血管紧张素Ⅱ致心肌细胞肥大作用研究进展

血管紧张素（Ang）Ⅱ是肾索-Ang系统（RASS）中的一种主要的多功能活性肽,同时也是一种重要的心肌肥大刺激因子,具有生长因子样作用,通过与特异的AngⅡ受体结合,可直接导致心肌肥厚,对心肌的结构、功能产生重大的影响。本文就AngⅡ致心肌细胞肥大作用的最新研究进展作一综述。     

shRNA敲降CaMKⅡβ对抑郁症小鼠行为及神经递质水平的影响

目的:探讨shRNA敲降CaMKⅡβ对抑郁症小鼠行为及神经递质水平的影响。方法:45只小鼠随机分为对照组、模型组和实验组。实验组小鼠经皮层注射CaMKⅡβshRNA腺相关病毒1×109CFU/只,对照组和模型组经皮层注射对照shRNA腺相关病毒1×109CFU/只。感染4周后模型组和实验组采用慢性不可预见性应激制备抑郁症模型,然后进行悬尾、强迫游泳、糖水消耗和蔽箱实验测试;采用酶联免疫反应(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定3组小鼠前额叶皮层多巴胺(dopamine,DA)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)和去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)水平。结果:与对照组和模型组比较,实验组小鼠采用Ca MKⅡβshRNA明显降低了CaMKⅡβ蛋白的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。3组小鼠水平运动和垂直运动次数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,模型组和实验组小鼠悬尾实验和强迫游泳实验持续不动时间明显增加,糖水消耗量显著减少,差异有统计学意义(P<0.0...     

血管紧张素Ⅱ对心肌细胞活力的影响

目的：旨在观察血管紧张素Ⅱ（ＡＮＧⅡ）对心肌细胞活力的影响。方法：本研究利用培养的乳鼠心肌细胞，根据活细胞线粒体在能量代谢过程中可作用于ＭＴＴ产生蓝紫色结晶产物ｆｏｒｍａｚａｎ这一原理，应用ＭＴＴ法测定ＡＮＧⅡ对培养心肌细活力的影响。结果：发现ＡＮＧⅡ在１２ｈ之内使ｆｏｒｍａｚａｎ产物的ＯＤ值逐渐上升，１２ｈ达到高峰，此后开始下降，至２４ｈ已低于正常水平，它们的ＯＤ值之间均有显著的统计学差异（Ｐ〈０．０５或０．０１）。结论：该结果提示ＡＮＧⅡ在早期具有提高心肌细胞活力的效应。这一发现对了解ＡＮＧⅡ在心功能不全代偿和心衰发生中的作用地位具有重要意义。     

尾加压素Ⅱ对新生大鼠心肌细胞肥大的影响

目的:观察尾加压素Ⅱ(UⅡ)对心肌细胞(MC)肥大的影响及其与钙离子的关系,为探讨高血压左室肥厚发生机制提供理论依据.方法:以培养的SD乳鼠心肌细胞为实验模型,通过测定MC表面积、蛋白含量和蛋白合成速率,以及免疫荧光观察MC内肌原纤维的变化趋势来探讨UⅡ对MC肥大的影响.结果:①随着UⅡ浓度的增加,MC表面积明显增加,呈剂量依赖性,其中10-8和10-7mol/LUⅡ组MC表面积分别为(2046.3±268.4)和(3662.2±259.2)μm2,均明显高于空白对照组的(936.2±99.8)μm2,差异有非常显著意义(P<0.01).②随着UⅡ浓度的增加,MC的蛋白含量和蛋白合成速率呈递增趋势,其中10-8和10-7mol/LUⅡ组MC蛋白含量分别为(1.60±0.37)和(1.89±0.25)ng/cell,明显高于对照组(0.83±0.16)ng/cell,差异有非常显著性意义(P<0.01).蛋白合成速率分别为(2508.33±299.81)和(2898.83±625.41)cpm/well,与对照组(1026.83±91.67)cpm/well比较,差异非常显著(P<0.01).③10-7mol/LUⅡ作用心肌细胞24h后,荧光显微镜下观察到细胞边界增大,肌原纤维发生增粗与重排.结论:UⅡ能够诱导心肌细胞的肥大,为研究高血压及其他心血管疾病引起心脏肥厚的原因提供新的理论依据.     

补阳还五汤对间歇低氧大鼠心肌miRNA-214/CaMKⅡ信号通路的影响

目的:探讨补阳还五汤对间歇低氧大鼠心肌损伤的保护作用及分子机制.方法:采用间歇低氧大鼠心肌为研究对象,实验随机分为常氧组、间歇低氧组、补阳还五汤组,每组8只.利用超声心动仪评估大鼠左心室结构与功能,HE染色法观察大鼠心肌病理学变化,TUNEL法及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒法检测组织氧化应激水平及凋亡效应;qPCR检测心肌组织中miRNA-214、钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)变化,Western blot检测CaMKⅡ蛋白表达变化.结果:与间歇低氧组对比,补阳还五汤组左室舒张末期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVIDs)减少(P<0.05),射血分数(EF)和心肌缩短分数(FS)增加(P<0.05),补阳还五汤能够明显减少氧化损伤,MDA表达水平及Tunel阳性细胞数明显降低,而SOD表达升高(P<0.05).此外,补阳还五汤组上调miRNA-214表达,显著抑制CaMKⅡ表达(P<0.05).结论:补阳还五汤可通过调控miRNA-214/CaMKⅡ信号通路改善间歇低氧大鼠心肌组织损伤引起的氧化应激反应.     

CaMKⅡ信号通路在神经肽Y诱导心肌细胞肥大中的作用

目的：探讨钙离子／钙调蛋白（Ca^2＋／CaM）依赖的蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）信号通路在神经肽Y（NPY）诱导下心肌细胞肥大的作用。方法：原代培养SD乳鼠心肌细胞，将细胞分为5组，NPY组：培养液中加入终浓度为100nmol／L的NPY：KN-931组、KN-935组和KN-9310组除加入100nmol／L的NPY外，分别加入CaMKⅡ特异性抑制剂KN-93，终浓度为1μmol／L、5μmol／L和10μmol／L；对照组：培养液中不加任何刺激药品。加药24h后采用 ^3H-亮氨酸（Leu）掺入法测定各组心肌细胞蛋白质合成速率，Western blotting测定对照组与NPY组心肌细胞的CaMKⅡδ蛋白表达。结果：经100nmol／L NPY刺激24h后，可明显增加心肌细胞^3H-Leu掺入量（p〈0．05），KN-93（1-10μmol／L）可以抑制NPY刺激的心肌细胞^3H-Leu掺入量的增加，并呈剂量依赖性（P均〈0．05）；100nmol／L NPY明显增加心肌细胞内CaMKⅡδ蛋白的表达（P〈（0．05）。结论：Ca^2＋／CaM依赖的蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）信号途径参与NPY诱导的大鼠心肌细胞肥大反应。     

缺氧缺血性损伤对新生猪脑内钠钾ATP酶及CaMKⅡ表达的影响

目的 探讨缺氧缺血性损伤对新生猪脑内钠钾ATP酶及CaMKⅡ表达的影响。方法 28头雄性新生约克夏猪随机分为对照组（进行假手术,n=4）、模型组（建立缺氧缺血脑损伤模型,n=24）。模型组根据缺氧缺血时间均分成6个亚组（0～2 h组、2～6 h组、6～12 h组、12～24 h组、24～48 h组、48～72 h组）,每组4头。利用免疫荧光染色法对各组脑切片进行染色,比较各组钠钾ATP酶、CaMKⅡ的表达状况。结果 各组均见钠钾ATP酶阳性表达,6～12 h组表达最低;相邻两两比较结果显示,0～2 h组与2～6 h组、2～6h组与6～12 h组、6～12 h组与12～24 h组、12～24 h组与24～48 h组钠钾ATP酶表达均有统计学差异（均P <0.05）。钠钾ATP酶表达呈先下降后上升然后继续下降的趋势。各组均见CaMKⅡ阳性表达,6～12 h组表达最低;0～2 h组与2～6 h组、2～6 h组与6～12 h组、6～12 h组与12～24 h组、24～48 h组与48～72 h组CaMKⅡ表达有统计学差异（均P <0.05）,CaMKⅡ表达呈现先减低然后增高,然后再...     

帕罗西汀对应激抑郁模型大鼠脑区蛋白激酶PKA、PKC和CaMKⅡ活力的影响

目的探讨帕罗西汀对应激抑郁模型大鼠脑区蛋白激酶PKA、PKC和CaMKⅡ活力的影响。方法将成年雄性SD大鼠随机分为6组：对照组（Ⅰ）、抑郁模型组（Ⅱ）、抑郁模型＋给药1次组（Ⅲ）、抑郁模型＋给药1周组（Ⅳ）、抑郁模型＋给药2周组（Ⅴ）和抑郁模型＋给药4周组（Ⅵ）。抑郁模型为强迫大鼠游泳4周。采用同位素法检测蛋白激酶PKA、PKC和CaMKⅡ的活力。结果（1）在海马，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ组大鼠PKA[分别为（3．92&#177;0．23）&#215;10^-2（3．68&#177;0．092）&#215;10^-2，（3．56&#177;0．11）10^-2，和（3．52&#177;0.18）10^-2]和CaMKⅡ[分别为（12．89&#177;0．31）10^-2，（15．08&#177;2．07）10^-2，（16．32&#177;2．87）10^-2，和（17．00&#177;1．52）10^-2】活力明显低于Ⅰ组[PKA（5．63&#177;0.41）10^-2；CaMKII（48．91&#177;1．86）10^-2]和Ⅵ组『PKA（4．92&#177;0．36）10^-2；CaMKII（46．74&#177;1．34）10^-2（P〈0．01或P〈0．05）；Ⅱ组大鼠PKC的活力[（0．55&#177;0．017）&#215;10^-2明显低于对照组[（1．48&#177;0．27）10^-2（P〈0．01），各用药组大鼠海马PKC活力与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）（2）在前额叶皮质，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组大鼠PKA活力[分别为（0．9&#177;0．027）10^-2（0．92&#177;0．081）10^-2（0．92&#177;0．028）10^-2与对照组[（0．99&#177;0．072）10^-2]比较差异无统计学意义（P〉0．05）；而Ⅴ【（1．14&#177;0．045）10^-2]和Ⅵ[（1．27&#177;0．040）10^-2]组的PKA活性则显著高于其它四组（P〈0.01）；Ⅱ和Ⅲ组的PKC活性[分别为（0．15&#177;0．013）10^-2（0．14&#177;0．007）10^-2）]均显著高于对照组[（0．099&#177;0．0007）10^-2]和其它用药组（P〈0．01），Ⅳ组PKC活性【（0．11&#177;0．0006）10^-2】与Ⅰ组比较差异无统计学意义（P〉0．05），Ⅴ和Ⅵ组PKC活性[分别为（0．077&#177;0．0005）10^-2，（0．03&#177;0．00017）10^-2]显著低于Ⅰ组（P〈0．01）；模型组[（6．84&#177;0．22）10^-2]和各用药组[分别为（6．68&#177;0．23）10^-2，（6．89&#177;0．15）&#215;10^-2（6．55&#177;0．14）10^-2，（6．53&#177;0．13）10^-2]的CaMKII活性显著低于对照组[（16．57&#177;0．19）10^-2（P〈0．01）。结论帕罗西汀长期用药逆转慢性应激所致大鼠海马PKA、PKC和CaMKⅡ活力降低，而对前额叶皮质PKA、PKC和CaMKⅡ活力改变的作用复杂。     

内源性一氧化碳对血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大的影响

目的 探讨内源性一氧化碳（CO）对血管紧张素Ⅱ（AT－Ⅱ）诱导心肌细胞肥大的影响。方法 体外培养新生SD大鼠的心肌细胞，用^3H-亮氨酸（^3H-Leu)掺入法观察AT－Ⅱ对其蛋白质合成的影响，用CO合成的关键酶即血红素氧合酶（HO）的诱导剂－氯化血红素诱导心肌细胞生成CO，观察它对AT－Ⅱ作用的影响。结果 与对照组相比，AT－Ⅱ可使培养的新生SD大鼠心肌细胞对^3H-Leu的摄取明显增多（P＜0．05），用氯化血红素干预后，AT－Ⅱ上述作用被明显抑制（P＜0．05）。结论 内源性CO对AT－Ⅱ诱导的SD大鼠心肌细胞肥大有抑制作用。     

心室重构中心脏非心肌细胞和心肌细胞的相互作用及与AngⅡ的关系

心脏在很多病理情况下都可以发生心室重构。心室重构实际上是一个涉及到心脏的心肌细胞、非心肌细胞、基质及血管的复杂过程。非心肌细胞引起心肌细胞肥大的机理目前尚无统一的认识。但有许多研究证明，非心肌细胞是通过局部旁分泌产生激素实现其作用的。其巾主要是肾素一血管紧张素一醛固酮系统。AngⅡ促使心肌细胞肥大、非心肌细胞增殖及胶原合成增多。是否还有其他的多种因子参与这一过程以及AngⅡ是通过何种信号途径影响心肌细胞的结构和功能尚待进一步研究阐明。     

香草乙酮通过抑制CaMKⅡ活性保护压力负荷小鼠的心功能

目的:探讨香草乙酮(Apo)对压力负荷心衰小鼠心功能的保护作用以及机制.方法:48只C57BL/6雄性小鼠,随机分为sham、sham+Apo、TAC、TAC+Apo组,每组12只.采用主动脉缩窄术(TAC)构建压力负荷小鼠模型,术后3d根据分组给予不同处理4周;利用小动物超声仪检测心功能各项指标的变化;苏木精-伊红(...     

细胞内Ca^2＋浓度和CaMKⅡ对学习和记忆的作用与影响的研究进展

Giacobini提出了突触可塑性学说,认为突触不是静止、固定的结构.1973年Bliss首先在麻醉家兔发现,短串高频条件刺激(强直刺激)穿通路传入纤维可在海马齿状回颗粒细胞诱导出持续10小时以上的群体锋电位和群体兴奋性突触后电位幅值增大的突触传递效能的易化现象,即长时程增强(1ong-term potentiation,LTP)现象并提出LTP是记忆的突触模型[1].     

急性酒精染毒小鼠的学习记忆与海马CaMKⅡ的表达

目的:研究急性酒精染毒小鼠的学习记忆与海马CaMKⅡ的表达关系。方法:以0.15g/ml、0.30g/ml、0.45g/ml三种浓度,按15ml/kg体重酒精灌胃,各组分别在灌胃3d、7d、14d后进行行为学检测(避暗实验)、病理学观察和CaMKⅡ的免疫印迹实验。结果:低浓度、中浓度染毒14d,高浓度染毒3d、7d、14d小鼠学习记忆能力损伤明显(P<0.05);低浓度、中浓度染毒14d,高浓度染毒3d、7d、14d小鼠大脑海马CaMKⅡa蛋白表达较对照组有明显下降(P<0.05)。结论:急性酒精中毒对学习记忆损伤与灌胃时间、浓度呈直线正相关,可能主要通过降低CaMKⅡa蛋白表达水平影响小鼠学习记忆能力。     

CaMK Ⅱ在小鼠重症急性胰腺炎胰腺损伤中的作用

目的 观察钙调素依赖蛋白激酶（CaMK Ⅱ）在重症急性胰腺炎（SAP）小鼠胰腺组织中的表达情况,并探讨其抑制剂KN93对SAP胰腺损伤的保护作用和机制。方法 36只健康雄性C57小鼠随机分为假手术组、SAP组、KN93组、SAP组+KN93组,9只/组。于造模后24 h收集血清和胰腺组织;采用HE染色观察胰腺组织病理改变;Elisa检测血清脂肪酶、淀粉酶活性以及炎性因子变化情况;免疫印迹法检测CaMK Ⅱ、p-CaMK Ⅱ、p-NF-κB、MAPK、p-MAPK在小鼠胰腺组织中的表达变化。 结果 与假手术组比较,SAP组p-CaMK Ⅱ、p-NF-κB、p-MAPK表达水平升高（P<0.05）。KN93干预后,SAP小鼠胰腺组织病理损伤减轻,血清脂肪酶、淀粉酶以及炎性因子（TNF-α、IL-6）水平降低（P<0.05）,同时NF-κB、ERK和MAPK蛋白磷酸化也降低（P<0.05）。结论 CaMK Ⅱ蛋白在SAP疾病胰腺组织活性升高,CaMK Ⅱ抑制剂KN93能有效减轻SAP小鼠胰腺损伤和炎症程度,其机制可能与ERK/MAPK信号通路有关。     

胚胎心肌细胞移植治疗心脏病的研究进展

Soonpaa等[1] 1994年首次报道了将胎鼠心肌细胞植入成鼠心肌内获得存活、增殖 ,并与宿主心肌细胞间建立了细胞连接。Leor等[2 ] 1996年发现将胎鼠心肌细胞移植入成年鼠心肌梗塞区 14～ 6 5天后存活 ,并且使心脏的功能得以明显改善。Scrosin等[3] 将胎鼠心肌细胞植入阿霉素诱导的成鼠心梗组织内 ,发现细胞存活 ,供宿主细胞间建立超微连接 ,并且受损心肌的功能有显著提高。Li等[4 ] 将胚鼠心肌细胞移植到成年鼠低温损伤所致的心肌疤痕组织周围 ,发现疤痕组织的范围减小 ,小血管数量明显增多 ,心脏功能得以改善。心肌细胞移植治疗心脏病的作…     

大鼠非心肌细胞对心肌细胞凋亡的影响

目的探讨大鼠心脏非心肌细胞对心肌细胞凋亡的影响。方法分别培养SD乳鼠心肌细胞(MC)和非心肌细胞(NMC)。制备非心肌细胞条件培养液(NMCM)。培养细胞的分组及药物干预:M组:MC+新鲜培养液;C组:MC+70%新鲜培养液+30%NMCM;L组:MC+新鲜培养液+Losartan;CL组:MC+70%新鲜培养液+30%NMCM+Losartan;P组:MC+新鲜培养液+PD123319;CP组:MC+70%新鲜培养液+30%NMCM+PD123319;LP组:MC+新鲜培养液+Losartan+PD123319;CLP组:MC+70%新鲜培养液+30%NMCM+Losartan+PD123319。用图像分析仪测定各组心肌细胞的面积,用流式细胞仪检测各组心肌细胞凋亡情况。结果用药物干预后,L组、P组及LP组与M组比较,心肌细胞面积无明显变化(P>0.05);C组及CP组细胞面积较M组、L组、P组、LP组明显增大(P<0.01)。C组及CP组细胞凋亡率明显高于其他组(P<0.001),CP组细胞凋亡较C组更为明显(P<0.05)。结论非心肌细胞培养液在促进心肌细胞肥大的同时,也促进了细胞的凋亡。Losartan可抵消非心肌细胞条件培养液促进心肌细胞凋亡的作用,提示AT1受体介导促进心肌细胞凋亡。     

STZ糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及葡萄糖、血管紧张素Ⅱ、瘦素对心肌细胞凋亡影响的观察

目的　观察链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠心肌细胞凋亡情况及葡萄糖、血管紧张素Ⅱ、瘦素对正常SD大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法　主动脉插管逆行灌流分离培养STZ糖尿病大鼠和正常SD大鼠心肌细胞,通过Annexin V FITC +PI双染法,采用流式细胞术,检测细胞凋亡情况,并运用细胞免疫荧光染色法检测心肌细胞膜瘦素受体的表达。结果　(1)STZ糖尿病大鼠心肌细胞凋亡较对照组明显增高(P <0 .0 1) ;(2 )在体外培养条件下,血管紧张素Ⅱ、瘦素使心肌细胞凋亡明显增加,且与浓度相关,差异均有显著性(P <0 .0 1) ,在葡萄糖5 .6、2 5mmol/L的培养环境中,心肌细胞凋亡变化不明显(P >0 .0 5 ) ;(3)细胞免疫荧光染色检测瘦素受体表达,在荧光显微镜下可见到心肌细胞膜呈现绿色荧光。结论　STZ糖尿病大鼠的心肌细胞凋亡增高;在体外培养条件下,血管紧张素Ⅱ、瘦素可促进SD大鼠心肌细胞凋亡,且与浓度相关,增加培养环境中的葡萄糖浓度,对SD大鼠心肌细胞的凋亡无明显影响,而瘦素可能通过与心肌细胞膜上瘦素受体结合而发挥作用。