甲基茉莉酮酸对悬浮培养南方红豆杉细胞代谢的影响

目的 探讨甲基茉莉酮酸作用下悬浮培养南方红豆杉细胞的系列生理生化反应。方法 TTC92，3，5-triphenyltetrazolium chloride)和蛋白含量测定方法以及酶活分析技术。结果 甲基茉莉酮酸不仅强烈抑制细胞活力，使细胞初生代谢受到显著抑制，并且还诱导PAL（苯丙氨酸解氨酶）活性增强，在一定程度上抑制了PPO（多酚氧化酶）的活性，使胞外酚含量增加且极大峰比对照提前约3d出现。结论 甲基茉莉酮酸不仅促进细胞由初生代谢提前向次生代谢转化，并且能够增强细胞的次生代谢，有利于细胞相关次生代谢产物的合成。     

在杂种红豆杉细胞悬浮培养中用茉莉酮酸刺激紫杉烷的产生

作者研究了茉莉酮酸对杂种红豆杉Taxus×media Rehd.细胞中和悬浮培养液中总紫杉烷和个别紫杉烷累积动力学的影响。将该植物细胞系置于 B_5培养液(2%蔗糖,10μmol/L,4-D,1 μmol/L 激动素,0.1g/L维生素 C,2 mmol/L 谷氨酰胺)中,暗处培养,培养温度23℃,旋转速度100 r/min,每2周继代培养1次。培养7天后加入茉莉酮酸,终浓度为100 μmol/L,在3个培养周期后的第3、6、9、13、16和19天取样分析细胞内和     

悬浮培养过程中碳、氮、磷的补加对南方红豆杉细胞生长影响的研究

目的：解决南方红豆杉生长缓慢的问题。方法：考察红豆杉细胞悬浮培养过程中磷的消耗，并研究了碳、氮、磷对细胞生长及细胞活性的影响。结果：碳源在悬浮培养中期已经消耗殆尽，后期碳源的缺乏限制了细胞的生长。结论：补加碳源组与对照组相比，细胞生长率和细胞密度明显提高，其中细胞生长率约提高了83％。     

南方红豆杉悬浮培养细胞团区域化及营养功能分化的研究

对南方红豆杉Ｔａｘｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ ｖａｒ,ｍａｉｒｅｉ细胞悬浮培养过程中的分化、细胞团区域化及营养功能分化等现象进行了研究。通过光学显微镜和电子显微镜对细胞团切片及淀粉颗粒染色从形态学上进行系统观察,发现悬浮培养细胞团从外向里呈明显的３个区域;表层细胞由成年细胞组成,中层细胞是由增殖能力旺盛的细胞组成,中心区域的细胞细胞核已消失,出现分化的管状分子。在电镜下可见胞间连丝。通过对细胞内淀粉     

茉莉酸甲酯结合高温胁迫对白桦悬浮细胞三萜合成的影响

目的研究茉莉酸甲酯(Me JA)和高温胁迫对白桦悬浮细胞三萜合成的影响。方法利用不同浓度(25、50、100、150μmol/L)Me JA和高温(50℃处理2 h)处理白桦细胞,进行生长量、细胞活力、抗逆酶活性、丙二醛和总三萜量及其合成关键酶基因相对表达量分析。结果高温和Me JA的复合处理对白桦细胞三萜合成的诱导作用比单独的Me JA和高温处理更强。高温胁迫1 d后加入150μmol/L的Me JA处理,细胞总三萜量最高,为76.6 mg/g,分别比空白对照、单独的Me JA和高温处理增加81.3%、159.9%和13.1%;三萜合成关键酶鲨烯合酶(SS)、鲨烯环氧酶(SE)、羽扇醇合酶(BPW)和β-香树酯醇合酶(BPY)基因的相对表达量也分别比空白对照增加297.1%、83.7%、1 032.6%和282.4%。高温胁迫1 d后加入Me JA处理,超氧化物歧化酶(SOD)和苯丙氨酸裂解酶(PAL)活性高于空白对照;生长量和细胞活力被抑制。结论在高温胁迫后加入Me JA的复合处理可能通过影响白桦细胞生长量、细胞活力、丙二醛量和防御酶活性变化,调节三萜合成关键酶基因的表达,最终促进三萜物质的高效合成与积累。     

健脾益智胶囊对大脑中动脉栓塞大鼠脑组织自由基代谢的影响

目的:探讨健脾益智胶囊对大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠脑组织自由基代谢的影响。方法:建立90只MCAO大鼠模型,随机分为正常组、模型组、中药组各30只。于术后6h、12h、1d、3d、7d分别检测丙二醛(malonaldehyde,MDA)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。结果:与模型组比较,中药组的MDA含量除了术后1 d外均显著低于模型组(P<0.05);而SOD活性除了术后3 d外,均显著高于模型组(P<0.05);CAT含量在术后3d、7d时与模型组比较有显著性差异(P<0.05);GSH-Px含量除了术后6h外均显著高于模型组(P<0.05)。结论:健脾益智胶囊可促进SOD、GSH-Px、CAT表达增加,减少MDA的产生,抑制脂质过氧化反应,对大脑中动脉栓塞大鼠脑组织损伤有明显保护作用。     

茉莉酸甲酯对乌拉尔甘草种子萌发和过氧化物酶活性的影响

目的探讨茉莉酸甲酯(MeJA)能否抑制乌拉尔甘草Glycyrrhiza uralensisFisch种子萌发并初步了解MeJA对种子萌发的作用机理。方法配制含10-4～10-8mol/L MeJA的系列溶液对甘草种子进行处理,试验分析其对种子发芽率、幼苗生长及过氧化物酶(POD)活性的作用效果。结果高浓度(10-4～10-5mol/L)的MeJA抑制甘草种子的萌发,影响其幼苗生长,低浓度(10-6～10-8mol/L)的MeJA对甘草种子的萌发和幼苗的生长具明显的促进作用,甘草幼苗的POD活性也随着MeJA浓度的升高而增强。结论 MeJA对甘草种子萌发及幼苗生长的作用表现出"双重性"效应。     

促进剂组合对中国红豆杉细胞悬浮培养紫杉醇合成的影响

目的研究中国红豆杉Taxus chinensis细胞悬浮培养中蔗糖、柠檬酸三铵、水杨酸和氨基酸前体组合对细胞生长和紫杉醇(taxol)积累的影响。方法采用L9(34)设计试验,考察了第9天添加蔗糖(10、16、22 g/L)、柠檬酸三铵(0、154、1 540 mg/L),第21天添加蔗糖(20、260、g/L)和不同时间组合添加水杨酸及氨基酸前体4个因素对红豆杉细胞悬浮培养和紫杉醇合成的影响。结果当在细胞培养的第0天添加1.67 mg/L硝酸银,第9天添加10 g/L蔗糖,第9天添加1 540 mg/L柠檬酸三铵,紫杉醇达到最高,在此最优组合处理时紫杉醇质量浓度达到39.2 mg/L,相对于最差组合处理的(2.1 mg/L)时提高18.7倍。结论促进剂组合对中国红豆杉细胞悬浮培养的生长和紫杉醇的合成都有很明显的影响。     

茉莉酮酸甲酯选择性促进野甘草培养组织中野甘草酸B的产生

野甘草酸(scopadulcic acid)B(SDB)是野甘草Scoparia dulcis中一种四环二萜化合物,具有广泛的生物活性,如抗单纯疱疹病毒复制、胃离子泵活性及抗肿瘤活性等。根据在细胞悬浮培养中次生代谢产物对茉莉酮酸酯的敏感性,以及许多二萜类化合物主要积累在嫩叶中这些特性,作者应用Mura     

海拔对贵州雷公山地区南方红豆杉种群遗传多样性的影响

目的:应用SSR标记研究海拔对贵州雷公山地区南方红豆杉遗传多样性的影响。方法:经梯度PCR扩增从红豆杉、白云杉、日本柳杉SSR引物中筛选获得了条带清晰的21对SSR引物用于群体研究。结果:21对引物共扩增出42条条带,其中多态性条带35条,多态性条带百分率为83.3%;物种水平上Nei's基因多样性为0.2587,Shannon指数为0.4719,多态位点百分率为85.71%,基因流为1.1453。聚类分析显示在阈值为0.71时,不同海拔南方红豆杉种群之间出现遗传分化。结论:海拔高度与南方红豆杉种群的遗传分化呈负相关。     

RP-HPLC法测定血脂宁口服液中二苯乙烯苷的含量

制何首乌为防老抗衰、防治动脉粥样硬化等症的常用中药 ,复方制剂血脂宁口服液由制何首乌、荷叶、山楂等 6味中药组成 ,具有滋补肝肾 ,活血化瘀 ,调节血脂的功能 ,适用于高血脂症的康复治疗 ,对头晕、肢麻、胸闷有较好的改善作用。据文献报道 [1] ,何首乌中的有效成分为二苯乙烯苷 ,是抗衰老、降血脂药理药效的活性成分 ,且含量较高。本实验采用 RP-HPLC法对制剂中二苯乙烯苷进行了定量测定 ,建立了该制剂的含量测定方法 ,并考察了不同产地的何首乌对其制剂质量的影响 ,为制剂的质量控制提供理论依据。1　仪器和试药美国 SSI高效液相色…     

茉莉酸甲酯对明党参植株和悬浮细胞中呋喃香豆素积累的影响

佛手酚、佛手柑内酯和花椒毒素为明党参中天然呋喃香豆素成分,具多重药理作用。以明党参栽培品和悬浮培养细胞为材料,研究茉莉酸甲酯处理后呋喃香豆素积累状况和一系列生理生化指标变化。结果显示,茉莉酸甲酯不同程度地促进明党参中各呋喃香豆素合成,柄悬浮细胞中产量高于叶悬浮细胞。于培养周期第10天加入100 μmol·L^-1茉莉酸甲酯对明党参悬浮细胞作用效果最明显,最适收获时间为处理4 d后,此时柄悬浮细胞中佛手酚,花椒毒素和佛手柑内酯产量分别是未诱导细胞的73.6,1.9,42.7倍。茉莉酸甲酯诱导呋喃香豆素增长的同时抑制细胞活力和生物量积累,激发细胞防御反应。该研究初次系统地探索了茉莉酸甲酯对明党参中呋喃香豆素的诱导效果,并为大量生产3种活性成分和探明茉莉酸甲酯诱导机制奠定基础。     

对数期继代对南方红豆杉细胞培养动力学的影响

目的 解决南方红豆杉细胞生长缓慢及代谢水平低下的问题。方法 对对数期(20d)和静止期(30d)的红豆杉细胞分别进行继代，在整个生长周期中测定了培养基中的碳源、氮源、磷酸盐的变化并分析了红豆杉细胞生长及紫杉醇的合成情况。结果 对数期继代细胞吸收碳源和硝态氮早于静止期继代的细胞，且前者的比生长速度是后者的1．5倍，紫杉醇含量提高了近4倍。结论 对数期继代有利于生物量的积累及紫杉醇的合成。     

南方红豆杉转录组SSR位点分析及其分子标记开发

目的 基于赤霉素（gibberellin A₃,GA₃）处理下的南方红豆杉Taxus chinensis var. mairei转录组数据鉴定和分析SSR位点,开发可用于南方红豆杉种质资源鉴定和遗传多样性分析的SSR标记。方法 使用MISA软件对南方红豆杉转录组数据进行SSR分析,搜索SSR位点。可搜索单核苷酸、二核苷酸、三核苷酸、四核苷酸、五核苷酸和六核苷酸,最小重复数分别设置为10、6、5、5、5、5次。采用Primer 3（2.3.5版,默认参数）进行SSR引物设计。通过毛细管荧光电泳检测,最终选定多态性好,扩增成功率高的SSR引物用于后续数据分析;通过MEGA进行UPGMA聚类分析,构建聚类树。结果 转录组测序共获得202 361条Unigene,采用MISA软件搜索出12 008个SSR位点,分布在10 894条Unigenes上,发生频率为5.38%,平均距离为1/7.64 kb。单核苷酸重复类型最丰富,占总SSR位点的51.74%,其次为三核苷酸（20.92%）和二核苷酸重复类型（20.88%）。A/T、AG/CT是优势重复基序,分别占总SSR重复类型的49.60%和10.93%。随机抽选96对SSR引物,以4个地区12份南方红豆杉种质进行引物有效性和多态性验证,筛选出13对具多态性的SSR引物,多态性引物比率为13.54%。13对引物在东北红豆杉Taxus cuspidata扩增效率高达100%,但在曼地亚红豆杉Taxus × media扩增效率仅为23.08%。聚类分析表明太行山地区南方红豆杉聚为一类,浙江、福建和湖南等南方来源的南方红豆杉聚为一类,后三者彼此之间遗传距离更近。结论 南方红豆杉转录组测序产生的Unigene信息可以用来开发SSR分子标记,开发的13个标记将有助于南方红豆杉物种遗传多样性、分子育种、资源保护等方面的研究。     

航天搭载丹参的可溶性蛋白及CAT、POD、SOD同工酶分析

目的:探讨航天搭载处理对丹参植株生理特性的影响。方法:以航天搭载丹参和未搭载的丹参植株为材料,利用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术对丹参植株进行了可溶性蛋白、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)同工酶分析。结果:与未搭载的丹参比较,航天搭载丹参的可溶性蛋白、CAT、POD、SOD同工酶酶带数、酶带迁移率、酶活性强度均表现出差异,可溶性蛋白的总量明显高于对照组,同工酶的酶活性强度增强。结论:空间环境对丹参种子产生了一定的诱变作用,搭载后的丹参抗逆性增强。     

洛伐他丁、氯胺和茉莉酸甲酯处理对茜草悬浮培养细胞中紫色素和大叶茜草素积累的作用(英文)

目的:使用茜草细胞悬浮培养体系研究茜草中萘醌类成分生合成途径原料IPP的来源,以及茉莉酸甲酯、氯胺和洛伐他丁对蒽醌和萘醌的积累情况。方法:建立茜草细胞悬浮培养体系,分别在培养基中添加茉莉酸甲酯、氯胺和洛伐他丁。每3天取样一次。使用高效液相色谱法测定紫色素和大叶茜草素含量并计算出产量。结果:洛伐他丁处理组中紫色素和大叶茜草素产量均有显著增加。氯胺处理组中紫色素和大叶茜草素产量明显下降。茉莉酸甲酯处理组中紫色素产量增加,同时大叶茜草素产量降低。结论:在茜草细胞中萘醌类成分的IPP可能是通过MEP途径合成的;要解释茉莉酸甲酯对蒽醌和萘醌积累的不同作用,基因表达水平方面的研究尤其是对1,4-二羟基-2-萘甲酸异戊烯基化的基因表达研究应该受到更多关注。     

南方红豆杉温室扦插育苗试验研究

南方红豆杉1年生萌蘖条插穗生根率最高，而1年生侧枝插穗来源易，数量多。以NAA50μg／mL＋IBA50μg／mL，处理1年生侧枝插穗8h，在善土-蛭石（1：1）的苗床上，插穗成苗率达60％以上。     

长鞭红景天细胞悬浮培养体系优化研究

目的 优化长鞭红景天Rhodiola fastigiata细胞悬浮培养体系及生长条件.方法 研究基本培养基、激素、碳源、氮源等因素对长鞭红景天细胞生长和红景天苷产量的影响,建立高产红景天苷的细胞悬浮培养体系.结果 MS培养基+BA5.0 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L为长鞭红景天细胞悬浮培养的最适培养条件.结论 对培养条件进行优化,为利用长鞭红景天细胞大规模生产天然活性成分奠定基础,为缓解野生长鞭红景天资源的匮乏提供可行途径.