补肾生精丸对腺嘌呤所致生精细胞损伤模型大鼠的干预作用

目的研究补肾生精丸对腺嘌呤所致生精细胞损伤模型大鼠的促生精作用.方法以腺嘌呤灌胃SD大鼠,诱发生精细胞损伤,制作肾阳虚大鼠模型,观察补肾生精丸给药前后实验动物精子活率、精子计数、精子指数,睾丸、附睾的脏器系数及睾丸组织形态学改变.结果补肾生精丸可提高生精细胞损伤大鼠精子质量;增加附睾的脏器系数;使受损的睾丸组织逐渐恢复.结论补肾生精丸对腺嘌呤诱发的大鼠生精细胞损伤具有保护作用.     

锰对大鼠生精功能的影响及机理研究

目的研究锰对大鼠生精功能的影响,探讨锰对大鼠生精功能抑制作用的机理。方法雄性SD大鼠,体重(120±10)g,随机分为6组:空白对照组,低剂量(15mg/kg MnCl2)和高剂量(30mg/kg MnCl2)组,8只/组。空白对照组给予等容NS,给药途径均为腹腔注射,5d/周,1次/d。空白对照组和MnCl2组分别于第4周末和第6周末处死,观察睾丸形态学改变并检测精子质量相关指标。结果与空白对照组比较,各组生精小管呈不同程度变性,生精细胞和精子数量减少,缺如。高剂量4周组睾丸脏器系数和各染锰组精子数量、活动度显著降低,畸形率显著升高(P<0.01)。染锰剂量相同,6周组与4周组比较,精子数量和精子活动度显著降低(P<0.01)。染锰时间相同,高剂量组与低剂量组比较,精子数量和精子活动度显著降低,畸形率显著升高(P<0.01)。结论染锰15mg/kg 4周即可对雄性大鼠生精功能产生抑制作用。     

砷染毒大鼠生精细胞Bcl-2表达的变化

目的观察不同剂量的三氧化二砷（As2O3）对成年大鼠生精细胞Bcl-2表达的影响。方法40只健康雄性SD大鼠随机分成4组，分别为0．375mg/kg、0．75mg/kg、1．5mg/kg 3个染毒组和对照组，灌胃法连续给药16w后对各组大鼠计算睾丸脏器系数、精子头计数，并计算每日精子生成量（DSP）。采用免疫组化法检测大鼠生精细胞Bcl-2表达的情况。结果①中剂量组（0．75mg/kg）和高剂量组（1．5mg/kg）睾丸精子头计数和DSP均低于对照组（P〈0．05）；②与对照组相比，中、高剂量组大鼠生精细胞Bcl-2阳性产物表达明显降低（P〈0．01）；③生精细胞Bcl-2阳性率与每日精子生成量呈正相关（r=0．589,P〈0．01）。结论一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞Bcl-2的表达而导致精子生成量的减少，产生雄性生殖毒性。     

益智仁提取物对小鼠生精能力的影响实验研究

目的 探讨益智仁提取物对环磷酰胺致生精障碍小鼠的治疗作用.方法 水提法获得益智仁提取物.50只Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组、益智仁提取物低剂量组、中剂量组和高剂量组(0.2g/kg、0.4g/kg、0.8g/kg)共5组.除对照组外,其余各组每天注射环磷酰胺75 mg/kg,连续5d,制备生精障碍小鼠模型.末次给药后,益智仁提取物低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予相应剂量灌胃,对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,每天1次,连续30 d.末次灌胃后24h,取小鼠睾丸和附睾组织.检测各组小鼠精子密度、活率及精子畸形率,HE染色观察睾丸组织形态.结果 与模型组相比,益智仁提取物各剂量组均可提高精子密度、精子活率,降低精子畸形率,组织学观察,益智仁提取物各剂量组小鼠睾丸组织病理性损害均得到改善.结论 益智仁提取物对环磷酰胺所致小鼠生精障碍具有明显的治疗作用.     

三氧化二砷对大鼠生精细胞端粒酶逆转录酶活性的影响

目的 观察不同剂量三氧化二砷(As2O3)对成年大鼠生精细胞端粒酶活性的影响.方法 将40只健康雄性SD大鼠随机分成4组,分别为0.375、0.75、1.5mg/kg 3个染毒组和对照组,采取灌胃法连续给药16周后对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数,并计算每日精子生成量(DSP).采用免疫组化法检测大鼠生精细胞端粒酶逆转录酶(TERT)活性.结果 (1)中剂量组(0.75mg/kg)和高剂量组(1.5mg/kg)睾丸精子头计数和DSP均明显低于对照组(P<0.05或<0.01);(2)与对照组相比,中、高剂量组大鼠生精细胞TERT阳性表达率显著降低(P<0.01);(3)生精细胞TERT活性与每日精子生成量成正相关(r=0.521,P<0.01).结论 一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞TERT的活性而导致精子生成量减少,产生生殖毒性.     

补肾生精丸对生精细胞损伤模型大鼠生精细胞凋亡与Bcl-2、Bax、Fas、FasL表达的影响

目的 观察补肾生精丸对腺嘌呤所致生精细胞损伤模型大鼠生精细胞凋亡的影响及凋亡相关基因的调控情况.方法 SD大鼠40只随机分为4组:正常组、模型组、中药治疗组(补肾生精丸组)、中药对照组(五子衍宗丸组).以腺嘌呤灌胃诱发生精细胞损伤肾阳虚模型,用TUNEL法检测各组大鼠睾丸组织生精细胞的凋亡情况;用免疫组化的方法检测Bcl-2、Bax、Fas及FasL的表达.结果 补肾生精丸能够抑制大鼠睾丸曲细精管生精细胞的凋亡,上调抑制凋亡基因Bcl-2的表达,下调促凋亡基因Bax、Fas、FasL的表达,与模型组比较有统计学意义(P<0.01).结论 补肾生精丸对腺嘌呤致生精细胞损伤模型大鼠生精细胞的凋亡有一定的抑制作用,其作用可能与该药调控Bcl-2、Bax、Fas、FasL的表达有关.     

As_2O_3对大鼠生精细胞凋亡及其Fas、FasL调控途径的研究

目的 观察不同剂量的染砷(As2O3)大鼠生精细胞凋亡及其Fas、FasL表达的变化,探讨砷的生殖毒性机制.方法 40只健康雄性SD大鼠随机分成4组,分别为0.375、0.75、1.5 mg/kg3个染毒组和对照组,灌胃法连续给药16wk后,采用TUNEL法检测大鼠生精细胞凋亡,免疫组化法检测大鼠生精细胞Fas、FasL的表达.结果 ①与对照组相比,中剂量组(0.75 mg/kg)和高剂量组(1.5 mg/kg)生精细胞凋亡指数(AD显著升高(P<0.01),生精细胞Fas、FasL表达明显升高(P<0.01);②每日精子生成量与生精细胞凋亡呈负相关(r=-0.563,P<0.01);③生精细胞凋亡与Fas、FasL表达呈正相关(分别为r=0.767,r=0.771,P<0.01).结论 一定剂量的As2O3可通过上调生精细胞Fas、FasL的表达,诱导生精细胞凋亡增加而导致精子生成量的减少,产生雄性生殖毒性.     

用蛋白质组学技术探讨补肾生精法对老龄大鼠睾丸生精功能影响的机制

目的：应用蛋白质组学技术研究补肾生精法对老龄大鼠睾丸生精功能影响的机制。方法：20只22月龄老龄雄性SD大鼠随机分为2组，每组10只，分别为老龄组（SC）和补’肾生精组（KT）。KT组灌胃给药补肾生精颗粒，连续用药60d。取附睾尾精子应用精子运动CASA分析技术，研究补肾生精法对衰老大鼠精子运动能力的影响。应用流式细胞仪检测技术，观察补肾生精颗粒对老龄大鼠睾丸生殖细胞凋亡率的影响。取大鼠右侧睾丸，应用双向凝胶电泳分析老龄组和补肾生精组大鼠睾丸表达差异蛋白。结果：与老龄组相比，补肾生精组大鼠精子密度明显增加（P〈0．05）；活动率和直线活动率显著上升（P〈0．001）；补肾生精组生殖细胞凋亡率明显下降（P〈0．05）。与老龄组相比，补肾生精组大鼠睾丸中有7种蛋白表达发生了显著变化，其中4种蛋白表达上调，3种下调。对7种差异表达蛋白点胶内酶切后进行质谱分析，其中5种蛋白分别鉴定为磷脂酰乙醇胺结合蛋白（PEBP），热休克蛋白8（HSP7C），磷酸丙糖异构酶（Triose-phosphate isomerase，TPIS），3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH），谷胱苷肽转移酶1（GSTM1-1）。结论：补肾生精法对老龄大鼠睾丸功能具有提高精子运动能力及减少其生殖细胞凋亡的作用。运用蛋白质组学技术，研究补肾生精法对衰老过程睾丸蛋白表达的影响，有助于在蛋白质组水平阐释中医肾主生殖，延缓睾丸衰老，改善睾丸生精功能的机制。     

邻苯二甲酸二丁酯对大鼠生精细胞凋亡的影响

目的：观察不同剂量的邻苯二甲酸二丁酯（DBP）对成年大鼠生精细胞凋亡的影响。方法：32只健康雄性sD大鼠随机分成4组,分别为每天250mg／kg、500mg／kg、1000mg／kg3个染毒组和对照组,灌胃法连续给药4周后对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数,并计算每日精子生成量（DSP）。采用TUNEL原位细胞杂交方法检测大鼠生精细胞凋亡情况。结果：①中剂量组（500mg／kg）和高剂量组（1000mg／kg）睾丸精子头计数和DSP均低于对照组（P〈0．05）;②与对照组相比,中剂量组和高剂量组生精细胞凋亡指数（AI）均显著升高（P〈0．01）;③生精细胞凋亡指数与每日精子生成量呈负相关（r=-0．542,P〈0．01）。结论：一定剂量的DBP可通过促进生精细胞凋亡而导致精子生成量的减少,产生生殖毒性。     

生精丸治疗男性不育60例临床研究

目的观察生精丸对男性不育的治疗作用.方法选择120例男性不育患者,随机分为治疗组和对照组.每组60例,分别给予生精丸和五子衍宗丸治疗.治疗前后以WLJY-9000伟力彩色精子质检系统进行精液参数分析,并检测血液睾酮(T)水平,同时观察病人服用生精丸期间有无明显不良反应.结果治疗组精子密度、活率、活力以及运动参数和睾酮水平等指标均明显高于对照组(P＜0.05),痊愈率、显效率及总有效率亦高于对照组(P＜0.05),且服药期间无明显的不良反应.结论生精丸有从整体上纠正精液异常的功效,能使病人精子数量、质量、睾酮水平得到提高.     

Anti-spermatogenic Effects of Ethanol Extract of Mucuna Urens

Objective To investigate the age-long claim by the locales that the food thickener, M. urens seed, has antispermatogenic, hence, antifertility effects in man. Methods Eight-week old male Albino rats were used as the mammalian model for this study. They were assigned to four groups of 6 rats each and treatment with the ethanol extract was for a period of 14 d. The treatment regimes were 70 mg/kg, 140 mg/kg, 210 mg/kg and 0 mg/kg BW in groups A, B, C and D, respectively. Extracts were prepared by Soxhlet extraction using 80% ethanol as the extracting solvent. The stock solution was prepared by dissolving 1 g of the paste extract in 10 ml corn oil （vehicle） to make up 100 mg/ml concentration. At the end of the treatment, sperm from the distal caudal epididymis was collected and analyzed for sperm count, sperm motility and sperm morphology. Results Significant reduction was observed in sperm count and sperm motility （P〈0.05）. The mean sperm count for group A was 6.27±0.02×10^6, for group B was 6.16±0.02×10^6 and group C had 6.0±0.0×10^6 sperm cells The control （group D） had a mean sperm count of 6.50±0.09×10^6 which was higher than that of any treated group. Results of the sperm motility test gave the following mean rates for motile sperm cells after treatment： group A, 57.6±% 2.1; group B, 50.0±4.0; group C, 45.0±4.0. The control had the highest mean motility rate of 72.3±2.1. The observed sperm abnormalities included unusual head with large acrosome, looped tailpiece, mid piece with distal droplet, pin head, pyriform head and long hook.Conclusion The anti-spermatogenic effects of the extract on the sperm in the Albino rat may lead to reduction of fertility.     

壬基酚对性成熟期F1子代雄性SD大鼠生殖发育的影响

目的　研究壬基酚(NP)对性成熟期F1 子代雄性SD大鼠生殖发育的影响。方法　设NP5 0 mg/ kg,10 0 m g/ kg,2 0 0 m g/ kg三个剂量组和一个空白对照组,对母鼠从妊娠第7d至断乳期灌胃染毒,产后5 5 d处死雄性子代,检测血清睾酮,取附睾作精子计数和活度测定,取睾丸作病理组织学观察和细胞增殖核抗原(PCNA)、雌激素受体(ER)及芳香化酶(Arom)的免疫组化分析。结果　与对照组相比,2 0 0 m g/ kg NP组血清睾酮浓度、精子计数、精子活度显著降低(P<0 .0 5 ) ;睾丸组织病理学检查显示,发育异常的生精小管数增多,支持细胞数量减少,生精功能受损;2 0 0 mg/ kg NP组PCNA的表达显著低于对照组(P<0 .0 5 ) ;10 0 mg/ kg和2 0 0 mg/ kg NP组Arom的表达显著降低(P<0 .0 5 ) ;各染毒组ER的表达与对照组相比无显著性差异。结论　2 0 0 mg/ kg NP能明显损伤性成熟期F1 子代雄性SD大鼠的生殖发育功能。     

Spermatoprotective activity of the leaf extract of Psidium guajava Linn

BACKGROUND: The leaves of Psidium guajava Linn. (guava) contain several natural antioxidants. We therefore designed the present study to evaluate the effect of ethanol extract of guava leaves on gossypol-associated sperm toxicity in Wistar rats. METHODS: Animal groups 1, 2, and 3 (n=6 each) were treated orally with crude cottonseed oil to provide 14 mg/kg/d of free gossypol for 53 d. Besides, groups 1 and 2 rats were supplemented orally with 250 mg/kg/d and 500 mg/kg/d respectively of guava leaf extract (GLE) for the same period. Group 4 animals (control, n=6) received normal saline. RESULTS: No significant difference (P>0.05) occurred in the sperm count of group 1 rats compared to control. In animal group 2, significant increase (P<0.05) in sperm count occurred, as opposed to group 3 animals, where this parameter decreased significantly (P<0.05). Besides, mean values of 78 %, 82 %, 30 %, and 65 % respectively were obtained for sperm motility in animal groups 1, 2, 3, and 4. CONCLUSION: Our findings suggest that ethanol extract of guava leaves possesses beneficial effect on gossypol-associated sperm toxicity, and may therefore enhance male fertility, possibly owing to its rich constituents of natural antioxidants.     

维生素C对邻苯二甲酸二丁酯雄性大鼠生殖毒性的保护作用

目的 观察邻苯二甲酸二丁酯(di-butylphthalate，DBP)所致雄性生殖毒性效应，并探讨维生素C(vitamin C，Vit C)对DBP所致SD雄性大鼠生殖功能受损的干预调节作用。 方法 将60只SD雄性大鼠随机分组，分别为正常对照组，DBP低、中、高剂量组(DBP 100、500、1 000 mg/kg体重)，VitC对照组(30 mg/kg体重)与VitC与DBP高剂量联合干预组。灌胃干预21 d，检测大鼠脏器重量及血液生化各项指标，大鼠精子活力、浓度、畸形率，以及检测血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平。 结果 与正常对照组相比，DBP高剂量组大鼠睾丸减轻，睾丸脏体比下降，部分血生化指标异常，精子活力下降、畸形率升高，血清T、LH、FSH水平显著下降，差异有统计学意义(均P＜0.05)；与DBP高剂量组相比，VitC干预组大鼠睾丸组织损伤有不同程度的恢复，精子活力、畸形率，以及血清T、LH、FSH水平差异有统计学意义(均P＜0.01)。 结论 DBP可致大鼠睾丸萎缩，精子活力下降，精子畸形率增高；DBP可致血清T、LH、FSH水平降低。VitC可提高血清LDH水平和T、LH、FSH水平，改善DBP所致大鼠精子活力下降，降低精子畸形率，为进一步开展DBP生殖毒性的预防干预提供理论依据。      

小剂量玉米赤霉烯酮损害雄性小鼠生殖能力的研究

目的 评估小剂量(低于无明显作用水平的浓度)玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)暴露后小鼠精子发生及精液质量的变化趋势,探讨小剂量ZEA暴露对雄性小鼠生殖能力的影响.方法 90只出生后21 d的雄性CD-1小鼠按随机数字表法分成3组,分别暴露于0、20、40 μg/(kg·d)ZEA,处理14、28、42 d后,采用计算机辅助精液质量分析观察精子活力参数,吉姆萨染色观测精子畸形率,测量睾丸体积及质量,免疫组化染色检测生精细胞计数.结果 处理42 d后,20、40 μg,/(kg·d)组精子活动率低于0 μg/(kg·d)组[(82.80±4.34)％、(74.90±6.70)％ vs (93.20±1.66)％,P=0.004、0.002];20、40 μg/(kg·d)组小鼠畸形精子率高于0μg/(kg·d)组[(29.40±1.09)％、(40.80-±6.17)％ vs (19.40±0.45)％,P ＜0.001,P=0.002];20、40μg/(kg·d)组小鼠的单位面积生精细胞计数低于0μg/(kg·d)组(2 422.7±206.1、1 855.8±105.3 vs3 189.8 ±306.0,P=0.013、0.001).结论 小剂量ZEA的暴露能够降低雄性小鼠的精子发生及精液质量,损害其生殖能力.     

甲基丙烯酸甲酯对雄鼠性腺功能的影响

通过甲基丙烯酸甲酯染毒的雄鼠精子畸形试验、精子计数、活动精子百分率的检查以及睾丸、附睾重量和光、电镜病理学检查,研究甲基丙烯酸甲酯对雄性大鼠性腺功能的影响。实验结果表明,1.68g/kg和2.80g/kg组的精子数目明显减少,精子畸形率明显增高;2.80g/kg组的活动精子百分率明显降低,而且染毒雄鼠的体重增重减少,睾丸、附睾重量下降,与阴性对照组相比,均有显著性差异。说明甲基丙烯酸甲酯对雄性大鼠性腺功能有损害作用。     

醋酸棉酚对雄性小鼠生育能力影响的实验研究

目的 探索醋酸棉酚对雄鼠生殖系统的影响,为生态灭鼠药的研制提供实验依据.方法 将雄性小鼠随机分成对照组和实验组,每组10只,通过灌胃的方法 ,对照组灌生理盐水,实验组按50、120、200 mg/kg体质量浓度灌胃,分别于灌胃10 d、20 d后解剖,取睾丸、附睾,进行精子细胞观察、精子计数、精子活率和精子形态观察,如指标有变化,进行交配试验检测醋酸棉酚对小鼠生育能力的影响.结果 灌胃10 d各指标组间差异均无显著性;20 d后,200 mg/kg组与对照组精子数目和睾丸系数变化差异有显著性(P＜0.05),睾丸切片可见120 mg/kg和200 mg/kg组生精小管的初级精母细胞与精原细胞或基膜之间有较大的空隙,部分生精小管腔内的精子尾部减少.合笼后产子数量和怀孕率对照组与120 mg/kg组和200 mg/kg组差异有显著性(P＜0.05),120 mg/kg组和200 mg/kg组间差异无显著性(P＞0.05).结论 醋酸棉酚对雄鼠生殖系统的影响可能与其浓度和药物作用的时间有关.50 mg/kg组在20 d内对小白鼠生育能力没有影响,120 mg/kg和200 mg/kg组在20 d内对小白鼠生育能力有影响.     

大鼠慢性砷中毒生精细胞XRCC_1蛋白表达与凋亡

目的:研究大鼠不同剂量慢性砷中毒生精细胞XRCC1蛋白表达水平和凋亡变化及其相互作用。方法:将40只健康雄性SD大鼠随机分为对照、低剂量、中剂量和高剂量4组,每组10只。以灌胃方式分别给予双蒸水、0.375mg/kgAs2O3水溶液、0.75mg/kgAs2O3水溶液、1.5mg/kgAs2O3水溶液,每日1次,连续给药16周。取睾丸组织免疫组化法检测其睾丸XRCC1蛋白表达、TUNEL检测细胞凋亡。结果:大鼠生精细胞XRCC1蛋白表达低剂量组与对照组无显著性差异(P>0.05);中、高剂量组XRCC1蛋白的表达较对照组降低(均P<0.05),XRCC1蛋白表达量随着染毒剂量的增高而降低(r=-0.637,P<0.001)。生精细胞凋亡指数低剂量组与对照组无显著性差异(P>0.05);中、高剂量组均高于对照组(P<0.05),且随着染毒剂量的增高而升高(r=0.893,P<0.001)。XRCC1蛋白表达与生精细胞凋亡指数呈负相关关系(r=-0.738,P<0.001)。结论:慢性接触0.75mg/kg和1.5mg/kgAs2O3可诱导SD大鼠生精细胞凋亡增加,XRCC1蛋白的表达降低可能是导致大鼠生精细胞凋亡增加原因之一。