CPU-86017及其手性衍生物对麻醉小鼠血压和大鼠血管活性作用的比较

目的：研究Ⅲ类抗心律失常药对氯苄基四氢小檗碱（CPU-86017）及其12个手性衍生物，分别观察其对麻醉小鼠血压及大鼠血管活性的作用。方法：zh-005～zh-008为对硝基苄基四氢小檗碱溴化物的4个立体异构体，zh-009～zh-012为N-苄基四氢小檗碱氯化物的4个立体异构体。通过对麻醉小鼠i．v．3mg／kgCPU-86017或zh-005～zh-012并连续观察3h，研究其对小鼠血压的影响；通过对大鼠离体主动脉梯度给予CPU-86017或zh-009～zh-012，研究其对去氧肾上腺素（Phe）或KCI引发的血管收缩活性的影响。结果：CPU-86017在改变对氯苄基为对硝基苄基或N-苄基后，只有zh-006对血压的影响最小，提示其i．v．毒性亦最小。CPU-86017的4个立体异构体，对a1A效应（ROC）呈现立体选择性抑制，而对电压依赖钙通道（VOC）抑制的立体选择性不明显。结论：对氯苄基四氢小檗碱类化合物与血管α1A受体的结合能力，可能取决于结构式中C-13a的构型。     

对氯苄基四氢小檗碱氯化盐光学异构体的结构确证

目的:确证对氯苄基四氢小檗碱氯化盐的四个光学异构体的结构.方法:通过对对氯苄基四氢小檗碱氯化盐四个光学异构体的氢谱(1H NMR)、碳谱(13C NMR,DEPT135)、氢-氢相关谱(1H-1H COSY)、碳氢相关谱(HMQC)、碳氢远程相关谱(HMBC)的解析,对所有的1H NMR,13C NMR谱的信号进行了归属.结果及结论:确证了对氯苄基四氢小檗碱氯化盐的四个光学异构体的光学结构.     

清风藤化学成分的研究

目的研究药用植物清风藤Sinomenium acutum的化学成分。方法清风藤分离除去青藤碱后的苯母液经过反复硅胶柱色谱，以氯仿、氯仿-甲醇、石油醚．丙酮洗脱分离其中残余的其他生物碱类成分。通过波谱分析方法和X-射线衍射分析法确定化合物结构。结果从清风藤除去青藤碱后的母液中分离出4个微量生物碱，分别鉴定为：四氢表小檗碱tetrahydroepiberberine（I）、紫堇碱eheilanthifoline（Ⅱ）、8-氧四氢小檗碱8-oxocanadine（Ⅲ）、8-氧四氢巴马丁8-oxotetrahydropalmatine（Ⅳ）。结论化合物Ⅱ～Ⅳ为首次从该植物中分离得到。     

氯苄四氢小檗碱对抗H2O2引起无血清培养的血管内皮细胞凋亡及坏死

目的：研究氯苄四氢小檗碱对过氧化氢（H2O2）引起无血清培养的小牛主动脉血管内皮细胞的凋亡、增殖、坏死的影响。方法：通过体外细胞培养，以噻唑兰（MTT）法测定细胞存活率；用流式细胞术检测细胞DNA含量及凋亡细胞百分率、增殖率；DNA琼脂糖凝胶电泳法观察细胞凋亡过程中DNA断裂程度。结果：H2O2诱导无血清培养的内皮细胞凋亡，氯苄四氢小檗碱可显降低内皮肌细胞中凋亡细胞百分率，并抑制其增殖，也减少凋亡细胞DNA断裂，同时也减少其引起的平滑肌细胞坏死。结论：氯苄四氢小檗碱可对抗H2O2引起的无血清培养的血管平滑肌细胞凋亡、增殖及坏死。     

3-环己烯-1-甲酸的手性拆分研究

目的 研究外消旋3-环己烯-1-甲酸的手性拆分,获得单一构型异构体.方法 通过化学拆分法中的生成非对映异构体拆分法来拆分外消旋3-环己烯-1-甲酸,以手性苯乙胺为手性拆分剂,外消旋3-环己烯-1-甲酸在丙酮中形成非对映体异构体并利用它们的溶解度差别来进行拆分.结果 拆分为(R)-(+)-3-环己烯-1-甲酸(收率28.3％)和(S)-(-)-3-环己烯-1-甲酸(收率28.7％),光学纯度均大于99％.结论 获得外消旋3-环己烯-1-甲酸的单一构型异构体.     

小檗碱与梓醇及其配伍对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞Glut-4、IRS-1、IRS-1 Ser307磷酸化蛋白表达的影响

目的：观察梓醇与小檗碱及其配伍对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗及这一过程中葡萄糖转运子-4（Glut-4）、胰岛素受体底物-1（IRS-1）和胰岛素受体底物-1丝氨酸307（IRS-1Ser307）磷酸化蛋白表达的影响。方法：采用高糖联合高胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞产生胰岛素抵抗，分别给予小檗碱、梓醇、小檗碱＋梓醇、盐酸罗格列酮进行干预，以葡萄糖氧化酶法检测培养液中葡萄糖消耗量，以WesternBlot法检测蛋白的表达。结果：与模型组相比，小檗碱能增加培养液中葡萄糖的消耗（P〈0．01），但对Glut，4蛋白的表达无影响；梓醇、小檗碱＋梓醇均能显著增加培养液中葡萄糖的消耗（P〈0．01），并使细胞中Glut-4蛋白的表达增强（P〈0．05），且小檗碱＋梓醇组的效应优于梓醇组及小檗碱组；与模型组相比，小檗碱与梓醇及其配伍对IRS-1的表达没有显著性影响，但能降低IRS-1 Ser307磷酸化蛋白表达。结论：小檗碱、梓醇及其配伍能改善胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的胰岛素敏感性，其作用机制与罗格列酮不同。     

罗通定的合成

盐酸小檗碱在对甲苯磺酸作用下得到去亚甲基小檗碱盐酸盐,再经O-甲基化、还原生成消旋四氢巴马汀,最后经(+)-二对甲基苯甲酰酒石酸拆分得到罗通定,总收率约25％.     

毛细管电泳法测量清热化毒丸中盐酸小檗碱的含量

目的建立毛细管电泳法测量清热化毒丸中盐酸小檗碱含量的方法。方法采用甲醇溶液提取清热化毒丸样品,通过高效毛细管电泳法,测量盐酸小檗碱的含量。熔融石英毛细管柱（47cm×75m,有效长度40cm）;缓冲液体系为：60mmol／L磷酸缓冲溶液．甲醇（65：35）,pH：3．2;分离电压30KV;毛细管柱温25℃;检测波长200nm;进样时间5s。结果盐酸小檗碱在进样浓度为0．05mg／ml～0．10mg／ml内线性关系良好（r=0．9993）,平均加样加收率为103．27％,RSD为0．87％。结论该方法简便、快捷、灵敏度高、重现性好,可用于清热化毒丸中小檗碱含量的测定。     

小檗碱对有机阴离子转运体抑制作用及双向跨膜转运研究

目的 研究小檗碱对有机阴离子转运体（OATs）的抑制作用及其双向跨膜转运情况。方法 应用由转染试剂Lipo 3 000介导的动物细胞转基因方法、经筛选得到人有机阴离子转运体OAT1、OAT2、OAT3、OAT4、OAT7和URAT1高表达单克隆细胞株;以野生型（WT）细胞为对照组,用各转运体放射性同位素标记底物和抑制剂验证其转运活性;观察100 μmol/L小檗碱对各转运体的抑制作用,并测定小檗碱对URAT1转运活性的半数抑制浓度（IC₅₀）。通过Caco-2细胞模型研究小檗碱的双向跨膜转运情况。结果 100 μmol/L小檗碱使OAT1、OAT2、OAT3、OAT4、OAT7和URAT1相对转运活性分别下降至（70.48±4.23）%、（69.13±1.28）%、（72.12±3.28）%、（79.77±6.49）%、（69.51±5.99）%、（38.4±2.67）%;小檗碱对URAT1抑制作用的IC₅₀为13.6 μmol/L;在50和100 μmol/L浓度下,小檗碱在顶侧（AP侧）-基底侧（BL侧）方向的跨膜渗透率P_app（A-B）分别为0.28×10^-6 cm/s和0.40×10^-6 cm/s,其相对应的外排率分别为3.18和3.15。结论 小檗碱对URAT1的抑制作用较强,对OAT1、OAT2、OAT3、OAT4、OAT7抑制作用相对较弱,小檗碱是一些外排蛋白的底物,为预测小檗碱可能发生的药物-药物相互作用、解释生物利用度低提供了理论依据。     

毛细管电泳法测定一清软胶囊中盐酸小檗碱的含量

目的建立毛细管电泳法测定一清软胶囊中盐酸小檗碱含量的方法。方法采用甲醇溶液提取一清软胶囊样品,通过高效毛细管电泳法,测量盐酸小檗碱的含量。熔融石英毛细管柱（47cm×75m,有效长度40cm）;缓冲液体系为：60mmol/L磷酸缓冲溶液-甲醇（65：35）,pH=3·5;分离电压30KV;毛细管柱温25℃;检测波长200nm;进样时间5s。结果盐酸小檗碱在进样浓度为0·03018~0·08048mg/ml内线性关系良好（r=0·9998）,平均加样加收率为99·94%,RSD为1·134%。结论该方法简便、快捷、灵敏度高、重现性好,可用于一清软胶囊中小糪碱含量的测定。     

HPLC法同时测定帕罗醇中反式帕罗醇和顺式帕罗醇的含量

目的：建立帕罗醇中反式帕罗醇和顺式帕罗醇的含量测定方法。方法：色谱柱为Phenomenex硅胶柱（250mm×4．6mm,5μm）,以正己烷-乙醇-二乙胺（68：32：0．5）为流动相,流速为1．0ml·min^-1,检测波长为267nm,柱温30℃。结果：反式帕罗醇、顺式帕罗醇与其他杂质之间能够达到良好分离;反式帕罗醇在5．0～4000．0μg·ml^-1。浓度范围内线性关系良好（r=0．9999）;顺式帕罗醇在2．0～800．0μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好（r=0．9999）;反式帕罗醇和顺式帕罗醇平均加样回收率分别为99．60％、98．73％,RSD分别为0．61％、0．94％。结论：该法能够分别同时准确测定帕罗醇中两个异构体的含量,而且简便、准确、快速,可用于样品的质量控制。     

白细胞介素-32在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用及其机制

目的:探讨白细胞介素-32(Interleukin,IL-32)在大鼠肾缺血再灌注(ischemia-reperfusion injury,IRI)损伤中的作用及其机制。方法:80只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(S组,n=20)、缺血再灌注组(I/R组,n=20)、缺血前IgG抗体预处理组(IgG+I/R组,n=20)和缺血前IL-32抗体预处理组(Anti-IL-32+I/R组,n=20)。采用夹闭双侧肾蒂30min后恢复血供的方法制备肾脏缺血再灌注损伤模型,再灌注3h、6h、12h、24h分别处死大鼠收集血样和肾脏样本,自动生化分析仪测定血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)浓度,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清IL-32、TNF-α、IL-1β的表达,化学比色法检测肾组织髓过氧化物酶(MPO)的活性。结果:与S组比较:1、血清Cr、BUN浓度,I/R、IgG+I/R组均显著升高(P0.05),Anti-IL-32+I/R组无显著性差异(P0.05);2、血清IL-32、TNF-α、IL-1β水平,I/R、IgG+I/R组均显著升高(P0.05),Anti-IL-32+I/R组无显著性差异(P0.05);3、肾组织MPO活性,I/R、IgG+I/R组显著增强(P0.05),Anti-IL-32+I/R组无显著性差异(P0.05)。结论:IL-32在肾脏缺血再灌注损伤后的大鼠血清中高表达,阻断IL-32能减少炎症因子释放、抑制中性粒细胞聚集,减轻肾功能损害。     

二氢菲类化合物赫尔西酚的手性异构体研究

目的研究中华石仙桃(Pholidota chinensis Lindl)全草中分离得到的二氢菲类化合物赫尔西酚(hircinol)的立体结构并进行手性异构体的分离。方法采用多种柱色谱法进行分离纯化,并根据比旋光度和圆二色谱数据进行构型确定。利用手性色谱柱对分离得到的赫尔西酚进行手性异构体的拆分。结果与结论得到赫尔西酚A、赫尔西酚B两种手性异构体,两种异构体比例为78.9∶22.1,两种异构体的比旋光度分别为+25.4°和-25.4°。本文首次报道赫尔西酚是具有旋光性的对映体,经圆二色谱(CD)测定和解析证明赫尔西酚A为S构型、赫尔西酚B为R构型。     

乙肝病毒前S1抗原及乙肝五项与ALT的相关性分析及临床意义

目的:通过对联合检测乙型肝炎病毒感染者血清中前S1抗原与乙肝五项常见模式及ALT的关系分析,探讨前S1抗原(PreS1)对病毒性乙型肝炎诊断,治疗和预后的价值。方法:收集乙型肝炎病毒HbsAg阳性血清449例以及乙型肝炎病毒所有标志物均阴性的血清55例,采用ELISA法进行前S1抗原和HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc五项检测,血清ALT用AU-640全自动生化分析仪速率法检测。结果:HBsAg(+)+HBeAg(+)+HBcAb(+)、HBsAg(+)+HbeAb(+)+HbcAb(+)、HBsAg(+)加HBcAb(+)3种模式的前S1抗原阳性率分别为93.8%,71.6%.76.9%。318例preS1-Ag阳性患者血清ALT≥46/L者占34.9%,而131例HBVpreS1-Ag阴性患者ALT≥46U/L者仅1.53%。结论:PreS1配合ALT能够敏感的反映乙型肝炎病毒的复制和肝功能受损的情况。     

以脱氢枞胺拆分布洛芬

目的:使用脱氢枞胺拆分布洛芬,拆分得到药用价值高的(S)-型对映体;方法:当n(Aml):n(Ibuprofen)=1:1反应时,形成酰胺;分别选择用甲醇、乙醇作为溶剂,分别结晶得到非对映异构体酰胺;酰胺在一定比例的乙酸、农盐酸条件下冷凝回流水解;结果与结论:脱氢枞胺可以拆分消旋布洛芬,拆分得到的左、右旋布洛芬在旋光仪...     

气相色谱法测定右旋棉酚衍生物的含量

目的:建立右旋棉酚衍生物含量测定的气相色谱法。方法:采用气相色谱内标法,色谱柱为5%Phenyl Methyl Siloxane毛细管柱,氢火焰离子化检测器,载气为氮气,程序升温:初始温度为200℃,保持2min,然后以20℃·min-1的速度上升到240℃,保持3min;甲硝唑为内标,以内标法计算右旋棉酚衍生物的含量。结果:右旋棉酚衍生物检测浓度线性范围为80.06～480.36μg·mL-(1R2=0.9994),平均加样回收率为96.67%,RSD=1.4%。结论:该法灵敏、简便、快速,适用于右旋棉酚衍生物的含量测定。     

慢性充血性心力衰竭2种治疗方案的成本-效果分析

目的:评价2种方案治疗慢性充血性心力衰竭(CHF)的经济学效果。方法:选择68例住院CHF患者,随机分为2组,分别给予地高辛+螺内酯+福辛普利+美托洛尔缓释片(治疗组1)、地高辛+螺内酯+培哚普利+茶碱缓释片(治疗组2)治疗21d后评价疗效,并进行成本-效果分析。结果:治疗组1与治疗组2疗效分别为88·24%和82·35%,无统计学差异(P=0·21);治疗心力衰竭总成本分别为3401·35、3325·38元,成本-效果比分别为3854·66、4038·11。结论:治疗组1方案成本-效果更优。     

内镜下十二指肠乳头括约肌小切开术联合球囊扩张术治疗胆管结石的近期疗效观察

目的：探讨内镜下乳头括约肌小切开术（SEST）联合球囊扩张术（EPBD）治疗胆管结石的近期疗效。方法：选择我院2009年3月至2011年12月住院治疗的127例结石直径大于10mm的胆管结石患者,随机分为四组,SEST＋EPBD组33例,先行乳头括约肌小切开（切开范围小于乳头肌三分之一）,然后球囊扩张,再碎石取石;EPBD＋SEST组32例,先行球囊扩张术,再行乳头括约肌小切开,再碎石取石;EST组32例行十二指肠乳头括约肌大切开（切开范围大于乳头肌三分之二）取石;EPBD组30例行球囊扩张碎石取石。比较四组的疗效和近期并发症发生率。结果：SEST＋EPBD组术后结石取净率为93.93%（31/33）,EPBD＋SEST组为93.75%（30/32）,EST组为96.77%（30/31）,EPBD组为67.67%（20/30）,EPBD组与其他三组比较差异有统计学意义（〈0.05）;SEST＋EPBD组近期并发症发生率为6.45%,EPBD＋SEST组为10%,EST组6.67%,EPBD组为21.42%,EPBD组与其他三组分别比较有显著性差异（〈0.05）。结论：SEST与EPBD联合治疗胆管结石,安全,有效,可以有效降低经内镜治疗胆管结石的近期并发症发生率,提高了胆管结石患者术后的生活质量。     

青蒿琥酯对人前列腺癌PC-3细胞内游离Ca~(2+)的影响

目的:研究青蒿琥酯(ART)对人前列腺癌PC-3细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响。方法:ART处理PC-3细胞,用Ca2+荧光探针Fluo-3/AM标记PC-3细胞,激光共聚焦扫描显微镜检测PC-3细胞内[Ca2+]i变化。结果:ART诱导PC-3细胞内[Ca2+]i在0～0.5h显著升高;在0.5～1h维持高水平;在4～24h降到初始水平。结论:ART能够诱导PC-3细胞内[Ca2+]i显著持续升高,[Ca2+]i升高可能在ART诱导PC-3细胞凋亡中起重要作用。     

3种“鸡尾酒疗法”治疗急性脑梗死的成本-效果分析

目的:比较3种"鸡尾酒疗法"治疗急性脑梗死的效果及成本。方法:141例急性脑梗死患者按照不同药物治疗方案分为3组,分别给予奥扎格雷钠+桂哌齐特+依达拉奉(A组)、长春西汀+棓丙酯+小牛血去蛋白提取物(B组)、阿魏酸钠+丁咯地尔+肌氨肽苷(C组)治疗14d,进行成本-效果分析。结果:A、B、C组人均治疗总成本分别为5970.67、4865.11、3939.72元,显效率分别为82.98%、63.04%、64.58%,成本-效果比分别为7195.31、7717.50、6100.53。结论:A组方案为较佳方案。