高体积分数氧致慢性肺疾病新生大鼠肺组织血小板源性生长因子的动态表达

目的 探讨高体积分数氧(高氧)损伤状态下,新生大鼠肺组织内血小板源性生长因子(PDGF)的动态变化.方法 新生Wistar大鼠320只.依据吸氧体积分数(FiO2)分为实验1组(FiO2=800 mL·L-1)、实验2组(FiO2=600 mL·L-1)、实验3组(FiO2=400 mL·L-1)及空气对照组(FiO2=210 mL·L-1).实验第1、3、5、7、14天,无菌取其肺组织,采用免疫组织化学法检测各组肺组织PDGF-A、PDGF-B、PDGF受体(PDGFR)-α、PDGFR-β的表达,MetaMorph软件测定平均光密度值,以表示肺组织PDGF-A、PDGF-B、PDGFR-α、PDGFR-β蛋白的表达水平.应用SPSS 11.5软件进行统计学分析.结果实验1组及实验2组第1天肺组织PDGF-B表达均低于空气对照组(Pa<0.05 );实验1组第5、7天,实验2组及实验3组第7天肺组织PDGF-B表达均高于空气对照组(Pa<0 05 ).PDGFR-β高氧刺激后持续增高,3个实验组第1天、第3天时与空气对照组比较无显著差异,第5、7、14天均明显高于空气对照组(Pa＜0.05).3个实验组PDGF-A 、PDGFR-α与空气对照组比较差异无统计学意义.结论 吸入高氧使新生大鼠肺组织PDGF-B、PDGFR-β表达增加,是导致早期高氧肺损伤可能途径之一.     

高体积分数氧致慢性肺疾病新生鼠肺泡II型上皮细胞超微结构的改变

目的 探讨高体积分数氧(高氧)损伤状态下,新生鼠肺组织通透性及肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)超微结构的动态变化.方法 新生大鼠320只,依据吸氧体积分数(FiO2)分组:实验组1(FiO2 800 mL·L-1)、实验组2(FiO2 600 mL·L-1)、实验组3(FiO2 400 mL·L-1)、空气对照组(FiO2 210 mL·L-1).每组分别于实验1 d、3 d、5 d、7 d、14 d取 8只鼠,计算其肺湿/干质量比值(W/D);另取8只新生鼠行支气管肺泡灌洗,检测其支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白水平的动态变化; 透射电镜及硝酸镧示踪技术观察其AECⅡ超微结构及细胞膜通透性改变.结果 各实验组5 d、7 d、14 d肺W/D比值明显高于空气对照组,差异均有统计学意义(Pa<0.05),高氧3 d后实验组1与实验组2、实验组3的BALF中蛋白水平与空气对照组比较均显著增高(Pa<0.05);各实验组 7 d 内随暴露时间延长呈上升趋势;BALF 中蛋白水平在实验组3、实验组2、实验组1也呈逐渐增高趋势,且与空气对照组比较均显著增高(Pa<0.05).实验组AECⅡ的超微结构在出生后不同时间可以出现明显改变,且对硝酸镧颗粒通透性明显增加.结论 高氧肺损伤早期存在肺泡上皮通透性增加导致的肺水肿改变;新生鼠随着高氧暴露浓度的增高和时间的延长,肺损伤加重.     

川芎嗪对新生大鼠高体积分数氧性肺损伤肺纤维化的影响

目的 探讨川芎嗪对高体积分数氧(高氧)性肺损伤新生大鼠肺组织纤维化的保护作用.方法 出生12 h内的清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠80只作为研究对象,随机分成4组(每组20只):空气对照组(A组);空气加川芎嗪组(B组);高氧组(C组);高氧加川芎嗪组(D组).B、D组新生大鼠每天腹腔注射溶于9 g/L盐水中的川芎嗪30 mg/kg,A、C组新生鼠每日腹腔注射等量9 g/L盐水,持续14 d.第14天每组随机选取10只新生鼠,处死,取其肺组织切片,HE染色法观察其肺组织病理变化;Masson三色染色图像定量分析计算其胶原纤维阳性面积百分比,测定其肺组织羟脯氨酸(HYP)水平,判断其肺纤维化程度.应用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 高氧组第14天肺组织病理发现间质细胞增多,肺泡数目减少,肺组织出现纤维化改变;川芎嗪治疗组肺组织病理改变明显减轻.高氧组新生大鼠体质量与A、B组比较均明显减轻(Pa<0.05);而D组新生大鼠体质最较C组明显增加(P<0.05).与A、B组比较,C组胶原沉积明显增多,胶原纤维阳性面积百分比及HYP水平明显增高(Pa<0.05).D组与C组比较,胶原沉积明显减少,胶原纤维阳性面积百分比、HYP水平均明显下降(Pa<0.05),D组与A组、B组相比差异无显著性(Pa>0.05).结论 川芎嗪早期干预町减轻高氧性肺损伤新生大鼠的肺组织纤维化程度.     

高体积分数氧暴露早产大鼠肺组织血红素加氧酶-1的表达及活性变化

目的 观察血红素加氧酶-1(HO-1)在高体积分数氧(高氧)暴露早产大鼠肺组织中的表达及活性变化,探讨HO-1在早产大鼠高氧肺损伤中的作用.方法 将3日龄早产SD大鼠28只随机分为高氧组、空气组(每组14只),于实验第3、7天分别用半定量反转录-聚合酶链反应法和免疫组织化学法检测各组早产大鼠肺组织HO-1 mRNA表达水平和HO-1蛋白在肺组织的分布和表达水平,并测定HO-1的活性.采用SPSS 12.0软件进行统计学分析.结果 实验第3天,空气组早产大鼠肺组织HO-1 mRNA(0.17±0.08)、HO-1蛋白(7.23±4.63)均有微弱表达,HO-1活性为(4.32±1.57)nmol/(mg·h);高氧组早产大鼠肺组织HO-1mRNA(0.72±0.33)表达明显高于空气组(Pa<0.01),HO-1蛋白(18.54±6.55)仅在臣噬细胞表达弱阳性,HO-1活性明显增加(6.14±1.62)nmol/(mg·h),二者均明显高于空气组(Pa<0.05).实验第7天,各组早产大鼠肺组织HO-1 mRNA均未见表达,高氧组早产大鼠肺组织HO-1蛋白表达及活性均显著高于空气组[(51.24±18.32)vs(4.11±1.82),(32.38±5.46)nmol/(mg·h)vs(5.75±1.87)nmol/(mg·h) Pa<0.01].结论 HO-1可能参与了早产大鼠高氧肺损伤的过程.     

Bax/Bcl-2在高体积分数氧致新生大鼠慢性肺疾病肺组织及成纤维细胞中的动态变化

目的 制备高体积分数氧(高氧)诱导新生大鼠慢性肺疾病(CLD)模型,探讨持续吸入高氧对新生大鼠肺组织及成纤维细胞Bax及Bcl-2蛋白表达的影响.方法 足月新生大鼠出生12 h内分别持续吸入氧体积分数为900 mL·L-1的高氧(高氧组)和空气(空气组),于3 d、7 d和14 d随机处死动物后,肺组织取材同时进行肺成纤维细胞的原代培养,应用免疫组织化学半定量法检测其Bax及Bcl-2蛋白水平变化.结果 在肺组织中,高氧组Bcl-2蛋白的表达水平在7 d、14 d有所升高(P<0.001),3 d时表达无变化(P>0.05);而高氧组Bax蛋白的表达水平及Bax/Bcl-2比值在3 d、7 d和14 d均明显高于空气组,且具有时间敏感性(Pa<0.01).在肺成纤维细胞,高氧组3 d、7 d Bcl-2蛋白表达水平无变化(P>0.05),14 d时有所增高(P<0.001),但不如Bax蛋白增加明显;高氧组3 d、7 d和14 d肺成纤维细胞Bax蛋白的表达水平及Bax/Bcl-2比值均明显高于空气组(Pa<0.01).结论 高氧可促进新生大鼠肺组织及成纤维细胞Bax蛋白的表达,从而通过上调Bax/Bcl-2比值促进凋亡发生,参与CLD的发生发展过程.     

高体积分数氧诱导幼鼠肺组织细胞凋亡情况及p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导机制

目的 探讨幼鼠高体积分数氧(高氧)暴露后肺组织细胞凋亡及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)对细胞凋亡的调控作用.方法 幼年Wiser大鼠40只随机分为空气对照组、高氧暴露组(高氧暴露第1、2、3天)和p38MAPK干预组,每组各8只.空气对照组大鼠置于同一室内空气中;高氧暴露组大鼠置于氧体积分数为900 mL/L的有机玻璃氧仓中;p38MAPK干预组大鼠尾静脉注射p38MAPK的抑制剂SB203580 2 h后置于高氧仓中3 d.应用Western blot法和末端标记法分别检测p38MAPK在大鼠肺组织中的表达及肺组织的细胞凋亡指数,并同时观察SB203580对肺组织细胞凋亡的影响.应用SPSS 13.0统计软件行单因素方差分析.结果 高氧暴露第1、2天组大鼠肺组织细胞凋亡指数与空气对照组比较无明显差异,高氧第3天组大鼠肺组织细胞凋亡指数较空气对照组明显增加(P<0.05),发生凋亡的主要靶细胞为肺泡、支气管上皮及血管内皮细胞.高氧暴露第1天,肺组织p38MAPK活性迅速升高,于第2天达高峰,高氧暴露第3天p38 MAPK活性有所下降,但仍高于空气对照组(Pa<0.05).使用SB203580干预后,肺组织p38MAPK活性被抑制,同时肺组织细胞凋亡指数降低.结论 高氧暴露可诱导肺组织发生细胞凋亡;p38MAPK参与了高氧诱导的肺组织细胞凋亡的调控,可能起促凋亡作用.     

氧化应激在新生大鼠常压高体积分数氧致脑损伤发生中的作用

目的探讨氧化应激在7日龄新生大鼠高体积分数氧（高氧）性脑损伤发生中的作用。方法体质量12～18g的7日龄SD大鼠42只，随机分为空气组和高氧组。高氧组与其乳母一起置于氧箱中，调节氧流量（3L／min），使箱内氧体积分数维持（800&#177;50）mL／L，用数字式测氧仪进行监测。空气组置于同一室内空气中，氧体积分数为210mL／L，饲养条件与高氧组相同。高氧／空气开始暴露30min后，各取3只大鼠，麻醉后采血，行动脉血气分析。高氧／空气暴露12h后2组大鼠各处死8只，化学比色法检测其脑组织还原型谷胱甘肽（GSH）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）、GSSG／GSH、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。高氧／空气暴露12h后2组各处死10只大鼠，取其脑组织常规脱水、包埋、切片（经海马），脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法观察脑组织细胞凋亡指数。结果空气组平均动脉血氧分压[pa（O2）]为（87．0&#177;2．71）mmHg（1mmHg=0．133kPa），高氧组为（219．0&#177;10．7）mmHg，高氧组明显高于空气组[（87．0&#177;2．71）mmHg]（P〈0．05）。高氧组暴露12h脑细胞凋亡指数[（39．20&#177;7．59）％]较空气组[（4．50&#177;1．87）％]显著增加（P〈0．01）。高氧暴露12h组GSH[（0．994&#177;0．230）μmol／g]较空气组[（1．210&#177;0．210）μmoL／g]明显下降（P〈0．05），高氧组暴露12h SOD[（124．60&#177;4．14）&#215;10^3 U／g]也较空气组[（145．0&#177;6．62）&#215;10^3 U／g]明显下降（P〈0．01）；高氧组GSSG[（0．0283&#177;0．0043）μmol／g]、GSSG／GSH（0．0296&#177;0．0045）、MDA[（5．21&#177;0．41）μmol／g]均较空气组[（0．0212&#177;0．0029）μmol／g，0．0181&#177;0．0031，（4．85&#177;0．25）μmol／g]显著升高（Pa〈0．05）。结论常压高氧可引起新生大鼠脑细胞的凋亡及氧化应激，氧化应激与高氧性脑损伤密切相关。     

阿奇霉素对新生大鼠高体积分数氧肺损伤的影响

目的探讨阿奇霉素对高体积分数氧(高氧)诱发新生大鼠肺损伤的影响。方法选用出生2d的新生Wistar大鼠90只,雌雄不拘,随机分为3组:空气对照组、高氧模型组、阿奇霉素治疗组(阿奇霉素组),每组各30只。空气对照组新生鼠暴露在室内空气中;高氧模型组和阿奇霉素组新生鼠暴露在900mL·L-1氧气中,共14d;阿奇霉素组新生大鼠于出生第2天起,每天分别腹腔内注射阿奇霉素200mg·kg-1;空气对照组和高氧模型组新生鼠腹腔内注射9g·L-1盐水。第3、7、14天每组各处死10只动物,取肺组织,光镜下观察其肺组织的病理变化;采用免疫组织化学染色检测其肺组织干扰素-γ(IFN-γ)、结缔组织生长因子(CTGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果IFN-γ在空气对照组无阳性表达;高氧模型组第7天达到高峰,第14天明显下降,但仍高于空气对照组;阿奇霉素组IFN-γ表达强度在各时间段均低于高氧模型组(Pa<0.05)。CTGF在空气对照组无阳性表达;高氧模型组随吸入高氧时间延长,阳性表达逐渐增强;阿奇霉素组CTGF表达强度在各时间段均低于高氧模型组(Pa<0.05)。MMP-9在空气对照组仅有散在的阳性细胞着色;...     

高氧致新生大鼠肺损伤肺组织中MMP-8和TIMP-2表达的动态变化和意义

目的探讨高氧致新生大鼠肺损伤肺组织基质金属蛋白酶-8（MMP-8）和基质金属蛋白酶抑制物-2（TIMP-2）表达的动态变化及其对慢性肺疾病（CLD）纤维化形成的作用。方法足月新生大鼠，于生后12h内分别持续吸入0．90～0．95的高氧和空气，于1、3、7、14、21d，取肺组织行Masson染色，图像定量分析，计算胶原纤维阳性面积百分比，以评估胶原纤维沉积程度；应用RT-PCR和免疫组化技术检测肺组织中MMP-8、TIMP-2mRNA和蛋白表达的动态变化。结果高氧暴露7d开始高氧组的胶原纤维在肺间质沉积，胶原纤维阳性面积高于空气组。高氧组MMp-8mRNA和蛋白表达在7d后低于空气组，两组TIMP-2的表达在各时间点上无差异。结论随着高氧暴露时间的延长，新生大鼠肺组织中MMP-8表达降低，而TIMP-2表达不变，MMP-8／TIMP-2的平衡状态遭到破坏，胶原降解减少，从而促进了胶原在肺间质的沉积。     

细胞色素氧化酶mRNA在高氧暴露早产大鼠肺组织中的表达变化

目的观察85％高浓度氧（高氧）暴露下早产新生大鼠肺组织的病理改变及线粒体DNA编码细胞色素氧化酶亚基（COXI、COXII、COXIII）mRNA表达的动态变化，探讨其在早产大鼠高氧肺损伤发生、发展中的可能作用。方法早产SD大鼠生后1d随机分为空气组、高氧组。高氧组持续暴露于85％氧气中，空气组置于同一室内常压空气中。两组分别于暴露满1、4、7、10和14d时，每组取动物8只，行肺组织病理学检查，半定量逆转录聚合酶链反应测定COXI、COXII和COXIIImRNA的表达。结果（1）高氧暴露4d即可见肺泡炎和肺发育滞后的改变。（2）与同时问点空气组相比，高氧暴露1d和4d时，COXImRNA的表达显著增强（P〈0．05和P〈0．01），其后开始下降，7d时两组差异无显著性（P〉0．05），10d时较空气组显著降低（P〈0．01），14d时复又增高，且明显高于空气组，差异有非常显著性（P〈0．01）。COXII和COXIIImRNA在各时间点的表达差异无显著性。结论85％高氧暴露诱导早产新生大鼠肺组织线粒体DNA编码COX亚基异常表达，这种变化可能参与了高氧肺损伤的发生。     

谷酰胺对高体积分数氧肺损伤新生大鼠的保护作用

目的探讨谷酰胺对新生大鼠高体积分数氧(高氧)肺损伤的保护作用。方法将足月2日龄新生SD大鼠24只随机均分为空气组、谷酰胺组和高氧组,每组8只。空气组新生大鼠不做处理,谷酰胺组新生大鼠实验前腹腔注射0.75 g·kg-1·d-1谷酰胺溶液,高氧组新生大鼠腹腔注射等容量9 g·L-1盐水,连续3 d;高氧组与谷酰胺组新生大鼠置于氧体积分数大于900 mL·L-1模型箱内,空气组新生大鼠置于同一室内常压空气中。分别于实验开始3 d、6 d比较各组新生大鼠体质量,于实验开始6 d无菌条件下处死新生大鼠,取肺组织,24 h后制成石蜡标本,观察病理改变及热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果 1.高氧组6 d存活率明显低于空气组(P<0.05);谷酰胺组6 d存活率与空气组比较差异无统计学意义(P>0.05)。高氧下暴露3 d,3组体质量比较差异无统计学意义(P>0.05);高氧暴露6 d,高氧组体质量明显低于空气组(P<0.01),谷酰胺组体质量与空气组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.高氧组肺水肿程度最严重,其肺湿质量/干质量值明显高于空气组(P<0.05);谷酰胺组肺湿质量/干质量值与空气组比较差异无统计学意义(P>0.05)。3.高氧暴露6 d,高氧组肺泡内有出血和大量渗出的炎性细胞、大量粉染的蛋白性液体,肺泡壁严重充血水肿;谷酰胺组肺泡内极少量红细胞渗出,肺泡腔内见粉染的水肿液,肺泡壁增厚。4.高氧暴露6 d,高氧组、谷酰胺组肺组织HSP70蛋白表达量均较空气组显著增加(Pa<0.01),谷酰胺组肺组织HSP70蛋白表达量较高氧组显著增加(P<0.01)。结论预防性使用谷酰胺可明显改善高氧肺损伤新生大鼠的生存率,有利于新生大鼠的生长发育;预防性使用谷酰胺能增加高氧肺损伤新生大鼠肺组织HSP70的表达,表明谷酰胺对高氧肺损伤的保护作用与HSP70表达相关。     

泛素-蛋白酶体途径在高体积分数氧肺损伤大鼠早期的激活

目的 探讨高体积分数氧(高氧)暴露早期大鼠肺损伤情况,以及泛素-蛋白酶体途径是否激活.方法 实验采用完全随机设计,SD大鼠20只随机分为高氧组和空气组,每组10只.空气组大鼠持续吸入空气(氧体积分数210 ml/L)72 h;高氧组大鼠持续吸入高氧(氧体积分数950 ml/L)72 h制备高氧肺损伤模型.并视肺形态学变化并确定大体病理分级,肺损伤病理评分;测定肺湿/干质量比值.免疫组织化学方法和Western blot方法检测肺组织泛素化蛋白的表达和蛋白酶体20 s的活性,评价泛素-蛋白酶体途径激活情况.结果 1.成功复制高氧肺损伤大鼠模型.2.大鼠高氧暴露后,出现明显肺水肿,肺湿/干质量比值增高(P=0).3.高氧组大鼠高氧暴露72 h肺组织鲜红色,饱满状,表面有点片状出血或局灶状出血,胸腔有少量积液.高氧组大体病理分级与空气组比较差异有显著性(P=0.005).光镜观察高氧组肺泡上皮肿胀,肺泡壁增宽,毛细血管扩张和充血,肺泡间质和肺泡腔水肿明显,肺泡内炎性细胞增多.高氧组肺损伤病理评分较空气组显著增高(P=0).4.免疫组织化学和Western blot结果均显示大鼠高氧暴露72 h肺组织泛素化蛋白表达显著增强(P=0).5.高氧组蛋白酶体20 s活性较空气组明显升高(P=0).结论 高氧暴露72 h对大鼠肺脏有明显损伤,弥散性肺泡上皮细胞、肺血管内皮细胞损伤,肺内炎性反应细胞浸润伴肺水肿为主要病理学改变.高氧暴露早期大鼠肺组织泛素-蛋白酶体途径激活,并参与肺损伤病理生理过程.     

丹参对高体积分数氧致新生大鼠支气管肺发育不良的影响

目的 探讨丹参对高体积分数氧(高氧)致新生大鼠慢性支气管肺发育不良(BPD)的影响.方法 出生2 d的新生SD大鼠随机分为空气加9 g/L盐水组(Ⅰ组)、空气加丹参组(Ⅱ组)、高氧加9 g/L盐水组(Ⅲ组)、高氧加丹参组(Ⅳ组).Ⅲ和Ⅳ组持续暴露于高氧中,Ⅱ和Ⅳ组予腹腔注射丹参10 mg/(kg·d),Ⅰ和Ⅲ组腹腔注射同等体积的9 g/L盐水,生后14 d对各组大鼠行肺组织病理学检查,分别采用硫代巴比妥酸法、亚硝酸盐法、二硝基苯甲酸法检测辐射状肺泡计数(RAC),检测各组大鼠肺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平.采用SPSS 11.5软件进行组间t检验.结果 1.Ⅲ、Ⅳ组显示明显的肺泡发育受阻,肺纤维化明显,RAC值较Ⅰ、Ⅱ组均减少(Pa＜0.05),但Ⅳ组RAC(8.6±0.2)较Ⅲ组(7.2±0.5)显著增加(P＜0.05).2.Ⅲ、Ⅳ组肺湿质量/干质量重(W/D)均高于Ⅰ、Ⅱ组(Pa＜0.05),提示高氧组肺纤维化、肺水肿均较空气组严重,使用丹参后肺W/D显著下降(P＜0.05).3.Ⅲ、Ⅳ组MDA水平显著高于Ⅰ、Ⅱ组(Pa＜0.05),Ⅳ组MDA水平较Ⅲ组明显下降(P＜0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组SOD、GSH-Px比较无明显差异,使用丹参后其水平上升,与Ⅲ组比较有统计学差异(P＜0.05).结论 丹参可部分抑制高氧所致的慢性BPD,其机制可能是通过抗氧自由基、减轻肺部炎性反应而发挥作用.     

川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导新生大鼠心肌细胞血小板源生长因子-β受体与细胞外信号调节激酶表达的影响

目的 观察川芎嗪对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌细胞血小板源生长因子-β(PDGF-β)受体、细胞外信号调节激酶 (ERK1/2) 表达的影响,探讨其治疗心肌肥大的作用机制.方法 体外培养新生大鼠心肌细胞,分为AngⅡ组(以 10-7 mol/L AngⅡ刺激)、川芎嗪组(10-7 mol/L AngⅡ加10 mg/L川芎嗪刺激)及对照组(正常培养的心肌细胞).3组分别培养24 h,收集心肌细胞,采用[3H]-亮氨酸掺入法测定心肌细胞蛋白合成速率,免疫印迹法测定其PDGF-β受体、ERK1/2表达.应用SPSS 11.0软件进行统计学分析.结果 3组间心肌细胞蛋白合成速率比较有显著性差异(F=20.71 P<0.01),其中AngⅡ组较对照组显著增加(P<0.01),川芎嗪组较AngⅡ组显著降低(P<0.01); AngⅡ组心肌细胞PDGF-β受体表达水平较对照组显著增加(P<0.01),川芎嗪组心肌细胞PDGF-β受体表达显著低于AngⅡ组 (P<0.05);AngⅡ组心肌细胞ERK1/2表达显著高于对照组(P<0.01),川芎嗪处理后AngⅡ诱导的心肌细胞ERK1/2表达较AngⅡ组显著降低 (P<0.01).结论 川芎嗪可抑制AngⅡ诱导的心肌细胞PDGF-β受体与ERK1/2的表达,这可能是川芎嗪治疗心肌肥大的重要机制之一.     

血管紧张素Ⅱ上调大鼠肾小球系膜细胞整合素连接激酶的表达

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠肾小球系膜细胞整合素连接激酶(ILK)表达的影响.方法 体外分离、培养SD大鼠肾小球系膜细胞,予10-7mol/L AngⅡ刺激细胞(O、12、24、48、72 h),检测各时间点细胞ILK蛋白质的表达水平;予不同水平(0、10-11、10-9、10-7、10-5mol/L)AngⅡ刺激细胞48 h,检测ILK蛋白质的表达水平.采用SPSS 10.0软件进行统计学分析.结果 1.分离、培养的SD大鼠肾小球系膜细胞结蛋白染色阳性;2.用lO-7mol/L AngⅡ干预肾小球系膜细胞,12 h后大鼠ILK的蛋白质表达水平开始升高,48 h达到高峰值,0、12、24、48、72 h大鼠ILK蛋白质表达水平分别为0.18±0.02、0.37±0.07、0.90 ±O.10、1.73±0.12、及1.72±0.13(F=166.78 P相似文献   

缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织小G蛋白Rho相关激酶1的表达及其干预作用

目的观察缺氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺组织中小G蛋白Rho相关激酶1(Rock1)表达情况,探讨其抑制剂法舒地尔(fasudil)的干预作用。方法30只雄性SD大鼠,随机分为对照组、缺氧组、缺氧 1、51、5 mg/(kg.d)法舒地尔组。测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、平均颈动脉压(mCAP)、右心肥厚指数(RVHI);半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹法(Western blot)分别从基因和蛋白水平检测肺组织Rock1的表达。结果与对照组比较,缺氧组mPAP、RVHI、肺组织Rock1 mRNA及蛋白表达水平均明显升高(F=328.87,304.27,218.89,370.37 P均<0.01);与缺氧组比较,法舒地尔组上述指标均明显下降(F=52.86,48.10,104.94,174.0 P均<0.01),且呈剂量依赖关系;各组间mCAP差异无显著性(F=1.10 P>0.05)。结论Rock1在HPH大鼠肺组织中表达上调,其抑制剂法舒地尔能显著降低mPAP,减轻右心室肥厚,有望用于肺动脉高压的治疗。     

高体积分数氧致A549细胞肺表面活性物质蛋白-A表达的变化

目的探索高体积分数氧(高氧)致A549细胞肺表面活性物质蛋白(SP)-A表达的变化规律。方法将A549细胞分为高氧组和常氧组。高氧组细胞置于含950 mL·L-1氧气和50 mL·L-1二氧化碳的条件下培养,常氧组以空气替代氧气,于0 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h在倒置相差显微镜下观察细胞生长状况,提取细胞内总蛋白,采用硫代巴比妥酸比色法检测其丙二醛(MDA)水平,Western blot检测其SP-A表达水平。结果高氧48 h可导致A549细胞生长明显减慢,72 h后细胞生长停滞,可见较多漂浮死亡细胞,96 h后漂浮死亡细胞明显增多。高氧组各时间点A549细胞SP-A表达水平均高于常氧组,高氧24 h SP-A表达增多最显著,此后增多的幅度逐渐减小,高氧48 h后细胞内MDA水平显著高于常氧组,随时间延长,MDA水平进一步升高。结论高氧可导致A549细胞损伤,SP-A表达在细胞高氧损伤早期代偿性增加,晚期降低,推测SP-A表达降低可能与细胞损伤加重有关,增加SP-A的表达可能有助于减轻高氧引起的细胞损伤。