kv2.1、Kir2.1基因表达的变化

目的:研究猪急性心肌梗死后梗死边缘区钾通道Kv2.1、Kir2.1 mRNA表达的变化。方法:通过结扎猪左前降支中下段2 h后再灌注建立急性心肌梗死模型(MI),手术后存活猪进入MI组,同时设立相应的假手术组(SH),于24 h后取左心室梗死边缘区及假手术组相应部位,应用半定量逆转录-聚合酶链反应方法检测心外膜和心内膜心肌内向整流性钾电流亚单位(Kir2.1)、延迟整流性钾电流亚单位(Kv2.1)mRNA的表达量。结果:Kv2.1基因表达在SH组左心室心内膜和心外膜间没有差异,而Kir2.1基因表达在心内膜高于心外膜(P<0.05),MI组Kv2.1基因表达在心内膜和心外膜都显著下降(P<0.05),而且减少的程度一致,而Kir2.1基因表达只在心外膜层下降(P<0.05)。结论:局部离子通道mRNA表达的下调可能是急性心肌梗死后电生理异质性的一个决定因素,从而增加心肌梗死后电活动的不稳定性。     

急性心肌梗死后氯通道基因表达的变化

目的：研究猪急性心肌梗死（AMI）后囊性纤维化跨膜转运调节氯通道（CFTR）和CIC-2型氯通道（CIC-2）基因表达的变化,探讨急性心肌梗死后早期室性心律失常发生的分子机制。方法：通过结扎猪左前降支远端1/3-1/2处2 h然后再灌注建立AMI模型,同时设立相应的假手术（SH）组。术后24 h取左心室梗死边缘区内层（En-do）、中层（Mid）和外层（Epi）心肌（SH组取对应位置心肌）,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）半定量分析氯通道CFTR和CIC-2的基因表达的改变。结果：与SH组相比,AMI后梗死边缘区三层心肌CFTR和CIC-2 mRNA表达均明显上升（P〈0.05）,而且三层心肌间的基因表达呈不均一性（P〈0.05）。结论：AMI后梗死边缘区三层心肌氯通道CFTR和CIC-2基因表达的不均一性上调,可能是AMI后早期易发室性心律失常的分子机制之一。     

急性心肌梗死后氯通道基因表达的变化

目的:研究猪急性心肌梗死(AMI)后囊性纤维化跨膜转运调节氯通道(CFTR)和CIC-2型氯通道(CIC-2)基因表达的变化,探讨急性心肌梗死后早期室性心律失常发生的分子机制。方法:通过结扎猪左前降支远端1/3-1/2处2 h然后再灌注建立AMI模型,同时设立相应的假手术(SH)组。术后24 h取左心室梗死边缘区内层(En-do)、中层(Mid)和外层(Epi)心肌(SH组取对应位置心肌),应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析氯通道CFTR和CIC-2的基因表达的改变。结果:与SH组相比,AMI后梗死边缘区三层心肌CFTR和CIC-2 mRNA表达均明显上升(P<0.05),而且三层心肌间的基因表达呈不均一性(P<0.05)。结论:AMI后梗死边缘区三层心肌氯通道CFTR和CIC-2基因表达的不均一性上调,可能是AMI后早期易发室性心律失常的分子机制之一。     

心肌梗死后钾通道Kv9.X基因表达水平的变化及意义

目的研究大鼠心肌梗死后钾通道Kv9.X(Kv9.1、Kv9.2、Kv9.3)基因表达水平的改变,并初步探讨此种变化的意义。方法通过结扎大鼠左前降支近端建立心肌梗死大鼠模型,手术后存活大鼠进入心肌梗死组(MI组)(7 d组,30 d组)。同时,设立相应的假手术组(SH组)。应用半定量RT-PCR方法检测左室心肌(心肌梗死者取非梗死区左室心肌)钾通道Kv9.1、Kv9.2、Kv9.3 mRNA量。结果7 d组:与假手术组比较,MI组Kv9.1、Kv9.2、Kv9.3 mRNA量明显下降(P<0.05)。30 d组:与假手术组比较,MI组Kv9.1、Kv9.2、Kv9.3 mRNA的量均极显著下降(P<0.01)。MI组:30 d组与7 d组比较,Kv9.1、Kv9.2、Kv9.3 mRNA的量显著下降(P<0.05)。结论心肌梗死后钾通道Kv9.1、Kv9.2、Kv9.3 mRNA表达呈时间依赖性下调。     

延迟整流性K+通道在人肝癌细胞增殖中的作用

目的：研究延迟整流性Ｋ＋通道在人肝癌细胞增殖中的作用。方法：采用膜片钳技术的全细胞记录方式记录人肝癌细胞在不同浓度ＥＧＦ中延迟整流性Ｋ＋通道的跨膜电流。利用氚标记的胸腺嘧啶核苷（３ＨＴｄＲ）掺入技术观察ＥＧＦ和Ｋ＋通道阻断剂（ＴＥＡ）对人肝癌细胞ＤＮＡ合成的影响。结果：发现表皮生长因子（ＥＧＦ）促进肝癌细胞增殖的同时使肝癌细胞膜离子通道的跨膜Ｋ＋电流增加。Ｋ＋通道阻断剂四乙胺（ＴＥＡ）能显著抑制ＥＧＦ促进ＤＮＡ合成的作用,具有明显的量效关系和时间依赖性,但对细胞的活力无明显影响。结论：人肝癌细胞的增殖活动需要延迟整流性Ｋ＋通道参与。     

美托洛尔对心肌梗死后大鼠心肌钾通道Kv2.1表达的影响

目的:探讨美托洛尔对心肌梗死后大鼠心肌钾通道Kv2.1表达的影响。方法:通过结扎大鼠左前降支近端建立心肌梗死(MI)大鼠模型,手术后存活大鼠随机分入MI组(7d组,30d组)和美托洛尔组(7d组,30d组;美托洛尔8mg/kg/d,2次/d),同时设立相应假手术组。应用半定量RT-PCR方法检测左室心肌(心肌梗死者取非梗死区左室心肌)钾通道Kv2.1 mRNA。结果:7d时,与假手术组比较,MI组和美托洛尔组Kv2.1表达量均显著下降(P<0.05;P<0.01);与MI组比较,美托洛尔组Kv2.1的表达量显著降低(P<0.01)。30d时,与假手术组比较,MI组和美托洛尔组Kv2.1均显著下降(P<0.01,P<0.05);与MI组比较,美托洛尔组Kv2.1显著增高(P<0.05)。MI组:与7d时比较,30d时Kv2.1显著下降(P<0.05)。美托洛尔组:30d比7d时Kv2.1显著升高(P<0.05)。结论:美托洛尔对心肌梗死后钾通道Kv2.1的表达存在双相性影响,但早期下调的意义有待阐明。     

G蛋白对阿片受体调节延迟整流钾通道的影响

目的观察G蛋白在阿片受体激动剂对钾通道的双相调节中所起的作用。方法利用膜片钳技术(patchclamp),采用全细胞记录方式,观察在电极液中分别加入G蛋白稳定抑制剂(GDPβS)、百日咳毒素(PTX)、二磷酸核苷酸激酶(NDPK)及环磷酸腺苷(cAMP)后,对阿片受体激动剂调节NG108-15细胞膜延迟整流钾通道作用的影响。结果(1)GDPβS能够阻断高浓度δ-阿片受体选择性激动剂(DPDPE)对钾电流的兴奋作用及低浓度DPDPE对钾电流的抑制作用(P<0.05)。(2)高浓度DPDPE对钾电流的兴奋性调节作用完全被PTX阻断(P<0.05),而霍乱毒素CTX对DPDPE对钾电流的双相调节作用无影响。(3)尿苷二磷酸(UDP)能够阻断NDPK对高浓度阿片受体激动剂对细胞膜钾通道兴奋性调节作用,而UDP对低浓度阿片受体激动剂的抑制作用无影响。(4)cAMP对高浓度阿片受体激动剂具有调节作用(P<0.05),而对低浓度阿片受体激动剂的抑制作用无影响。结论阿片受体对NG108-15细胞膜上延迟整流钾通道具有双相调节作用,其中高浓度激动剂引起的兴奋作用可能由Gi/o介导,并与cAMP有关,而其抑制作用可能是由G蛋白βγ亚单位直接作用。     

兔坐骨神经损伤后许旺细胞的增殖能力及延迟整流钾离子通道活动变化

目的:观察成年兔坐骨神经分别受到75V,125V电压损伤后雪旺细胞增殖及延迟整流K+离子通道的变化情况。方法:建立兔坐骨神经电损伤实验模型,应用双酶消化法分离受损区域神经雪旺细胞,选择损伤后第3天作为观察点,应用细胞计数和同位素H3掺入胸腺嘧啶核苷技术观察雪旺细胞的增殖变化。应用膜片钳全细胞记录雪旺细胞延迟钾整流离子通道的变化并相互比较。结果:125V电损伤后较75V电损伤后雪旺细胞的增殖能力减弱,相应的雪旺细胞延迟整流钾离子通道活动表现出同样的变化趋势。结论:雪旺细胞延迟整流钾离子通道自身受到125V电压损伤后,较75V电损伤造成了更大的功能破坏和活动改变,这种变化影响雪旺细胞的增殖。     

钾通道阻滞剂对大鼠缺血-再灌注心肌梗死范围的影响

钾离子通道是广泛存在于心血管系统中的最为复杂的一大类离子通道,其种类繁多.近年来,关于钾通道在心肌缺血再灌注损伤中的作用的报道很多,但结果不甚一致.并且大多数工作是围绕心律失常和心功能方面进行的,关于钾通道与心肌细胞损伤方面的报道较少.众所周知,心电变化、心功能改变及心肌细胞损伤可从不同侧面反映心脏状况,但影响因素各异.     

K~+v通道在缺氧性肺血管收缩中的作用

目的 探讨K+v通道在缺氧性肺血管收缩(HPV)中的作用.方法 Wistar大鼠40只随机分为两组:常氧对照组和低氧组,采用酶消化的方法获得单个肺动脉血管平滑肌细胞(PASMC),将分离细胞经a-actin免疫组化鉴定为PASMC.采用膜片钳技术记录PASMC静息膜电位(Em)和电压门控性钾通道电流(Ikv).细胞内灌流Kv1.2,Kv1.3,Kv1.5,Kv2.1,Kv9.3抗体混合液(1:125),探讨钾通道在HPV中的作用.结果 低氧组膜电位明显去极化,细胞内灌流Kv1.2,Kv1.3,Kv1.5,Kv2.1,Kv9.3抗体混合液可显著抑制常氧对照组PASMC的Ikv,使Em去极化,细胞内灌流Kv1.2,Kv1.3,Kv1.5,Kv2.1,Kv9.3抗体混合液对低氧组PASMC的Ikv和Em均无显著影响.结论 Kv1.2,Kv1.3,Kv1.5,Kv2.1,Kv9.3可能是氧敏感型通道,并可能介导了缺氧性肺血管收缩.     

急性心肌梗死后心力衰竭的特异性靶点基因研究

目的:生物信息库系统性比较急性心肌梗死后心力衰竭患者相对于非心力衰竭患者的差异性基因(mRNA和miRNAs),临床进行重点差异基因验证。方法: 基础研究中,基于GEO数据库(编号GSE59867)中17例急性心肌梗死患者在发病后6个月随访期间内心力衰竭发展的详细情况,分析心力衰竭患者相对于非心力衰竭患者基因表达的差异,构建心力衰竭患者基因表达网络。临床研究中,回顾性收集天津泰达国际心血管病医院2018年1月—2020年12月经病理确诊的急性心肌梗死患者61例,根据心力衰竭与否,分为心力衰竭组和非心力衰竭组。利用ELISA方法比较验证特征基因的表达差异。结果:基础研究发现,与急性心肌梗死后非心力衰竭患者比较,心力衰竭患者共显示703个差异表达基因（mRNAs）,包括567个上调基因和136个下调基因。其中SPI1、MCUR1、ZBTB7A、IRF8和PPARG表现出最显著上调。与此同时,心力衰竭患者表现出12个差异miRNAs,其中上调的miRNAs 5个,下调的miRNAs 7个。miR-133、miR-124-3和miR-9-1显著下调,差异均具有统计学意义（P<0.05）。临床研究发现,SPI1、MCUR1、ZBTB7A、IRF8和PPARG蛋白表达浓度在急性心肌梗死后心力衰竭组中有了显著的升高（SPI1:t=4.36,P<0.01;MCUR1:t=4.98,P<0.01;ZBTB7A:t=3.77, P<0.01;IRF8:t=3.12,P<0.01;PPARG:t=5.13,P<0.01)。结论:相对于心肌梗死后非心力衰竭患者,心力衰竭患者表现出若干差异基因（SPI1、MCUR1、ZBTB7A、IRF8和PPARG）,可以作为潜在临床标志物进行研究。     

β受体阻滞剂阿替洛尔和酒石酸美托洛尔对大鼠急性心肌梗死后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的作用

目的比较阿替洛尔和酒石酸美托洛尔对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的作用。方法251只雌性SD大鼠结扎左冠状动脉建立AMI模型,术后24h存活的124只随机分为AMI对照(MI组,n=43)、阿替洛尔(A组,10mg·kg-1·d-1,n=39)和酒石酸美托洛尔(B组,20mg·kg-1·d-1,n=42)治疗组;另设假手术组(S组,n=27)。各组再按观察时点随机分为48h和4周两亚组。术后24h以直接灌胃法给药。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记技术(TUNEL)和DNA凝胶电泳检测心肌细胞凋亡。免疫组织化学方法和Western blot检测“凋亡抑制基因”bcl-2、“凋亡促进基因”bax和“凋亡执行因子”caspase-3基因的表达。结果与AMI对照组相比,AMI后48h,A、B两组梗死区、边缘区和非梗死区的心肌细胞凋亡指数,除B组梗死区显著降低(P<0·01)外,其他指标差异均无显著性(均P>0·05);心肌细胞中bcl-2的表达除A组的非梗死区外均增加(免疫组织化学染色),bax和caspase-3的表达均无明显降低。AMI4周时,A、B两组瘢痕区及其边缘区和非梗死区的心肌细胞凋亡指数均显著降低(P<0·05,P<0·01);bcl-2、bax和caspase-3的表达均无明显变化,仅A4周组非梗死区bax的表达明显降低。Western blot显示,与AMI对照组相比,A、B两组心肌细胞中caspase-3、bcl-2和bax的表达差异均无显著性,但bcl-2/bax的比值显著增加(P<0·05),并与假手术组相当。结论阿替洛尔和酒石酸美托洛尔均能减少AMI梗死/瘢痕区、边缘区和非梗死区的心肌细胞凋亡,作用相当,此作用主要是通过增加bcl-2的表达和bcl-2/bax的比值而实现。     

兔急性心肌梗死心肌组织TNF-α mRNA表达的空间分布

目的研究TNF-αmRNA在实验性兔急性心肌梗死(AMI)心脏不同部位表达的特点.方法结扎兔前降支近端,用原位杂交的方法检测TNF-αmRNA在梗死区、梗死周边区及梗死区对侧左室、左心房、右室和右房的表达.结果在整个观察期内可在梗死区、梗死周边区梗死、梗死区对侧左室及左心房检测出TNF-αmRNA表达,在右室和右房无表达.结论AMI早期兔心脏的梗死区、梗死周边区梗死、梗死区对侧左室及左心房存在TNF-αmRNA表达;左室及左房非梗死区TNF-αmRNA表达的机制可能与心肌梗死后左室和左房壁张力增高有关.     

The Changes of Potassium Currents in Rabbit Ventricle with Healed Myocardial Infarction

Epidemiologicalstudiesshowedthatpatientswithhealmyocardialinfarction (HMI)arethemainpopula tionofcardiacsuddendeath .CASTtrial[1 ] andSWORDtrial[2 ] hadaprofoundimpactonthepracticeofcardiolo gy,andthemortalitywassignificantlyhigherinpatientswithHMItreated…     

吡那地尔对大鼠心肌缺血/再灌注时细胞凋亡及fas基因表达的影响

目的　探讨 ATP敏感性钾通道 (KATP)开放剂吡那地尔对大鼠心肌缺血 /再灌注时心肌细胞凋亡及 fas基因蛋白表达的调节作用 .方法　 4 0只大鼠随机分成 4组 :1假手术组 (仅穿线而不结扎 ,观察 6 .5 h) ;2缺血 /再灌注组(缺血 30 min,再灌注 6 h) ;3吡那地尔组 (缺血前 10 m in静推吡那地尔 0 .2 mg· kg- 1 ,然后缺血 30 min/再灌注 6 h) ;4吡那地尔 +优降糖组 (缺血前 10 min静推吡那地尔 0 .2 m g·kg- 1 +优降糖 3mg·kg- 1 ,然后缺血 30 min/再灌注 6 h) .称质量法计算心肌梗死范围 ,以缺口末端标记法 (TUNEL)检测凋亡细胞 ,以 SABC免疫组化法检测 fas蛋白的表达 .结果　缺血 /再灌注组出现显著的心肌细胞凋亡 ,伴有 fas蛋白表达指数升高 (P<0 .0 1vs假手术组 ) ;吡那地尔可抑制心肌细胞凋亡 ,并显著下调 fas蛋白的表达 (P<0 .0 5 ) ,而优降糖可取消吡那地尔的作用 .结论　细胞凋亡及 fas基因表达改变参与了心肌缺血 /再灌注损伤过程 ,KATP开放剂 (吡那地尔 )可抑制心肌细胞凋亡、下调 fas基因的蛋白表达 .     

细胞周期蛋白A2在大鼠急性心肌梗死后心肌细胞的表达

目的:探讨急性心肌梗死后梗死区周围心肌细胞内细胞周期蛋白A2(cyclin A2)的表达?方法:制作SD大鼠急性心肌梗死模型,分别于梗死后3d?1周?2周?3周?4周各处死5只大鼠,5只假手术大鼠为对照,取出心脏组织,进行Masson染色,同时使用免疫组织化学法检测心脏组织中cyclin A2及磷酸化组蛋白H3(phospho-histone H3,H3P)的表达?结果:Masson染色从病理上证明心肌梗死模型构建成功;梗死区周围心肌细胞cyclin A2的表达在梗死后1周时最高,阳性细胞染色百分比为(7.72 ± 1.16)%,2周后逐渐下降,梗死后4周时,与假手术组相似,几乎无阳性表达?梗死后第3天?1周?2周和3周均可见少量心肌细胞核表达H3P,其阳性率为1.56%~3.12%?结论:心肌细胞cyclin A2的阳性表达提示急性心肌梗死后梗死区周围少部分心肌细胞能重新进入有丝分裂周期?     

MR电影判断急性心肌梗死后存活心肌的价值

目的:探讨MR电影心肌运动影像判断急性心肌梗死后存活心肌的价值。方法:分析22例急性心肌梗死患者(急性梗死组)和20例正常对照组的MR电影,判断MR电影对急性心肌梗死后存活心肌检测率。结果:正常对照组心肌各室壁厚度变化一致(P>0.05),梗死心肌节段室壁厚度变化明显小于正常心肌(P<0.05)。室壁厚度变化减小(<2mm)对梗死心肌节段的检测敏感性为77%,特异性为100%;结合首过及延迟灌注异常可将其敏感性提高到91%。结论:MR电影心肌运动影像是MRI诊断急性心肌梗死后存活心肌可靠的指标,可初步判断心肌存活性,行靶区首过心肌灌注可以明显提高检查的敏感性。     

急性心肌梗塞心肌再灌注心电图定量研究

本文对１７例接受尿激酶（溶栓组）、２５例接受极化液（非溶栓组）治疗的急性心肌梗塞患者运用心电定量心肌梗塞面积。用药前采用ＳＴ段运算法预计梗塞面积，住院７２ｈ后用ＱＲＳ积分法计算实际梗塞面积，二者之差为梗塞缩小面积，并以此计算梗塞心肌存活率，大于－２０％者为再灌注。结果显示溶栓组平均心肌梗塞面积缩小６．７％，梗塞区心肌存活率－２９．２％，早期溶栓（＜３ｈ）４例（４／５）符合心肌再灌注标准；晚期溶栓（３～８ｈ）６例（６／１２）符合再灌注标准。而非溶栓组无一例符合再灌注标准。故认为溶栓治疗是急性心肌梗塞的首选方法。