F344大鼠膀胱肿瘤模型的制备与检测

目的通过膀胱灌注N-甲基亚硝基脲(MNU)诱导F344大鼠膀胱肿瘤模型。方法选取F344大鼠40只,随机分为两组第1组膀胱灌注生理盐水(对照组),第2组膀胱灌注MNU(MNU组),每2周1次,共5次;于第14周处死动物,取血清测干扰素(INF-γ),膀胱肿瘤组织测主要组织相容性抗原-I(MHC-I)及病理观察。结果MNU组出现膀胱肿瘤,对照组无1例肿瘤;对照组血清INF-γ为(9.620±7.256)pg/ml,实验组为(0.898±0.323)pg/ml,两组相比有统计学意义(P<0.001)。实验组膀胱肿瘤的MHC-I表达较高(58.60%～93.80%)。结论MNU可成功诱导F344大鼠膀胱肿瘤,该模型是肿瘤免疫治疗的理想模型。     

MNU诱导的大白鼠膀胱肿瘤模型的建立及病理学动态观察

目的观察N-甲基亚硝基脲（MNU）诱发SD大鼠膀胱癌模型的建立及病理学动态过程。方法MNU大鼠膀胱灌注每2周1次，每次2mg，共4次。随机观察实验第3、6、9、12、14周膀胱黏膜的改变，并在9、12和10周膀胱灌注^125I-UdR后行SPECT平面显像。结果膀胱灌注3周出现不典型增生，6周有原位癌改变，9周膀胱内有明显癌性肿块，12～14周膀胱内均出现乳头状癌或浸润性癌，9周的致癌率100．0％，组织学改变及病理学特征与人膀胱癌十分相似。SPECT显像见^125I-UdR膀胱灌注3d后诱癌组大鼠膀胱区放射性浓集。结论MNU灌注诱导大鼠膀胱癌模型为一理想的动物模型。致癌过程经历不典型增生、乳头状瘤形成和癌变动态过程。     

大鼠膀胱癌模型建立的实验研究

目的动态观察诱癌剂N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)诱发Wistar大鼠膀胱肿瘤发生发展的过程,探讨建立膀胱癌动物模型的合适方法。方法60只Wistar大鼠随机分成3组,用MNU(2mg/2周)定期作膀胱内灌注,实验周期为14周,按计划处死大鼠,观察不同阶段动物膀胱癌的发生情况。结果60只大鼠中58只完成了实验,2只中途死亡,诱癌组(MNU组)存活39只大鼠中,病理证实为膀胱癌者37只,占92.5%,2只为不典型增生,占5%。在病理确诊的39只大鼠中,有33只联合使用尿HE染色 AO染色诊断为膀胱肿瘤,阳性率89.2%。结论MNU经膀胱灌注诱发膀胱肿瘤动物模型方法简单、药物用量少、诱瘤时间短、致癌率高,其诱发的膀胱肿瘤在组织学和病理学特征上和人的膀胱肿瘤十分相似,是较理想的动物模型。在动物实验中用尿HE染色 AO染色诊断膀胱肿瘤有一定应用价值。     

金雀异黄素对人肝癌SMMC-7721细胞生长抑制和凋亡的影响

目的：探讨金雀异黄素（Gen）对人肝癌SMMC-7721细胞生长的抑制作用及凋亡调控的影响,明确Gen抗肿瘤的可能机制。方法： SMMC-7721细胞按Gen浓度分为5、10和20 mg·L^-13个处理组和对照组（未加Gen）,给药24和48 h后,透射电镜观察细胞超微结构变化,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪（FCM）分析细胞时相,免疫组化法检测细胞内Caspases-3蛋白的表达水平。结果：Gen处理组细胞核内异染色质呈块状凝集,胞质内线粒体肿胀空化,随着Gen浓度增加,细胞核呈固缩状,核内异染色质趋边凝集,细胞质空化明显,对照组无改变;MTT法检测显示,随着Gen浓度增加,作用时间从24到48 h的延长,SMMC-7721细胞增殖抑制率升高,呈时间和剂量依赖性（P<0.01）。流式细胞术显示,随着Gen浓度增加,停滞在G₂/M期细胞数增加（P<0.01）,S期细胞减少（P<0.01）,G₀G₁期细胞减少（P<0.01）。免疫组化结果显示,随着Gen浓度增加,Caspases-3蛋白表达增强,呈剂量依赖性（P<0.01）。结论：Gen对人肝癌SMMC-7721细胞的生长具有明显抑制作用,上调Caspases-3蛋白表达和诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一。     

转铁蛋白修饰共载紫杉醇和金雀异黄素脂质体抑制卵巢癌株和荷瘤裸鼠肿瘤的生长

目的：制备转铁蛋白修饰共载紫杉醇（paclitaxel,PTX）和金雀异黄素（genistein,Gen）脂质体（liposome,LP）,并对其A2780细胞及对荷瘤裸鼠的治疗效果进行初步评价。方法：采用薄膜分散法制备普通载药LP,后采用插入法制备转铁蛋白修饰载药LP。考察LP的粒径,电位以及包封率;通过细胞摄取实验考察卵巢癌细胞对普通LP和转铁蛋白修饰脂质体（transferrin conjugated liposome,TFLP）的摄取效率。MTT实验考察不同LP对耐药卵巢癌细胞的细胞毒性;构建卵巢癌细胞肿瘤球模型,考察不同LP对肿瘤球的穿透能力以及不同载药LP对肿瘤球的生长抑制能力。构建卵巢癌裸鼠异位模型,考察不同载药LP对肿瘤生长抑制效果。结果：TFLP-PTX/Gen的粒径在（115.0±9.5） nm,电位为（-4.00±2.15） mV,PTX与Gen的包封率分别为83.4%和79.6%。细胞摄取实验结果显示,A2780细胞对TFLP的摄取效率是LP的2.8倍;MTT实验表明TFLP-PTX/Gen对耐药卵巢癌细胞的毒性显著强于TFLP-PTX、TFLP-Gen和LP-PTX/Gen;肿瘤球抑制实验和荷瘤裸鼠肿瘤生长抑制实验结果都表明TFLP-PTX/Gen具有良好的抗肿瘤效果。结论：转铁蛋白修饰共载PTX和Gen LP具有良好的卵巢癌细胞靶向性和抗卵巢癌作用,是一种潜在的卵巢癌靶向给药系统。     

金雀异黄素抑制肝癌干细胞样细胞的特性及对氟尿嘧啶耐药性的影响

目的：研究金雀异黄素对SMMC-7721细胞系肝癌干细胞样细胞特性以及氟尿嘧啶敏感性的影响。方法不同浓度金雀异黄素处理SMMC-7721细胞系球形成细胞。肿瘤球形成法检测自我更新能力。MTT比色法测定氟尿嘧啶药物敏感性。Western blot分析干细胞标志物CD133、CD44、Gli1和ABCG2蛋白表达。结果金雀异黄素显著抑制SMMC-7721细胞肿瘤球形成,并优先抑制球形成细胞增殖活性(P<0.05)。金雀异黄素(10μmol/L)有效逆转球形成细胞对氟尿嘧啶的耐药性。金雀异黄素降低CD133、CD44、Gli1和ABCG2蛋白表达水平。结论金雀异黄素抑制肝癌干细胞样细胞特性和氟尿嘧啶耐药性,其作用机制与抑制干细胞标志物蛋白表达和阻断Hedgehog信号传导有关。     

金雀异黄素对肾癌细胞系GRC-1细胞生物学行为的影响

目的：观察酪氨酸蛋白激酶抑制剂金雀异黄素（genistein)对GRC－1细胞的体外生物学行为的影响，探讨蛋白酪氨酸激酶（PTK）抑制效应用于肿瘤治疗的可能。方法：将细胞用金雀异黄素处理后，分别用MTT法、激光共聚焦显微镜、电子显微镜观察金雀异黄素对肿瘤细胞的体外生物学行为的影响。结果：金雀异黄素可显著抑制GRC－1细胞的增殖，使肿瘤细胞增殖停滞在G1期和G2期，并明显改变细胞的外在形态和细胞内波形蛋白的排列方式。结论：酪氨酸蛋白激酶抑制剂genisein可抑制肾肿瘤细胞的增殖（P＜0．01），并改变其细胞骨架的排布方式。酪氨酸激酶抑制剂有望开发成为有效的抗恶性肾肿瘤的药物。     

N-甲基亚硝基脲诱导大鼠膀胱癌模型的动态观察

目的探讨N-甲基亚硝基脲（MNU）诱发SD大鼠膀胱癌的模型构建及动态变化。方法采用MNU进行大鼠膀胱灌注2mg／次,每2周1次,共4次。分别观察实验第3、5、7、9、12和14周的膀胱黏膜改变。结果膀胱灌注3周出现不典型增生,5周上述改变明显,7周有原位癌改变,9周膀胱内可见明显癌性肿块,12—14周证实为膀胱乳头状癌或浸润性癌,9周的致癌率为100％（6／6）,其组织学改变及病理学特征与人膀胱癌相似。结论MNU灌注诱导构建大鼠膀胱癌模型方法简便、可靠。致癌经历上皮增生、乳头状瘤形成和癌变过程,为比较理想的动物模型。     

金雀异黄素对糖尿病大鼠肾脏AGEs和氧化应激的影响

目的 探讨糖基化产物(AGEs)、氧化应激与糖尿病肾病(DN)的关系和金雀异黄素(Gen)改善肾功能的保护机制. 方法 采用腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,观察Gen对糖尿病大鼠血糖、肾功能、AGEs、超氧化物歧化酶(SOD) 等的影响.结果 实验8周后,糖尿病大鼠空腹血糖、尿蛋白、血肌酐、尿素氮及AGEs、丙二醛(MDA)含量明显增高,而体重、肌酐清除率、肾组织SOD活力显著下降;Gen能降低糖尿病大鼠的血糖、尿蛋白、血肌酐、尿素氮、MDA、AGEs含量,增加糖尿病大鼠的肌酐清除率、 SOD、总抗氧化能力. 结论 AGEs增多和氧化应激增强与DN的发生密切相关,Gen能降低糖尿病大鼠的血糖水平、抑制肾脏的氧化应激、阻碍糖基化反应,减轻或延缓DN的发生.     

金雀异黄素对大鼠骨代谢的影响

目的 探讨金雀异黄素对大鼠骨代谢的影响。方法 取SD大鼠32只，随机分成4组，灌胃给药4周，测体重、血清碱性磷酸酶（AKP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（ACP）活性和骨钙素（BGP）、雌二醇（E2）水平。结果 金雀异黄素40mg／kg可以增加大鼠体重、AKP活性和骨钙素水平；金雀异黄素20、30mg／kg对大鼠体重及AKP、ACP活性无明显影响。结论 金雀异黄素对骨代谢有一定的调节作用。     

华蟾素对SD大鼠膀胱肿瘤的抑制作用

目的研究华蟾素对SD大鼠膀胱肿瘤的治疗作用。方法 50只SD大鼠按随机分为对照组和实验组,实验组40只大鼠膀胱灌注N-甲基-N-亚硝基脲(N-methyl-N-nitrosourea,MUN),每3周1次,共4次;于第14周将实验组大鼠随机分为生理盐水组(膀胱灌注生理盐水)、丝裂霉素组(5 mg/kg)、低浓度华蟾素组(5 mg/kg)及高浓度华蟾素组(20 mg/kg),每周灌注1次,连续灌注5次,计算抑瘤率,TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果 MNU膀胱灌注成功建立膀胱肿瘤动物模型,以膀胱肿瘤质量计算高浓度华蟾素组的抑瘤率为76.7%,高浓度华蟾素组抑瘤率较丝裂霉素组及低浓度华蟾素组高;TUNEL法检测高浓度华蟾素组AI值为(24.21±1.24)%,较其他各组AI值明显增高,提示高浓度华蟾素组凋亡指数高于丝裂霉素及低浓度华蟾素组。结论华蟾素对膀胱肿瘤有抑制生长、促进凋亡的作用,且高浓度时抑瘤作用及促凋亡作用较强。     

膀胱肿瘤经尿道切除术后复发相关因素分析

目的分析经尿道膀胱肿瘤切除术（TUR-Bt）后影响膀胱肿瘤复发的相关因素。方法应用Logistic回归方法和COX比例风险模型，对126例行TUR-Bt术的膀胱肿瘤患者的一般情况和临床特征等17项指标与复发时间进行统计分析，并绘制Kaplan-Meier复发风险曲线。结果肿瘤基底（Hr=2．825）、肿瘤分期（Hr=2．223）、肿瘤数目（Hr=2．203）和术后膀胱灌注化疗（Hr=0．465）是与TUR-Bt术后肿瘤复发显著相关的因素。结论评价TUR-Bt术后膀胱肿瘤复发情况可参考上述4个因素。     

半导体激光与等离子电切术治疗浅表性膀胱肿瘤的疗效比较

目的 探讨1 470 nm半导体激光治疗浅表性膀胱肿瘤的临床疗效.方法 将2012年1月至2014年1月收治的浅表性膀胱肿瘤患者216例,分为激光组和电切组,分别行1 470 nm半导体激光和等离子电切术治疗,比较两组患者的疗效.结果 激光组的手术时间、术中出血量、留置尿管时间及术后住院时间均明显小于电切组,且激光组术中和术后6h的血肾上腺素、去甲肾上腺素及血管紧张素Ⅱ水平均明显低于电切组(P＜0.05).激光组未发生闭孔神经反射和膀胱穿孔,总并发症发生率为5.1％,术后24个月膀胱肿瘤复发率为7.1％;电切组闭孔神经反射发生率为7.6％,膀胱穿孔发生率为1.7％,总并发症发生率为15.3％,术后24个月膀胱肿瘤复发率为17.8％;激光组的上述指标均明显低于电切组(P＜0.05).结论 1 470 nm半导体激光手术治疗非浸润性膀胱肿瘤临床疗效确切,操作简单,术后并发症发生率低,安全性高,中远期复发率低,且对患者应激水平影响小.     

赫赛汀对大鼠膀胱肿瘤靶向治疗的体内研究

目的研究赫赛汀(Herceptin)对大鼠膀胱肿瘤的治疗作用。方法50只SD大鼠随机分两组,对照组膀胱灌注生理盐水,实验组膀胱灌注N-甲基-N-亚硝基脲(N-methyl-N-nitrosourea,MUN),每3周1次,共4次,MNU总量为10mg;于灌注后第11周切开膀胱取标本,用光镜、免疫组化及RT-PCR方法对其诱发的膀胱肿瘤进行检测。筛选HER-2阳性表达的SD大鼠膀胱癌动物随机分为治疗组(Herceptin按20mg/kg腹腔注射)和非治疗组,检测赫赛汀作用后肿瘤大小、形态,计算抑瘤率,并用免疫组化S-P法检测HER-2蛋白表达、TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡情况,分析赫赛汀对膀胱肿瘤的作用。结果抑瘤率结果提示治疗组与非治疗组相比抑瘤率为50.0%,差异有统计学意义(P<0.05),免疫组化S-P法结果提示赫赛汀作用后HER-2蛋白表达下降;TUNEL原位凋亡结果提示治疗组凋亡指数(64.0±6.3)%高于非治疗组(47.9±5.4)%(P<0.05)。结论赫赛汀对HER-2阳性的实验性膀胱肿瘤有抑制生长、促进凋亡的作用。     

膀胱肿瘤保留膀胱的策略

目的 探讨膀胱肿瘤保留膀胱的策略.方法 分析249例保留膀胱的膀胱肿瘤患者的复发率、复发时间和近远期存活率与手术方式、灌注药物和临床分期的关系.结果 手术方式和灌注药物种类对膀胱肿瘤首次复发时间的影响不明显,但随临床分期的增高首次复发时间明显缩短.3种手术方式后膀胱肿瘤的总复发率、3年和5年生存率无显著性差异,而10年生存率以经尿道膀胱肿瘤电切术为最高(77.3%).4种药物灌注后总复发率、3、5年及10年生存率有显著差异,以卡介苗灌注后的复发率最低(28.2%)、近远期存活率最高(3年为100%,10年为81.7%).4个临床分期组的3、5和10年生存率组间两两比较,Tis、Ta、T13组间无显著性差异,而T2-4组与其他3组间有显著性差异;总复发率在Tis、Ta、T2-43组间无显著差异(52.5%～60.4%).结论 对于未侵及膀胱壁肌层的膀胱肿瘤,采用经尿道膀胱肿瘤电切手术,结合卡介苗灌注治疗可取得良好的预后,而对于已侵及膀胱壁肌层者,不适宜采用保留膀胱手术.     

膀胱全切术后不同尿流改道治疗肌层浸润性膀胱癌的研究

目的探讨分析全膀胱切除术后4种尿流改道术式的临床效果。方法回顾性分析73例膀胱癌患者膀胱全切除后不同尿流改道术,其中输尿管皮肤造口术12例,回肠膀胱术(Bricker)41例,原位新膀胱术(Studer)11例,Sigma直肠膀胱术9例。对4组患者在出血量、手术时间、术后平均住院天数、术后并发症发生率等方面的情况进行统计学比较分析。结果回肠膀胱术组的手术时间、手术出血量比其它组多,输尿管皮肤造口术组的手术时间、术后平均住院天数少于其它组,差异有统计学意义(P<0.05)。原位新膀胱术组与Sigma直肠膀胱术组在手术时间、出血量、术后平均住院天数等方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论膀胱全切术后4种尿流改道方式各有优、缺点,应根据患者的个体情况选择合适的手术方式。     

经尿道膀胱肿瘤电切术治疗肌层浸润性膀胱癌的临床疗效

目的 探讨经尿道膀胱肿瘤电切术治疗T2期肌层浸润性膀胱癌的临床疗效及安全性。 方法 回顾性分析101例肌层浸润性膀胱癌患者,所有患者术后病理均为浸润性尿路上皮癌(T2期),观察组84例行经尿道膀胱肿瘤电切术,将肿瘤位置膀胱壁全部切除,包括周围1.5 cm膀胱黏膜组织。对照组17例行根治性膀胱切除术,观察记录两组患者复发情况、并发症、生存率及生活质量等临床资料。 结果 观察组平均手术时间(53.1±10.3)min低于对照组的(202.4±31.5)min,观察组平均住院时间(11.7±1.7)d低于对照组的(28.0±4.7)d,观察组平均术中出血量(13.7±6.3)mL少于对照组的(470.6±143.1)mL,差异均有统计学意义(P<0.001)。观察组和对照组1、3、5年生存率分别为97.6%、84.5%、78.5%和94.1%、82.4%、76.4%,组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组4例患者术后出现尿路感染,经抗炎对症治疗后痊愈。对照组1例患者出现肾积水行肾穿刺造瘘引流,1例患者出现输尿管梗阻,2例出现尿路感染行抗炎治疗,1例患者出现急性肠梗阻行手术治疗。观察组较对照组并发症发生率及住院费用低,保留膀胱,生活质量明显提高,患者满意度高。 结论 经尿道膀胱肿瘤电切术对于肿瘤单发、体积较小(直径≤2 cm)、分期较早(T2期)的肌层浸润性膀胱癌疗效可靠,安全性及术后生活质量高。对于肿瘤多发、体积较大(直径>2 cm)的肌层浸润性膀胱癌应首选根治性膀胱切除术。     

经尿道膀胱肿瘤切除术的研究进展

该文简述了经尿道膀胱肿瘤切除术存在的缺点,分析了电切方法、电切设备、麻醉方法、灌注化疗、操作者水平对该术式的影响,指出其临床应用注意要点。     

尿膀胱肿瘤抗原在膀胱癌中的表达及意义

摘要：目的  探讨膀胱肿瘤抗原（BTA）的临床应用价值。方法  收集46例膀胱癌、35例泌尿系良性疾病、10例健康者尿液,同时做尿脱落细胞学及BTA检测。结果  ①BTA检测的敏感性为86.9%,特异性为82.2%,假阳性率为17.8%（95%CI：0.759,0.924）;尿脱落细胞学检测的敏感性为34.7%,特异性为97.8%,假阳性率为2.2%（95%CI：0.550,0.775）;②BTA表达水平和敏感性与肿瘤分级分期、有无肉眼血尿有关（P <0.05）,与复发或初发无关（P >0.05）;BTA对各级、各期的膀胱癌的敏感性均高于尿脱落细胞学检测（P <0.05）;③BTA在早期膀胱癌（Ta～T1期）中表达水平高于良性疾病组、健康组（P <0.05）。结论  BTA对膀胱癌的诊断、早期筛查及跟踪随访有较高的临床应用价值,但应注意血尿影响BTA检测结果。