急性脊髓损伤后脑脊液中兴奋性氨基酸含量变化的临床观察

目的；探讨脑脊液中兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）含量性急性脊髓损伤的关系。方法；采用氨基酸自动分析仪检测２６例生脊髓损伤患者脑脊髓（ＣＳＦ）中天门冬氨基酸（Ａｓｐ）、谷氨酸（Ｇｌｕ）等ＥＡＡ含量的动态变化。结果；脊髓损伤后２４ｈ内ＣＳＦ中Ａｓｐ、Ｇｌｕ显著升高，其升高幅度与脊髓损伤的程度成正相关，即脊髓损伤越重；Ａｓｐ、Ｇｌｕ升高越显著，且预后就越差；结论；伤后ＣＳＦ中ＥＡＡ含量可作为衡量脊髓损伤程度和预     

Alteration of Excitatory Amino Acid in Experimental Spinal Cord Injury in Rats

Objective To detect the effect of excitatory ammo add (EAA) in the secondary damage following spinal cord injury (SCI). Methods Glutamate (Glu) and Aspartate (Asp) on the injury site (T8) were studied using a rat SCI model induced by Allen's weight drop method (10g×2. 5cm). The result suggested that Asp and Glu were significantly increased in 10 mm. Results Glu was significantly decreased from 2 h to 24 h,while Asp was a tittle reduced in 2 h,and slightly rose in 4 h as compared with Control Group. Though elevated in 8 h,it dropped again in 24h as compared with Control Group. Conclusion The result indicates that the rise of EAA following SCI could be the cause of the secondary spinal cord damage.     

急性脊髓损伤后脑脊液中兴奋性氨基酸含量在脊髓功能恢复中的临床意义

目的 探讨急性脊髓损伤后脑脊液中兴奋性氨基酸含量变化与脊髓功能恢复的关系及其对预后的影响。方法 采用氨基酸自动分析仪检测32例急性脊髓损伤患者脑脊液（CSF）中天门冬氨基酸（Asp）和谷氨酸（Glu）在损伤后不同时段的含量变化。结果 天门冬氨基酸（Asp）和谷氨酸（Glu）在损伤后16h达到高峰，24h后开始逐渐下降；兴奋性氨基酸在损伤后高峰越早，升高得越多，脊髓损伤越严重；CSF中兴奋性氨基酸含量升高越高、持续的时间越长，脊髓功能恢复越差。结论 CSF中兴奋性氨基酸含量是脊髓损伤的敏感指标，可以作为早期预测脊髓损伤程度和判断其预后的指标之一。     

Effects of Nerve Growth Factor on\= Excitatory Amino Acid Content in\= Spinal Cord Neuron after Spinal Cord Injury

ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎＷｅｅｖａｌｕａｔｅｄｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆＮＧＦｆｏｌｏｗｉｎｇｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｉｎｊｕｒｙ（ＳＣＩ）ｂｙｄｅｔｅｃｔｉｎｇｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｅｘｃｉｔａｔｏｒｙａｍｉｎｏａｃｉｄｓ（ＥＡＡ）,ａｎｄｔｏｅｘｐｌｏｒ...     

实验性大鼠颅脑损伤后兴奋性氨基酸及脑血流量的变化研究

目的观察流体冲击致大鼠脑损伤后不同时相点脑组织兴奋性氨基酸(excitatory amino acids,EAA)和局部血流量(regional cerebral blood flow,rCBF)的变化,及它们在脑损伤和继发性脑损伤中的作用.方法用流体冲击装置制作中度脑损伤,氨基酸微量分析系统检测谷氨酸(glutamate,Glu)和天门冬氨酸(aspate,Asp)含量,氢清除法检测大脑局部血流量.结果中度脑损伤后rCBF明显低于伤前和正常对照组;脑组织Glu、Asp的含量在伤后30min即可见明显增加,1h有所回落,2h又有所升高,4h至6h趋于稳定.结论结果显示脑损伤后脑血流量的下降可能与氨基酸释放有着一定的关系,氨基酸大量释放可能在脑损伤和继发性脑损伤中起着主要作用.     

MK-801在脊髓缺血再灌注损伤中的作用

目的 研究大鼠脊髓缺血40min和再灌注4h脊髓组织兴奋性氨基酸(EAA)和细胞内Ca^2 ([Ca^2 ]i)的含量变化，及应用地卓西平马来酸盐(MK-801)对上述指标的影响。方法 SD大鼠40只，随机分为假手术组、缺血40min组、再灌注4h组、MK-801治疗组(n=10)。测定各组脊髓组织中谷氨酸(Glu)和[Ca^2 ]i含量，同时观察MK-801对上述指标的影响．结果 缺血40min组Glu含量明显降低，再灌注4h组Glu含量降低更明显；[Ca^2 ]i的含量在缺血40min组时有所升高，再灌注4h组则明显升高，MK-801组能显著升高Glu含量和降低[Ca^2 ]i的含量．结论 EAA的兴奋性神经毒性在脊髓缺血再灌注中发挥着重要的作用，MK-801对该神经毒性有明显的抑制作用。     

Excitatory amino acid on secondary spinal cord injury: effect anmechanism

Ｅｘｃｉｔａｔｏｒｙａｍｉｎｏａｃｉｄｏｎｓｅｃｏｎｄａｒｙｓｐｉｎａｌｃｏｒｄｉｎｊｕｒｙ：ｅｆｆｅｃｔａｎｍｅｃｈａｎｉｓｍ￥（叶晓健）（李家顺）（王家林），（李明）ＹｅＸｉａｏｊｉａｎ，ＬｉＪｉａｓｈｕｎ，ＷａｎｇＪｉａｌｉｎＬｉＭｉｎｇ（Ｄｅ...     

实验性大鼠脑缺血再灌注对海马兴奋性氨基酸及氧自由基的影响

在大鼠脑缺血再灌注损伤实验模型上．观察、测定在脑缺血后对海马组织的兴奋性氨基酸及氧自由基的影响、结果显才缺血后GM1显著减少，诱发其细胞外谷氨酸和天门冬氨酸增高。表明脑缺血再灌注损伤与EAA的过度释放和氧自由基的产生密切相关，而GM1对大鼠脑缺血具有保护作用（P＜0.01）。     

髓鞘碱性蛋白与脊髓损伤预后的关系

目的 研究急性脊髓损伤后血清、脑脊液髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）变化与脊髓损伤程度、预后情况之间的关系。方法 ＥＬＩＳＡ法检测５１例不同程度脊髓损伤患者伤后２４ｈ内血清和脑脊液ＭＢＰ含量,结合预后程度进行分析。结果 脊髓完全性损伤患者伤后２４ｈ内即出现脑脊液ＭＢＰ显著增高,较重的脊髓不完全性损伤（ＡＳＩＡ分级Ｂ或Ｃ级）伤后２４ｈ内也出现脑脊液ＭＢＰ增高,但各时间点增高幅度完全性损伤组小;较轻的脊髓不完全性损伤（ＡＳＩＡ分级Ｄ级）和脊髓震荡不出现脑脊液ＭＢＰ增高;各组血清检测结果与脑脊液结果一致变化。结论 受伤后２４ｈ内血清或脑脊液ＭＢＰ检测对于判断脊髓损伤程度以及估计预后具有积极的意义。     

腺苷受体激动剂对大鼠脊髓损伤后细胞外液兴奋性氨基酸的影响

目的：观察腺苷对脊髓损伤后细胞外液兴奋性氨基酸（ＥＡＡ）的影响,研究腺苷脊髓损伤后的神经保护机制。方法：腹侧压迫损伤法造成大鼠脊髓Ｔ１３中度损伤,用微透析法收集伤前１５ｍｉｎ和伤后即刻,１５,３０,４５ｍｉｎ脊髓Ｔ１３的细胞外液。治疗组伤后立即灌注非特异笥腺苷受体激动剂２－氯腺苷（２－ＣＡＤＯ,０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）。采用高效液相色谱仪荧光检测法检测透析液中谷氨酸和天门冬氨酸含量。     

递质和非递质性氨基酸在脊髓缺血性继发损伤中的作用

用６３００黄金系列氨基酸自动分析仪对清醒兔脊髓缺血２０ｍｉｎ，再灌不同时间后测定Ｌ４脊髓组织中的兴奋氨基酸（谷氨酸，门冬氨酸），抑制性氨基酸（甘氨酸，ｒ－氨基丁酸，牛黄酸，丙氨酸）和非递质性氨基酸（谷氨酰胺，苏氨酸，丝氨酸）的变化。缺血２０ｍｉｎ时各氨基酸无变化，谷氨酸，门冬氨酸分别在再灌３６ｈ和４８ｈ显著下降，甘氨酸在再灌２ｈ和４８ｈ，丙氨酸在２ｈ和２４ｈ，ｒ－氨基丁酸在灌３６ｈ下降显著，牛黄酸     

脊神经节损伤所介导的脊髓背角兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸变化的实验研究

目的研究脊神经节 (DRG)炎性损伤时 ,脊髓背角兴奋性氨基酸 (EAAs)、抑制性氨基酸 (I AAs)含量和脊髓背角谷氨酸 (Glu)、天门冬氨酸 (Asp)免疫组织化学的变化 ,以及与实验动物神经行为异常变化之间的关系。方法健康家兔 5 4只 ,随机分为手术对照组 ( n =2 4) ;炎症损伤组 ( n =2 4)和正常对照组 (n =6)。采用组织氨基酸的含量分析仪测定脊髓背角Glu ,Asp ,GABA ,Tau ,Thr和Ser含量变化。采用免疫组化法观察脊髓背角Glu和Asp分布特点及变化。结果 1.术后 2～ 4周 ,伤侧的Glu ,Asp ,GABA ,Tau ,Ser含量较术前 ,非伤侧显著增高 (P <0 .0 5 )。 2 .术后 2～ 4周 ,其伤侧N 甲基 D 天 (门 )冬氨酸受体 (NMDAR1)免疫阳性纤维在脊髓背角浅层 (Ⅰ ,Ⅱ )和固有层 (Ⅲ ,Ⅳ )的分布密度和染色强度 ,较术前和非伤侧显著降低 (P <0 .0 5 )。结论DRG炎症损伤所介导脊髓背角EAAs释放增加 ,在痛觉过敏的形成和维持中具有重要作用。而IAAs的增加则与机体抗伤害性保护反应相关。DRG炎症损伤初期 ,脊髓背角EAAs/IAAs动态平衡的破坏是伤害性神经细胞兴奋性损伤和伤侧肢体痛觉过敏的主要原因。     

Spinal cord protection: effect of N-methyl-D-aspartate receptor antagonist MK-801 for spinal cord ischemia in a rabbit model

Excitatory amino acids (glutamate, aspartate) play an important role in the ischemic cascade leading to cell death. The N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor is an excitatory amino acid (EAA) receptor, and NMDA receptor antagonists have been shown to exert a neuroprotective effect in central nervous system ischemia. The purpose of this study was to investigate the effects of noncompetitive NMDA receptor antagonists MK-801 and to observe the changes in EAAs after spinal cord ischemia in a rabbit model. Spinal cord ischemia was induced by clamping the infrarenal abdominal aorta for 24 min. Group 1 (n = 6) received no pharmacologic infusion. Group 2 (n = 5) was administered an intra-aortic hypothermic MK-801 (1 mg/kg) solution and group 3 (n = 6) was administered an intra-aortic normothermic MK-801 (2 mg/kg) solution immediately after clamping of the abdominal aorta. We evaluated the neurological function at 12, 24 and 48 hrs after spinal cord ischemia. A histopathologic study was carried out 72 hrs after spinal cord ischemia, and the results for groups 1 and 3 were compared. The glutamate and aspartate levels in the blood plasma were compared at pre-ischemia and at 12, 24, and 48 hrs among the groups. The perfusion of a normothermic MK-801 (2 mg/kg) solution significantly reduced the neurological dysfunction and the neuronal damage. There was a significant increase in aspartate at 24 and 48 hrs in group 1, but no such increase in glutamate occurred in groups 1 and 3. In conclusion, these data provide the evidence that therapeutic intervention with MK-801 (2 mg/kg) in the early period of spinal cord ischemia is beneficial in reducing neurological dysfunction and neuronal damage.     

复方氨基酸对低体重儿血清和脑脊液中Glu、Asp水平的影响

目的　研究复方氨基酸对低出生体重儿中枢神经系统的可能影响。方法　采用丹酰氯 -聚酰胺薄层层析法测定 2 0例全能营养液 (TNA)治疗低体重儿和 2 0例非TNA治疗 (对照组 )低体重儿血清和脑脊液中谷氨酸(Glu)、天冬氨酸 (Asp)水平。 结果　治疗后TNA组血清中Glu、Asp皆显著提高 (P <0 .0 1) ,而脑脊液中Glu、Asp无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;对照组中两者均无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;TNA组脑脊液中Glu、Asp之间呈正相关 (r =0 .79,P <0 .0 0 1) ;血清中Glu、Asp分别与脑脊液中Glu、Asp均无相关性 (分别是r =0 .32 8,P >0 .0 5 ;r =0 .334,P>0 .0 5 )。结论　静脉使用复方氨基酸于低体重儿对其脑脊液中Glu、Asp水平无影响     

丙泊酚对大鼠脊髓星形胶质细胞释放兴奋性氨基酸的影响

目的研究被肿瘤坏死因子（TNF-α）刺激的大鼠脊髓星形胶质细胞（AST）在丙泊酚作用下兴奋性氨基酸（EAA）的释放情况。方法体外纯化培养大鼠脊髓星形胶质细胞，分为TNF-α终浓度为1ug／L及丙泊酚终浓度为25umol／L（TP组），TNF-α终浓度为1ug／L（T组），乳剂对照组（Intralipid，0．2ml／L、L组），空白对照组（C组）。用高效液相色谱仪测定各组培养细胞在0、30、60、120min时谷氨酸（Glu），天门冬氨酸（Asp）的释放量。结果与C组相比，L组的Glu、Asp释放量无明显差异（P〉0．05）；T、TP组Glu、Asp释放量随着时间的延长而增加；与T组相比，60、120man时，TP组Glu、Asp释放量明显减少（P〈0．05）。结论TNF-α刺激AST释放EAA，而丙泊酚对此有抑制作用。     

载脂蛋白E基因多态性与星形胶质细胞损伤后兴奋性氨基酸变化的关系

目的探讨载脂蛋白E(apolipoprotein E,蛋白:ApoE,基因:APOE)基因多态性与星形胶质细胞损伤后兴奋性氨基酸(excitatory amino acids,EAAs)变化的关系。方法提取APOE敲除鼠新生2 d内乳鼠大脑皮层星形胶质细胞,并以GFAP-FITC免疫荧光法对所获细胞进行鉴定。脂质体介导重组体pEGFP-N1-APOEε2、pEGFP-N1-APOEε3、pEGFP-N1-APOEε4分别转染入星形胶质细胞中,RT-PCR鉴定该基因在转染后的细胞中的表达,荧光显微镜观察该基因的亚细胞定位及转染效率。制备3种基因型星形胶质细胞划伤模型,采用氨基酸分析仪分别测其中氨基酸的含量,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果星形胶质细胞划伤后谷氨酸(Glu)和天冬氨酸(Asp)的释放较早,在划伤后30 min即达到高峰,在伤后30、60 min APOEε4型显著高于APOEε2、APOEε3型(P<0.05)。细胞早期凋亡率在24 h达到高峰,在伤后12、24 hAPOEε4型显著高于APOEε2、APOEε3型(P<0.05)。结论 APOE以亚型特异性的方式影响星形胶质细胞创伤后EAAs的释放,APOEε4携带体可能通过EAAs毒性作用导致创伤性脑损伤急性期伤情加重及不良预后。     

氯胺酮对缺血再灌注脑组织兴奋性氨基酸递质及钙含量的影响

用“四动脉闭塞法”制成兔脑缺血再灌注损伤模型，测定其组织兴奋性氨基酸递质、脑组织钙及线性粒体钙含量变化，同时观察兴奋性氨基酸受体拮抗剂氯胺酮对上述指标的影响。结果提示：缺血２０ｍｉｎ，脑组织兴奋性氨基酸递质谷氨酸和天门氨酸明显降低，再灌注后其降低更加明显。     

深低温停循环脊髓损伤的微透析研究

目的运用微透析技术观察猪深低温停循环过程中脊髓神经细胞间液中的各种物质变化,探讨脊髓损伤的分子机制。方法6只小型香猪,于腰2段脊髓中植入微透析针。建立体外循环,并行循环降温30min至直肠温度为20℃,停循环60min,复温和并行循环120min。在固定时间点采集微透析样本,检测氨基酸和能量代谢物质含量,观察变化趋势。结果停循环期间丙酮酸明显降低,乳酸／丙酮酸比值达到高峰。复温后葡萄糖、乳酸、丙酮酸和甘油显著升高。降温时谷氨酸和γ-氨基丁酸明显升高。天门冬氨酸、牛磺酸和甘氨酸在复温时升高明显。结论停循环过程中,神经元细胞的能量代谢被明显抑制。复温中能量代谢率有所恢复,细胞处于高糖、高乳酸的环境中。降温时谷氨酸和γ-氨基丁酸升高,复温中天门冬氨酸、甘氨酸和牛磺酸均显著升高,可能与脊髓损伤有关。     

鞘内注射加巴喷丁复合吗啡对切口痛大鼠脊髓兴奋性氨基酸类神经递质的影响

目的观察鞘内注射（intrathecal,IT）加巴喷丁和／或吗啡对切口痛大鼠脊髓兴奋性氨基酸类神经递质的影响。方法选择鞘内置管成功的雄性SD大鼠40只,随机分为5组,每组8只,分别为假手术组,对照组,加巴喷丁50旭组,吗啡2．5蟮组,加巴喷丁50pg加吗啡2．5熠组。按Yaksh法鞘内置管,按Brennan法制作大鼠足底切口疼痛模型,用机械缩爪反射阈值（MWT）和热缩爪潜伏期（TWL）来确定疼痛行为学变化;应用高效液相色谱法（HPLC）测定脊髓兴奋性氨基酸类神经递质如谷氨酸（Glu）、天门冬氨酸（Asp）含量的变化。结果与假手术组比较,对照组大鼠在术后2h时MWT明显降低,TWL明显缩短（P〈0．05）,脊髓Glu、Asp含量明显升高（P〈0．05）;与对照组比较,术前IT加巴喷丁50旭加吗啡2．5μg在术后2h的MWT明显增加,TwL明显延长（P〈0．05）,脊髓Glu、Asp含量明显减少（P〈0．05）。结论在大鼠切口痛模型中,鞘内注射加巴喷丁能增强鞘内吗啡的抗伤害作用,其机理可能与降低脊髓兴奋性氨基酸类神经递质含量有关。     

五菟颗粒剂对大鼠海马细胞外液兴奋性氨基酸水平的影响

应用脑内微透析技术观察五菟颗粒剂在大鼠脑缺血时海马细胞外液氨基酸的变化。结果显示：该药对缺血前脑细胞外液氨基酸水平无明显影响（Ｐ＞０．０５）；缺血时，试验组Ｇｌｕ和Ａｓｐ比对照组明显减低（Ｐ＜０．０１）。提示当脑缺血时，五菟颗粒剂能减少脑细胞兴奋性氨基酸的释放，对脑组织起保护作用。